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区分高低致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR方法的建立

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江苏农业科学 2015年第7期43卷 226-228页

作者：孙春亮赵敬慧刘月蔡锦顺延边大学农学院动物医学系吉林延吉133002 中国军事医学科学院军事兽医研究所流行病学四室吉林长春130122

为了在临床上快速、有效区分高低致病性PRRSV,参考Gen Bank发表的代表性毒株,根据高致病性毒株Nsp2基因上有30个氨基酸不连续缺失的特点,设计并合成1对引物,扩增高低致病性PRRSV Nsp2基因的目的条带长度分别为644、734 bp,从而将二者区... 详细信息

为了在临床上快速、有效区分高低致病性PRRSV,参考Gen Bank发表的代表性毒株,根据高致病性毒株Nsp2基因上有30个氨基酸不连续缺失的特点,设计并合成1对引物,扩增高低致病性PRRSV Nsp2基因的目的条带长度分别为644、734 bp,从而将二者区分开来。用本方法对长春及其周边地区送检60份病料进行盲检,检出10份高致病性PRRSV。并与N蛋白基因引物RT-PCR诊断方法进行比较,结果均一致,表明该方法准确性高。本研究所建立的RT-PCR方法为PRRSV在临床上的快速诊断和实验室流行病学调查提供了简捷的技术手段。

关键词： PRRSV Nsp2基因 RT-PCR诊断流行病学调查

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值得关注的我国狐和貉相关的狂犬病

中国兽医学报 2014年第7期34卷 1112-1113页

作者：刘晔张守峰赵敬慧张菲李楠乌仁格格郭试瑜扈荣良军事医学科学院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室吉林长春130122 河套学院理学系内蒙古巴彦淖尔015000 日本昭和大学医学部

近年来，随着我国退耕还林还草政策的实施，植被生态呈现出显著的改观，随之而来，其他生物尤其是动物的生态也出现了明显改善，尤其是草原鼠、大黄鼠、野兔等不同啮齿类动物的种群和数量明显增加。这些食草类动物同时为食肉类动物提供... 详细信息

近年来，随着我国退耕还林还草政策的实施，植被生态呈现出显著的改观，随之而来，其他生物尤其是动物的生态也出现了明显改善，尤其是草原鼠、大黄鼠、野兔等不同啮齿类动物的种群和数量明显增加。这些食草类动物同时为食肉类动物提供了充足的食物来源。因此，近年来我国新疆、内蒙古和黑龙江等地的狐和貉等动物的数量也在增加。

关键词：狐貉狂犬病中国

犬细小病毒VP2蛋白重组人5型腺病毒的构建

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中国生物制品学杂志 2013年第5期26卷 599-602页

作者：杨洋宫婷米立娟赵敬慧陈奇钱方刘晔张守峰扈荣良吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室吉林长春130122

目的构建犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白重组人5型腺病毒。方法将从CPV中PCR扩增的VP2基因克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA中,经酶切及测序鉴定,将构建正确的重组穿梭质粒pacAd5-cVP2与骨架质粒pacAd5 9.2-100经PacⅠ酶切线性... 详细信息

目的构建犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白重组人5型腺病毒。方法将从CPV中PCR扩增的VP2基因克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA中,经酶切及测序鉴定,将构建正确的重组穿梭质粒pacAd5-cVP2与骨架质粒pacAd5 9.2-100经PacⅠ酶切线性化,共转染293AD细胞,进行同源重组,包装出重组腺病毒rAd5v-cVP2,按Karber法计算重组腺病毒的病毒滴度(TCID50)。电镜下观察重组腺病毒的形态;RT-PCR及Western blot法检测CPV VP2基因mRNA的转录及蛋白的表达水平。结果重组穿梭质粒pacAd5-cVP2经酶切及测序证明构建正确;包装出的重组腺病毒rAd5v-cVP2的病毒滴度可稳定在108.25TCID50/ml;电镜下观察可见典型的腺病毒外型特征;重组腺病毒感染的293AD细胞可检测到VP2基因的转录和表达。结论已成功构建了CPV VP2蛋白重组人5型腺病毒。

关键词：细小病毒,犬 VP2基因腺病毒,人

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日粮添加干中药渣对肉牛生长性能的影响

吉林畜牧兽医 2023年第8期44卷 3-4页

作者：孟影赵敬慧尹航吉林大北农农牧科技有限责任公司吉林长春130102

目的:旨在探究日粮中添加不同含量干中药渣对肉牛生长性能的影响。方法:选取健康月龄接近、体重分别在200±10 kg左右的西门塔尔牛30头,随机分为3组,每组10头,对照组采用TMR日粮饲喂,试验1组在日粮中添加5%中药渣,试验2组在日粮中添加10... 详细信息

目的:旨在探究日粮中添加不同含量干中药渣对肉牛生长性能的影响。方法:选取健康月龄接近、体重分别在200±10 kg左右的西门塔尔牛30头,随机分为3组,每组10头,对照组采用TMR日粮饲喂,试验1组在日粮中添加5%中药渣,试验2组在日粮中添加10%中药渣,饲喂1个月后进行称重,计算平均日增重与料重比。结果:与对照组相比,试验1组肉牛生长性能并未显著提高(p>0.05);试验2组肉牛平均日增重显著升高(p<0.05),料重比降低(p<0.05)。结论:在肉牛日粮中添加适宜含量干中药渣可以显著提高肉牛增重,节约成本,发挥了中药渣的残留价值与经济价值。

关键词：日粮中药渣肉牛生长性能

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广东省猪圆环病毒2型基因的克隆与序列分析

中国动物传染病学报 2016年第2期24卷 76-79页

作者：严妍宫婷张守峰赵敬慧刘晔王颖张菲张锦霞扈荣良吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室长春130122 本溪市畜产品安全监察所本溪117000

根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）... 详细信息

根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的组织病料进行了PCV2基因克隆和序列分析。结果表明,采集的PMWS病料均可扩增出PCV2完整基因序列,与Gen Bank已发表的PCV2参考毒株序列核苷酸同源性达93.7%-99.8%,亲缘关系密切。其中10个PCV2基因全长1767 bp,属于PCV2b亚型,1个PCV2基因全长1768 bp,属于PCV2a亚型。

关键词：猪圆环病毒2型基因分析流行毒株

我国狂犬病流行毒株JX08-45适应细胞培养后的生物学特性

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中国生物制品学杂志 2012年第9期25卷 1112-1114,1120页

作者：刘晔房丽君赵敬慧张守峰张菲扈荣良中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室长春130122 吉林亚泰生物药业股份有限公司长春130033

目的鉴定我国狂犬病流行毒株JX08-45适应细胞培养后(命名为JX08-45CC株)的生物学特性。方法通过全基因组序列分析比对、小鼠脑内和外周攻毒试验和免疫原性试验,分别对JX08-45CC株的基因组特点、毒力和免疫原性进行鉴定。结果 JX08-45CC... 详细信息

目的鉴定我国狂犬病流行毒株JX08-45适应细胞培养后(命名为JX08-45CC株)的生物学特性。方法通过全基因组序列分析比对、小鼠脑内和外周攻毒试验和免疫原性试验,分别对JX08-45CC株的基因组特点、毒力和免疫原性进行鉴定。结果 JX08-45CC株的基因组序列与JX08-45株比对,共出现16个核苷酸突变点和7个氨基酸突变点,其中6个氨基酸变异发生在G蛋白(333位精氨酸未改变)编码区,L蛋白仅有1个氨基酸突变;在G蛋白氨基酸变异中,4个突变序列在其他细胞适应毒株CVS-11、CTN-1、Nishigahara、SAG2、Flury-LEP和SRV9中也普遍存在。JX08-45CC株培养滴度≥107TCID50/ml时,脑内接种小鼠的致死率为100%,滴度为102～106TCID50/ml时,脑内接种小鼠的致死率为20%～80%;滴度为105～108TCID50/ml时,外周肌肉接种小鼠,致死率为10%～70%;脑内和外周攻毒小鼠的潜伏期均为7～9 d,并于发病后24～48 h死亡。JX08-45CC株与狂犬病病毒CVS-11、ERA、SRV9和Flury-LEP株的中和抗体滴度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论已对JX08-45CC株的基因组序列、毒力和免疫原性等生物学特性进行了鉴定,为开发具有我国自主知识产权的兽用狂犬病灭活疫苗候选株奠定了基础。

关键词：狂犬病病毒鼬獾细胞培养突变生物学特性

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鼬獾狂犬病病毒分离株的培养及其免疫原性

中国生物制品学杂志 2011年第2期24卷 192-194页

作者：刘晔房丽君赵敬慧张守峰张菲扈荣良中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室长春130062

目的对分离的鼬獾狂犬病病毒BHK-21细胞适应株进行毒力和免疫原性检测,为兽用狂犬病疫苗的生产奠定基础。方法将分离获得的鼬獾狂犬病病毒野毒株JX08-45在BHK-21细胞上连续传代,采用直接免疫荧光法测定病毒滴度(TCID50);PCR法检测外源... 详细信息

目的对分离的鼬獾狂犬病病毒BHK-21细胞适应株进行毒力和免疫原性检测,为兽用狂犬病疫苗的生产奠定基础。方法将分离获得的鼬獾狂犬病病毒野毒株JX08-45在BHK-21细胞上连续传代,采用直接免疫荧光法测定病毒滴度(TCID50);PCR法检测外源病毒和支原体。以β-丙内酯灭活病毒液,将灭活的病毒液免疫犬,采用FAVN法检测狂犬病病毒中和抗体水平,分析其免疫原性。结果鼬獾狂犬病病毒野毒株JX08-45在体外培养至130代时,病毒滴度可达1.0×107.75 TCID50/ml;未从狂犬病病毒JX08-45株中扩增出犬瘟热病毒、细小病毒、冠状病毒、腺病毒和支原体的特异性核酸;灭活的病毒液接种犬后产生的中和抗体可持续1年以上,且均在0.5 IU/ml以上。结论鼬獾狂犬病病毒野毒株JX08-45经BHK-21细胞传代适应性较好,病毒滴度较高,且具有较好的免疫原性,已具备制备疫苗的基本条件。

关键词：鼬獾狂犬病病毒细胞培养技术疫苗,灭活免疫原性

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改进的贝叶斯垃圾邮件过滤算法

计算机系统应用 2016年第10期25卷 137-140页

作者：赵敬慧魏振钢中国海洋大学信息科学与工程学院青岛266100

随着网络的不断发展,电子邮件已成为人们生活中较为普及的通信手段,相应地垃圾邮件也成为了困扰E-mail用户的主要问题,因此研究如何更好的抑制垃圾邮件的滥发变得愈发紧迫.在基于朴素贝叶斯算法的基础上提出了带有损失因子k的最小风险... 详细信息

随着网络的不断发展,电子邮件已成为人们生活中较为普及的通信手段,相应地垃圾邮件也成为了困扰E-mail用户的主要问题,因此研究如何更好的抑制垃圾邮件的滥发变得愈发紧迫.在基于朴素贝叶斯算法的基础上提出了带有损失因子k的最小风险贝叶斯算法,该算法通过调整k值,来改善正常邮件的误判问题,最大程度上减少用户的损失.最后实验结果表明,最小风险贝叶斯算法可以使垃圾邮件有着更好的过滤效果.

关键词：垃圾邮件贝叶斯算法损失因子最小风险

玉米在蛋鸡饲粮中有效能值的测定及其净能预测模型的构建

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2344-2355页

作者：潘敏慧李成云张海军班志彬陈思淼梁浩闫晓刚赵晓东赵敬慧延边大学农学院延吉133002 中国农业科学院饲料研究所北京100081 吉林省农业科学院动物营养与饲料研究所公主岭136100 吉林大北农农牧科技有限责任公司长春130000

本试验采用间接测热法结合套算法测定不同来源玉米在产蛋高峰期海兰褐蛋鸡饲粮中的有效能值并建立基于理化指标的玉米净能(NE)预测模型。选取54周龄体重为(1898.32±114.12)g、产蛋率为(90.74±1.31)%的海兰褐蛋鸡共72只,随机分为6个组(... 详细信息

本试验采用间接测热法结合套算法测定不同来源玉米在产蛋高峰期海兰褐蛋鸡饲粮中的有效能值并建立基于理化指标的玉米净能(NE)预测模型。选取54周龄体重为(1898.32±114.12)g、产蛋率为(90.74±1.31)%的海兰褐蛋鸡共72只,随机分为6个组(1个玉米-豆粕型基础饲粮组和5个玉米替代比例为30%的试验饲粮组),每组6个重复,每个重复2只鸡。试验鸡在舍内笼养,预试期10 d,正试期12 d,其中正试期分为3期,每期4 d(适应1 d,呼吸测热3 d)。每期试验中,从每组中选择4只试验鸡,称重后分别放入呼吸测热装置的12个代谢室(每个代谢室2只),每2个代谢室对应l种饲粮,间接测热和消化代谢试验同时进行。结果显示:1)5种玉米的表观代谢能(AME)分别为15.09、14.18、14.67、14.33和14.28 MJ/kg DM,NE分别为10.90、10.33、10.82、10.47和10.44 MJ/kg DM,NE/AME分别为72.17%、72.84%、73.71%、72.99%和73.11%。2)玉米的NE预测方程为NE=-0.001+0.57×AME+0.606×粗脂肪+0.088×粗纤维(R 2=0.987,P<0.01)。交叉验证显示本试验所得蛋鸡玉米的NE预测模型准确性较高,利用该模型可根据AME、粗脂肪和粗纤维含量预测玉米的NE。

关键词：蛋鸡净能间接测热法预测模型