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异源基因在链霉菌系统中的克隆和表达

生物工程学报 1990年第3期6卷 175-180页

作者：董可宁还连栋中国科学院微生物研究所

链霉菌作为遗传学和分子生物学分析系统已引起人们的兴趣,这不仅因为链霉菌是抗生素的主要产生菌,它还产生许多胞外酶以及酶的抑制物等。此外链霉菌尚有许多引人注意的特征,如细胞分化,基因组的高GC含量等。近年来DNA体外重组、基因克... 详细信息

链霉菌作为遗传学和分子生物学分析系统已引起人们的兴趣,这不仅因为链霉菌是抗生素的主要产生菌,它还产生许多胞外酶以及酶的抑制物等。此外链霉菌尚有许多引人注意的特征,如细胞分化,基因组的高GC含量等。近年来DNA体外重组、基因克隆、基因融合。

关键词：异源基因链霉菌克隆基因表达

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羊毛硫细菌素及其应用

微生物学通报 1999年第6期26卷 430-433页

作者：那淑敏还连栋中国科学院微生物研究所北京100080

由基因编码、在核糖体上合成的抗菌多肽广泛分布于自然界中。人、动物、昆虫、植物和微生物都可以产生。这些抗菌多肽在食品防腐保鲜以及在药物治疗和医治肿瘤、癌症方面的潜力引起人们极大的关注[1]。近10年来,原核生物和真核生物产生... 详细信息

由基因编码、在核糖体上合成的抗菌多肽广泛分布于自然界中。人、动物、昆虫、植物和微生物都可以产生。这些抗菌多肽在食品防腐保鲜以及在药物治疗和医治肿瘤、癌症方面的潜力引起人们极大的关注[1]。近10年来,原核生物和真核生物产生的抗菌多肽成为人们研究的热点,并取得飞速进展[1-4]。本文将主要介绍革兰氏阳性细菌产生的羊毛硫细菌素的结构、性质、生物合成,作用机制及应用。1什么叫羊毛硫细菌素由细菌基因编码、在核糖体上合成的抗菌多肽叫作细菌素。它是由某些细菌通过核糖体合成机制产生的一类具有抑菌生物活性的多肽…

关键词：羊毛硫细菌素抗菌多肽特性作用机制

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羊毛硫细菌素生物合成基因簇的遗传分析

中国抗生素杂志 2006年第9期31卷 513-517,570页

作者：钟瑾刘刚还连栋中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室北京100080

羊毛硫细菌素是一类核糖体合成且经翻译后修饰的具有生物活性的小肽,通常含有羊毛硫氨酸及β-甲基羊毛硫氨酸等稀有氨基酸。近年来随着来源于乳酸乳球菌的nisin(乳链菌肽)被广泛地用作天然食品防腐剂和对其研究的不断深入,羊毛硫细菌素... 详细信息

羊毛硫细菌素是一类核糖体合成且经翻译后修饰的具有生物活性的小肽,通常含有羊毛硫氨酸及β-甲基羊毛硫氨酸等稀有氨基酸。近年来随着来源于乳酸乳球菌的nisin(乳链菌肽)被广泛地用作天然食品防腐剂和对其研究的不断深入,羊毛硫细菌素已引起研究者广泛关注。因其无耐药性,羊毛硫细菌素还极有可能替代传统抗生素应用于生物医药领域。羊毛硫细菌素的生物合成基因包括结构基因、修饰基因、加工基因、转运基因、免疫基因、调节基因,它们成簇排列于产生菌的染色体或质粒上,构成数个转录单元。本文综述了近年来羊毛硫细菌素生物合成基因簇遗传分析的研究进展。

关键词：羊毛硫细菌素生物合成基因簇遗传分析

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乳链菌肽(NISIN)生物合成的遗传控制

微生物学通报 1993年第5期20卷 301-307页

作者：还连栋陈秀珠中国科学院微生物研究所北京100080

乳链菌肽(nisin)是某些乳酸链球菌产生的一个由基因编码的多肽抗生素。它对许多革兰氏阳性菌,包括利斯特氏菌属、梭菌属和芽孢杆菌属这些腐败菌和食物病原菌有强烈的抑制作用,已被50多个国家和地区广泛应用于乳制品、罐头食品。

关键词：乳酸链球菌乳链菌肽生物合成

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利用PCR技术克隆乳链菌肽前体基因

生物工程学报 1995年第4期11卷 389-391页

作者：还连栋陶勇田宇清何松薛禹谷中国科学院微生物研究所北京100080

乳链菌肽(Nisin)是由核糖体合成,经翻译后修饰、加工而含有稀有氨基酸的一种小肽分子。它对许多革兰氏阳性菌,包括利斯特氏菌属、梭菌属和芽孢杆菌属这些腐败菌和病原菌有强烈抑制作用。已被50多个国家和地区广泛应用于乳制品、罐头食... 详细信息

乳链菌肽(Nisin)是由核糖体合成,经翻译后修饰、加工而含有稀有氨基酸的一种小肽分子。它对许多革兰氏阳性菌,包括利斯特氏菌属、梭菌属和芽孢杆菌属这些腐败菌和病原菌有强烈抑制作用。已被50多个国家和地区广泛应用于乳制品、罐头食品、高蛋白食品及乙醇饮料的防腐保鲜,是越来越受到人们重视的一种无毒的天然食品防腐剂。对乳链菌肽分子结构与功能及生物合成遗传控制的研究不仅有应用价值,而且有其理论意义。本实验室以产乳链菌肽的乳酸乳酸球菌ATCC 11454总DNA为模板,利用PCR技术成功地扩增了乳链菌肽前体基因,并对其核苷酸序列进行了测定。

关键词：乳链菌肽前体基因克隆聚合酶链反应基因工程

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小单孢菌遗传研究进展

中国抗生素杂志 1986年第4期 368-375页

作者：还连栋中国科学院微生物研究所北京

小单孢菌(Micromonospora)是新近崛起的具有巨大潜力的一群抗生素产生菌。在先后报道的近60种小单孢菌中,就有40多种产生抗生素,它们包括氨基糖苷类、大环内酯类、安莎类、多肽类和蒽环类等等~[1、2]。由于小单孢菌不仅能产生链霉菌所... 详细信息

小单孢菌(Micromonospora)是新近崛起的具有巨大潜力的一群抗生素产生菌。在先后报道的近60种小单孢菌中,就有40多种产生抗生素,它们包括氨基糖苷类、大环内酯类、安莎类、多肽类和蒽环类等等~[1、2]。由于小单孢菌不仅能产生链霉菌所产生的抗生素,如放线菌素、新霉素、红霉素等,而且还产生西索米星(Sisomicin)、阿司米星(Astromicin,Fortimicin)、扁枝衣霉素(Everninomicin)等具有独特结构的抗生素;特别是以近年来找到的新抗生素的数目而言,小单孢菌已超过链霉菌而跃居首位。因此,小单孢菌日益受到了人们的重视和青睐。然而,由于小单孢分布奇特,生长缓慢,加之直到1963年分离到庆大霉素以后,才引起人们的注意,所以它的遗传研究领域尚是一块有待开垦的处女地。但是随着人们对小单

关键词：庆大霉素生物合成艮他霉素生化反应抗生素细胞融合原生质体融合西索米星基因载体质粒菌落碳水化合物氨基糖遗传研究阻断突变株交换子重组子产生菌

灰树花菌丝体多糖G.F.-2理化性质及生物活性的研究

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菌物系统 2003年第2期22卷 289-295页

作者：杜巍袁静李元瑞陈秀珠贾士芳还连栋上海理工大学动力工程学院上海200093 西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨陵712100 中国科学院微生物研究所分子微生物学研究中心北京100080

对灰树花菌丝体多糖G.F.-2的理化性质及生物活性进行了研究,结果表明G.F.-2是一种均一性好、分子量为7.24×105的大分子纯多糖,其单糖组成的摩尔比为Xyl∶Man:GaL∶Glc=0.7:1.0:1.5:4.3;G.F.-2由β-D-葡聚糖单元以糖苷键连接而成,主链以... 详细信息

对灰树花菌丝体多糖G.F.-2的理化性质及生物活性进行了研究,结果表明G.F.-2是一种均一性好、分子量为7.24×105的大分子纯多糖,其单糖组成的摩尔比为Xyl∶Man:GaL∶Glc=0.7:1.0:1.5:4.3;G.F.-2由β-D-葡聚糖单元以糖苷键连接而成,主链以β-1,3和β-1,4为主,分枝点主要发生在C6位,形成β-1,6糖苷键;同时,该多糖具有清除氧自由基,显著促进小鼠淋巴细胞增殖的生物活性功能。

关键词：菌丝体多糖结构组成生物活性

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乳链菌肽高产菌株AL2的发酵条件研究

微生物学通报 1995年第4期22卷 215-218页

作者：陈秀珠何松龙力红还连栋薛禹谷中国科学院微生物研究所

对乳链菌肽高产菌株ＡＬ２的发酵条件进行了研究，发现３０℃是产乳链菌肽的最适温度；蔗糖和酵母膏是最佳的碳、氮源，浓度分别为０．５％和１％。发酵培养基起始ｐＨ为６．５；锰离子对乳链菌肽的产生有促进作用，而铜离子却有严重的... 详细信息

对乳链菌肽高产菌株ＡＬ２的发酵条件进行了研究，发现３０℃是产乳链菌肽的最适温度；蔗糖和酵母膏是最佳的碳、氮源，浓度分别为０．５％和１％。发酵培养基起始ｐＨ为６．５；锰离子对乳链菌肽的产生有促进作用，而铜离子却有严重的抑制作用。

关键词：乳酸乳酸球菌乳链菌肽发酵条件食品微生物

人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及其对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠的作用

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微生物学报 2007年第6期47卷 987-991页

作者：陈思维钟瑾还连栋中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室中国科学院微生物研究所微生物代谢工程研究中心北京100101

为实现人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及探索其用作口服疫苗治疗Ⅰ型糖尿病(T1DM)的可行性,首先将人胰岛素基因密码子替换为乳酸菌偏爱密码子,同时在A,B链序列间加入连接短肽序列,经引物退火拼接合成人胰岛素基因。克隆至乳酸菌表达载体... 详细信息

为实现人胰岛素基因在乳酸菌中的表达及探索其用作口服疫苗治疗Ⅰ型糖尿病(T1DM)的可行性,首先将人胰岛素基因密码子替换为乳酸菌偏爱密码子,同时在A,B链序列间加入连接短肽序列,经引物退火拼接合成人胰岛素基因。克隆至乳酸菌表达载体中后,利用电击转化法实现了带信号肽SPUsp45的人胰岛素基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)MG1363和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)ATCC27092中的表达。Western blot检测显示重组胰岛素位于细胞壁上,当菌体生长到OD600为0.4时达到最大表达量。用含有表达重组人胰岛素的Lactobacillus caseiATCC27092/pSW501菌体饲喂非肥胖糖尿病(NOD)小鼠,发现可刺激小鼠产生特异性抗体,同时使与免疫耐受相关的细胞因子IL-4水平明显升高(38.583±2.083pg/mL,P<0.05),提示其对NOD小鼠产生免疫耐受有一定的作用,为研制乳酸菌口服疫苗防治T1DM的可行性进行了有益的探索。

关键词：胰岛素干酪乳杆菌乳酸乳球菌表达非肥胖糖尿病(NOD)小鼠