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一株枯草芽孢杆菌降解黄曲霉毒素B;产物分析

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生物技术通报 2021年

作者：唐璎黄佳邓展瑞杨晓楠甘肃省产品质量监督检验研究院

以丰富生物降解黄曲霉毒素B;资源，研究菌株降解机制及产物毒性。通过液相色谱串联三重四级杆质谱仪（UPLC-MS/MS）及核磁共振氢谱（1H NMR）检测一株枯草芽孢杆菌WTX1降解黄曲霉毒素B;（aflatoxin B;,AFB;）产物，并将降解产物进行细... 详细信息

以丰富生物降解黄曲霉毒素B;资源，研究菌株降解机制及产物毒性。通过液相色谱串联三重四级杆质谱仪（UPLC-MS/MS）及核磁共振氢谱（1H NMR）检测一株枯草芽孢杆菌WTX1降解黄曲霉毒素B;（aflatoxin B;,AFB;）产物，并将降解产物进行细胞毒理实验。菌株WTX1降解AFB;机制是破坏AFB;结构中的呋喃环二氢双键、香兰素内脂环及戊烯酮环结构，形成小分子化合物，达到脱毒效果。细胞毒理实验证实菌株WTX1降解AFB;产物基本对细胞无毒。菌株WTX1降解机制是破坏AFB;结构中的致毒致变异结构，产生小分子化合物。WTX1降解AFB;的产物对细胞无致突变性，无毒性。后期研究菌株降解AFB;起主要作用的物质，为工业化去除AFB;毒素提供新思路。

关键词：黄曲霉毒素B 枯草芽孢杆菌产物分析细胞毒理

黄曲霉毒素B_(1)降解菌株的鉴定及降解产物研究

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食品与发酵工业 2021年第7期47卷 64-70页

作者：唐璎邓展瑞黄佳杨晓楠甘肃省产品质量监督检验研究院甘肃兰州730050

为开发有效降解黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))的生物菌剂,筛选降解率高的菌株进行分离鉴定,并分析降解产物,以前期筛选到AFB 1降解率高达83.5%的菌株WTX1为研究对象,通过形态学、生理生化特征及菌株16S rRNA基因测序对菌株... 详细信息

为开发有效降解黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))的生物菌剂,筛选降解率高的菌株进行分离鉴定,并分析降解产物,以前期筛选到AFB 1降解率高达83.5%的菌株WTX1为研究对象,通过形态学、生理生化特征及菌株16S rRNA基因测序对菌株进行鉴定,通过超高效液相色谱-串联四级杆质谱(ultra-performance liquid chromatography-MS/MS,UPLC-MS/MS)测定菌株各组分降解率,将降解液产物质谱图与软件中标准质谱库比对,分析菌株降解AFB_(1)产物结构。菌株WTX1被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌株降解AFB_(1)起主要作用的是生长过程产生的次级代谢产物。菌株WTX1降解AFB_(1)机制是破坏AFB_(1)的毒性结构即呋喃环二氢双键,香兰素内脂环结构,达到脱毒效果。较目前筛选到降解AFB_(1)的菌株,菌株WTX1更具有食品安全优势。

关键词：黄曲霉毒素B_(1) 枯草芽孢杆菌超高效液相色谱-串联四级杆质谱产物分析质谱分析

布氏乳杆菌L34-2对黄曲霉毒素脱毒条件优化

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食品安全导刊 2022年第25期 144-147页

作者：王俊丽陈春喜邓展瑞甘肃省产品质量监督检验研究院甘肃兰州730050 兰州交通大学甘肃兰州730070

本研究以甘肃地区酸菜中分离的一株黄曲霉毒素B脱毒率高达66.4%的布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)L34-2为材料,以菌株对AFB脱毒条件及脱毒机制为研究内容。结果表明,脱毒最佳反应条件为发酵温度30 ℃,发酵液pH值4.0,接种比例50 mL/3... 详细信息

本研究以甘肃地区酸菜中分离的一株黄曲霉毒素B脱毒率高达66.4%的布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)L34-2为材料,以菌株对AFB脱毒条件及脱毒机制为研究内容。结果表明,脱毒最佳反应条件为发酵温度30 ℃,发酵液pH值4.0,接种比例50 mL/300 mL,氧气供应量60%,优化后菌株L34-2脱毒率达到85.7%,比优化前提高21.1%,影响脱毒效果最大的因素是发酵温度。

关键词：黄曲霉毒素B1 布氏乳杆菌西北酸菜脱毒条件优化解毒机制

西北酸菜中吸附黄曲霉毒素B1乳酸菌株的筛选鉴定及稳定性研究

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食品与发酵工业 2020年第15期46卷 60-65页

作者：唐璎孟宪刚邓展瑞马芮萍黄佳甘肃省产品质量监督检验研究院甘肃兰州730050 兰州交通大学化学与生物工程学院甘肃兰州730070

为工业化控制黄曲霉毒素B 1(aflatoxin B 1,AFB 1)污染,筛选吸附率高、稳定性好、脱毒后具备食品安全的优势菌株,应用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)技术检测菌株发酵液AFB 1残留量的方法,从35份采集自甘肃不同地域的西北酸菜样品中筛选到1株活菌脱毒率为66.41%、解吸后仍保留脱毒率为53.7%的菌株L34-2。菌株L34-2经形态学、生理生化及16S rRNA基因序列扩增测序,鉴定为布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)。通过磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)洗脱,体外模拟胃液消化,研究菌株-AFB 1复合体稳定性,结果表明,菌株L34-2吸附AFB 1具有较好的稳定性。

关键词：黄曲霉毒素B 1 乳酸菌超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱西北酸菜模拟体外胃液消化

短小芽孢杆菌HN-10抗菌肽的分离纯化及其抗粉红单端孢活性

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食品科学 2018年第22期39卷 123-128页

作者：严海娇贠建民白杰郭娟邓展瑞李多佳甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070

长期大量使用杀菌剂不但会导致病原微生物产生耐药性,同时也存在着严重的环境和健康风险,因此开发不易产生耐药性的新型抗菌物质非常重要。本实验采用硫酸铵沉淀、AB-8大孔吸附树脂、Sephadex G-100凝胶和半制备型反相高效液相色谱对短... 详细信息

长期大量使用杀菌剂不但会导致病原微生物产生耐药性,同时也存在着严重的环境和健康风险,因此开发不易产生耐药性的新型抗菌物质非常重要。本实验采用硫酸铵沉淀、AB-8大孔吸附树脂、Sephadex G-100凝胶和半制备型反相高效液相色谱对短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10发酵液进行逐级分离纯化,以粉红单端孢(Trichothecium roseum)为指示菌,测其抑菌活性,并通过基质辅助激光解析串联飞行时间串联质谱对纯化后的活性物质进行氨基酸序列分析。结果表明,经纯化后得到一种抗真菌肽P-1,其氨基酸序列为G-G-S-G-G-G-S-S-G-G-S-I-G-G-R,分子质量为1 149.14 Da。经抑菌实验可知,抗真菌肽P-1在最小抑菌浓度为1μg/mL时可抑制粉红单端孢生长。经ProtParam软件分析得到P-1理论等电点为9.75,带有1个正电荷数。在NCBI数据库和APD数据库检索,与之序列相似性最高的仅为45%,因此判断这是一种新型抗真菌肽。抗真菌肽P-1抑菌效果良好,可为开发新型生防制剂提供理论依据。

关键词：抗菌肽短小芽孢杆菌HN-10 分离纯化粉红单端孢

Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢的抑菌机理

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食品科学 2019年第19期40卷 17-22页

作者：郭娟贠建民邓展瑞艾对元张紊玮赵风云甘肃农业大学食品科学与工程学院

Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1是一种对粉红单端孢(Trichothecium roseum)具有很强抑菌作用的肽,但其抑菌机理尚不明确。本研究从细胞膜通透性、蛋白合成和核酸合成3方面研究其抑菌机理。通过大分子释放量和电导率研究抗菌肽P-1对粉... 详细信息

Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1是一种对粉红单端孢(Trichothecium roseum)具有很强抑菌作用的肽,但其抑菌机理尚不明确。本研究从细胞膜通透性、蛋白合成和核酸合成3方面研究其抑菌机理。通过大分子释放量和电导率研究抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜通透性的影响;经胞内蛋白含量测定及胞内蛋白十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究抗菌肽P-1对蛋白合成的影响;采用琼脂糖凝胶电泳和荧光光谱分析抗菌肽P-1对粉红单端孢DNA的凝胶阻滞作用及与溴化乙锭(ethidium bromide,EB)竞争性结合作用,并通过DNA和RNA相对含量来研究粉红单端孢核酸合成是否受到抑制。结果表明:抗菌肽P-1可引起粉红单端孢细胞膜通透性增加,胞内电解质和大分子物质外泄;同时,菌体蛋白合成受到抑制,尤其对分子质量在43.0~97.4 kDa之间的蛋白最为明显;抗菌肽P-1对DNA没有明显阻滞作用,但其能与EB竞争性结合DNA,使核酸合成受到抑制,导致菌体代谢紊乱,影响蛋白质的正常表达,进而起到抑菌作用。

关键词：抗菌肽P-1 粉红单端孢细胞膜通透性蛋白合成核酸合成

一株枯草芽孢杆菌降解黄曲霉毒素B_(1)产物分析

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生物技术通报 2021年第12期37卷 82-90页

作者：唐璎黄佳邓展瑞杨晓楠甘肃省产品质量监督检验研究院兰州730050

为丰富生物降解黄曲霉毒素B_(1)资源,研究菌株降解机制及产物毒性。通过液相色谱串联三重四级杆质谱仪(UPLC-MS/MS)及核磁共振氢谱(^(1)H NMR)检测一株枯草芽孢杆菌WTX1降解黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))产物,并将降解产物... 详细信息

为丰富生物降解黄曲霉毒素B_(1)资源,研究菌株降解机制及产物毒性。通过液相色谱串联三重四级杆质谱仪(UPLC-MS/MS)及核磁共振氢谱(^(1)H NMR)检测一株枯草芽孢杆菌WTX1降解黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))产物,并将降解产物进行细胞毒理实验。菌株WTX1降解AFB_(1)机制是破坏AFB_(1)结构中的呋喃环二氢双键、香兰素内脂环及戊烯酮环结构,形成小分子化合物,达到脱毒效果。细胞毒理实验证实菌株WTX1降解AFB_(1)产物基本对细胞无毒。菌株WTX1降解机制是破坏AFB_(1)结构中的致毒致变异结构,产生小分子化合物。WTX1降解AFB_(1)的产物对细胞无致突变性,无毒性。后期研究菌株降解AFB_(1)起主要作用的物质,为工业化去除AFB_(1)毒素提供新思路。

关键词：黄曲霉毒素B_(1) 枯草芽孢杆菌产物分析细胞毒理

短小芽孢菌HN-10抗菌肽P-2对双孢蘑菇保鲜效果的影响

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食品与发酵工业 2019年第5期45卷 133-139页

作者：牛耀星贠建民李彦虎郭娟邓展瑞刘小霞甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070

为了防止双孢蘑菇采后微生物侵染引起的子实体腐败变质问题,延长双孢蘑菇的保质期,以新鲜的双孢蘑菇子实体为材料,以产抗菌肽P-2的短小芽孢菌HN-10菌株(Bacillus pumilus)的发酵液粗提物为防腐保鲜剂,经无菌水稀释为1∶1、1∶2、1∶3 (V... 详细信息

为了防止双孢蘑菇采后微生物侵染引起的子实体腐败变质问题,延长双孢蘑菇的保质期,以新鲜的双孢蘑菇子实体为材料,以产抗菌肽P-2的短小芽孢菌HN-10菌株(Bacillus pumilus)的发酵液粗提物为防腐保鲜剂,经无菌水稀释为1∶1、1∶2、1∶3 (V/V)比例的梯度稀释液后对双孢蘑菇进行喷涂处理,开展了在常温(25±1)℃条件下的最优浓度筛选试验和低温(4±1)℃条件下的防腐保鲜贮藏试验。结果表明,常温下抗菌肽P-2保鲜双孢蘑菇最优稀释比例为1∶1 (V/V),在贮藏3 d时,处理组仍保持着一定的感官品质和较低的腐烂指数。低温贮藏条件下抗菌肽P-2处理能显著抑制双孢蘑菇的菌落总数的上升,降低双孢蘑菇的失重,维持稳定的可溶性蛋白质含量,有效抑制PPO活性的增加,在贮藏5 d时,仍保持着良好的感官品质和一定的商品价值。可见,低温(4±1)℃条件下结合抗菌肽P-2处理对双孢蘑菇有良好保鲜效果,延长了双孢蘑菇的保质期,可为食用菌抗菌肽保鲜剂的开发提供技术参考和依据。

关键词：双孢蘑菇抗菌肽保鲜喷涂处理

基于HS-GC-MS/MS法测定食品烘焙用纸中9种有机溶剂

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包装工程 2020年第21期41卷 38-44页

作者：周春红唐璎张志龙邓展瑞黄佳甘肃省产品质量监督检验研究院兰州730050

目的建立同时测定食品烘焙用纸包装中9种有机溶剂残留量(丁酮、苯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、乙酸乙酯、乙酸丁脂、正丁醇)的方法。方法通过优化自动顶空(HS)-气相色谱(GC)-串联三重四级杆质谱(MS/MS)仪器的自动顶空进样器... 详细信息

目的建立同时测定食品烘焙用纸包装中9种有机溶剂残留量(丁酮、苯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、乙酸乙酯、乙酸丁脂、正丁醇)的方法。方法通过优化自动顶空(HS)-气相色谱(GC)-串联三重四级杆质谱(MS/MS)仪器的自动顶空进样器、色谱、质谱检测。采用优化条件,样品平衡温度为120℃,顶空平衡时间为30 min,用ThermoTG-WAXMS色谱柱分离化合物,进样分流比为25∶1,采用外标法定量,MRM(多反应监测模式)模式GC-MS/MS方式检测食品烘焙用纸。结果采用该方法能完全分离9种有机溶剂,且线性良好(相关系数在0.99以上),方法检出限为0.003~0.010 mg/m2,回收率为93.8%~101.5%,RSD范围为1.3%~3.5%。结论该方法与气相色谱检验方法比较,更简单快捷,分离效果好,结果准确,检出限更低,可用于实际检测大批量食品烘焙用纸包装产品中9种有机溶剂残留量。

关键词：食品烘焙用纸溶剂残留气相色谱-串联三重四级杆质谱自动顶空