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心脏植入性电子器械术后患者合并房颤不同治疗策略的效果与安全性评价

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名医 2022年第16期 72-74页

作者：严叶香车文良上海市第十人民医院崇明分院上海市第十人民医院

目的：探究心脏植入性电子器械术后患者合并房颤不同治疗策略的效果与安全性。方法：选取2018年1月至2020年1月上海市第十人民医院起搏器门诊随访的216例植入双腔起搏器、双腔埋藏式心律转复除颤仪（ICD）及心脏再同步化治疗（CRT）/带... 详细信息

目的：探究心脏植入性电子器械术后患者合并房颤不同治疗策略的效果与安全性。方法：选取2018年1月至2020年1月上海市第十人民医院起搏器门诊随访的216例植入双腔起搏器、双腔埋藏式心律转复除颤仪（ICD）及心脏再同步化治疗（CRT）/带有除颤功能的心脏再同步化治疗（CRT-D）并发房颤患者为研究对象，根据治疗方式不同分为对照组（n=113）与观察组（n=103），对照组采用口服非维生素K抗凝药（利伐沙班，达比加群），观察组采用左心耳封堵联合药物治疗；随访节点两年，观察两组患者的脑梗死、出血发生率，房颤再住院率、住院次数以及药物相关不良反应。结果：两组患者基本资料比较无统计学意义（P>0.05）；观察组患者脑梗死、出血发生率，房颤再住院率、住院次数与对照组比较无统计学意义（P>0.05）；两组患者药物不良反应（肝损/肾损）的发生率比较无统计学意义（P>0.05）。结论：药物治疗及左心耳封堵治疗在心脏植入性电子器械术后患者合并房颤治疗方面，临床各观察事件无统计学意义，实际工作中应结合情况选择合适的治疗方法。

关键词：心脏植入性电子器械房颤抗凝药左心耳封堵

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一种新型的双功能体内突变检测系统的建立

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第2期34卷 199-203页

作者：姚真真黎怀星车文良贺艳傅继梁第二军医大学医学遗传教研室上海200433 第二军医大学医学遗传教研室

将含有两个LacI靶基因的穿梭质粒pMCLacI/neo整合入小鼠的基因组中 ,建立一种能同时分析体内表达基因和沉默基因的双功能的新型体内突变检测系统 ,使在体内比较分析不同组织、器官中表达基因和沉默基因的突变谱和突变率成为可能。486个... 详细信息

将含有两个LacI靶基因的穿梭质粒pMCLacI/neo整合入小鼠的基因组中 ,建立一种能同时分析体内表达基因和沉默基因的双功能的新型体内突变检测系统 ,使在体内比较分析不同组织、器官中表达基因和沉默基因的突变谱和突变率成为可能。486个经显微注射过 pMCLacI/neo质粒的C5 7BL/ 6小鼠的受精卵 ,分别移植入 18只假孕母鼠的输卵管中 ,产下 32只存活小鼠 ,进一步检测证实 :(1)有 5只小鼠在基因组中整合有 pMCLacI/neo基因 ;(2 )该质粒中的两个LacI靶基因 ,只有一个表达 ;(3)能有效地从小鼠基因组中回收 pMCLacI/neo基因。因此 ,成功建立了pMCLacI/neo的转基因小鼠品系 ;可以将该小鼠用于整体动物水平研究表达基因和沉默基因突变机制的模型 ;该模型为一种具有双功能的新型体内突变检测系统

关键词：转基因小鼠突变检测 LacI 质粒

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冠状动脉非阻塞性心肌梗死的预后及治疗现状

国际心血管病杂志 2022年第1期49卷 5-8页

作者：印国庆车文良南京医科大学上海十院临床医学院心血管内科上海200072

冠状动脉非阻塞性心肌梗死(MINOCA)是一组多病因的临床综合征,发病率在急性心肌梗死中占1%~15%。MINOCA的病因主要包括心外膜血管病变和微血管病变。MINOCA的治疗尚无共识,目前指南推荐在明确病因后给予个体化治疗方案。MINOCA存在多种... 详细信息

冠状动脉非阻塞性心肌梗死(MINOCA)是一组多病因的临床综合征,发病率在急性心肌梗死中占1%~15%。MINOCA的病因主要包括心外膜血管病变和微血管病变。MINOCA的治疗尚无共识,目前指南推荐在明确病因后给予个体化治疗方案。MINOCA存在多种潜在的发病机制,冠状动脉阻塞性心肌梗死(MI-CAD)的二级预防策略对MINOCA患者是否适用尚不明确。MINOCA患者发生主要心血管不良事件的风险高于无冠状动脉疾病的人群,预后并不乐观且危险因素尚不明确。

关键词：冠状动脉非阻塞性心肌梗死预后治疗

基于凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

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基于凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

作者：车文良第二军医大学

学位级别：硕士

血友病乙的发生是由于位于X27.1的凝血因子IX基因结构改变而使凝血因子IX缺失或结构异常并致其功能缺乏，从而导致程度不同的凝血功能障碍。从大量的临床资料来看，导致血友病乙发病的基因缺陷的形式具有多样性，包括缺失、插入、突变... 详细信息

血友病乙的发生是由于位于X27.1的凝血因子IX基因结构改变而使凝血因子IX缺失或结构异常并致其功能缺乏，从而导致程度不同的凝血功能障碍。从大量的临床资料来看，导致血友病乙发病的基因缺陷的形式具有多样性，包括缺失、插入、突变等。各种基因缺陷引起凝血因子IX的生成过程中包括基因转录、翻译及翻译后修饰等各个环节异常，使血液中凝血因子IX的蛋白质构成、结构发生变化，继而导致其凝血活性、免疫原性发生不同程度的改变，从而表现出程度不一的临床症状。近年来血友病乙成为探讨遗传病发病机理、基因诊断、基因治疗的主要研究对象，对这些研究的深入需要有良好的能够精确模拟血友病乙真实发病机制的动物模型。已经报道的几个血友病乙小鼠模型大多是基因较大片段的缺失造成的，本研究所应用的凝血因子IX基因剔除小鼠基因组中，凝血因子IX基因的启动子至外显子c区段被neo△HPRT基因取代，使凝血因子IX基因失去转录功能，在血浆中无凝血因子IX蛋白。在本研究中对此动物模型进行了鉴定，通过分子水平分析，表明凝血因子IX基因没有转录产物，该小鼠繁殖过程中没有发生回复突变;血浆PT，KPTT测定结果显示该小鼠具有人血友病乙相应临床特征。以上策略建立的血友病乙小鼠模型基因组中较大范围的DNA缺失可能会对邻近基因功能产生影响，同时也不能真实地反映出血友病乙的自然发生的病理机制。我们在此凝血因子IX基因剔除小鼠基础上，根据临床资料选取导致血友病乙发生的突变，在体外将突变点引入人凝血因子IX小基因中，构建含有特定突变的人凝血因子IX基因表达载体。该载体包括由人凝血因子IX基因编码区及第一内含子(位于正常位置)构成的人凝血因子IX小基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子(MCKe)、鸡β-肌动蛋白启动子(bA)及Poly A，命名为pMe4bAIXml质粒。用显微注射法将该含特定第二军医大学硕士学位论文(中文摘要部分)99级遗传学专业突变的人凝血因于IX小基因表达载体注射入该鼠系的受精卵雄原核，再将它们分别回输假孕受体母鼠的输卵管中，以产生能够精确模拟血友病乙真实发病机制的转基因动物模型。本研究中共选取了三个有代表意义的突变(R338A、C36lR、G363R)，选取其中两个含特定突变的线性化载体进行注射。PMe4bANmld(含 R338A，此突变提高凝血因于IX活性)共注射入623颗凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核，产仔28 只，存活19 只，未鉴定出阳性小鼠。 pMe4bAIXml－2(C361R，含有止类突变点的患者血浆中凝血因子IX蛋白的凝血活性小于正常水平的1％，其免疫原性也小于正常水平的1％。)共注射入817颗凝血因子工X基因剔除小鼠受精卵雄原核，产仔69只，存活63 只。采用 PCR，基因组 Southern杂交筛选法鉴定小鼠，证实 6只小鼠(l 只为死亡小鼠)基因组中整合有pMe4bAIXel－2质粒，并对PCR产物进行测序，证实转基因结构特征符合设计要求，突变点仍存在，没有发生回复突变。RTICR结果表明有4只小鼠有该原核注射载体的转录产物产生。以基因组Southern杂交阳性小鼠为Founder小鼠，通过选育建系获得的小鼠模型无疑将可以进行血友病乙分子生物学相关分析，为研究凝血因子IX基因结构与功能的关系积累资料，同时也为血友病乙基因治疗的基础研究提供更有临床代表性的动物模型。

关键词：血友病乙凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠突变人凝血因子Ⅸ小基因转基因小鼠模型

pMCLacⅠ/neo转基因小鼠靶基因突变检测的新策略

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Acta Genetica Sinica 2002年第7期29卷 589-593页

作者：姚真真黎怀星车文良贺艳傅继梁第二军医大学医学遗传教研室上海200433

由于pMCLacⅠ neo转基因小鼠含有两种不同状态的LacⅠ靶基因 ,有别于以往所建立的只含有一种靶基因的系统。因此 ,建立一种能快速、有效地分析这两种靶基因的检测方法 ,成为该转基因小鼠建立后的又一新课题。通过适当方法将pMCLacⅠ ... 详细信息

由于pMCLacⅠ neo转基因小鼠含有两种不同状态的LacⅠ靶基因 ,有别于以往所建立的只含有一种靶基因的系统。因此 ,建立一种能快速、有效地分析这两种靶基因的检测方法 ,成为该转基因小鼠建立后的又一新课题。通过适当方法将pMCLacⅠ neo中两种LacⅠ靶基因分开后 ,采用了新近建立的M9 L正向选择系统进行检测 ,并用已知的LacⅠ基因突变子作为阳性对照 ,验证该策略的可行性。实验结果提示 ,M9 L正向选择系统可应用于pMCLacⅠ neo转基因小鼠中两种LacⅠ靶基因的检测 ;实验中所建立的突变检测方法快速。

关键词：正向选择 LacI靶基因突变检测

基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型

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Acta Genetica Sinica 2002年第7期29卷 594-598页

作者：车文良贺艳姚真真李坚傅继梁第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载... 详细信息

为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体 ,该载体包括由人凝血因子IX编码区及第一内含子构成的人凝血因子IX基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子 (MCKe)、鸡 β -肌动蛋白启动子 (bA)及PolyA ,命名为pMe4bAIXml质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 817只凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核 ,再将它们分别回输 4 5只假孕受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 6 9只 ,存活 6 3只。采用PCR与基因组Southern杂交筛选法鉴定小鼠 ,证实 6只小鼠基因组中整合有含特定点突变的pMe4bAIXml质粒 ,并对 1只小鼠的PCR产物进行测序。

关键词：血友病乙转基因小鼠模型点突变人凝血因子IX基因

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增强型体外反搏在心血管疾病中的研究进展

医学综述 2022年第4期28卷 748-753页

作者：骆艳茹刘伟静车文良姚光辉蚌埠市第三人民医院全科医学科安徽蚌埠233000 同济大学医学院附属第十人民医院心内科上海200072

随着社会老龄化的不断加剧和人们生活水平的提高,心血管疾病的患病率不断升高,传统的药物治疗和介入治疗不能满足部分心血管疾病患者的治疗需求,增强型体外反搏(EECP)作为一种无创的循环辅助装置,因易操作、经济且安全而广泛用于临床治... 详细信息

随着社会老龄化的不断加剧和人们生活水平的提高,心血管疾病的患病率不断升高,传统的药物治疗和介入治疗不能满足部分心血管疾病患者的治疗需求,增强型体外反搏(EECP)作为一种无创的循环辅助装置,因易操作、经济且安全而广泛用于临床治疗。EECP通过改变患者的血流动力学及增加血管剪切应力减轻顽固性心绞痛患者的症状,改善心功能不全患者心功能,还可以降低心血管疾病患者的动脉血压。未来需要进一步探索EECP的作用机制及其应用于其他疾病的效果,以扩大EECP的应用范围,使更多患者获益。

关键词：心血管疾病增强型体外反搏作用机制

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冠状动脉微血管疾病诊治进展

中华老年心脑血管病杂志 2018年第3期20卷 334-336页

作者：苏斌杰程劲松魏毅东车文良浙江省宁海县第一医院心内科 315600 浙江省宁波市第一医院心内科上海同济大学附属第十人民医院心内科

随着冠状动脉造影技术的广泛开展,越来越多主诉症状为胸痛但冠状动脉造影却无明显狭窄的患者被发现。目前认为,这些患者可能存在冠状动脉微血管疾病（coronary microvascular disease,CMVD）。CMVD可导致心肌缺血及心功能不全,其机制尚... 详细信息

随着冠状动脉造影技术的广泛开展,越来越多主诉症状为胸痛但冠状动脉造影却无明显狭窄的患者被发现。目前认为,这些患者可能存在冠状动脉微血管疾病（coronary microvascular disease,CMVD）。CMVD可导致心肌缺血及心功能不全,其机制尚不十分明确。另外,CMVD患者可能导致不良预后,需引起临床医师重视,并加强对其治疗管理。

关键词：冠状动脉疾病心肌缺血冠状动脉狭窄胸痛细胞黏附分子血管紧张素转换酶抑制药

分子遗传学与肝脏学讲座——第一讲人类基因图

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肝脏 2000年第2期5卷 101-102页

作者：车文良傅继梁上海第二军医大学医学遗传学教研室 200433

随着分子遗传学研究突飞猛进地发展 ,肝脏疾病的相关本质日益得以揭示。为了让广大基础和临床工作者了解这方面的信息和知识 ,本刊特邀请第二军医大学副校长 ,医学遗传学教研室主任傅继梁教授组织撰写一组“分子遗传学与肝脏学”的系列... 详细信息

随着分子遗传学研究突飞猛进地发展 ,肝脏疾病的相关本质日益得以揭示。为了让广大基础和临床工作者了解这方面的信息和知识 ,本刊特邀请第二军医大学副校长 ,医学遗传学教研室主任傅继梁教授组织撰写一组“分子遗传学与肝脏学”的系列讲座。本期起始陆续刊出以飨读者。

关键词：人类基因图 HGP 遗传图谱物理图谱转录图谱