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雌激素调节人血管紧张肽原基因表达的顺式作用元件分析

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1998年第5期30卷 33-36页

作者：赵彦艳孙开来ＡｓｈｏｋＫｕｍａｒ中国医科大学医学遗传学教研室

为了鉴定人血管紧张肽原（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ，ＡＧＴ）基因的雌激素调控元件，在ＡＧＴ基因转录起始点和ＴＡＴＡ框之间的一段核苷酸序列与雌激素应答元件共有寡核苷酸序列高度同源，通过电泳迁移率变动分析，证明该ＤＮ... 详细信息

为了鉴定人血管紧张肽原（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ，ＡＧＴ）基因的雌激素调控元件，在ＡＧＴ基因转录起始点和ＴＡＴＡ框之间的一段核苷酸序列与雌激素应答元件共有寡核苷酸序列高度同源，通过电泳迁移率变动分析，证明该ＤＮＡ序列为雌激素应答元件（ＨＡＧＥＲＥ）。将带有ＨＡＧＥＲＥ的ＡＧＴ基因核心启动子同氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）报道基因融合，或将多拷贝ＨＡＧＥＲＥ同ＴＫ核心启动子连接，再与ＣＡＴ基因融合，构成表达载体，与人雌激素受体（ｈＥＲ）表达载体共转染ＨｅｐＧ２细胞，显示了β１７－雌二醇能增强ＣＡＴ活性。这些结果表明β１７－雌二醇通过雌激素受体作用于启动子中ＴＡＴＡ框附近的雌激素应答元件调节血管紧张肽原基因表达。

关键词：血管紧张肽原基因表达顺式作用元件雌激素

表皮生长因子受体2靶向小分子干扰RNA对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响

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中华医学杂志 2008年第13期88卷 909-913页

作者：鲁艳明张淑兰孟丽荣赵彦艳中国医科大学附属第二医院妇产科沈阳 110004 澳门理工学院澳门理工学院遗传教研室

目的探讨表皮生长因子受体2（HER-2）靶向小分子干扰RNA（siRNA）对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响。方法采用蛋白质印迹法筛选出特异性的HER-2siRNA，将其转染人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞。将实验分为对照组（不转染HER-2siRNA），非... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体2（HER-2）靶向小分子干扰RNA（siRNA）对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响。方法采用蛋白质印迹法筛选出特异性的HER-2siRNA，将其转染人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞。将实验分为对照组（不转染HER-2siRNA），非特异性siRNA组（转染非特异性siRNA），HER-2siRNA组（转染特异性siRNA），3组分别加入0、0．05、0．2、0．4、0．8、1．0、2．0、10、20μg／ml不同浓度的顺铂，采用噻唑蓝法检测3组SKOV3细胞增殖情况；在给予1μg／ml顺铂后，采用膜联蛋白V法检测顺铂组、HER-2siRNA组与HER-2siRNA联合顺铂组在不同时间（2～4d）凋亡率变化的情况；应用蛋白印迹法检测顺铂组及HER-2siRNA＋顺铂组抗凋亡蛋白Bcl-2、存活素、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）和促凋亡蛋白第二线粒体衍生蛋白酶活化子（Smac）的表达。结果暴露于顺铂24h后，3组细胞增殖率均随顺铂浓度的增加而降低，但降低的幅度不同，其中，转染HER-2siRNA组细胞降低最为显著；在给予1μg／ml顺铂后，转染HER-2siRNA组细胞增殖率[（58．1±4．7）％]与转染非特异性siRNA组[（65．3±2．7）％]、空白对照组[（68．5±2．8）％]相比，差异均有统计学意义（P〈0．01），而非特异性组与空白对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；HER-2siRNA联合顺铂组细胞凋亡率明显增加，与单独使用顺铂及单独使用HER-2siRNA组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。HER-2siRNA联合顺铂组抗凋亡蛋白Bcl-2、存活素、XIAP明显低于顺铂组；促凋亡蛋白Smac明显高于顺铂组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HER-2siRNA能增加卵巢癌SKOV-3细胞对顺铂的敏感性，显著诱导凋亡。HER-2siRNA联合顺铂对卵巢癌治疗具有协同作用。HER-2siRNA和顺铂协同诱导细胞凋亡的机制可能与Bcl-2、存活素、XIAP蛋白质的下调、Smac蛋白质的上调有关。

关键词： RNA 卵巢肿瘤受体 erbB-2 细胞凋亡顺铂

QF-PCR在染色体异常男性不育症诊断中的应用

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遗传 2011年第8期33卷 895-900页

作者：齐漫龙张媛媛刘晓亮何蓉赵彦艳中国医科大学附属盛京医院临床遗传科沈阳110004

为评估定量荧光PCR(QF-PCR)方法在男性不育遗传学诊断中的应用价值,文章对78例非梗阻性男性不育患者,采用精液常规检测精子情况,并检测患者性激素水平;采用QF-PCR方法对患者性染色体多态性STR位点及特异性位点进行检测;采用常规染色体G... 详细信息

为评估定量荧光PCR(QF-PCR)方法在男性不育遗传学诊断中的应用价值,文章对78例非梗阻性男性不育患者,采用精液常规检测精子情况,并检测患者性激素水平;采用QF-PCR方法对患者性染色体多态性STR位点及特异性位点进行检测;采用常规染色体G显带方法进行核型分析;PCR检测AZF微缺失。结果显示78例非梗阻性男性不育患者中发现无精子症患者18例,少精子症患者20例,总检出率为48.72%。采用QF-PCR方法检出3例47,XXY患者,2例46,XX(SRY+)性反转患者,1例AZFc区微缺失患者,与细胞培养染色体分析和AZF微缺失PCR检测结果相符。与传统方法相比,QF-PCR技术能更迅速、直接、可靠地检测到男性不育患者的染色体异常区域,及早发现染色体细微结构异常,有助于染色体异常造成的男性不育症的鉴别诊断。

关键词：无精子症遗传学基因 STR SRY

建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型及其生物学特性的探讨

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中国肿瘤临床 2007年第22期34卷 1306-1309,1312页

作者：孟丽荣张淑兰鲁艳明乔宠赵彦艳澳门理工学院高等卫生学校中国医科大学附属盛京医院妇产科中国医科大学遗传教研室

目的:建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,为人子宫内膜癌的诊断和治疗提供理想的在体研究工具。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1B,采用皮下注射接种至裸鼠体内,待肿瘤直径达0.8～1.0cm时,将其切下剪成直径为1～2mm小块,再接种... 详细信息

目的:建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,为人子宫内膜癌的诊断和治疗提供理想的在体研究工具。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1B,采用皮下注射接种至裸鼠体内,待肿瘤直径达0.8～1.0cm时,将其切下剪成直径为1～2mm小块,再接种至另一裸鼠皮下进行传代。病理组织学检查,光镜、电镜、流式细胞术分析,检测皮下瘤组织和肿瘤细胞系ER、PR、CK表达。结果:成功建立了人子宫内膜癌细胞株HEC-1B裸鼠皮下移植瘤模型,并传至第二代,形成的肿瘤具备人肿瘤生物学特点。HEC-1B、皮下移植瘤DI(DNAindex)值分别为1.81±0.46、1.95±0.53,均示异倍体。可见裸鼠皮下移植瘤与HEC-1B细胞的恶性肿瘤生物学特性基本一致。结论:通过此细胞系建立的人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的组织病理学免疫组化表型,超微结构,DNA倍体水平特点与来源肿瘤细胞相一致,而且肿瘤的移植生长率为100%,说明该模型系统的生物学特性是稳定的。建立的人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型具有人子宫内膜癌特征,可用于研究子宫内膜癌的生物学特性,为进一步开展子宫内膜癌的实验研究提供理想的动物模型。

关键词：子宫内膜癌细胞株HEC-1B 疾病模型/动物异种移植裸鼠

NIDDM新候选基因KCNA7的cSNP在东北人群中的分布及意义

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遗传 2003年第2期25卷 129-132页

作者：丁茜赵彦艳董凌月孙志军郭磊中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001

为研究NIDDM新候选基因KCNA7的cSNP在东北人群中的分布及意义,本实验采用PCR-RFLP技术检测了97例NIDDM患者、141例健康对照者KCNA7基因T418M(C T)多态;并利用SSCP技术筛查了该位点附近其他未知SNP。发现KCNA7基因T418M(C T)基因型频率... 详细信息

为研究NIDDM新候选基因KCNA7的cSNP在东北人群中的分布及意义,本实验采用PCR-RFLP技术检测了97例NIDDM患者、141例健康对照者KCNA7基因T418M(C T)多态;并利用SSCP技术筛查了该位点附近其他未知SNP。发现KCNA7基因T418M(C T)基因型频率在正常人群中分布符合Hardy-Weinberg平衡,基因频率和基因型频率在NIDDM组和正常对照组中分布无显著性差异(P>0.05);NIDDM组和正常对照组中各基因型间临床生化指标无显著性差异;该位点附近尚未发现其他SNP。结果提示,T418M(C T)仅为KCNA7基因多态性标志,但不排除KCNA7基因其余结构变异与NIDDM存在相关性的可能。

关键词： KCNA7基因 NIDDM 单核苷酸多态性东北人群分布

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预适应诱发胶质瘤耐药作用机制探讨

中国肿瘤临床 2007年第6期34卷 301-304页

作者：李光宇赵彦艳李英慧王郡刘洪付凌雨中国医科大学附属第一医院神经外科中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳市110001

目的:明确低氧预适应诱发胶质瘤细胞系SK-N-SH对BCNU的耐药,研究在低氧预适应的过程中一氧化氮合酶的作用及其机制。方法:用300μmol/L CoCl2预处理SK-N-SH细胞3小时,24小时后以BCNU刺激细胞,MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的... 详细信息

目的:明确低氧预适应诱发胶质瘤细胞系SK-N-SH对BCNU的耐药,研究在低氧预适应的过程中一氧化氮合酶的作用及其机制。方法:用300μmol/L CoCl2预处理SK-N-SH细胞3小时,24小时后以BCNU刺激细胞,MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的凋亡。RT-PCR技术检测神经型一氧化氮合酶和凋亡相关基因的表达情况。结果:300μmol/L CoCl2预处理可以明显增加细胞在BCNU条件下的增殖能力,减少凋亡。预适应可以上调神经型一氧化氮合酶的表达,同时可以上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达,下调凋亡促进基因Apaf-1的表达。这些调节作用可被神经型一氧化氮合酶的抑制剂7-NI抑制。结论:300μmol/L CoCl2预处理SK-N-SH细胞3小时可以增加肿瘤细胞对BCNU的耐药作用。神经型一氧化氮合酶在预适应中可调节Bcl-2和Apaf-1基因的表达从而起到重要的作用。

关键词：低氧预适应神经型一氧化氮含酶凋亡化疗耐药

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WNK家族基因在小鼠肾脏表达的特性分析

中华肾脏病杂志 2004年第2期20卷 90-93页

作者：吕晶玉 Jean Marie GASC Xavier Jeunemaitre 赵彦艳中国医科大学医学遗传学教研室 INSERM U36 College de France

目的检测WNK1和WNK4基因在小鼠肾脏组织中的表达位点。方法RT-PCR方法扩增WNK1和WNK4基因片段作为探针,在小鼠多组织膜上进行Northern印迹杂交。将上述片段克隆入pGEM-T载体,测序证实后,体外转录RNA探针并在小鼠肾脏石蜡组织切片上进行... 详细信息

目的检测WNK1和WNK4基因在小鼠肾脏组织中的表达位点。方法RT-PCR方法扩增WNK1和WNK4基因片段作为探针,在小鼠多组织膜上进行Northern印迹杂交。将上述片段克隆入pGEM-T载体,测序证实后,体外转录RNA探针并在小鼠肾脏石蜡组织切片上进行原位杂交。结果WNK1基因广泛表达在小鼠各组织中,在肾脏有9.5kb强杂交信号。WNK4基因主要表达在肾脏组织中,有4.4kb杂交信号。原位杂交显示WNK1基因仅表达在肾脏远曲小管中,而WNK4除表达在肾脏远曲小管外,还表达在髓质集合管上。结论WNK1和WNK4基因均在肾脏中有表达,WNK4基因在肾脏中表达比WNK1基因更广泛。

关键词： WNK家族基因小鼠肾脏表达肾脏组织 RT-PCR 原位杂交

大鼠弥漫性脑损伤后脑组织一氧化氮和一氧化氮合酶表达变化

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中华创伤杂志 2006年第6期22卷 462-463页

作者：李光宇赵彦艳杨国瑞中国医科大学附属第一医院神经外科沈阳110001 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室

一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种重要的神经递质，具有调节脑血管张力、抑制血小板聚集等保护作用，同时过量的NO具有神经毒性作用。现在发现有3种酶可以催化NO的生成，即神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNO... 详细信息

一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种重要的神经递质，具有调节脑血管张力、抑制血小板聚集等保护作用，同时过量的NO具有神经毒性作用。现在发现有3种酶可以催化NO的生成，即神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）。笔者通过大鼠弥漫性脑损伤模型，研究NO在弥漫性脑损伤中时程变化及3种NOS的作用。

关键词：神经型一氧化氮合酶弥漫性脑损伤表达变化后脑组织大鼠 nitric 内皮型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶 oxide 神经毒性作用

17染色体微卫星多态与原发性高血压关系的多因素分析

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中华流行病学杂志 2008年第6期29卷 522-525页

作者：付凌雨赵彦艳时景璞李春义刘洪周波中国医科大学附属第一医院临床流行病教研室沈阳110001 中国医科大学遗传教研室

目的探索D17S1878和D17S932位点多态性是否与原发性高血压存在关联。方法在高血压高发区收集67个原发性高血压家系的流行病学资料，应用遗传分析仪分析D17S1878、D17S932位点的多态性，进行表型不一致家系同胞的病例对照研究，应用log... 详细信息

目的探索D17S1878和D17S932位点多态性是否与原发性高血压存在关联。方法在高血压高发区收集67个原发性高血压家系的流行病学资料，应用遗传分析仪分析D17S1878、D17S932位点的多态性，进行表型不一致家系同胞的病例对照研究，应用logistic回归方法进行多因素分析。结果高血压受累同胞与非高血压受累同胞相比，年龄、男性、饮酒、平均收缩压、平均舒张压、BMI、总胆固醇、HI）L—C、LDL—C均显著高于非高血压受累同胞（P〈0．05）。D17S1878多态性位点共有11个等位基因，其等位基因频率在家系高血压者与非高血压者的分布，经Fisher’s确切检验差异具有统计学意义（P=0．017）。D17S932多态性位点共有9个等位基因，其等位基因频率在家系高血压者与非高血压者的分布，经Fisher’s确切检验差异无统计学意义（P=0．559）。logistic多因素分析结果显示，两个位点均没有进入模型，而年龄（0R=1．044，95％CI：1．019～1．069）、饮酒（OR=2．644，95％CI：1．778～3．932）、性格急躁（OR=3．078，95％CI：1．721～5．504）、甘油三酯（OR=1．305，95％CI：1．016～1．676）、LDL—C（OR：1．787，95％CI：1．296～2．646）进入模型，是原发性高血压的危险因素。结论在原发性高血压家系中，D17S1878、D17S932多态性位点可能与原发性高血压无关联。

关键词：原发性高血压微卫星多态遗传易感性