检索结果-南通市图书馆

TRIM 29低表达在食管癌增殖和转移中的作用及机制研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

TRIM 29低表达在食管癌增殖和转移中的作用及机制研究

作者：赵玉佳安徽医科大学

学位级别：硕士

背景与目的:食管癌（Esophagus cancer,EC）是当今世界最常见的恶性肿瘤之一,有很高的发病率和死亡率,主要包括食管鳞癌（ESCC）和食管腺癌（EAC）两种病理类型。其预后较差,寻找能够用于食管癌早期诊断、治疗的靶点是提高与改善食管癌... 详细信息

背景与目的:食管癌（Esophagus cancer,EC）是当今世界最常见的恶性肿瘤之一,有很高的发病率和死亡率,主要包括食管鳞癌（ESCC）和食管腺癌（EAC）两种病理类型。其预后较差,寻找能够用于食管癌早期诊断、治疗的靶点是提高与改善食管癌预后的重要方法。TRIM 29（Tripartite motif containing 29）蛋白属于TRIM蛋白家族一员,可以形成核酸连接过程中的同质二聚体或异质二聚体,该蛋白在肿瘤发生发展过程中发挥转录调控作用。目前,有研究发现TRIM 29在多种肿瘤如结直肠癌、胃癌等肿瘤中表达明显上调,但在某些肿瘤中如前列腺癌、乳腺癌中低表达,提示TRIM 29在不同的肿瘤背景下,其作用可能完全相反。同时,TRIM29在食管癌中的表达情况及具体作用仍不明确。在本课题中,我们结合食管癌临床标本数据库的生物信息学分析和细胞生物学实验,详细阐述TRIM 29在食管癌中的表达情况,探索该基因参与食管癌发生发展的生物学机制,并进一步探讨其具体的信号通路及作用机制。实验方法:（1）通过生物信息学方法,利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库、Oncomine数据库中的食管癌数据集,分析癌旁组织、食管癌良性病变以及食管癌中TRIM 29的表达差异;（2）通过生物信息学方法分析TCGA和GEO食管癌数据集中TRIM 29表达与食管癌各临床特征,如TNM分期、分级、分化等的关系,并使?Kaplan-Meier分析考察TRIM 29表达在食管癌预后中的作用;（3）分析TCGA食管癌数据集中TRIM 29的启动子区域甲基化位点的甲基化水平与其表达的相关性,以及食管癌细胞中TRIM 29表达与甲基化程度的关系考察TRIM 29表达的调控机制;（4）通过慢病毒感染的方法,建立KYSE-30对照细胞及TRIM 29过表达细胞株,KYSE-410、KYSE-450对照细胞及TRIM 29敲除细胞株;（5）利用建立的三对细胞株,通过细胞划痕实验、Transwell迁移实验、克隆形成集落实验、CCK-8增殖实验考察TRIM 29表达对食管癌细胞迁移、侵袭、集落形成能力与增殖能力的影响;（6）通过基因集富集分析（GSEA）研究与TRIM 29表达相关的信号通路;（7）利用建立的三组食管癌细胞系,通过Western blotting等方法考察TRIM 29对于下游信号通路的调控的分子机制。实验结果:（1）TRIM 29表达在食管癌及良性病变中均显著低于癌旁/正常食管癌组织;（2）在食管癌中,随着TNM分期、分级（Grade）升高,TRIM 29的表达逐渐下降,TRIM 29表达越低。此外,TRIM 29与淋巴结转移阳性呈负相关。总之,肿瘤恶性程度越高TRIM 29表达越低;TRIM 29表达越低,食管癌患者的预后越差;（3）食管癌临床标本中,TRIM 29表达与其启动子区域甲基化程度呈负相关,食管癌细胞中TRIM 29受甲基化调控;（4）TRIM 29的上调能明显抑制食管癌细胞的迁移、侵袭、细胞集落形成能力以及增殖能力;（5）GSEA基因集富集分析发现,TRIM29的表达与p53信号通路和凋亡通路的活性呈正相关,而与EMT（上皮间质转化）信号通路呈负相关;（6）Western blotting检测显示TRIM 29通过调控IL6/STAT3信号通路及ZNF750表达抑制上皮间质转化的发生,进而抑制食管癌细胞的侵袭转移。研究结论:本实验系统分析了TRIM 29在各种癌症与正常组织、食管癌与癌旁组织、不同类型肿瘤及其分期、食管癌组织中表达水平与临床病理特征、预后生存分析以及甲基化位点进行生存分析等。研究了TRIM 29在食管癌细胞中的表达及其对食管癌细胞迁移、侵袭、细胞集落形成能力与增殖能力的影响,并进一步探究了TRIM 29在食管癌细胞中相关通路的分子机制。发现TRIM 29过表达能明显抑制食管癌细胞的迁移、侵袭、细胞集落形成能力以及增殖能力等,并且TRIM29通过IL6/STAT3信号通路调控EMT等来影响食管癌细胞的生理学行为。上述研究为食管癌的治疗提供了新的思路,可能成为食管癌治疗的新靶点。

关键词：食管癌 TRIM 29 DNA 甲基化迁移侵袭

同步共检五种猪繁殖障碍性疫病可视化基因芯片的建立与初步应用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

同步共检五种猪繁殖障碍性疫病可视化基因芯片的建立与初步应用

作者：赵玉佳四川农业大学

学位级别：硕士

猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus,PRRSV)、猪流行性乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)、猪圆环病毒 2 型(Porcine Circovirus Serotype 2,PCV2)、猪伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)是引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原。这几种病原可导致相似的发病症状,临床上常常难以区别。因此,建立一种同步鉴别这几种猪繁殖障碍性疫病的检测方法是生产中亟待解决的问题。本研究以CSFV、HP-PRRSV、JEV、PCV以及PRV为研究对象,通过金标银染显色技术,构建了一套能够同步鉴别这五种猪繁殖障碍性疫病的可视化基因芯片检测技术。通过优化可视化基因芯片制备和检测过程中的条件,建立起了标准化的可视化基因芯片检测技术,并在此基础上,对其进行质量评价以及临床初步应用评价。主要研究内容如下:1.靶基因引物及寡核苷酸探针的设计本研究在前期研究的基础上,针对CSFV的E0保守基因;HP-PRRSV的Nsp2保守基因;JEV的PrM/M保守基因;PCV的ORF2保守基因以及PRV的gB保守基因分别合成设计特异性引物。根据各个靶基因扩增产物的内部核酸序列分别设计1条或者2条长度约为45bp的寡核苷酸探针,并在其5’端添加15个T碱基作为连接臂,同时进行氨基化修饰。2.可视化共检基因芯片的构建与条件优化研究(1)不对称PCRr扩增标记技术通过优化上游引物和下游引物的浓度比例,进行靶基因的不对称PCR扩增标记,获得大量生物素标记的单链靶基因。结果发现,当CSFV-E0基因的上游引物与下游引物的浓度比为1:8时,靶基因单链产物最多;而JEV-PrM/M、PRRSV-Nsp2、PCV-ORF2及PRV-gB基因的上游引物与下游引物的浓度比为1:6,靶基因单链产物最多。(2)可视化共检基因芯片的制备利用Baio(?)点样缓冲液和ddH20稀释以上各个寡核苷酸探针,将其终浓度调整为50μmol/L。按照预先设计的芯片阵列,利用晶芯(?)SmartArrayerTM16的喷样系统将寡核苷酸探针点制到醛基基片上。1次喷样结束后,紫外交联5min,将醛基基片置于37℃环境条件下水化过夜,使用0.5%NaBH4封闭30min。经过洗涤程序后,自然干燥,4℃保存备用。(3)可视化基因芯片的条件优化研究通过探索和优化可视化基因芯片制备及其检测过程中的条件,确定了标准化的可视化基因芯片检测技术:探针浓度为50μmol/L,进行1次喷样,即可制备质量较好的芯片;在45℃杂交温度下杂交120min;加入200pL20倍稀释的Streptavidin-nangold(浓度为4μg/mL),在37℃环境条件下孵育30min;在避光条件下,银染显色6-8min,即可用肉眼观察结果。3.可视化基因芯片检测技术的评价本研究对可视化基因芯片进行特异性、灵敏性和稳定性试验,并将其初步应用于临床样本检测,比较其与PCR/RT-PCR临床样品检测结果的一致性。(1)可视化基因芯片的质量评价分别以 CSFV、HP-PRRSV、LP-PRRSV、JEV、PCV2、PRV 以及 PPV 为模板,进行靶基因的扩增标记,标记产物与芯片进行杂交,评价其特异性;将重组质粒DNA,分别进行10×梯度倍比稀释,将其作为模板进行靶基因的扩增标记,与芯片杂交后,评价其灵敏性;将同一批次制备的芯片,在4℃环境条件下分别保存15天、30天、45天、60天后,取出与靶基因进行杂交,评价其稳定性。结果表明,CSFV、HP-PRRSV、JEV、PCV2、PRV单独杂交时只在芯片相应位置出现黑色银染信号,LP-PRRSV和PPV杂交结果则呈阴性,各个探针之间没有相互干扰;芯片最低检测浓度为25.0pg/μl;芯片在4℃环境条件下保存60天仍可进行有效检测。(2)可视化基因芯片的初步临床应用本研究应用所构建的芯片对四川绵阳、郫县、宜宾、邛崃、新津、名山、北川、崇州、潼南、洪雅、安岳等地区的113份临床送检样本进行检测。提取病死猪的肝脏、肺脏、肾脏、脾脏等组织的基因组RNA和DNA,RNA病毒经反转录成cDNA后,分别以cDNA/DNA为模板进行不对称PCR扩增标记后与可视化基因芯片杂交检测,比较其与PCR/RT-PCR检测结果的一致性。结果表明:以PCR/RT-PCR作为方法对照,可视化基因芯片的特异性为100%,灵敏性为84%～100%,两种检测方法的符合率高于96.5%。说明本研究所构建的可视化基因芯片可对用于猪临床样本的检测。

关键词：可视化基因芯片猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒猪乙型脑炎病毒猪圆环病毒猪伪狂犬病毒

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中西调脂药门诊处方分析

中国实验方剂学杂志 2009年第5期15卷 89-90页

作者：孟祥丽赵玉佳崔红黑龙江省牡丹江医学院红旗医院药剂科黑龙江牡丹江157011

高血脂症是一种血液中脂类含量超过正常水平的病症.又称高脂蛋白血症.目前我院所用的调脂类药物有:辛伐他汀、氟伐他汀、非诺贝特、阿托伐他汀钙、普伐他汀钠、吉非罗齐、夫拉扎勃、卵磷脂、荷丹、月见草油、脂必妥、藻酸双酯钠、丹田... 详细信息

高血脂症是一种血液中脂类含量超过正常水平的病症.又称高脂蛋白血症.目前我院所用的调脂类药物有:辛伐他汀、氟伐他汀、非诺贝特、阿托伐他汀钙、普伐他汀钠、吉非罗齐、夫拉扎勃、卵磷脂、荷丹、月见草油、脂必妥、藻酸双酯钠、丹田降脂丸、复方降脂片、血脂康等15种.为了解医生对调脂药物的处方习惯,监测用药的合理性,探索药物利用的流行趋势,我们采用药物日剂量(DDD)和药物利用指数(DUI)对我院2007年门诊调脂药物使用处方进行了调查.

关键词：处方分析调脂药物门诊药物利用指数调脂类药物中西高脂蛋白血症阿托伐他汀钙

联合用药对伴有高脂血症NAFLD的临床疗效研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2009年第7期15卷 100-101页

作者：赵玉佳孟祥丽鞠宝玲黑龙江省牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011 黑龙江省牡丹江医学院红旗医院黑龙江牡丹江157011

随着生活水平的提高和饮食结构的改善,非酒精性脂肪肝(Non-alcohol fatty liver disease,NAFLD)的发病率有逐年上升的趋势.本研究应用血脂康和多烯磷脂酰胆碱联合治疗30例伴有高脂血症的NAFLD,效果满意,现将结果报告如下.

关键词： NAFLD 高脂血症临床疗效联合用药非酒精性脂肪肝多烯磷脂酰胆碱 liver 饮食结构

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

长链非编码RNA在心血管疾病中的研究进展

基因组学与应用生物学 2017年第5期36卷 1876-1881页

作者：周杨孟祥丽张继伟赵玉佳牡丹江医学院附属红旗医院药学部牡丹江157011 牡丹江医学院药学院牡丹江157011

心血管疾病在全球范围高发,具有较高的发病率和致死率。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与心血管疾病的发生有着密切的联系,参与X染色体沉默,基因组印记、染色质修饰、转录激活、转录干扰及核内运输等多种重要的调控过程。ln... 详细信息

心血管疾病在全球范围高发,具有较高的发病率和致死率。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与心血管疾病的发生有着密切的联系,参与X染色体沉默,基因组印记、染色质修饰、转录激活、转录干扰及核内运输等多种重要的调控过程。lncRNA是目前RNA领域的研究热点,lncRNA对一些心血管疾病具有保护作用,可以维持心脏内环境的稳态以及促进心肌细胞再生,调控心律失常、心肌梗死,参与心肌肥厚的形成、房颤时的神经重塑,更有望成为特异性心力衰竭生物标志物。本综述围绕lncRNA在心脏中的功能以及lncRNA对心血管疾病过程的调控进行阐述,为今后心血管防治领域新靶标的研究提供参考。

关键词：长非编码RNA 心肌细胞再生心血管疾病药物靶标

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

朱乐耕环境陶艺研究

开封教育学院学报 2019年第4期39卷 241-242页

作者：赵玉佳延安大学西安创新学院艺术系

环境陶艺是陶瓷艺术与空间艺术结合而产生的新兴艺术形式。作为我国现代环境陶艺奠基人的朱乐耕,在三十余年的探索和实践中,融汇中西,贯通古今,不但使陶艺语言更加丰富,而且极大拓展了陶瓷艺术的表现领域,使人们对陶瓷艺术有了全新的认... 详细信息

环境陶艺是陶瓷艺术与空间艺术结合而产生的新兴艺术形式。作为我国现代环境陶艺奠基人的朱乐耕,在三十余年的探索和实践中,融汇中西,贯通古今,不但使陶艺语言更加丰富,而且极大拓展了陶瓷艺术的表现领域,使人们对陶瓷艺术有了全新的认识,更为今后的环境陶艺创作提供了可资借鉴的范式。

关键词：朱乐耕环境陶艺当代性中国精神

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛合成新途径

中国实验方剂学杂志 2010年第9期16卷 64-65页

作者：孟祥丽赵玉佳丁禄荣孟繁钦牡丹江医学院红旗医院黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011

目的:找到一条简单、经济地合成非诺多泮重要的医药中间体2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛的工业生产路线。方法:以藜芦醛为原料通过一步法合成2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛。结果与结论:采用磺酰氯直接氯化方法合成2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛,方法可... 详细信息

目的:找到一条简单、经济地合成非诺多泮重要的医药中间体2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛的工业生产路线。方法:以藜芦醛为原料通过一步法合成2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛。结果与结论:采用磺酰氯直接氯化方法合成2-氯-3,4-二甲氧基苯甲醛,方法可行,收率54%,可以用重结晶方法进行精制,适合工业生产。

关键词：非诺多泮中间体合成

建筑工程施工技术质量管理控制问题与对策研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2021年第8期 6-7页

作者：肖伟赵玉佳烟台智通人力资源有限公司山东烟台264000

随着社会经济的不断完善,建设项目的数量不断增加。在建设项目实施过程中,加强施工技术的质量控制尤为重要,既能保证实际的施工质量,又能帮助建筑业实现可持续发展。任何一种建筑都有其特定的施工工艺。本文论述了建筑工程施工技术的质... 详细信息

随着社会经济的不断完善,建设项目的数量不断增加。在建设项目实施过程中,加强施工技术的质量控制尤为重要,既能保证实际的施工质量,又能帮助建筑业实现可持续发展。任何一种建筑都有其特定的施工工艺。本文论述了建筑工程施工技术的质量控制。基于此,本文首先简要分析了施工技术质量控制中存在的问题,然后从三个方面阐述了施工技术质量控制的措施。以此来供相关人士交流参考。

关键词：建筑工程施工技术质量管理问题对策

不同采收期、不同药用部位对长柱金丝桃中总黄酮含量的影响

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2010年第10期16卷 76-77页

作者：赵玉佳孟祥丽丁禄荣王加良牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院红旗医院黑龙江牡丹江157011

目的:考察长柱金丝桃药用部位、采收期对总黄酮含量的影响。方法:采用比色法测定长柱金丝桃不同采收期、不同部位的总黄酮含量。结果:长柱金丝桃带花的地上部分在花盛期采收总黄酮含量较高。结论:通过研究,得到一种适用于长柱金丝桃药... 详细信息

目的:考察长柱金丝桃药用部位、采收期对总黄酮含量的影响。方法:采用比色法测定长柱金丝桃不同采收期、不同部位的总黄酮含量。结果:长柱金丝桃带花的地上部分在花盛期采收总黄酮含量较高。结论:通过研究,得到一种适用于长柱金丝桃药材的采收方法,对其开发具有指导意义。

关键词：长柱金丝桃药用部位采收季节总黄酮