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免疫性血小板减少性紫癜患者血浆协同刺激分子B7-H2和B7-H3与血小板自身抗体之间的相关性分析

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中国实验血液学杂志 2015年第4期23卷 1075-1080页

作者：左斌赵赟霄杨剑峰何杨苏州大学血液和血管疾病诊疗药物技术教育部工程研究中心江苏苏州215123 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:探讨免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆中的协同刺激分子B7-H2和B7-H3与血小板膜糖蛋白自身抗体水平之间是否具有相关性。方法:选取2012年6月至2013年8月期间于苏州大学附属第一医院就诊的ITP患者61例及同期健康体检者25例,通... 详细信息

目的:探讨免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆中的协同刺激分子B7-H2和B7-H3与血小板膜糖蛋白自身抗体水平之间是否具有相关性。方法:选取2012年6月至2013年8月期间于苏州大学附属第一医院就诊的ITP患者61例及同期健康体检者25例,通过流式免疫微球(FCIA)方法检测血浆中血小板5种糖蛋白(GPⅨ、GPⅠb、GPⅢa、GPⅡb及P选择素)的自身抗体,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血浆中可溶性协同刺激分子B7-H2(s B7-H2)和B7-H3(s B7-H3)水平,采用SPSS软件进行统计分析。结果:ITP患者血浆中5种血小板膜糖蛋白的自身抗体水平明显升高(P<0.01);ITP患者血浆s B7-H2水平升高(P<0.05),s B7-H3无明显变化;相关性分析显示,s B7-H3与血小板P-选择素自身抗体呈负相关(r=-0.46,P<0.05),并且s B7-H2和s B7-H3水平在P-选择素自身抗体阳性的ITP患者中降低(P<0.05);ITP患者血小板计数与s B7-H2水平之间呈负相关(r=-0.3907,P<0.01)。结论:ITP患者血浆中可溶性协同刺激分子s B7-H2升高,s B7-H3水平与P选择素自身抗体有关,提示协同刺激分子B7-H2和B7-H3可能参与了ITP自身免疫的病理机制。

关键词：免疫性血小板减少性紫癜协同刺激分子自身抗体 P选择素

定量检测血小板特异性抗体的流式免疫微珠芯片技术的建立及其临床应用

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中国实验血液学杂志 2019年第6期27卷 1955-1961页

作者：翟菊萍左斌翁震赵赟霄何杨苏州大学附属第一医院输血科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:建立流式免疫微珠芯片技术(FCIA)定量检测血小板特异性抗体的方法,探讨其在ITP诊治中的应用。方法:通过已知浓度的人IgG结合在包被抗体的微珠上,构建定量标准曲线,同时使用5种抗血小板GPIX(SZ1)、GPIb(SZ2)、GPIIIa(SZ21)、GPIIb(S... 详细信息

目的:建立流式免疫微珠芯片技术(FCIA)定量检测血小板特异性抗体的方法,探讨其在ITP诊治中的应用。方法:通过已知浓度的人IgG结合在包被抗体的微珠上,构建定量标准曲线,同时使用5种抗血小板GPIX(SZ1)、GPIb(SZ2)、GPIIIa(SZ21)、GPIIb(SZ22)和P-选择素(SZ51)抗体包被的微珠捕获血小板特异性抗原抗体复合物进行血小板抗体的检测。通过定量标准曲线将流式细胞仪检测的荧光信号转换成样品中血小板抗体浓度,从而建立定量检测血浆样品中血小板特异性抗体的方法(FCIA),并对该方法从性能、效率,临床应用等方面进行评价。结果:针对GPIX、GPIb、GPIIIa、GPIIb和P-选择素5种抗体的FCIA定量检测范围分别为33.29-1280、45.17-1280、42.07-1280、46.40-1280和42.48-1280 ng/ml,回收率分别为115.23%、112.58%、117.47%、107.64%和112.67%。批内精密度(CV%)分别为3.54%、3.65%、4.66%、6.43%和6.97%,批间精密度(CV%)分别为10.89%、7.57%、10.34%、6.95%和10.72%。ITP组5种血小板特异性抗体浓度值均高于NITP和健康对照组(P<0.01)。FCIA定量检测5种抗体对诊断ITP的灵敏度、特异性和准确度分别为68.29%,84.93%和78.95%,而改良间接MAIPA技术检测的相应值分别为41.46%、90.41%和72.81%。结论:建立的血小板特异性抗体FCIA定量检测方法为ITP的诊断、疗效评估、患者预后提供了一个良好工具。

关键词：血小板特异性抗体免疫微珠芯片技术定量流式细胞术 ITP

血小板聚集功能的新检测方法和仪器的性能评价及临床应用

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 674-677页

作者：张有涛赵益明季顺东赵赟霄蒋敏金晓华史进方顾国浩阮长耿苏州大学附属第一医院检验科苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究旨在评价对血小板聚集功能检测的新方法及仪器的性能,并建立其参考区间,探讨其临床应用价值。按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的仪器性能验证标准和美国《临床实验室改进修... 详细信息

本研究旨在评价对血小板聚集功能检测的新方法及仪器的性能,并建立其参考区间,探讨其临床应用价值。按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的仪器性能验证标准和美国《临床实验室改进修正法案-88》(Clinical Laboratory Improvement Amendment 88,CLIA’88法案)制定的评价标准,对PL-11血小板分析仪进行了分析性能评估。用PL-11血小板分析仪测试健康志愿者柠檬酸钠静脉抗凝血的聚集功能,并对测定结果进行统计分析,建立PL-11血小板分析仪本实验室的参考区间。同时收集本院神经内科急性脑梗死(ACI)患者服用氯吡格雷7 d前后血小板最大聚集率(MAR)的变化来探讨PL-11血小板分析仪的临床诊断意义。结果表明,各参数皆符合CLIA'88法案的要求。测得PLR-06、PLR-07、PLR-09、PLR-10血小板诱聚剂诱导的247名健康正常人血小板MAR分别为58.8±10.1(﹪)、61.2±11.8(﹪)、51±10.2(﹪)、53.1±9.2(﹪)。ACI患者MAR在服用氯吡格雷后明显降低。结论:PL-11血小板分析仪检测结果准确可靠,是一种较理想的适用于血栓病早期预警和诊断的新型血小板聚集功能检测仪,值得推广应用。

关键词：血小板聚集血小板分析仪检测方法

流式免疫微球芯片技术检测血小板膜糖蛋白特异性自身抗体的方法及其临床应用

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苏州大学学报（医学版） 2012年第6期32卷 826-829页

作者：赵赟霄何杨朱明清阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的建立流式免疫微球芯片技术(FCIBA)检测血小板膜糖蛋白(GP)特异性自身抗体的方法及其临床应用。方法使用流式细胞仪检测包被不同GP的单克隆抗体,抗GPⅨ(SZ1)、抗GPⅠb(SZ2)、抗GPⅢa(SZ21)、抗GPⅡb(SZ22)、抗P-选择素(SZ51)的不同... 详细信息

目的建立流式免疫微球芯片技术(FCIBA)检测血小板膜糖蛋白(GP)特异性自身抗体的方法及其临床应用。方法使用流式细胞仪检测包被不同GP的单克隆抗体,抗GPⅨ(SZ1)、抗GPⅠb(SZ2)、抗GPⅢa(SZ21)、抗GPⅡb(SZ22)、抗P-选择素(SZ51)的不同荧光强度的微球,检测结果与单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAI-PA)进行比较。选取特发性血小板减少性紫癜(ITP)组、非ITP(NITP)组和健康人对照组样本用FCIBA分析SZ1、SZ2、SZ21、SZ22、SZ51共5种特异性血小板自身抗体。结果批内批间差异小;ITP组与NITP组和健康人对照组比较,差异均有高度统计学意义(均P0.05)。敏感度为62.00%(31/50),明显高于改良间接MAIPA的31.00%(19/50,P<0.05)。结论 FCIBA可以一次同时进行5种自身抗体的联合检测,为ITP的临床诊断提供了一种快速测定的新方法。

关键词：流式细胞术自身抗体糖蛋白血小板减少

Matriptase-2多克隆抗体的制备及鉴定

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中国血液流变学杂志 2014年第4期24卷 472-475页

作者：杨剑峰赵赟霄左斌何杨苏州大学唐仲英血液学研究中心江苏苏州215123 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所江苏苏州215006

目的：探讨Matriptase-2重组蛋白的表达及多克隆抗体制备。方法 Matriptase-2胞外区近跨膜段（Glu81-Gly228）克隆入pMAL-C2X，重组质粒转化BL21（DE3）大肠杆菌，经IPTG诱导表达，提取细菌蛋白后用直链淀粉树脂纯化柱进行纯化。将纯化... 详细信息

目的：探讨Matriptase-2重组蛋白的表达及多克隆抗体制备。方法 Matriptase-2胞外区近跨膜段（Glu81-Gly228）克隆入pMAL-C2X，重组质粒转化BL21（DE3）大肠杆菌，经IPTG诱导表达，提取细菌蛋白后用直链淀粉树脂纯化柱进行纯化。将纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔，制备Matriptase-2抗血清；免疫血清用protein G亲和层析柱进行纯化，获得多克隆抗体。结果成功表达了Matriptase-2重组融合蛋白，获得了高效价的抗血清，Western blot结果显示具有抗原特异性识别。结论成功制备了高特异性、高效价的抗人Matriptase-2多克隆抗体，为今后深入研究Matriptase-2的生物学功能提供了有用的实验工具。

关键词： Matriptase-2 原核表达多克隆抗体

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疏血通注射液体外抗栓及抗凝作用研究

中国全科医学 2018年第36期21卷 4502-4505页

作者：陈艳明夏珂何杨赵赟霄张忠兵江淼郑顺亮王思瑶周剑波白芳牡丹江友搏药业有限责任公司黑龙江省牡丹江市157013 北京友博药业有限责任公司北京市101300 天津大学药物科学与技术学院天津市现代药物传递及功能高效化重点实验室天津市300072 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏省苏州市215006

目的探讨疏血通注射液(以下简称疏血通)体外抗凝、抗栓作用。方法 2015年5—7月,收集来自江苏省血液研究所的6例健康献血者的外周血,采用同一健康献血者的血液或血浆,以疏血通1份+血液或血浆9份作为加药组,0.9%氯化钠溶液1份+血液或血浆... 详细信息

目的探讨疏血通注射液(以下简称疏血通)体外抗凝、抗栓作用。方法 2015年5—7月,收集来自江苏省血液研究所的6例健康献血者的外周血,采用同一健康献血者的血液或血浆,以疏血通1份+血液或血浆9份作为加药组,0.9%氯化钠溶液1份+血液或血浆9份作为对照组。检测两组血常规指标、凝血指标、纤溶指标、血小板功能、体外血栓形成情况。结果对照组白细胞计数、血小板计数高于加药组(P0.05)。加药组活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)长于对照组(P0.05)。纠正试验的APTT、PT、TT长于对照组(P0.05);加药组P-选择素高于对照组(P<0.05)。加药组R值、K值长于对照组,α角、MA值小于对照组(P<0.05)。结论疏血通在体外实验中显示出一定的抗凝、促纤溶、抑制血小板聚集和抑制血栓形成的作用。

关键词：血栓形成抗凝药血液凝固疏血通注射液血小板聚集血小板黏附

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PL-11血小板分析仪检测功能的性能评价

中华检验医学杂志 2012年第12期35卷 1139-1141页

作者：张有涛赵益明季顺东赵赟霄蒋敏金晓华史进方顾国浩阮长耿苏州大学附属第一医院检验科 215006 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的评价PL-11血小板分析仪的分析性能。方法用EDTA．K2及柠檬酸钠静脉抗凝血，测试PL-11血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性及线性性能，并选择2012年2月至7月苏州大学附属第一医院门诊30位体检者的空腹柠檬酸... 详细信息

目的评价PL-11血小板分析仪的分析性能。方法用EDTA．K2及柠檬酸钠静脉抗凝血，测试PL-11血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性及线性性能，并选择2012年2月至7月苏州大学附属第一医院门诊30位体检者的空腹柠檬酸钠静脉抗凝血与MPG-3E多功能双通道血液凝聚仪测定结果进行相关分析。结果各参数皆符合ELIA’88法案的要求。PL．11血小板分析仪批内、日间精密度的CV均〈5％；携带污染率〈1％；测定定值全血质控物，准确性满意，线性良好；测定结果与光电比浊法结果相关性分析，R2=0．9439。结论PL-11血小板分析仪可直接使用全血动态分析血小板聚集过程并能对血液细胞的多种组分（包括血小板和红细胞）进行定量分析，报告结果准确可靠。

关键词：血小板聚集血小板功能试验诊断设备评价研究

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三七抗血小板聚集及抗凝作用机制研究

西部中医药 2021年第8期34卷 21-24页

作者：朱心怡王琪赵赟霄宋雅雅张威赵益明苏州大学附属第一医院江苏苏州215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室盐城市第一人民医院

目的:探讨中药三七抗血小板聚集和抗凝的作用机制。方法:征集10例志愿者,每日口服三七3 g,连续服用5日。比较服药前后经由胶原(collgen,COL)、肾上腺素(epinephrine,EPI)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)和花生四烯酸(arachidon... 详细信息

目的:探讨中药三七抗血小板聚集和抗凝的作用机制。方法:征集10例志愿者,每日口服三七3 g,连续服用5日。比较服药前后经由胶原(collgen,COL)、肾上腺素(epinephrine,EPI)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)所诱导的血小板聚集率(maximum platelet aggregation rate,MAR),比较血浆中血管性血友病因子抗原(von willebrand factor antigen,VWF:Ag)、P-选择素(Pselectin)含量,凝血酶时间(thrombin time,TT),活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)及凝血酶原时间(prothrombin time,PT)。结果:与服药前相比,MAR在第3、6日均显著下降(P<0.05),服药后第6日血浆VWF:Ag和P-选择素的含量显著下降(P<0.05),服药后第6日,TT、APTT、PT均延长(P<0.05)。结论:三七主要通过抑制血小板黏附、聚集和释放的作用起到抗血栓的作用,兼有抗凝作用。

关键词：三七血小板活化聚集抗凝

血小板聚集机能检测的新方法及仪器的性能评价

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苏州医学 2012年第2期35卷 28-31页

作者：张有涛赵益明季顺东赵赟霄蒋敏金晓华史进方顾国浩阮长耿苏州大学附属第一医院检验科 215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的对血小板聚集机能检测的新方法及仪器的性能进行评价并报告。方法按照国际血液学标准华委员会（ICSH）制定的评价标准进行。用EDTA．K2及柠檬酸钠静脉抗凝血测试血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性及线性性... 详细信息

目的对血小板聚集机能检测的新方法及仪器的性能进行评价并报告。方法按照国际血液学标准华委员会（ICSH）制定的评价标准进行。用EDTA．K2及柠檬酸钠静脉抗凝血测试血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性及线性性能，并与MPG．3E多功能双通道血液凝聚仪测定结果进行相关分析。结果各参数皆符合ICSH的要求。血小板分析仪批内、日间精密度的CV均〈5％；携带污染率〈1％；测定定值全血质控物，准确性满意，线性良好；测定结果与光密度比浊法结果相关性分析，R^2=0．9439。结论新型血小板分析仪的批内重复性、日间重复性、携带污染率、准确性、线性及比较实验均较好，报告结果准确可靠。新型血小板分析仪是一种较理想的适用于血栓病早期预警和诊断的新型血小板聚集机能检测仪，值得推广应用。

关键词：血小板聚集血小板分析仪评价