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系统生物学方法筛选人肺巨细胞癌细胞株转移相关miRNA的研究

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中华肿瘤防治杂志 2012年第18期19卷 1361-1364页

作者：辇伟奇陈锐陈芳琳张琨琨王东林重庆市肿瘤研究所肿瘤内科重庆400030 第三军医大学新桥医院病理科重庆400037 第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037

目的:探讨人低转移肺巨细胞癌细胞株95C和人高转移肺巨细胞癌细胞株95D中微小RNA(microRNA,miR-NA)的差异性表达,分析差异表达miRNA在肺癌细胞转移调控网络中的作用。方法:常规培养95C和95D,分别提取总RNA并进行质检;应用微阵列芯片检测... 详细信息

目的:探讨人低转移肺巨细胞癌细胞株95C和人高转移肺巨细胞癌细胞株95D中微小RNA(microRNA,miR-NA)的差异性表达,分析差异表达miRNA在肺癌细胞转移调控网络中的作用。方法:常规培养95C和95D,分别提取总RNA并进行质检;应用微阵列芯片检测miRNAs的表达,并对其表达谱进行差异性分析;从系统生物学角度,应用生物信息学的研究方法,分析肺癌转移可能相关的异常表达miRNA与相应靶基因。结果:两者miRNA表达存在显著差异,与95C细胞相比,在95D中上调>1.5倍的miRNA有36条,下调>1.5倍的miRNA有19条;12条差异表达miR-NA及1 046个预测靶基因构成了肺癌转移相关调控网络。结论:获得了人低转移肺巨细胞癌细胞株95C和人高转移肺巨细胞癌细胞株95D的差异miRNA表达谱,初步构建了一个由差异miRNA及其靶基因组成的复杂肺癌转移相关调控网络,分析发现部分miRNA为调控网络的关键节点。

关键词：肺肿瘤转移微小RNA 系统生物学

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞具有促发新生血管形成的特征

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重庆医学 2009年第22期38卷 2825-2826,2830,I0003页

作者：辇伟奇陈芳琳敖绪军陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037 解放军第五三二医院普通外科安徽黄山245041

目的研究CXCR4阳性Lewis肺癌细胞(LLC)在新生血管形成时的始动作用。方法激光共聚焦检测LLC细胞系中CXCR4抗原表达情况,观察小鼠移植瘤组织内CXCR4阳性LLC与新生血管的毗邻关系;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测CXCR4阳性和阴性... 详细信息

目的研究CXCR4阳性Lewis肺癌细胞(LLC)在新生血管形成时的始动作用。方法激光共聚焦检测LLC细胞系中CXCR4抗原表达情况,观察小鼠移植瘤组织内CXCR4阳性LLC与新生血管的毗邻关系;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测CXCR4阳性和阴性LLC中VEGF、MMP9 mRNA表达情况,同时免疫组化检测两亚群细胞移植瘤中VEGF、MMP9以及CD31表达情况。结果CXCR4阳性LLC多毗邻内皮细胞,周围形成血管样结构;CXCR4阳性LLC的VEGF mR-NA表达(0.439 8±0.059)明显高于CXCR4阴性LLC(0.289 9±0.003 1)(P<0.01);CXCR4阳性LLC的MMP9 mRNA表达(0.622 3±0.013 6)明显高于CXCR4阴性LLC(0.579 2±0.017 4)(P<0.05);CXCR4阳性LLC移植瘤组织MVD(56.87±4.83)明显高于CXCR4阴性LLC移植瘤(43.52±4.91)(P<0.01)。结论LLC中的CXCR4阳性亚群具有更强上调VEGF、MMP9表达的能力,具有促发新生血管形成的特征。

关键词： Lewis肺癌细胞 CXCR4 新生血管形成

大肠癌新型CEA疫苗重组杆状病毒的表达与鉴定

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第三军医大学学报 2006年第1期28卷 66-68页

作者：辇伟奇吴玉章王志新第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治中心重庆市肿瘤生物技术研究所重庆400037 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所重庆400038

目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建新型CEA融合表位疫苗(以HPV16L1为蛋白载体)的重组杆状病毒。方法构建含有HPV16L1片段和CEA-PADRE合成片段的表达载体pFastBac1-V,转化DH10Bac感受态菌。利用其含有的细菌Tn7转座系统,将该基因... 详细信息

目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建新型CEA融合表位疫苗(以HPV16L1为蛋白载体)的重组杆状病毒。方法构建含有HPV16L1片段和CEA-PADRE合成片段的表达载体pFastBac1-V,转化DH10Bac感受态菌。利用其含有的细菌Tn7转座系统,将该基因重组至杆状病毒穿梭质粒bacm id中,转染昆虫细胞sf9,获得新型CEA疫苗的重组杆状病毒。结果限制性内切酶酶切和DNA序列分析表明目的片断正确克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中;重组杆状病毒感染昆虫细胞后,PCR检测可以扩增出相应大小的片段。结论利用杆状病毒表达系统,成功构建了CEA融合表位疫苗的重组杆状病毒,为进一步的研究奠定了基础。

关键词：癌胚抗原疫苗大肠癌杆状病毒

CXCR4阳性Lewis肺癌细胞的高致瘤性和高转移潜能

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第三军医大学学报 2010年第4期32卷 315-318页

作者：辇伟奇敖绪军陈芳琳陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤诊治研究所重庆400037 解放军第532医院普通外科安徽黄山45041

目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志... 详细信息

目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测分选前后细胞活性,观察分析CXCR4阳性亚群的恶性生物学行为。结果LLC细胞中Sca-1、CXCR4双阳性细胞比例为0.1%,CXCR4阳性细胞为0.18%,小鼠肺癌组织存在荧光双染色细胞;分选前细胞活性为(95.58±0.87)%,分选后活力为(94.96±0.76)%(P>0.05);CXCR4阳性亚群在无血清中呈球状生长,CXCR阴性亚群1×105即不可成瘤,CXCR4阳性亚群在7×103仍可成瘤;CXCR4阴性和阳性亚群分别以5×105、2×104密度各接种3只小鼠,前者无转移,而后者2只发生肺转移,1只发生耳转移。结论Lewis肺癌细胞中的CXCR4阳性亚群具有一定的自我更新和转移能力,具备癌转移性干细胞某些特性。

关键词：细胞系,肿瘤癌,非小细胞肺肿瘤干细胞小鼠,近交C578L 癌,Lewis肺受体,CXCR4

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恶性肿瘤微转移研究进展

生命的化学 2009年第2期29卷 180-183页

作者：陈芳琳辇伟奇王卫东陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037

随着免疫细胞化学、分子生物学等检测技术的不断进展,恶性肿瘤微转移被发现是肿瘤发生发展过程中的早期事件,在乳腺癌和某些类型的肿瘤中,微转移的发生被认为是影响肿瘤患者预后的重要因素,对于指导个体化和系统化的治疗方式有着重要意... 详细信息

随着免疫细胞化学、分子生物学等检测技术的不断进展,恶性肿瘤微转移被发现是肿瘤发生发展过程中的早期事件,在乳腺癌和某些类型的肿瘤中,微转移的发生被认为是影响肿瘤患者预后的重要因素,对于指导个体化和系统化的治疗方式有着重要意义。本文就近年来在微转移检测方法和研究理论两方面的研究进展作一综述。

关键词：肿瘤微转移

miR-223在CXCR4^+ Lewis肺癌细胞中的显著低表达及其靶基因预测

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第三军医大学学报 2009年第22期31卷 2202-2205页

作者：辇伟奇陈芳琳敖绪军陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037 中国人民解放军532医院普通外科安徽黄山245041

目的分析miR-146a、miR-206、miR-223、let-7c-1等细胞分化相关miRNAs,在小鼠Lewis肺癌细胞株(theLewis lung cancer cell lines,LLC)CXCR4+与CXCR4-亚群间的差异表达。方法免疫磁珠分选CXCR4+和CXCR4-LLC细胞,Trizol法抽提细胞总RNA,实时荧光定量PCR(TaqMan探针)检测miRNAs表达,对表达差异最为显著的miRNAs进行潜在靶基因预测,应用免疫组化方法初步分析具有研究价值的关键分子在两个不同亚群小鼠种植瘤组织中的表达情况,并通过BLAST对其3′非翻译端(untranslated region,UTR)进行直向同源基因序列比对分析。结果CXCR4+与CXCR4-LLC比较,各检测mirna表达均较低,其中以miR-223差异最为显著(Fold Change=8.26),通过软件分析预测,miR-223与IGF1R、IGFBP5、Pik3cb、ELK-1和E2F1等基因均具有可能靶位点,免疫组化检测发现CXCR4+亚群种植瘤组织IGF1R表达显著高于CXCR4-亚群,IGF1R3′UTR的238～244nt和688～695nt两个结合位点具有高度的进化保守性。结论miR-223在CXCR4+LLC中显著低表达,可能与肺腺癌细胞IGF1R信号通路调控有关。

关键词： miR-223 CXCR4 Lewis肺癌细胞

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肿瘤干细胞研究进展及其临床应用前景

中国肿瘤临床与康复 2009年第5期16卷 468-471页

作者：辇伟奇陈正堂第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所重庆400037

干细胞是一类具有自我更新、多向分化潜能,并能无限增殖分裂的慢周期细胞,其相关研究在生物发育、基因治疗、药物筛选和器官移植等方面发挥着日益重要的作用.近年来,随着对干细胞生理特性研究的不断深入,研究者们发现恶性肿瘤进行性生... 详细信息

干细胞是一类具有自我更新、多向分化潜能,并能无限增殖分裂的慢周期细胞,其相关研究在生物发育、基因治疗、药物筛选和器官移植等方面发挥着日益重要的作用.近年来,随着对干细胞生理特性研究的不断深入,研究者们发现恶性肿瘤进行性生长、复发和转移等与干细胞诸多基本特性极其相似,因此,干细胞与肿瘤的关系也就成为了当前肿瘤研究领域的一大热点.

关键词：肿瘤干细胞肿瘤临床应用

基于无机卤化物钙钛矿湿度传感器的呼吸率监测系统

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光电工程 2021年第3期48卷 34-41页

作者：邬映杰伍志林王玲辇伟奇何邕郭永彩重庆大学光电工程学院光电技术与系统教育部重点实验室重庆400044 重庆大学附属肿瘤医院重庆400030

呼吸率检测中存在主观因素强、信号提取复杂、设备不易获取和有线连接不方便测试者移动等问题。人体呼吸周期为3 s-6 s,呼吸气流是呼吸动作的最直接反应,与周围空气存在湿度差。本文采用研制的新型无机卤化物钙钛矿湿度传感器测量呼吸率... 详细信息

呼吸率检测中存在主观因素强、信号提取复杂、设备不易获取和有线连接不方便测试者移动等问题。人体呼吸周期为3 s-6 s,呼吸气流是呼吸动作的最直接反应,与周围空气存在湿度差。本文采用研制的新型无机卤化物钙钛矿湿度传感器测量呼吸率,克服了市面上湿度传感器响应和恢复时间长(10 s以上)的问题。系统使用Zigbee无线通信传输检测信号,使信号检测和处理部分分离,方便测试者移动。使用上位机软件进行数据处理计算呼吸率,并根据呼吸暂停阈值判断呼吸状态。测试结果表明,系统可实时准确监测呼吸率,最大误差1次/分钟,具有准确率高、信号处理简单、便携和成本低的优势。

关键词：呼吸气流湿度传感器呼吸率监测无线通信上位机设计

HPV16 L1作为肿瘤疫苗载体的研究及进展

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重庆医学 2004年第7期33卷 1043-1044页

作者：辇伟奇王志新第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心重庆400037

病毒样颗粒是近几年发展起来并具有潜在临床应用前景的一类肿瘤疫苗载体。所谓的病毒样颗粒(VLP)，是一类由某些病毒的衣壳蛋白组分自发装配而成，不含病毒遗传物质，具有类似病毒立体构象(多为20面体结构)的颗粒的总称。现已发现约有3... 详细信息

病毒样颗粒是近几年发展起来并具有潜在临床应用前景的一类肿瘤疫苗载体。所谓的病毒样颗粒(VLP)，是一类由某些病毒的衣壳蛋白组分自发装配而成，不含病毒遗传物质，具有类似病毒立体构象(多为20面体结构)的颗粒的总称。现已发现约有30多种病毒的衣壳蛋白组分都可形成VLPs，如人类乳头状病毒(HPV)、乙型和丙型肝炎病毒(HBV，HCV)、SV40、JC等。

关键词： HPV16 肿瘤疫苗载体研究进展