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5株H6N3亚型禽流感病毒的分子特征及遗传演化分析

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中国家禽 2024年

作者：陈源崔鹏飞施建忠邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室国家禽类实验动物资源库

为了解H6N3亚型禽流感病毒（AIV）的遗传演化特点，试验对2023年采集自广东、湖北两地的活禽交易市场禽类咽喉拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定，并对分离的H6N3亚型AIV进行全基因组序列测定，进一步分析其遗传演化情况和特殊分子标记... 详细信息

为了解H6N3亚型禽流感病毒（AIV）的遗传演化特点，试验对2023年采集自广东、湖北两地的活禽交易市场禽类咽喉拭子及泄殖腔拭子进行病原分离鉴定，并对分离的H6N3亚型AIV进行全基因组序列测定，进一步分析其遗传演化情况和特殊分子标记。结果显示：共分离到5株H6N3亚型AIV，且均为新型重配病毒，可分为2种基因型，其中4株湖北分离株属于基因1型，NA基因进化支相对独立，其余基因片段与分离于我国家禽的H3N2、H3N3、H3N8、H6N6亚型AIV有着较近的亲缘关系；1株广东分离株属于基因2型，与多种不同亚型野鸟源病毒高度同源；5株分离株HA蛋白的裂解位点序列仅有一个碱性氨基酸，符合低致病性禽流感病毒（LPAIV）的特征；4株湖北分离株的NA基因全长仅有1 365 bp，其编码的NA蛋白出现茎部缺失；部分分离株HA蛋白获得A138S突变，一株病毒的PB2蛋白获得I292V突变。综上所述，分离的5株H6N3亚型AIV为新型重配病毒，部分分离株获得哺乳动物适应性突变，应加强对H6亚型AIV的流行病学监测。

关键词： H6N3 禽流感病毒活禽交易市场分子特征基因重配

视网膜分支静脉阻塞继发黄斑水肿患者康柏西普治疗前后视网膜微循环变化的研究

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中华眼外伤职业眼病杂志 2024年第4期46卷 277-282页

作者：夏洋邹茜邓国华常州市第三人民医院眼科常州213000

目的应用光学相干断层扫描血管成像技术(OCTA)分析视网膜分支静脉阻塞(BRVO)继发黄斑水肿(ME)患者行康柏西普玻璃体内注射治疗前后视网膜血流的变化。方法回顾性病例对照研究。纳入常州市第三人民医院2019年1月至2021年1月BRVO继发ME(BR... 详细信息

目的应用光学相干断层扫描血管成像技术(OCTA)分析视网膜分支静脉阻塞(BRVO)继发黄斑水肿(ME)患者行康柏西普玻璃体内注射治疗前后视网膜血流的变化。方法回顾性病例对照研究。纳入常州市第三人民医院2019年1月至2021年1月BRVO继发ME(BRVO-ME)82例(82眼)。根据荧光素眼底血管造影(FFA)检查结果分为两组,非缺血组40例(40眼);缺血组42例(42眼)。患者双眼均行最佳矫正视力(BCVA)和OCTA检查,测量治疗前后中心凹无血管区域(FAZ)面积、浅层毛细血管网(SCP)和深层毛细血管网(DCP)的血流密度。所有患者采用1+按需治疗(PRN)进行康柏西普玻璃内注射。对比观察治疗前后上述指标的变化情况。Pearson相关性分析远期视力与治疗前后黄斑区微循环参数的相关性。结果非缺血组治疗前黄斑区FAZ和DCP血流密度分别为(0.35±0.12)mm 2和(39.77±3.66)%,治疗后黄斑区FAZ和DCP血流密度分别为(0.31±0.12)mm 2和(38.76±10.02)%,黄斑区FAZ显著缩小(t=10.12,P<0.001),DCP血流密度无变化,差异无统计学意义(t=0.82,P=0.415)。缺血组治疗前FAZ和DCP血流密度分别为(0.36±0.11)mm 2和(39.07±2.62)%,治疗后FAZ和DCP血流密度分别为(0.43±0.09)mm 2和(39.90±3.25)%,患眼FAZ明显扩大(t=-13.88,P<0.001),DCP血流密度和治疗前比较差异无统计学意义(t=-0.96,P=0.343)。非缺血组注药次数为(3.65±1.81)次,缺血组注药次数为(4.55±2.10)次,差异有统计学意义(t=-2.08,P=0.041)。结论康柏西普治疗缺血型和非缺血型BRVO-ME均可提高视力、改善微循环血流状态,减轻黄斑水肿。非缺血型BRVO-ME较缺血型效果更好。

关键词：视网膜静脉闭塞血管内皮生长因子类康柏西普密度,血流,黄斑区光学相干断层扫描血管成像

累积塑性体应变对非饱和原状Q_(3)黄土动骨干曲线的影响研究

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甘肃科学学报 2024年第3期36卷 77-83页

作者：王强张喆杨谦邓国华陕西工业职业技术学院咸阳市黄土力学与灾害防治工程技术研究中心陕西咸阳712000 西安理工大学陕西省黄土力学与工程重点实验室陕西西安710048 西安黄土地下工程技术咨询有限公司陕西西安710054

为研究循环累积塑性体应变对黄土骨干曲线的影响,选取典型原状Q_(3)黄土,开展了一系列不同含水率、固结压力和剪应变幅等变化条件下的动单剪试验。试验结果显示,非饱和原状Q_(3)黄土具有明显的循环剪缩和循环硬化特性;骨干曲线形态随循... 详细信息

为研究循环累积塑性体应变对黄土骨干曲线的影响,选取典型原状Q_(3)黄土,开展了一系列不同含水率、固结压力和剪应变幅等变化条件下的动单剪试验。试验结果显示,非饱和原状Q_(3)黄土具有明显的循环剪缩和循环硬化特性;骨干曲线形态随循环加载周的变化而变化,变化幅度与累积塑性体应变相关。由此认为,震陷性黄土骨干曲线的构造需要考虑循环加载累积效应的影响,多级加载试验对其是不适用的;震陷性黄土的初始骨干曲线应采用单级加载试验构造,多级加载动骨干曲线需要考虑塑性累积体应变对初始骨干曲线的影响。基于剑桥模型推导的土体孔隙比和抗剪强度的关系式,推导了不同加载周土体最大动剪切模量比和最大动剪应力比与累积塑性体应变之间的关系式,并建立了可以考虑累积塑性体应变影响的动骨干曲线方程,试验验证该方程具有较好的模拟效果。

关键词：非饱和黄土骨干曲线动单剪试验震陷性单、多级加载试验

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两阶段云服务组合优化算法及其应用研究

现代信息科技 2024年第8期8卷 115-122页

作者：邓国华丁海旭陈冬林江汉大学商学院湖北武汉430056 江汉大学武汉城市圈制造业发展研究中心湖北武汉430056 武汉理工大学经济学院湖北武汉430070

针对目前云服务市场中如何快速有效为客户提供最优组合云服务问题,提出一种包括灰色关联和自适应遗传算法的两阶段云服务组合优化算法。首先根据用户云服务需求,利用灰色关联分析对云服务进行初步筛选形成候选云服务集;其次建立时间最... 详细信息

针对目前云服务市场中如何快速有效为客户提供最优组合云服务问题,提出一种包括灰色关联和自适应遗传算法的两阶段云服务组合优化算法。首先根据用户云服务需求,利用灰色关联分析对云服务进行初步筛选形成候选云服务集;其次建立时间最短、成本最低、可用性、互操作性、可扩展性和满意度最佳的多目标决策模型,采用自适应遗传算法求解模型,确定最优云服务组合方案;最后通过算例证明该算法在解决最佳云服务组合方面的合理性和科学性。

关键词：云服务组合灰色关联分析改进遗传算法多目标决策

A型流感病毒PB2蛋白帽子结合结构域的原核表达与鉴定

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 107-112,139页

作者：林维鹏崔鹏飞王思文邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室/农业农村部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150069

A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,严重威胁全球公共卫生安全。PB2蛋白的帽子结合结构域(CBD)在流感病毒的转录过程中发挥重要功能,是抗流感病毒药物的重要靶点之一。为获得高纯度原核表达的A型流感病毒的CBD蛋白,本研究利用同源... 详细信息

A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,严重威胁全球公共卫生安全。PB2蛋白的帽子结合结构域(CBD)在流感病毒的转录过程中发挥重要功能,是抗流感病毒药物的重要靶点之一。为获得高纯度原核表达的A型流感病毒的CBD蛋白,本研究利用同源重组策略将8×His标签与一株H5N1亚型高致病性禽流感病毒的CBD区基因序列克隆至原核表达载体pET28a中,构建重组质粒pET28a-8×His-CBD,经PCR及测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经不同浓度IPTG诱导不同时间后,经SDS-PAGE检测蛋白表达后使用镍柱纯化。结果显示,菌体裂解上清中在21 ku处可见目的条带,与8×His-CBD蛋白预期大小符合,且以0.5 mmol/L IPTG于37℃诱导6 h时蛋白表达量最高,镍柱纯化后可获得纯度大于95%的8×His-CBD蛋白。为确定该蛋白是否具有生物学活性,本研究以帽子结构类似物m7GTP对其进行等温滴定量热试验,结果显示8×His-CBD蛋白和m~7GTP结合时存在明显热峰,表明8×His-CBD蛋白具有生物学活性;经计算,其Kd值为1.71×10^(-5)(±2.92×10^(-6))mol/L。本研究结果对流感病毒的基础研究和抗流感病毒药物的研发具有借鉴意义。

关键词： A型流感病毒 PB2蛋白帽子结合结构域原核表达纯化

2019-2022年中国H6N1亚型禽流感病毒的生物学特性分析

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中国农业科学 2024年第9期57卷 1820-1832页

作者：陈源崔鹏飞施建忠张元成于晴晴颜成张亚萍王丛丛张洁王燕邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/国家禽类实验动物资源库

【背景】H6亚型禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）广泛流行于我国南方地区，是我国家禽中最常见AIV之一。H6N1亚型AIV频繁地与其他野鸟源毒株重配，并且可以作为供体为高致病性AIV提供内部基因片段，产生新型重组病毒，进而威胁... 详细信息

【背景】H6亚型禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）广泛流行于我国南方地区，是我国家禽中最常见AIV之一。H6N1亚型AIV频繁地与其他野鸟源毒株重配，并且可以作为供体为高致病性AIV提供内部基因片段，产生新型重组病毒，进而威胁人类健康。【目的】通过对我国H6N1亚型AIV的演化动态及其相关生物学特性分析研究，为我国禽流感的综合防控提供数据支持。【方法】采集2019—2022年我国25个省（直辖市、自治区）的活禽交易市场及养殖场家禽喉和泄殖腔拭子，通过接种鸡胚分离到7株H6N1亚型AIVs并对其进行全基因组测序，分析其遗传演化特征、受体结合特性及其对SPF鸡和BALB/c小鼠的感染性。【结果】遗传演化分析表明，7株病毒的基因与分离于北美及东南亚地区的野鸟源病毒基因同源性较高，基因来源复杂，具有明显的遗传多样性。贝叶斯演化分析表明，H6亚型AIV HA基因曾发生过多次的跨洲际传播，欧亚谱系病毒在北美地区也有着较长时间流行。1株病毒HA基因与北美地区毒株基因高度同源，根据贝叶斯演化分析结果，推测该病毒在野鸟体内经历了复杂的基因重配后形成，后经野鸟传入我国。特殊氨基酸位点分析结果显示，病毒HA蛋白裂解位点序列均为PQIETR↓GLF，符合低致病性AIV特征；此外，另有1株病毒的NP蛋白发生Y52H突变，据报道，该突变对AIV获得抵抗人干扰素刺激基因BTN3A3的能力起到关键作用。受体结合特性分析表明，部分毒株具有双受体结合特性，但结合人源受体能力弱于结合禽源受体能力。病毒对SPF鸡的感染性试验表明，鸡感染A/chicken/Jiangxi/S40445/2019(H6N1)后能通过呼吸道及消化道排毒，并且病毒可在鸡群内通过接触传播。鸡感染A/duck/Jiangxi/S10941/2019(H6N1)后仅有少数鸡通过呼吸道排毒，病毒无法在鸡群间通过接触传播。BALB/c小鼠的感染性试验表明，H6N1亚型AIV无需提前适应便可在小鼠呼吸道内有效复制，但对小鼠仍呈低致病力。【结论】2019—2022年分离于我国的H6N1亚型AIV基因大部分来源于野鸟源病毒，候鸟可经东亚-澳大利亚迁徙路线将病毒传入我国；部分病毒能够结合人源唾液酸受体并在小鼠呼吸道内有效复制，表明该亚型病毒对公共卫生安全构成潜在威胁。

关键词： H6N1 禽流感病毒跨洲际传播重配感染性

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

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中国家禽 2024年

作者：张洁崔鹏飞张元成邢鑫王丛丛颜成王燕陈源朱春成缪葭皓陈素娟邓国华陈化兰扬州大学兽医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室国家禽类实验动物资源库

研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFa... 详细信息

研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFastBac1-N1转化至DH10Bac感受态细胞，经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1，然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞，获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示：N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达，并且该重组蛋白具有良好的反应原性，能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应，其仅能识别N1亚型鸡血清，特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白，为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。

关键词：禽流感病毒杆状病毒表达系统 N1蛋白血清抗体

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欠压密饱和黄土基本物理力学性质研究

岩土力学 2023年第11期44卷 3117-3127页

作者：康佐亢佳伟邓国华西安市轨道交通集团有限公司陕西西安710018 西安理工大学岩土工程研究所陕西西安710048 西安黄土地下工程技术咨询有限公司陕西西安710000

黄土浸水可形成两类工程性质差异较大的压密饱和黄土或欠压密饱和黄土。通过对西安地区22个黄土场地的试验和数据统计,分析了两类饱和黄土性质的差异,系统地研究了欠压密饱和黄土的基本物理力学性质,揭示了其具有饱水软弱性和失水大变... 详细信息

黄土浸水可形成两类工程性质差异较大的压密饱和黄土或欠压密饱和黄土。通过对西安地区22个黄土场地的试验和数据统计,分析了两类饱和黄土性质的差异,系统地研究了欠压密饱和黄土的基本物理力学性质,揭示了其具有饱水软弱性和失水大变形的根本原因,归纳得到了西安地区欠压密饱和黄土的物理力学特征指标,为科学研究和工程实践中严格区分两类饱和黄土、分类制定技术措施提供了依据。研究表明:欠压密饱和黄土是黄土浸水过程中未被充分压密、大孔隙结构仍然存在的土,在Q_(3)和Q_(2)上部地层中均有揭露,其具有大孔隙比、高含水率、中高灵敏度、中高压缩性、低承载力和强度等特征,一般处于软塑或流塑状态,其与湿陷性黄土、古土壤和压密饱和黄土邻近分布,形成了软硬不均的地层组合特征。

关键词：饱和黄土欠压密特性物性状态力学特性

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纤维纱加筋黄土一维蠕变特性试验研究

岩石力学与工程学报 2022年第5期41卷 1054-1066页

作者：褚峰邵生俊邓国华陈存礼西安工程大学城市规划与市政工程学院陕西西安710048 西安理工大学岩土工程研究所陕西西安710048 西安黄土地下工程技术咨询有限公司陕西西安710048

将纺织废旧布料经过开松、分梳、切断制成纤维纱,在黄土中掺入一定比例及长度的纤维纱,制备成纤维纱加筋黄土,利用一维蠕变仪研究在不同竖向荷载作用下,纤维纱加筋黄土的一维蠕变变形特性。试验结果表明:在不同竖向荷载作用下,纤维纱加... 详细信息

将纺织废旧布料经过开松、分梳、切断制成纤维纱,在黄土中掺入一定比例及长度的纤维纱,制备成纤维纱加筋黄土,利用一维蠕变仪研究在不同竖向荷载作用下,纤维纱加筋黄土的一维蠕变变形特性。试验结果表明:在不同竖向荷载作用下,纤维纱加筋黄土的蠕变应变均小于素黄土的蠕变应变,纤维纱加筋对于抑制黄土的蠕变变形具有积极作用;当竖向荷载大于400k Pa时,纤维纱加筋黄土达到稳定蠕变的时间相较于素黄土更长;随着纤维纱掺加比例及纤维纱掺加长度的增大,纤维纱加筋黄土的蠕变应变呈现出先减小后增大的变化趋势;纤维纱最佳掺加比例为0.3%,纤维纱最佳掺加长度为30 mm。构建可以反映土体进入蠕变阶段后,长期强度稳定性能的蠕变指数表达式,当竖向荷载在400~800 kPa时,蠕变指数增长显著,当竖向荷载大于800 kPa时,蠕变指数随竖向荷载的增大逐渐趋于稳定。结合一维蠕变试验数据,建立了考虑纤维纱掺加比例及纤维纱掺加长度影响的纤维纱加筋黄土一维蠕变经验模型。

关键词：土力学纤维纱加筋黄土蠕变试验蠕变模型