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分泌型miR-139参与氧化脂蛋白致动脉粥样硬化形成的分子机制及其临床价值研究

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分泌型miR-139参与氧化脂蛋白致动脉粥样硬化形成的分子机制及其...

作者：陆攀南京大学

学位级别：硕士

研究背景:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)性心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)已成为威胁人类健康的主要病因之一,但其发病机制目前尚未完全阐明,亦缺乏高灵敏性和特异性分子标志物。As是CVD最主要的病理基础,脂代谢异常是其... 详细信息

研究背景:动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)性心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)已成为威胁人类健康的主要病因之一,但其发病机制目前尚未完全阐明,亦缺乏高灵敏性和特异性分子标志物。As是CVD最主要的病理基础,脂代谢异常是其重要的危险因素,其中氧化脂蛋白(ox-LDL)起着关键作用。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长度约为19-22个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA,在转录后水平调控基因表达,并在氧化脂蛋白诱导As相关细胞中发挥重要作用,参与脂代谢异常As性CVD的发生、发展。新近研究显示,人外周血循环中也存在丰富、稳定表达的miRNA,且部分具备生理功能的循环miRNA可由不同类型细胞分泌的外泌体(exosome)包裹(称为分泌型miRNA),并运送至受体细胞进行细胞间的信息交流,参与包括As性CVD在内的多种疾病的病理过程。因此,探寻As性疾病中的关键分泌miRNA及其作用机制,将对疾病的早期诊断提供新的更加敏感、特异的标志物,为开发出新的治疗方法奠定理论基础。目的:(1)筛选巨噬细胞和ox-LDL刺激诱导的泡沫细胞模型中表达显著变化的miRNA,分析其在细胞及其培液中存在形式及变化趋势;(2)探讨As患者血清、exosome及exosome free血清中该miRNA是否发生相应水平改变,以期为As患者的诊断和治疗提供新思路与新方法;(3)探寻特异变化分泌miRNA在As过程中的作用机制。方法:(1)首先将佛波醇-12-肉豆蔻-13-乙酯(PMA)加入到THP-1中,诱导成为巨噬细胞,泡沫细胞的诱导是在巨噬细胞诱导成功的基础上加100μg/ml ox-LDL,刺激48 h,通过油红O染色鉴定泡沫细胞模型是否构建成功。将构建成功的巨噬细胞和泡沫细胞模型通过Affymetrix miRNA芯片筛选出细胞内异常表达的miRNA,实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(quantitative Real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证巨噬细胞与泡沫细胞内miRNA的变化。用试剂盒提细胞培液中的exosome,进一步检测特定变化miRNA在巨噬细胞与泡沫细胞分泌的exosome中的表达。(2)收集30例急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血清标本,并选择同期体检健康者30例为正常对照组,利用qRT-PCR技术验证前期筛选出的特异变化的miRNA在血清中总miRNA、exosome和exosome free血清中表达水平的变化。ROC曲线分析该miRNA作为疾病标志物的敏感性和特异性。(3)通过生物信息学软件预测特定变化分泌miRNA与As相关细胞功能联系紧密的靶蛋白。Dil染料标记exosome,与As相关细胞共培养,通过激光扫描共聚焦显微镜证实exosome是否进入细胞内,并检测该细胞内表达变化的miRNA水平。通过凋亡实验、Western Blot和qRT-PCR技术研究miRNA对As相关细胞功能的影响。通过荧光素酶报告基因实验及过表达或抑制表达特定变化分泌miRNA实验验证其与靶蛋白的关系。结果:(1)芯片结果表明,与巨噬细胞相比,泡沫细胞内发生水平改变的miRNA为 miR-99,miR-139,miR-1973 和 miR-6757,均表达上调。qRT-PCR 验证结果表明,与巨噬细胞相比,泡沫细胞内miR-99(P=0.0177)和miR-139(P=0.0240)水平均显著性升高,miR-1973和miR-6757未出现显著性差异(P>0.05)。与巨噬细胞相比,泡沫细胞分泌的exosome中miR-139水平显著性升高(P=0.0216)。(2)与正常对照组相比,AMI患者血清中总miR-99(P=0.0406)、exosome中miR-99(P=0.0049)和 exosome free 血清中 miR-99(P=0.047)均显著升高,总 miR-139 显著性升高(P=0.0051),而 exosome 和 exosome free 血清中 miR-139因含量低而不能稳定检测。ROC曲线结果显示,miR-99和miR-139鉴别AMI患者的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.631(95%CI 0.489～0.773)和0.650(95%CI 0.511～0.789),敏感度均为67%。(3)生物信息学软件预测胰岛素样生长因子 1 受体(insulin-like growth factor 1,IGF-1R)可能是 miR-139 的靶基因。激光扫描共聚焦显微镜证实exosome成功进入HUVEC内,将泡沫细胞分泌的exosome与HUVEC共培养,可以显著性的升高HUVEC中miR-139的水平(P=0.0153);功能实验发现,相对于巨噬

关键词：动脉粥样硬化生物标志物 miR-139 IGF-1R 外泌体

槟榔间作咖啡模式对咖啡光合特性及产量的影响

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热带作物学报 2022年第9期43卷 1824-1832页

作者：赵少官董云萍赵青云钟壹鸣化党领张昂中国热带农业科学院香料饮料研究所/海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室海南万宁571533 河南农业大学资源与环境学院河南郑州450003 云南省董云萍专家工作站云南普洱665099

为了探明槟榔-咖啡间作槟榔冠层的遮荫度对咖啡叶片的光合特性及其产量的影响,在海南省琼海大陆基地设计3种不同间作模式的大田试验:(1)高密度种植(H):咖啡、槟榔株行距均为2.5 m×3.0 m;(2)中密度种植(M):咖啡株行距2.0 m×3.0 m、槟榔... 详细信息

为了探明槟榔-咖啡间作槟榔冠层的遮荫度对咖啡叶片的光合特性及其产量的影响,在海南省琼海大陆基地设计3种不同间作模式的大田试验:(1)高密度种植(H):咖啡、槟榔株行距均为2.5 m×3.0 m;(2)中密度种植(M):咖啡株行距2.0 m×3.0 m、槟榔4.0 m×3.0 m;(3)低密度种植(L):咖啡株行距2.0 m×3.0 m、槟榔株行距6.0 m×6.0 m。分别测定不同种植模式处理下土壤理化性质和咖啡植株光合速率、气孔导度、蒸腾速率等光合指标,以及咖啡单株产量,并利用灰色关联度分析评价不同间作模式下叶片光合特性指标和产量,并对其影响因子进行探究。结果表明,在不同间作处理中除低密度种植模式下土壤温度显著低于其他种植模式外,其余指标并无显著差异;相较于M,H和L叶片的净光合速率和气孔导度分别降低了0.06~0.97μmol/(m2·s)、0.49~0.97μmol/(m2·s)和0~0.04 mol/(m2·s)、0.01~0.08 mol/(m2·s)。M叶片的蒸腾速率年变化除了夏季低于H 0.11 mmol/(m2·s)左右,高于L 0.47 mmol/(m2·s)左右。其他时期M曲线分别高出H和L 0.33~0.78 mmol/(m2·s)、0.17~0.92 mmol/(m2·s)。在水分利用率方面3种种植模式之间全年变化较为复杂,没有明显的差异性。其中咖啡叶片的气孔导度和蒸腾速率指标响应于种植模式;中密度种植处理下的咖啡单株鲜果产量相较于高、低密度种植处理分别增产19.41%和18.69%,咖啡单位面积产量方面显著增产50.62%和41.67%。通过灰色关联度分析发现,中密度种植模式表现较好,在咖啡不同生长时期等权关联度和加权关联度位次均为第一。以上结果表明,在槟榔-咖啡间作体系中,适当密植咖啡以及增加槟榔行间距有助于提高咖啡总产量,在实际生产过程中建议推行中密度间作的种植模式,可以有效地提升间作模式的综合优势,提高土地单位面积的收益。

关键词：复合栽培光合速率蒸腾速率水分利用效率灰色关联度分析

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电脑导光板质量智能光学检测关键技术研究

电脑导光板质量智能光学检测关键技术研究

作者：李兆攀浙江理工大学

学位级别：硕士

在当今信息化时代,电脑仍以它优异的性能占据大量市场份额。在电脑显示器中,电脑导光板作为其背光模组的重要组成部分,负责将线光源转换成面光源,其质量直接关系到屏幕显示效果。而在电脑导光板生产环节中,由于受到工艺和环境等要素的影... 详细信息

在当今信息化时代,电脑仍以它优异的性能占据大量市场份额。在电脑显示器中,电脑导光板作为其背光模组的重要组成部分,负责将线光源转换成面光源,其质量直接关系到屏幕显示效果。而在电脑导光板生产环节中,由于受到工艺和环境等要素的影响,不可避免地会出现亮点、划伤、脏污等缺陷。它们的存在将影响相关设备的使用,因此,对生产出的导光板进行质量检测,剔除劣质品尤为重要。目前,大部分导光板厂家采用的是人工检测的方法,该方法是低效的、不准确的,且不利于员工身体健康。随着市场需求的提升,导光板生产线必须要提高质量和速度,因此,一小部分导光板厂家开始引进传统机器视觉检测设备来替换人工检测。但是,由于电脑导光板导光点分布不均匀,且导光板缺陷大小、形状、亮度各异的特点,传统机器视觉方法仍然很难应付这些复杂的情况。本文针对目前导光板缺陷检测领域存在的问题和难点,研发了电脑导光板质量智能光学检测系统,最后结合大量相关实验,验证了本文检测系统的可靠性。全文由如下几方面展开:(1)针对导光板光学特性及产线检测要求,制定了电脑导光板缺陷检测系统硬件方案,包含机械架构、机器视觉装置、电气控制装置。机械架构负责系统支撑、导光板传动、导光板分拣等功能;机器视觉装置负责图像的采集和处理,根据导光板缺陷成像特性,最终确定了设置选型方案:线扫相机、线扫描镜头、多角度光源、工控机;电气控制装置负责整个系统的控制逻辑,整体流程如下:导光板从产线进入检测设备,通过传送带进行运输,首先通过限位装置对其进行位置调整,保证其不超出相机视野,随后会触发光电传感器,产生一个进料信号给PLC,PLC接收到该信号后点亮多角度光源,并触发线扫相机进行图像采集,后续根据检测结果,PLC控制机械手进行导光板的分拣。(2)根据电脑导光板图像特点,构建了一个基于“分割+决策”的两阶段多尺度残差注意力网络用于电脑导光板缺陷检测。第一阶段,构建一个分割子网络,通过使用U型结构和设计的多尺度残差注意力单元(Multiscale Residual Attention Unit,MRAU),来完成缺陷的精确分割和定位。第二阶段,构建一个决策子网络,在分割子网络提取出的特征的指导下,准确判断导光板图像是否有缺陷。设计的模型使用少量的样本进行训练,克服了缺陷样本数量受限的情况。通过在自建的电脑导光板数据集(Compute Light Guide Plate Surface Defect Detection,CLGPSDD)和开源的高分辨率电子换向器缺陷数据集(KolektorSDD)上的一系列实验对比,证明了本方法在检测精度和通用性上的优势,其中在CLGPSDD数据集上准确率达到了99.839%,F1-Score指标达到了99.845%。(3)基于VS2017平台的MFC框架搭建,并结合OpenCV图像库、PyTorch深度学习平台联合开发了一套模块化的导光板缺陷检测可视化系统。

关键词：电脑导光板缺陷检测深度学习多尺度残差注意力网络缺陷检测系统

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解读如何培养乡村小学学生学习英语的兴趣

小学生(上旬刊) 2023年第6期 112-114页

作者：王攀英甘肃省甘南藏族自治州临潭县古战九年制学校

在新课改的背景下，教育行业应不断做出改变与调整。英语是学科教学中重要的组成部分，也要积极进行改革。在小学英语教学中，乡村教师要创新教学模式，提升学生个人学习能力。本文就如何培养乡村小学学生学习英语的兴趣进行分析，并提... 详细信息

在新课改的背景下，教育行业应不断做出改变与调整。英语是学科教学中重要的组成部分，也要积极进行改革。在小学英语教学中，乡村教师要创新教学模式，提升学生个人学习能力。本文就如何培养乡村小学学生学习英语的兴趣进行分析，并提出一系列的要点架构，以期对教师有所帮助。

关键词：乡村英语教育

科尔沁沙质草地不同恢复年限草本层群落结构及其与土壤理化性质的关系

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中国沙漠 2022年第2期42卷 134-141页

作者：赵啸龙谢玉鸿马旭君王少昆兰州大学草地农业科技学院甘肃兰州730000 中国科学院西北生态环境资源研究院奈曼沙漠化研究站/乌拉特荒漠草原研究站/甘肃省寒区旱区逆境生理与生态重点实验室甘肃兰州730000

草本植物在沙地植被恢复过程中具有重要作用,研究自然恢复沙质草地草本层植物群落组成变化规律及其与土壤因子之间的关系,对植被与土壤恢复具有重要的意义。本研究对科尔沁严重退化沙地封育12、17年和20年的自然恢复沙质草地植物组成和... 详细信息

草本植物在沙地植被恢复过程中具有重要作用,研究自然恢复沙质草地草本层植物群落组成变化规律及其与土壤因子之间的关系,对植被与土壤恢复具有重要的意义。本研究对科尔沁严重退化沙地封育12、17年和20年的自然恢复沙质草地植物组成和土壤理化性质进行研究,同时分析了植物组成与土壤因子的相关关系。结果表明:随着恢复年限的增加,土壤有机质、全氮、速效氮、速效钾和缓效钾含量显著升高,群落物种丰富度逐渐增加,禾本科植物所占比例升高,菊科和藜科植物比例降低;一年生和二年生植物占比下降,多年生植物占比上升;草本层植物高度、盖度与地上生物量显著增加,物种丰富度、优势度和多样性指数分别增加30.16%、10.86%和21.81%;沙质草地植被恢复过程中植物群落特征主要受土壤含水量(贡献率为30.77%)和土壤速效养分(速效氮、速效磷和速效钾的贡献率分别为16.67%、13.74%和7.69%)的影响,说明土壤含水量和土壤速效养分是影响科尔沁沙质草地退化植被恢复的主要影响因素。

关键词：科尔沁沙地沙质草地群落结构物种多样性土壤养分

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砂岩泊松比函数的提出及研究

断块油气田 2017年第1期24卷 21-25页

作者：田家林吴波伍开松赵攀西南石油大学机电工程学院四川成都610500 西南交通大学机械工程学院四川成都610031

泊松比是一个重要的材料属性参数,它反映了材料在受载情况下横向变形和纵向变形之比,有明确的物理意义。但岩石的泊松比相对金属而言有其特殊性,岩石的泊松比不是定值,而金属的泊松比是定值,故岩石泊松比的变化规律值得深入研究。文中... 详细信息

泊松比是一个重要的材料属性参数,它反映了材料在受载情况下横向变形和纵向变形之比,有明确的物理意义。但岩石的泊松比相对金属而言有其特殊性,岩石的泊松比不是定值,而金属的泊松比是定值,故岩石泊松比的变化规律值得深入研究。文中以南充砂岩和武胜砂岩2种岩样为例进行了岩石三轴压缩实验,分析处理了实验数据,提出了泊松比函数概念,并且推导出了泊松比函数公式,得到了泊松比函数与标准泊松比、峰值泊松比以及最大泊松比之间的关系,分析了泊松比函数中的各个材料参数的物理意义。泊松比函数很好地解释了岩石在受力变形过程中的一些物理现象,具有实际的力学研究意义。

关键词：弹性常数三轴压缩实验泊松比函数标准泊松比

基于N,N-二甲基烯胺酮的串联环化及自由基反应研究

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基于N,N-二甲基烯胺酮的串联环化及自由基反应研究

作者：周攀昆明理工大学

学位级别：硕士

N,N-二甲基烯胺酮类化合物是烯胺酮家族中重要的成员之一,以其为底物参与的串联环化反应和自由基反应是有机合成中的研究热点。近年来,N,N-二甲基烯胺酮类化合物已经广泛应用于杂环骨架的构建、类天然产物的合成以及新药研发中,但是往... 详细信息

N,N-二甲基烯胺酮类化合物是烯胺酮家族中重要的成员之一,以其为底物参与的串联环化反应和自由基反应是有机合成中的研究热点。近年来,N,N-二甲基烯胺酮类化合物已经广泛应用于杂环骨架的构建、类天然产物的合成以及新药研发中,但是往往使用过渡态金属和贵金属催化,存在反应成本高、过渡态金属残留等问题。利用无过渡态金属参与的N,N-二甲基烯胺酮类化合物的串联环化反应,以构建杂环化合物的新方法尤为重要,与此同时,基于N,N-二甲基烯胺酮类化合物的自由基反应报道较为少见。本文从N,N-二甲基烯胺酮出发,通过环化反应研究喹啉、螺环氧化吲哚以及3-糠醛骨架的构建,以及通过自由基反应切断烯胺酮分子内C=C双键偶联膦酸酯,研究了β-膦酸酯类化合物的构建。论文主要包括以下两个方面的研究内容:1.N,N-二甲基烯胺酮参与的环化反应喹啉类化合物的合成:基于N,N-二甲基烯胺酮和邻胺基苯乙酮,在p-TSA的促进下,通过[4+2]的环化反应合成多取代喹啉衍生物。该方法通过温度和催化剂量的控制,选择性地合成N-芳基烯胺酮和喹啉类化合物(图1)。基于N,N-二甲基烯胺酮和吲哚醌在TMSCl的促进下通过[4+2]环化反应合成多取代喹啉类化合物,该方法以醇作为溶剂和反应物,三组分一步法合成多取代的喹啉酯化产物。此外,把底物N,N-二甲基烯胺酮替换为N-芳基烯胺酮时,路易斯酸Bi(CFSO)为催化剂,也可以高产率地获得多取代喹啉酯类化合物(图2)。氧化螺环吲哚类化合物的合成:以N,N-二甲基烯胺酮、胺类化合物和吲哚醌为底物,在TMSCl的促进下,通过双烯胺酮的中间体,四组分串联环化合成氧化螺环吲哚类化合物(图3)。基于N,N-二甲基烯胺酮、醋酸铵和吲哚醌,乙醇/水(v/v=1:4)为溶剂,在醋酸的促进下,通过[2+1+2+1]的四组分串联环化反应,绿色、高效地合成氧化螺环吲哚类化合物(图4)。3-糠醛类化合物的合成:基于N,N-二甲基烯胺酮,在氯化铜的促进下,单分子两组分通过[3+2]环化反应,高效简洁地制备3-糠醛类化合物。该方法具有原子经济性好和底物耐受范围较宽的优点(图5)。2.N,N-二甲基烯胺酮参与的自由基反应基于N,N-二甲基烯胺酮的自由基反应研究较少,而通过Mn(Ⅲ)切断C=C键的反应也是较为少见,我们研究了利用Mn(Ⅲ)切断N,N-二甲基烯胺酮的C=C键,再偶联亚磷酸二乙酯的自由基反应,合成了一系列的β-膦酸酯类化合。并且在此基础上通过设计的控制实验,对其反应机理进行深入的探讨和解释(图6)。

关键词： N,N-二甲基烯胺酮环化反应自由基反应