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甲氨蝶呤与异环磷酰胺对骨肉瘤细胞株作用的分子机制研究

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甲氨蝶呤与异环磷酰胺对骨肉瘤细胞株作用的分子机制研究

作者：赵维丽河北医科大学

学位级别：硕士

目的:研究甲氨蝶呤及异环磷酰胺对人骨肉瘤细胞(MG-63)诱导凋亡的作用及其分子机制。方法:将MG63细胞置于37℃, 5%CO2饱和湿度的培养箱常规条件下培养,待细胞进入对数生长期后用于实验。1应用倒置相差显微镜观察细胞形态学变化:将不同... 详细信息

目的:研究甲氨蝶呤及异环磷酰胺对人骨肉瘤细胞(MG-63)诱导凋亡的作用及其分子机制。方法:将MG63细胞置于37℃, 5%CO2饱和湿度的培养箱常规条件下培养,待细胞进入对数生长期后用于实验。1应用倒置相差显微镜观察细胞形态学变化:将不同浓度的甲氨蝶呤与异环磷酰胺分别作用于MG63细胞,在倒置相差显微镜下定时观察细胞的形态变化及生长状态。2采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的生长的抑制作用。将不同浓度的甲氨蝶呤(10 ug/ml、50 ug/ml、100ug/ml、200ug/ml)与不同浓度的异环磷酰胺(5ug/ml、25 ug/ml、50ug/ml、100ug/ml)分别作用于MG63细胞24h,48h,72h后加MTT10ul/孔,继续培养4h,在水平离心机上离心10min,2000rpm,弃上清液,加二甲亚砜150ul/孔,待结晶溶解后,用全自动酶标仪(波长492nm)测定每一孔的吸光度A值(OD值),并计算其细胞毒性指数值(CI),CI=(对照组A值-试验组A值)/对照组A值×100%。3制作生长曲线:根据上述药物浓度(MTT)实验处理的结果制作甲氨蝶呤与异环磷酰胺对骨肉瘤细胞株(MG-63)的生长曲线,并求出两者的IC50值。4流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞周期分布:收集分别经不同浓度的甲氨蝶呤和异环磷酰胺作用48h的MG63细胞及对照组细胞,经AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂处理后,流式细胞术检测,应用软件进行处理分析。5免疫印迹:观察甲氨蝶呤作用后的人成骨肉瘤细胞MG-63的PCNA、Cyclin-D1、Cyclin-E以及Bcl-2、Bax的表达。结果:1.细胞在倒置显微镜下的形态学变化:倒置显微镜下观察可见,未经药物处理的肿瘤细胞呈梭形贴壁生长。经IC50甲氨蝶呤处理MG63细胞24h后,细胞生长受到抑制,部分细胞变圆,折光性增强;随两者作用时间的延长,继续培养48h后可见变圆细胞逐渐增多,胞浆内颗粒增多增粗,部分细胞脱落,可见坏死细胞及碎片悬浮在培养基内;72h后部分细胞漂浮,大部细胞壁溶解,出现细胞核裸露,随后出现细胞核裂解。而经不同浓度的异环磷酰胺处理MG63细胞24h和48h后,细胞生长状态未有明显的受抑制现象,与正常对照组细胞形态相比无显著差异,表明此种药在体外对细胞的生长的抑制影响不明显。***实验不同浓度甲氨蝶呤对MG-63细胞分别作用24h、48h和72h后,对细胞的生长起到了抑制作用。将不同时间及不同浓度组与对照组相比,MTT结果显示甲氨蝶呤能明显抑制MG63细胞的增殖,甲氨蝶呤对MG-63细胞的生长抑制作用与对照组相比差异具有显著性(p0.05)。3.流式细胞分析结果显示FCM分析发现,以50 ug/ml、100ug/ml、200ug/ml的甲氨蝶呤处理MG63细胞48h后,早期凋亡百分率分别为(10.7±0.6)%、(20.4±1.9)%、(14.8±2.3)%。晚期凋亡百分率分别为(7.4±0.3)%、(22.8±3.6)%、(55.7±3.1)%。空白对照组早期凋亡百分率为(0.4±0.1)%,晚期凋亡百分率为(2.1±0.4)%.甲氨蝶呤处理组与对照组相比差异有显著性,抑制作用呈剂量依赖性。100ug/ml的异环磷酰胺处理MG63细胞48h后,G0/G1期前面未出现明显的凋亡峰, G1期细胞比例为41.0%,G2期细胞比例为17.9%,S期细胞比例为41.1%,对照组G1期细胞比例为36.2%,G2期细胞比例为22.5%,S期细胞比例为41.3%,细胞周期显示各

关键词：甲氨蝶呤异环磷酰胺骨肉瘤细胞 MTT 流式细胞分析 Western blot

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双车道公路驾驶舒适费模型

内蒙古公路与运输 1996年第2期 26-29页

作者：王忠仁赵维丽交通部公路科学研究所

文章论述了双车道公路的经济分析问题，介绍了加拿大阿尔波特省运输局所进行的关于驾驶舒适费的研究、测试结果以及计算舒适费用的模型。鉴于双车道公路交通量上升所导致的服务水平下降的情况，国外有关专家于１９８５年就建议在道路用... 详细信息

文章论述了双车道公路的经济分析问题，介绍了加拿大阿尔波特省运输局所进行的关于驾驶舒适费的研究、测试结果以及计算舒适费用的模型。鉴于双车道公路交通量上升所导致的服务水平下降的情况，国外有关专家于１９８５年就建议在道路用户费中增加计算舒适费、为此，该文在以往研究的基础上，提出并标定了双车道公路的驾驶舒适费的概念性模型。同时详细讨论了模型参数的确定方法。

关键词：双车道公路驾驶舒适费经济分析模型参数

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血清总胆红素与糖尿病肾病因果关系分析

中华疾病控制杂志 2023年第5期27卷 551-556,568页

作者：夏淼王敏珍赵增毅邢玉微赵维丽杨洪燕刘赞朝兰州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学研究所兰州730000 河北省糖尿病基础医学研究重点实验室河北省石家庄市第二医院内分泌科石家庄050051

目的采用断点回归设计(regression discontinuity design,RDD)探讨血清总胆红素(total bilirubin,TBIL)与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的因果关系。方法以石家庄市第二医院就诊2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者为研究对象,分析其DN患病现状,应用logistic回归分析模型探讨DN影响因素,建立风险预测模型,得出DN个体患病概率值,以TBIL为分组变量,DN风险概率为结局变量,进行RDD分析。结果4173例糖尿病患者中,DN 507例,检出率12.15%。在DN风险预测模型中,预测因素为高脂血症、吸烟、饮酒、饮食控制、运动情况、降糖药物使用、糖尿病病程、尿素氮、SBP、TBIL。DN风险预测模型受试者工作特征(receiver oper⁃ating characteristic,ROC)曲线下面积(area under curve,AUC)为0.758(95%CI:0.736~0.779)。TBIL是DN的保护因素(OR=0.967,95%CI:0.948~0.987);当TBIL=8μmol/L时,DN风险下降5.02%(P=0.004)。结论TBIL是DN的保护因素;当TBIL=8μmol/L时,患DN风险降低。

关键词：血清总胆红素糖尿病肾病断点回归设计风险预测

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胎儿电子监护1504人次临床分析

河北医药 1989年第3期 134-135页

作者：田印娥罗保存赵维丽邢台市第一医院

胎儿电子监护可以预测胎盘功能,了解胎儿在宫内生活状况,以及胎心率变化与子宫收缩的关系,进而早期诊断缺氧,及时拟定治疗和分娩方案,有效地降低胎婴儿的窒息及死亡率。本文共监护1504人次,临床效果满意。同时对空腹时胎心率监护也进行... 详细信息

胎儿电子监护可以预测胎盘功能,了解胎儿在宫内生活状况,以及胎心率变化与子宫收缩的关系,进而早期诊断缺氧,及时拟定治疗和分娩方案,有效地降低胎婴儿的窒息及死亡率。本文共监护1504人次,临床效果满意。同时对空腹时胎心率监护也进行了初步探讨。报告如下: 资料来源自1987年9月～1988年8月对来我院的孕产妇做无刺激试验(NST)1168人次,宫缩试验(CST或OCT)336人次,共计1504人次。其中高危妊娠471人

关键词：无反应型高危妊娠围产儿死亡率新生儿窒息率 ST 正常妊娠胎儿电子监护

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阿司匹林预防子痫前期的研究进展

中国药物与临床 2024年第2期24卷 84-87页

作者：赵维丽胡丽燕山西医科大学附属山西省儿童医院妇产科山西太原030013 山西省儿童医院山西省妇幼保健院妇产科山西太原030013

阿司匹林是一种非甾体类抗炎药,通过非选择性且不可逆抑制环氧合酶(COX)起作用,抑制前列腺素和血栓素的产生,抑制血小板聚集;阿司匹林还通过抑制COX-1抑制缺氧诱导的可溶性fms样酪氨酸激酶-1过表达;增加滋养细胞的增殖和侵袭,抑制滋养... 详细信息

阿司匹林是一种非甾体类抗炎药,通过非选择性且不可逆抑制环氧合酶(COX)起作用,抑制前列腺素和血栓素的产生,抑制血小板聚集;阿司匹林还通过抑制COX-1抑制缺氧诱导的可溶性fms样酪氨酸激酶-1过表达;增加滋养细胞的增殖和侵袭,抑制滋养细胞凋亡。子痫前期是一种复杂的多系统疾病,诊断标准为突发性高血压(妊娠>20周)和至少一个其他相关并发症,包括蛋白尿、母体器官功能障碍或子宫胎盘功能障碍。最新研究发现胎盘中许多长链非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miRNAs)的表达改变与子痫前期发生的病理生理过程有关,它参与了胎盘发育和母体免疫。本文就阿司匹林预防子痫前期的研究进展进行综述,以期为临床预防妊娠期高血压疾病提供参考。

关键词：子痫阿司匹林预防

三叉神经痛微血管减压术围手术期规范化护理措施探讨

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中西医结合护理（中英文） 2018年第9期4卷 155-157页

作者：朱青张竞文赵维丽河南省许昌市中心医院神经外科河南许昌461000

本文回顾了86例三叉神经痛行微血管减压术患者的临床资料。术前针对患者采取心理护理及加强营养,术后及时发现后颅窝出血、颅神经损伤、脑脊液漏等并发症并采取针对性措施。本组病例术后疼痛完全缓解83(96. 51%)例,部分缓解2(2. 32%)例,... 详细信息

本文回顾了86例三叉神经痛行微血管减压术患者的临床资料。术前针对患者采取心理护理及加强营养,术后及时发现后颅窝出血、颅神经损伤、脑脊液漏等并发症并采取针对性措施。本组病例术后疼痛完全缓解83(96. 51%)例,部分缓解2(2. 32%)例,1(1. 16%)例无缓解。三叉神经痛微血管减压术围手术期实施规范化护理措施,对确保手术效果具有积极意义。

关键词：三叉神经痛微血管减压术规范化护理颅窝

外周血CCN1与2型糖尿病患者早期肾损伤的相关性研究

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河北医科大学学报 2024年第9期45卷 1047-1052页

作者：李坤赵维丽张培徐运强河北省石家庄市第二医院检验科河北石家庄050051 河北省石家庄市第二医院糖尿病检测中心河北石家庄050051

目的探讨外周血富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich protein 61,CCN1)与2型糖尿病患者早期肾损伤的相关性研究。方法回顾性研究河北省石家庄市第二医院2型糖尿病患者321例,以尿液微量白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)... 详细信息

目的探讨外周血富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich protein 61,CCN1)与2型糖尿病患者早期肾损伤的相关性研究。方法回顾性研究河北省石家庄市第二医院2型糖尿病患者321例,以尿液微量白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)为金标准,将患者分成将2型糖尿病患者分成早期肾损伤组(n=78,20μg/min≤UAER≤200μg/min)、糖尿病肾病组(n=28,UAER>200μg/min)和正常组(n=215,UAER<20μg/min)。比较3组外周血CCN1表达,Pearson法测定UAER与外周血CCN1的相关性,使用ROC曲线评估外周血CCN1对2型糖尿病早期肾损伤和糖尿病肾病的预测价值。单因素分析基线资料,多因素Logistic回归分析确定早期肾损伤或糖尿病肾病的影响因素。结果糖尿病肾病组CCN1和UAER水平高于早期肾损伤组和正常组;早期肾损伤组的CCN1和UAER水平也高于正常组(P<0.05);外周血CCN1与UAER呈正相关(r=0.916,P<0.001)。以外周血CCN1为检验变量,以是否发生早期肾损伤为状态标量,以敏感度为Y轴,以“1-特异度”为X轴绘制ROC曲线。ROC结果显示,CCN1诊断的临界值为1.59μg/L,其对应的敏感度为85.85%,特异度为73.02%,AUC为0.871(95%CI:0.831~0.903)。以外周血CCN1为检验变量,以是否发生糖尿病肾病为状态标量,以敏感度为Y轴,以“1-特异度”为X轴绘制ROC曲线。ROC结果显示,CCN1诊断的临界值为3.41μg/L,其对应的敏感度为71.43%,特异度为73.72%,AUC为0.761(95%CI:0.707~0.813)。糖尿病肾病组、早期肾损伤组和正常组的病程、高血压、高血脂、收缩压、FPG、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbA1c)、尿酸(uric acid,UA)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)和低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)等方面比较差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,病程(OR=1.740,95%CI:1.180~2.565)、收缩压(OR=1.943,95%CI:1.267~2.978)、高血脂(OR=1.654,95%CI:1.310~2.088)、FPG(OR=2.776,95%CI:1.260~6.116)、UA(OR=2.228,95%CI:1.174~4.229)和CCN1(OR=3.744,95%CI:1.709~8.200)是2型糖尿病早期肾损伤发生的影响因素(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,病程(OR=1.752,95%CI:1.177~2.609)、收缩压(OR=1.818,95%CI:1.034~3.198)、高血脂(OR=1.680,95%CI:1.320~2.138)、FPG(OR=2.389,95%CI:1.519~3.758)、UA(OR=1.260,95%CI:1.038~1.530)和CCN1(OR=3.815,95%CI:1.636~8.897)是糖尿病肾病发生的影响因素(P<0.05)。结论外周血CCN1与尿液微量白蛋白排泄率呈正相关,是早期肾损伤或糖尿病肾病的危险因素,并可应用于预测早期肾损伤或糖尿病肾病的发生,值得临床进一步研究并推广。

关键词：糖尿病,2型富含半胱氨酸蛋白61 肾损伤

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尿蛋白和尿微量白蛋白在糖尿病肾病检验中的准确性分析

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第5期 52-54页

作者：李坤赵维丽张培张婷婷荣瑞娟石家庄市第二医院河北石家庄050000

目的是应用在糖尿病肾病的临床检查尿蛋白和尿微量白蛋白的价值。以在2020年7月至2022年7月期间在我院接受治疗的30名糖尿病肾病患者为对象进行研究,并命名了实验组。同时,以同一时期在我院完成体检的30人为对象,命名对照组。组间比较... 详细信息

目的是应用在糖尿病肾病的临床检查尿蛋白和尿微量白蛋白的价值。以在2020年7月至2022年7月期间在我院接受治疗的30名糖尿病肾病患者为对象进行研究,并命名了实验组。同时,以同一时期在我院完成体检的30人为对象,命名对照组。组间比较数据显示,尿蛋白及尿微量白蛋白指标与对照组相比有明显差异,P < 0.05。结论糖尿病肾病的诊断,参考尿蛋白和尿微量白蛋白,可以提高诊断的精度。

关键词：尿蛋白尿微量白蛋白糖尿病肾病诊断效果

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糖尿病肾病早期诊断应用生化检验的临床价值

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第5期 61-63页

作者：李坤张婷婷荣瑞娟赵维丽张培石家庄市第二医院河北石家庄050000

分析在早期糖尿病肾病诊断中,使用生化检验的有效性。方法本次研究主要是选择早期糖尿病肾病患者以及健康人员参与实验,每组30名,实验时间为2021年1月-2022年5月,分别为试验组、健康组,检验方法均为生化检验,将两组实验人员的C反应蛋... 详细信息

分析在早期糖尿病肾病诊断中,使用生化检验的有效性。方法本次研究主要是选择早期糖尿病肾病患者以及健康人员参与实验,每组30名,实验时间为2021年1月-2022年5月,分别为试验组、健康组,检验方法均为生化检验,将两组实验人员的C反应蛋白、血清胱抑素C、糖化血红蛋白、游离脂肪酸、血同型半胱氨酸、血尿酸、尿蛋白进行对比检验。结果结果显示,生化指标各项指标对比结果显示,健康人群和糖尿病肾病对比有明显的差异性(P<0.05)。结论生化指标在糖尿病肾病早期的诊断工作中,能够给出明确的诊断,为治疗提供帮助。

关键词：生化指标糖尿病肾病早期诊断效果 C反应蛋白