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利用糖芯片研究海洋多糖及其衍生物与蛋白质的相互作用

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利用糖芯片研究海洋多糖及其衍生物与蛋白质的相互作用

作者：赵小亮中国海洋大学

学位级别：硕士

本论文分别从红藻多管藻(Polysiphonia senticulosa Harv.)和日本新管藻(Neosiphonia Japonica Harv.)中提取制备11种硫酸半乳聚糖，纯化多糖组分14个，从杜梨果实、叶片和银杏果皮制备4种果胶，1种葡聚糖和1种木聚糖，制备淀粉、琼胶... 详细信息

本论文分别从红藻多管藻(Polysiphonia senticulosa Harv.)和日本新管藻(Neosiphonia Japonica Harv.)中提取制备11种硫酸半乳聚糖，纯化多糖组分14个，从杜梨果实、叶片和银杏果皮制备4种果胶，1种葡聚糖和1种木聚糖，制备淀粉、琼胶和卡拉胶磷酸化与氧化衍生物9种，此40种多糖均为首次获得。活性研究发现，多管藻多糖组分PS3-2能有效延长活化部分凝血酶时间(APTT)，作用效果强于阳性对照低分子量肝素(LMWH)和藻酸双酯钠(PSS)，PS3-2和日本新管藻多糖NJ1-2均能延长凝血酶时间(TT)作用，表明具有较好的抗凝血活性;杜梨果实多糖PBP清除DPPH自由基半抑制浓度(IC50)为61.37μg·mL-1，小于阳性对照VC(197.60μg·mL-1)，PBP和杜梨叶片多糖PBPF均有较好的细胞病变(CPE)抑制活性，而PBPF可能是通过与流感病毒A/PR/8/34(H1N1)神经氨酸酶(NA)相互作用而发挥抗病毒活性;银杏果皮多糖GBC和GBH有抑制肿瘤细胞生长活性，GBLA和GBHA有抑制MDA-MB-231细胞生长活性;Agarose和ι-car磷酸化与氧化衍生物对CPE的抑制率明显增强，Agarose氧化产物不仅溶解性提高，对肿瘤细胞MDA-MB-231也有一定的抑制活性，同时磷酸化衍生物对羟自由基的清除活性得到明显提高，而κ-car衍生物活性均无明显变化;通过对FGF/FGFR介导的BaF3细胞增殖活性研究发现，红藻来源的硫酸半乳聚糖PS3-0.5、PS3-1.5、NJ1-0.8、NJ1-1.4和NJ1-1.6、银杏果胶GBC和木聚糖GBHA具有极显著的促进细胞增殖的活性;磷酸化和氧化修饰可提高ι-car和κ-car对BaF3细胞的增殖活性的，同时脱硫的κ-car (dsκ-car)及脱硫后磷酸化的κ-car (pκ-car)则无细胞增殖活性，表明硫酸基对于该细胞增殖作用强于磷酸基，而Agarose及其修饰物与其分子整体骨架相同，只是空间构型有差异，推测活性的提高在受电荷作用影响的同时，分子空间构象的变化也是重要因素。通过AF或FITC标记新制备荧光标记多糖50个，结合实验室糖库荧光多糖，通过对点样条件探索，首次制备了含有64个多糖探针，16×16方阵共256个样点的海洋多糖芯片。在利用岩藻糖凝集素橘果粉胞凝集素(Aleuria aurantia lectin,AAL)与多糖芯片作用证明多糖芯片研究多糖与蛋白质相互作用可靠的基础上，进一步研究了海洋多糖与H1N1HA蛋白、NA蛋白和NS1蛋白，乙型肝炎病毒(HBV)蛋白、胰淀素(Amylin)、结缔组织生长因子(CTGF)以及α-核突触蛋白(α-Synuclein)7种疾病相关蛋白质的相互作用。结果表明，多糖分子结构对结合活性有直接影响，特别是硫酸基、糖醛酸等酸性基团对活性有重要影响，而多糖的磷酸化、氧化修饰能显著提高多糖与蛋白质的结合活性。根据芯片实验结果利用红外光谱、一维NMR和二维NMR等技术，对与H1N1HA蛋白和NS1蛋白、CTGF和α-Synuclein有较强结合活性的多糖组分PS3-2的结构进行了表征。结果表明，PS3-2是分子C6-OH被硫酸基和丙酮酸取代的琼胶型多糖，二糖重复单元以硫琼胶[→3)β-D-G6S-(1→4)-3,6-AnG(1→]为主，还含有少量的[→3)β-D-GPA-(1→4)-3,6-AnG(1→]，二者的比例约为4.2:1。通过弱酸降解质谱分析，获得了硫琼胶三糖、五糖和七糖，并首次发现了带有Xyl侧链的硫琼胶三糖、五糖和七糖。综上，本文从多糖样品制备、芯片构建、与蛋白质相互作用、结果检测分析、活性多糖结构解析等方面，首次成功构建了海洋多糖芯片，并运用此技术研究了海洋多糖与几种疾病相关蛋白的相互作用，明确了与相关蛋白质结合的糖的特点，并对活性多糖进行了详细结构解析，为糖芯片的构建和应用提供了技术参考。

关键词：海洋多糖衍生物蛋白质糖芯片相互作用

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我国国库现金管理存在问题与解决对策

我国国库现金管理存在问题与解决对策

作者：赵小亮山东财经大学

学位级别：硕士

2006年以来,我国国库现金管理取得了一定的进展和成效。但存在问题也不少,主要包括法律法规建设、财政预算管理体制、金融市场建设以及管理责任主体等诸多问题,这对我国国库现金管理在政策、制度、办法制定和完善上均不同程度的构成影响... 详细信息

2006年以来,我国国库现金管理取得了一定的进展和成效。但存在问题也不少,主要包括法律法规建设、财政预算管理体制、金融市场建设以及管理责任主体等诸多问题,这对我国国库现金管理在政策、制度、办法制定和完善上均不同程度的构成影响,进而直接降低了我国国库现金管理的效率。从国库现金管理国际经验来看,一套成熟完善的管理制度,对降低国库成本、提高国库运作效率将起到重要作用,其中单一国库账户集中收付制度对完善国库现金管理制度建设的作用不容忽视。通过单一账户体系,国库现金管理主体可以每天或及时地掌握政府现金余额,实现较为准确的现金流动预测,以此建立现金流动预测机制,指导库底资金的合理运作。成熟的国库现金管理需要良好运作环境,这需要财政部门与中央银行密切协作,进而充分实现国库现金管理目标,即在确保国库支付的同时,实现国库闲置现金余额最小化并填补资金缺口,最大可能地提高国库现金使用效率,在保障安全性的前提下获得最大化的公共资金收益。目前,在现金流预测上,多数国家财政部门与中央银行之间均设立了紧密的协作机制,借助双方的密切协作,为国库现金管理提供良好的运作环境。从操作方式上,当前世界各国国库现金管理人员根据对现金流的预测结果,正逐步采用积极、多样化的运作模式,如短期国债、国债回购或逆回购、央行存款等,操作主动性更强,更易实现管理目标。本文在研究我国国库现金管理发展现状的基础上,分析指出了我国国库现金管理在保障机制建设、操作方式以及管理效率方面存在的问题,并借鉴发达国家的实践经验,从完善国库现金管理体制机制建设、丰富国库现金管理操作工具、强化财政与央行协调配合、稳妥推进地方国库现金管理等方面,分别提出了相关建议。由于各国的政治、经济体制不同,我国国库现金管理工作在借鉴他国经验时,应充分结合我国国情,从制度设计、管理理念的层面,有针对性的进行选择和吸收。首先要明确国库现金管理工作定位,确定管理工作有关责任主体,重点是建立一套操作性和规程性的法律法规。同时,应深入推进财政集中收付制度改革,逐步建立国库单一账户,确保国库现金流预测及时准确。其次为保障国库现金管理高效开展,应积极拓宽国库现金投资渠道,立足强化金融市场建设,不断丰富国库现金余额的投融资工具,为在保障安全性的同时增加国库资金收益提供充足手段。三是应进一步强化财政部门与中央银行的协调机制建设,在决策机制和工作机制上充分实现国库现金管理与货币政策的相互配合,确保工作保障健康发展。最后,应探索扩大国库现金管理范围,稳步推进地方国库现金管理工作。

关键词：国库国库现金管理国库单一账户国际比较

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杜梨果实挥发油化学成分的GC-MS分析

安徽农业科学 2007年第19期35卷 5659-5660页

作者：吴瑛赵小亮塔里木大学文理学院新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300

采用水蒸气蒸馏法从杜梨果实中提取挥发油,用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定。共分离出50个峰,确定了其中的49种,所鉴定化合物的含量占全油的78.85%,18种化合物占总挥发油的62.51%,得到的挥发油为淡黄色油状物,具有浓郁的芳香气味。

关键词：杜梨果实挥发油气相色谱-质谱分析

苦参多糖的提取工艺优化及体外抗氧化、降血脂活性分析

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食品工业科技 2024年第13期45卷 212-220页

作者：赵小亮牟翮张晶张伟杰兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 甘肃省中藏药筛选评价及深加工高校重点实验室甘肃兰州730050

目的:为提高苦参多糖的得率,明确多糖的抗氧化和降血脂活性,通过正交试验优化多糖的提取工艺,并评价其体外抗氧化和降血脂活性。方法:以多糖得率为评价指标,在单因素实验研究提取温度、提取次数、料液比和提取时间对苦参多糖得率影响的... 详细信息

目的:为提高苦参多糖的得率,明确多糖的抗氧化和降血脂活性,通过正交试验优化多糖的提取工艺,并评价其体外抗氧化和降血脂活性。方法:以多糖得率为评价指标,在单因素实验研究提取温度、提取次数、料液比和提取时间对苦参多糖得率影响的基础上,通过正交试验优化多糖的提取工艺。通过对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用评价多糖的体外抗氧化活性,通过与胆酸钠(SC)、牛磺胆酸钠(STC)、甘氨胆酸钠(SGC)和混合胆酸盐(MBS)的结合作用评价多糖的体外降血脂活性。结果:苦参多糖的最佳提取条件为:温度85℃,料液比1:35 (g:mL),提取时间3.5 h,在此条件下多糖平均得率为3.07%±0.07%。苦参多糖在浓度为5 mg/mL时对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为60.1%±3.6%、39.6%±3.1%和45.1%±4.1%;在浓度为10 mg/mL时与胆酸钠(SC)、牛磺胆酸钠(STC)、甘氨胆酸钠(SGC)和混合胆酸盐(MBS)的结合率分别为34.4%±0.75%、45.4%±0.15%、19.7%±0.94%和37.7%±0.64%。结论:苦参多糖具有较好的体外抗氧化和降血脂活性。本研究为苦参多糖的开发利用提供了一定的理论依据。

关键词：苦参多糖工艺优化抗氧化活性降血脂活性

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荷叶化学成分研究

中国中药杂志 2013年第5期38卷 703-708页

作者：赵小亮王智民马小军荆文光刘安中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100094

研究植物莲Nelumbo nucifera干燥叶的化学成分,为进一步开发利用荷叶提供依据。分离得到27个化合物,分别为10-二十八烷醇(1)、β-谷甾醇(2)、1-十一烷醇(3)、1-二十烷醇(4)、胡萝卜苷(5)、6'-hydroxy-4,4'-dimethoxychalcone(6)、1-羟基... 详细信息

研究植物莲Nelumbo nucifera干燥叶的化学成分,为进一步开发利用荷叶提供依据。分离得到27个化合物,分别为10-二十八烷醇(1)、β-谷甾醇(2)、1-十一烷醇(3)、1-二十烷醇(4)、胡萝卜苷(5)、6'-hydroxy-4,4'-dimethoxychalcone(6)、1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮(7)、鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、chrysoeriol-7-O-β-D-glucoside(9)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(11)、金丝桃苷(12)、槲皮素-3-O-芸香糖苷(13)、紫云英苷(14)、异鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-[α-D-来苏糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷](15)、异鼠李素-3-O-α-D-来苏糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(16)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(17)、异鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(18)、槲皮素(19)、山柰酚(20)、去氢荷叶碱(21)、莲碱(22)、stigmast-7-en-3-O-β-D-glucopyranoside(23)、stigmast-7-en-3β-ol(24)、邻二羟基苯(25)、alangionoside L(26)、icariside B2(27)。化合物1,6～8,24,25为首次从该植物中分离得到,化合物15～18为首次从荷叶中分离得到。经体外活性筛选,发现化合物6,8,10,11,13,15对体外淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)具抑制活性,抑制率分别为(63.99±24.29)%,(79.61±4.49)%,(49.96±12.61)%,(101.19±8.19)%,(88.41±6.76)%,(72.48±8.97)%,其中有5个化合物为黄酮类化合物。

关键词：荷叶化学成分黄酮体外淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)抑制活性

一种刺松藻来源的硫酸阿拉伯聚糖的制备及特征结构表征

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高等学校化学学报 2019年第4期40卷 733-739页

作者：金鑫嵇国利赵小亮李国云于广利山东省糖科学与糖工程重点实验室海洋药物教育部重点实验室中国海洋大学医药学院青岛266003

刺松藻(Codium fragile)经水提-醇沉获得粗多糖,进一步将刺松藻粗多糖(CFP)通过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换柱纯化得到6个多糖组分CFP1～CFP6,其中,在CFP6中发现纯度较高的阿拉伯聚糖.采用高效凝胶渗透色谱与十八角激光散射... 详细信息

刺松藻(Codium fragile)经水提-醇沉获得粗多糖,进一步将刺松藻粗多糖(CFP)通过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换柱纯化得到6个多糖组分CFP1～CFP6,其中,在CFP6中发现纯度较高的阿拉伯聚糖.采用高效凝胶渗透色谱与十八角激光散射仪联用法和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法对CFP6的分子量及单糖组成进行了分析.结果表明,CFP6是一种分子量为79290的多糖,由阿拉伯糖(Ara)和半乳糖(Gal)组成,二者摩尔比为14. 8∶1. 0.通过多维核磁共振波谱、液相色谱-质谱联用及二级质谱等方法对CFP6的糖苷键连接方式及其寡糖序列结构进行表征,进一步阐明了该复杂多糖的特征结构.经判断,CFP6主链由Ara组成,通过β-(1→3)糖苷键连接,在Ara的C2位存在分支结构,硫酸基位于Ara的C4或C2位.

关键词：刺松藻多糖结构分析寡糖序列分析二级质谱

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不同提取方法对苦苣菜多糖提取率的影响

安徽农业科学 2010年第17期38卷 8960-8961页

作者：刘占文赵小亮塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔843300

[目的]筛选苦苣菜多糖提取方法。[方法]设计超声波、微波、超声微波提取法与常规水溶提取法进行比较;以粗多糖提取率为指标,评价测定方法。[结果]4种提取方法对苦苣菜多糖提取率有显著影响（P〈0.05）,超声-微波协同提取法提取率最高,为... 详细信息

[目的]筛选苦苣菜多糖提取方法。[方法]设计超声波、微波、超声微波提取法与常规水溶提取法进行比较;以粗多糖提取率为指标,评价测定方法。[结果]4种提取方法对苦苣菜多糖提取率有显著影响（P〈0.05）,超声-微波协同提取法提取率最高,为23.16%,其次是微波、水浴和超声波,提取率分别为22.33%、20.98%和19.54%。[结论]超声微波协同提取法效果最好,即准确称取苦苣菜干粉5.0 g,加入100 ml蒸馏水混匀后,置于超声-微波仪中提取。超声功率50 W,频率50 kHz,微波频率2 450 MHz;80℃条件下提取30 min,过滤收集滤液,残渣重复提取1次,合并滤液,200 ml定容,测定多糖含量。以葡萄糖为标准品,选用蒽酮-硫酸比色法,葡萄糖浓度线性范围为10~100μg/ml,比色波滤为620 nm,平均回收率为100.29%,RSD值为0.22%（n=5）。

关键词：苦苣菜多糖超声-微波协同萃取微波超声波提取方法考察

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氟硅改性水性聚氨酯的合成及性能

印染 2022年第10期48卷 47-50页

作者：赵小亮王博西安工程大学材料工程学院陕西西安710048

以聚丙二醇2000(PPG2000)、2,2-双(羟甲基)丙酸(DMPA)、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)和端羟基含氟聚硅氧烷(PDSF)为主要原料合成氟硅改性水性聚氨酯。通过乳液稳定性、黏度、表面张力、红外分析、力学性能、接触角、热重等性能的测试和表征... 详细信息

以聚丙二醇2000(PPG2000)、2,2-双(羟甲基)丙酸(DMPA)、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)和端羟基含氟聚硅氧烷(PDSF)为主要原料合成氟硅改性水性聚氨酯。通过乳液稳定性、黏度、表面张力、红外分析、力学性能、接触角、热重等性能的测试和表征,研究PDSF用量对水性聚氨酯性能的影响,并将氟硅改性水性聚氨酯应用于棉织物的疏水整理。结果表明:随着PDSF含量增加,乳液的表面张力降低,黏度增大;胶膜的接触角和断裂伸长率先增大后减小,拉伸强度先减小后增大,热稳定性提高。改性水性聚氨酯用于棉织物整理时,随着PDSF用量的增加,织物疏水性提高。

关键词：水性聚氨酯含氟聚硅氧烷疏水整理棉织物

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异氰酸酯指数对水性聚氨酯性能的影响

合成树脂及塑料 2018年第5期35卷 25-28页

作者：赵小亮邵水源孙元娜西安工程大学材料工程学院陕西省西安市710048 西安科技大学材料科学与工程学院陕西省西安市710054

以聚氧化丙烯二醇2000、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)、二羟甲基丙酸、1,4-丁二醇和三羟甲基丙烷为原料,釆用预聚体分散法制备了水性聚氨酯(WPU)。固定其他原料用量,仅调节IPDI的用量来改变异氰酸酯指数(R),研究了乳化前原料的R对WPU性能... 详细信息

以聚氧化丙烯二醇2000、异佛尔酮二异氰酸酯(IPDI)、二羟甲基丙酸、1,4-丁二醇和三羟甲基丙烷为原料,釆用预聚体分散法制备了水性聚氨酯(WPU)。固定其他原料用量,仅调节IPDI的用量来改变异氰酸酯指数(R),研究了乳化前原料的R对WPU性能的影响,并探索了其在织物疏水改性方面的应用。结果表明:当R值增加时,WPU乳液的粒径变大,黏度减小,胶膜耐水性提高,拉伸强度增大,断裂拉伸应变降低,热稳定性先提高后降低,提高了棉织物的疏水性能;当R值为1.25时,WPU综合性能优异,乳液呈现半透明且稳定,平均粒径93 nm,黏度49.0m Pa·s,胶膜拉伸强度18.42 MPa,热稳定性最好,对应的棉织物接触角为114.08°。

关键词：水性聚氨酯预聚体分散法异氰酸酯指数疏水