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稀土氯化镧增强卵巢癌顺铂耐药细胞敏感性的蛋白表达分析及分子机制研究

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稀土氯化镧增强卵巢癌顺铂耐药细胞敏感性的蛋白表达分析及分子机...

作者：辛佳凌南昌大学

学位级别：硕士

目的:探讨稀土氯化镧对卵巢癌细胞(人COC1细胞系、人卵巢癌SKOV3细胞系)及卵巢癌顺铂耐药细胞(COC1/DDP细胞系、SKOV3/DDP细胞系)的作用以及蛋白表达的机制。方法:1、选择人卵巢癌(COC1)细胞株、人卵巢癌耐顺铂细胞株(COC1/DDP)、人卵巢... 详细信息

目的:探讨稀土氯化镧对卵巢癌细胞(人COC1细胞系、人卵巢癌SKOV3细胞系)及卵巢癌顺铂耐药细胞(COC1/DDP细胞系、SKOV3/DDP细胞系)的作用以及蛋白表达的机制。方法:1、选择人卵巢癌(COC1)细胞株、人卵巢癌耐顺铂细胞株(COC1/DDP)、人卵巢癌(SKOV3)细胞株作为实验细胞株,并通过将SKOV3培养于含有DDP的培养液中并逐步增加DDP的浓度使其产生耐药性,获得SKOV3/DDP耐药细胞株。2、采用0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0μmol/L浓度的氯化镧分别进行COC1细胞系及COC1/DDP细胞系的常规培养及添加半数已知浓度顺铂的联合培养,于48h后,利用MTT法进行各组细胞增殖抑制率的检测。3、按照加入氯化镧浓度不同将COC1和COC1/DDP细胞分别分为对照组(细胞悬液+培养基)、低剂量组(0.5μmol/L氯化镧)、中剂量组(2μmol/L氯化镧)和高剂量组(5μmol/L氯化镧),加入氯化镧培养48h后,在透射电子显微镜下观察不同浓度氯化镧处理后COC1和COC1/DDP细胞形态变化。4、依据细胞处理方法,将COC1和COC1/DDP细胞分别分为对照组(COC1或COC1/DDP)、顺铂组(COC1或COC1/DDP+DDP)、氯化镧组(COC1或COC1/DDP+氯化镧)和顺铂+氯化镧组(COC1或COC1/DDP+DDP+氯化镧),利用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,以Western blot检测不同处理方式下COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白的相对表达量。5、采用DDP浓度逐渐增加的方法诱导卵巢癌DDP耐药细胞株(SKOV3/DDP),并在显微镜下观察其形态变化。6、向SKOV3和SKOV3/DDP细胞加入浓度分别为1、2、4、6、8、10、20、30μg/m L的DDP,培养24小时后,采用CCK8分析DDP对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的生长抑制率(Cell growth inhibition rate,GIR)和耐药指数(RI)。7、向SKOV3/DDP细胞中分别加入浓度为5、10、20、40、60、80、160、320μg/m L的氯化镧,培养36、48小时后采用CCK方法分析不同浓度不同时间药物对细胞生长抑制率。8、依据细胞处理方式不同将SKOV3和SKOV3/DDP细胞分为对照组(SKOV3或SKOV3/DDP)、氯化镧组(SKOV3或SKOV3/DDP+10μg/m L氯化镧)、DDP组(SKOV3或SKOV3/DDP+5μg/m L DDP)和氯化镧+DDP组(SKOV3或SKOV3/DDP+5μg/m L DDP+10μg/m L氯化镧)。将细胞处理后置于培养箱中培养7d计算不同实验组细胞克隆数。利用流式细胞术检测各组SKOV3和SKOV3/DDP细胞的凋亡率,以Western blot检测不同处理方式下SKOV3/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6、c-Cbl和Caspase-3蛋白的相对表达量。结果:1、顺铂处理后COC1及COC1/DDP细胞的增殖率明显降低,且呈现出浓度依赖性。COC1细胞株的IC50为2.11μg/m L,COC1/DDP细胞株的IC50为22.86μg/m L,耐药指数为10.53倍。2、MTT检测细胞增殖率的结果显示:氯化镧对COC1细胞及COC1/DDP细胞的生长具有显著的抑制作用,并呈现出浓度依赖特征。氯化镧以1.5μmol/L为节点,低于该浓度则细胞增殖的抑制效果降低;超过该浓度则细胞增殖的抑制效果增强,并呈现浓度依赖特征。取1.5μmol/L浓度的氯化镧进行卵巢癌细胞的处理,可获得最优的细胞增敏效果。3、对照组和低剂量组的COC1和COC1/DDP细胞形态正常,核膜完整,细胞器和细胞核结构清晰,胞内无空泡,两组间细胞形态的差异不显著(P>0.05)。中剂量组的COC1和COC1/DDP细胞株均出现微量皱缩,胞质内有少量空泡。高剂量组的COC1和COC1/DDP细胞株染色质固缩后凝结成团块,分布无规律,边界不清,形成新月状或环状小体在核膜周边聚集,而后细胞浆浓缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成空泡;细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体,细胞凋亡较多。4、对照组、顺铂组、氯化镧组、顺铂+氯化镧组的COC1细胞及COC1/DDP细胞的凋亡率分别为5.52±0.92%及4.60±1.11%、25.40±4.38%及18.24±2.81%、7.22±2.55%及5.59±1.73%、27.54±4.03%及29.12±5.38%.与对照组相比,顺铂组、顺铂+氯化镧组COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与顺铂组相比,顺铂+氯化镧组COC1/DDP细胞中ERCC1、Ki67、CDK6

关键词：稀土氯化镧卵巢癌细胞顺铂耐药性

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毛华菊3种瓣型株系再生体系的建立

植物学报 2024年第2期59卷 245-256页

作者：武晓云廖敏凌李雪茹舒梓淳辛佳潼张伯晗戴思兰北京林业大学园林学院城乡生态环境北京实验室花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心北京100083

毛华菊(Chrysanthemum vestitum)是栽培菊花(C.×morifolium)的近缘六倍体野生种之一,其自然群体中的舌状花与栽培菊花一样具有典型的平瓣型、管瓣型和混合瓣型变异,是研究菊属植物瓣型变异的理想材料。其舌状花发育过程受生长素和花器... 详细信息

毛华菊(Chrysanthemum vestitum)是栽培菊花(C.×morifolium)的近缘六倍体野生种之一,其自然群体中的舌状花与栽培菊花一样具有典型的平瓣型、管瓣型和混合瓣型变异,是研究菊属植物瓣型变异的理想材料。其舌状花发育过程受生长素和花器官发育关键差异基因的影响,但目前缺乏稳定高效的不同瓣型毛华菊株系的再生体系,制约了毛华菊瓣型相关基因的研究。利用在河南省伏牛山收集的3种瓣型毛华菊株系,以叶片和茎间薄层为外植体建立再生体系。结果表明,以平瓣型叶片为外植体,其愈伤组织诱导和不定芽分化最佳培养基为MS+1 mg·L^(-1)NAA+2mg·L^(-1)6-BA,接种20天愈伤组织诱导率为100%,不定芽分化率达100%;最佳生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^(-1)NAA,生根率达100%。平瓣型毛华菊的叶片最佳再生体系也适用于管瓣型和混合瓣型株系,不定芽分化率分别为83.46%和91.67%,生根率均为100%。移栽后对开花植株进行观察,发现利用叶片再生体系获得的3种不同瓣型再生植株花型稳定,为后续利用不同瓣型株系解析舌状花形态变异机理提供了技术方法。

关键词：毛华菊不同瓣型叶片再生体系茎间薄层

468株细菌性阴道炎患者阴道分泌物标本中致病菌的分布及其耐药性分析

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抗感染药学 2019年第12期16卷 2076-2078页

作者：辛佳凌新余市人民医院妇产科

目的:分析细菌性阴道炎患者阴道分泌物中致病菌的分布及其对抗菌药物的耐药性。方法:抽取2017年6月-2019年6月间诊治的细菌性阴道炎患者200例资料,统计其患者阴道分泌物细菌培养及其药敏试验结果,分析其阴道分泌物中致病菌的分布及其对... 详细信息

目的:分析细菌性阴道炎患者阴道分泌物中致病菌的分布及其对抗菌药物的耐药性。方法:抽取2017年6月-2019年6月间诊治的细菌性阴道炎患者200例资料,统计其患者阴道分泌物细菌培养及其药敏试验结果,分析其阴道分泌物中致病菌的分布及其对抗菌药物的耐药性。结果:200例患者中培养出病原菌468株,其中革兰阴性菌177株占37.82%,革兰阳性菌291株占62.18%;大肠埃希菌对亚胺培南、阿米卡星、头孢替坦的耐药率较低,肺炎克雷伯菌对亚胺培南、阿米卡星、厄他培南的耐药率较低;金黄色葡萄球菌对呋喃妥因、万古霉素、替加环素、利奈唑胺的耐药性较低,凝固酶阴性葡萄球菌对呋喃妥因、万古霉素、替加环素、利奈唑胺、青霉素、氨苄西林的耐药性较低。结论:细菌性阴道炎患者致病菌主要以革兰阳性菌为主兼有部分革兰阴性菌,临床可根据细菌培养及药敏试验结果合理选用抗菌药物治疗,以确保患者治疗的有效性和安全性。

关键词：细菌性阴道炎药敏试验细菌培养抗菌药物

60例阴道分泌物标本中细菌培养及药敏试验结果对黏液脓性宫颈炎患者抗菌药物合理使用的影响

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抗感染药学 2020年第8期17卷 1174-1176页

作者：辛佳凌新余市人民医院妇产科江西新余338025

目的:探究阴道分泌物细菌培养及药敏试验结果对黏液脓性宫颈炎(MPC)患者抗菌药物合理使用的影响。方法:选取医院2018年2月—2019年8月间诊治的MPC患者60例资料,统计其病原菌培养检测和药敏试验结果,分析其病原体阳性检出率、致病菌的分... 详细信息

目的:探究阴道分泌物细菌培养及药敏试验结果对黏液脓性宫颈炎(MPC)患者抗菌药物合理使用的影响。方法:选取医院2018年2月—2019年8月间诊治的MPC患者60例资料,统计其病原菌培养检测和药敏试验结果,分析其病原体阳性检出率、致病菌的分布与构成比以及主要革兰阳性菌、革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率。结果:60例患者阴道分泌物中检出细菌43株,阳性检出率为71.67%,其中单纯细菌感染8例、合并假丝酵母属感染9例和合并支原体属感染26例;43株致病菌中,其中革兰阴性菌16株(占37.21%)、革兰阳性菌27株(占62.79%);表皮葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁不耐药,粪肠球菌对万古霉素不耐药,无乳链球菌对氨苄西林、青霉素、利奈唑胺、替考拉宁也不耐药,而其对四环素、克林霉素的耐药率均为100.00%;大肠埃希菌、淋病奈瑟菌对亚胺培南均不耐药。结论:MPC患者阴道分泌物中感染病原菌主要为细菌感染与支原体属或假丝酵母属混合感染,了解了病原菌的分布及耐药性,有利于指导临床合理使用抗菌药物治疗,确保其用药的有效性。

关键词：细菌培养耐药性分析黏液脓性宫颈炎抗菌药物合理使用

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宫内宫外复合妊娠漏诊1例

实用妇产科杂志 2015年第8期31卷 627-628页

作者：阮玖根付水平朱昌华辛佳凌南昌大学附属新余市人民医院江西新余338025

复合妊娠为同时两个不同部位的妊娠,常见为宫内和宫外合并妊娠,其异位妊娠大多位于输卵管,尤其是输卵管壶腹部[1]。随着辅助生殖技术的应用,其发病概率为1%-3%[2],但在自然妊娠中其发病率少于十万分之一[3]。我院近年诊治时漏诊1例,现... 详细信息

复合妊娠为同时两个不同部位的妊娠,常见为宫内和宫外合并妊娠,其异位妊娠大多位于输卵管,尤其是输卵管壶腹部[1]。随着辅助生殖技术的应用,其发病概率为1%-3%[2],但在自然妊娠中其发病率少于十万分之一[3]。我院近年诊治时漏诊1例,现报告如下。1病例报告患者,35岁,已婚,G2P1。因停经37天,B超检查提示异位妊娠可能于2013年11月26日入院。患者平素月经规律,

关键词：异位妊娠输卵管壶腹部辅助生殖技术发病概率自然妊娠平素月经规律宫内妊娠左侧子宫双侧附件区子宫动脉

宫腹腔镜联合修补术与阴式手术治疗剖宫产术后子宫瘢痕憩室的效果比较

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基层医学论坛 2020年第16期24卷 2297-2298页

作者：辛佳凌新余市人民医院江西新余338025

目的对比宫腹腔镜联合修补术与阴式手术治疗剖宫产术后子宫瘢痕憩室的临床效果。方法纳入2016年8月—2018年8月来我院治疗的74例患者,依据入院顺序分为2组,各37例。对照组采用阴式手术治疗,观察组采用宫腹腔镜联合修补术治疗,观察2组患... 详细信息

目的对比宫腹腔镜联合修补术与阴式手术治疗剖宫产术后子宫瘢痕憩室的临床效果。方法纳入2016年8月—2018年8月来我院治疗的74例患者,依据入院顺序分为2组,各37例。对照组采用阴式手术治疗,观察组采用宫腹腔镜联合修补术治疗,观察2组患者手术情况、疗效。结果观察组手术时间、术中出血量多于对照组,住院时间、术后阴道出血时间少于对照组,差异显著(P0.05)。结论宫腹腔镜联合修补术与阴式手术治疗剖宫产术后子宫瘢痕憩室均有一定的疗效,前者手术时间较长、术中出血量较多,后者住院时间、术后阴道出血时间较长,临床需结合患者的实际情况加以选择。

关键词：剖宫产子宫瘢痕憩室宫腹腔镜联合修补术阴式手术

子宫动脉栓塞术治疗子宫瘢痕妊娠疗效及对卵巢功能的影响

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基层医学论坛 2020年第4期24卷 589-590页

作者：辛佳凌新余市人民医院

目的探讨子宫瘢痕妊娠患者采用子宫动脉栓塞术(UAE)治疗的临床疗效。方法选择我院2018年1月-2019年4月收治的子宫瘢痕妊娠患者64例,将其随机分为采用保守治疗的对照组(n=32)与采用子宫动脉栓塞术治疗的试验组(n=32),对比2组患者的临床... 详细信息

目的探讨子宫瘢痕妊娠患者采用子宫动脉栓塞术(UAE)治疗的临床疗效。方法选择我院2018年1月-2019年4月收治的子宫瘢痕妊娠患者64例,将其随机分为采用保守治疗的对照组(n=32)与采用子宫动脉栓塞术治疗的试验组(n=32),对比2组患者的临床疗效及治疗后卵巢功能水平。结果试验组术中出血量、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)转阴时间、病灶消失时间与住院时间均少于对照组(P0.05)。结论采用子宫动脉栓塞术治疗子宫瘢痕妊娠疗效理想,且不会导致患者卵巢功能降低,值得推广。

关键词：子宫瘢痕妊娠子宫动脉栓塞术疗效卵巢功能

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子宫动脉栓塞术在妇产科出血性疾病中的应用

现代医院 2016年第9期16卷 1289-1290页

作者：辛佳凌新余市人民医院江西新余338025

目的探析子宫动脉栓塞术在妇产科出血性疾病治疗中的临床应用效果。方法选取我院妇产科收治的出血性疾病42例患者为研究资料,其中难治性产后出血18例、子宫切口瘢痕妊娠13例、宫颈妊娠6例、异位妊娠5例,所有患者均予以子宫动脉栓塞术治... 详细信息

目的探析子宫动脉栓塞术在妇产科出血性疾病治疗中的临床应用效果。方法选取我院妇产科收治的出血性疾病42例患者为研究资料,其中难治性产后出血18例、子宫切口瘢痕妊娠13例、宫颈妊娠6例、异位妊娠5例,所有患者均予以子宫动脉栓塞术治疗,分析临床疗效。结果患者的临床效果治疗前与治疗后比较(P<0.05);患者采用双侧子宫动脉超选择性插管的成功率为100%;治疗后,患者的穿刺下肢状态良好,术后并发症经处理治疗后都已得到改善,并未发生严重型并发症。讨论采用子宫动脉栓塞术对妇产科出血性疾病患者进行临床治疗,能降低出血量,提高临床治疗效果,并且此治疗方法安全性较高,对患者的伤害小,因此,值得在临床上推广和应用。

关键词：子宫动脉栓塞出血性疾病难治性产后出血

中心静脉血氧饱和度乳酸水平在严重产后出血产妇预后评估中的价值探讨

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基层医学论坛 2021年第34期25卷 5032-5034页

作者：郭丽平胡萍辛佳凌新余市人民医院江西新余338000

目的探讨中心静脉血氧饱和度(Scv O_(2))、乳酸(LAC)水平在严重产后出血产妇预后评估中的价值,为严重产后出血治疗提供依据。方法选择新余市人民医院2018年1月—2020年1月产后严重出血产妇68例作为研究对象,以急性生理与慢性健康状况(AP... 详细信息

目的探讨中心静脉血氧饱和度(Scv O_(2))、乳酸(LAC)水平在严重产后出血产妇预后评估中的价值,为严重产后出血治疗提供依据。方法选择新余市人民医院2018年1月—2020年1月产后严重出血产妇68例作为研究对象,以急性生理与慢性健康状况(APACHE-Ⅱ)评分为标准将产妇分为2组,将APACHE-Ⅱ评分≥20分作为高风险组(n=28例),将APACHE-Ⅱ评分<20分作为低风险组(n=40例)。对比2组产妇中心静脉导管置入后即刻以及置入6 h后的中心静脉血氧饱和度和乳酸水平变化情况,分析中心静脉血氧饱和度、乳酸水平与APACHE-Ⅱ评分的关系。结果中心静脉导管置入后即刻及6 h后,高风险组产妇中心静脉血氧饱和度与低风险组相比明显降低(P<0.05),乳酸水平与低风险组相比显著上升(P<0.05);相关性分析显示中心静脉血氧饱和度与APACHE-Ⅱ评分呈负相关关系(P<0.05),乳酸水平与APACHE-Ⅱ评分呈正相关关系(P<0.05)。结论中心静脉血氧饱和度及乳酸水平能有效反映严重产后出血产妇疾病状况,对预后评估具有一定指导意义。

关键词：产后严重出血中心静脉血氧饱和度乳酸急性生理与慢性健康-Ⅱ评分