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一例小熊猫大叶性肺炎的病例报告

今日畜牧兽医 2024年第7期40卷 20-22页

作者：李婧伦曹越董壮孙利丽蔡成陈胜军张凤宇赵宏敬李茹大连森林动物园有限公司 116013 东北林业大学野生动物与自然保护地学院 150040

对1例治疗无效死亡的小熊猫(Ailurus fulgens)进行病理组织学检查,结合临床症状及血液学检查等技术,确诊为大叶性肺炎(Lobar pneumonia)致死。临床可见该患病小熊猫精神沉郁,流出铁锈色鼻液;剖检可见心脏表面有多个出血点、部分肺叶呈... 详细信息

对1例治疗无效死亡的小熊猫(Ailurus fulgens)进行病理组织学检查,结合临床症状及血液学检查等技术,确诊为大叶性肺炎(Lobar pneumonia)致死。临床可见该患病小熊猫精神沉郁,流出铁锈色鼻液;剖检可见心脏表面有多个出血点、部分肺叶呈肝样变、脾脏多处梗死;组织病理学可见肺泡结构大量破坏,肺泡腔内有大量红细胞及炎性细胞浸润,心、肝、脾、肾均有不同程度红细胞浸润。本研究可为相似野生动物疾病诊疗提供参考。

关键词：小熊猫大叶性肺炎病理切片

东北虎源细小病毒间接ELISA方法的建立及FPV对凋亡通路的影响

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东北虎源细小病毒间接ELISA方法的建立及FPV对凋亡通路的影响

作者：赵宏敬东北林业大学

学位级别：硕士

东北虎源细小病毒是由猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleucopenia virus,FPV)引起的一种急性和致死性极高的传染病。又称猫泛白细胞减少症、猫瘟热病毒、猫细小病毒、猫传染性肠炎病毒。在自然条件下,可感染熊、虎、水貂、豹等多种食... 详细信息

东北虎源细小病毒是由猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleucopenia virus,FPV)引起的一种急性和致死性极高的传染病。又称猫泛白细胞减少症、猫瘟热病毒、猫细小病毒、猫传染性肠炎病毒。在自然条件下,可感染熊、虎、水貂、豹等多种食肉类动物,该病发病过程急、患病过程短、传染性和死亡率较高。FPV的爆发在很大程度上对特种经济动物以及野生动物造成威胁,因此控制FPV在我国的流行、诊断和预防具有重要的意义本研究以黑龙江省某虎林园的东北虎粪便为研究对象,该虎具有出血性肠炎,精神萎靡等症状。通过病毒分离鉴定、动物回归试验及分子生物学检测等方法,证明东北虎的发病原是东北虎源细小病毒,命名为FPV-HER-NEFU。细小病毒NS1蛋白在病毒的复制和转录过程中起重要作用。研究NS1基因对细小病毒的生物学特性及诊断预防等方面研究具有指导意义。本研究对分离的东北虎源细小病毒NS1全长基因进行克隆,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析和构建分子遗传进化树。成功扩增2007bp靶基因并连接到表达载体pGEX-6P-1中以构建重组表达载体pGEX-FPV-NS1。将阳性重组质粒转化到大肠杆菌感受态Rosetta(DE3)中并用IPTG诱导。获得的可溶性蛋白质为102.6kDa,具有良好的免疫原性。我们使用该重组蛋白作为诊断抗原,建立细小病毒的间接ELISA检测方法。通过方针滴定法确定最佳条件,包括250ng/孔的抗原浓度,1:100的血清稀释度和5%脱脂乳作为封闭液,二抗浓度为1:8000,底物作用时间为25分钟。实验结果表明,建立的间接ELISA方法具有较高的特异性和灵敏度。最后,采用 TdT-mediateddUTP Nick-End Labeling(Tunel)荧光染色,DNA 片段化分析,实时荧光定量,Western Blot等方法初步探究FPV对F81细胞凋亡的影响。结果表明FPV感染F81细胞后,细胞的凋亡率随着病毒感染时间的延长而逐渐升高;FPV感染F81细胞能够显著激活细胞内Caspase-9及Caspase-3,而Caspase-8,Fas和FasL的表达无显著变化,该病毒可能通过Caspase-9/-3级联活化来诱导F81细胞发生凋亡,并且FPV感染能够上调细胞内促凋亡分子Bax的表达,下调细胞内的抑凋亡分子Bcl-2的表达。综上所述,本研究成功从东北虎粪便中分离出一株细小病毒FPV-HER-NEFU毒株,通过克隆测序获得了其主要ORF序列并进行生物信息学分析;并以表达的pGEX-FPV-NS1蛋白为抗原,建立了猫科血清抗体的间接ELISA检测方法。本研究将有助于分析我国虎源细小病毒的分子流行情况和遗传规律,为筛选虎源细小病毒疫苗株及其诊断奠定基础。并初步探究FPV对F81细胞凋亡的影响,为进一步研究FPV感染对宿主细胞的致病机制提供理论依据,同时也为其它病毒的研究提供新思路。

关键词：细小病毒 NS1蛋白 ELISA检测方法细胞凋亡东北虎

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小羊驼纤维素性化脓性肺炎的病例报告

中国兽医杂志 2019年第11期55卷 55-56,I0006页

作者：李婧伦蔡成孙利丽曹越赵宏敬宋晓东邢明伟东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 大连森林动物园辽宁大连116013

小羊驼(Lama pacos)属哺乳纲偶蹄目骆驼科美洲鸵属,主要分布于安第斯山脉^([1])。小羊驼性情温顺,是良好的动物园展示动物,除此之外,小羊驼还是毛肉兼用的草饲家畜,有着较高的经济价值^([2])。2018年5月9日,大连森林动物园饲养的1只成... 详细信息

小羊驼(Lama pacos)属哺乳纲偶蹄目骆驼科美洲鸵属,主要分布于安第斯山脉^([1])。小羊驼性情温顺,是良好的动物园展示动物,除此之外,小羊驼还是毛肉兼用的草饲家畜,有着较高的经济价值^([2])。2018年5月9日,大连森林动物园饲养的1只成年雌性小羊驼突然倒地不起,经抢救无效后死亡。

关键词：病例报告纤维素性小羊驼美洲鸵哺乳纲化脓性肺炎大连森林动物园

白羽鹌鹑IFN-γ基因克隆、序列分析及原核表达

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中国兽医杂志 2018年第2期54卷 19-22,F0003页

作者：刘梓欣赵宏敬王雨陶金邢明伟东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为了探究白羽鹌鹑IFN-γ的相关特性,本试验利用从刀豆素A诱导培养的鹌鹑外周血淋巴细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增IFN-γ基因片段并构建pEASY-Blunt-coIFN-γ克隆载体,测序表明,白羽鹌鹑IFN-γ(coIFN-γ)开放阅读框大小为495 bp,包含... 详细信息

为了探究白羽鹌鹑IFN-γ的相关特性,本试验利用从刀豆素A诱导培养的鹌鹑外周血淋巴细胞中提取RNA,应用RT-PCR方法扩增IFN-γ基因片段并构建pEASY-Blunt-coIFN-γ克隆载体,测序表明,白羽鹌鹑IFN-γ(coIFN-γ)开放阅读框大小为495 bp,包含1个由24个氨基酸组成的信号肽序列和140个氨基酸组成的成熟肽序列,有2个糖基化位点。进化树结果显示,coIFN-γ基因与日本鹌鹑同源性最高,达到100%,与鸡形目动物差异不明显,同源性能达到95.6%。构建重组表达载体pET-32a(+)-coIFN-γ,并在大肠杆菌系统中诱导表达。丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,coIFN-γ重组蛋白大小约为40.0 kDa,均存在于包涵体中。通过本试验得到了coIFN-γ基因,原核表达coIFN-γ分子蛋白,并对其理化性质做了初步研究,为鹌鹑养殖业抗病毒生物制剂的研发提供理论基础。

关键词：白羽鹌鹑干扰素克隆原核表达

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行政第三人的程序权利及其司法保护

法学研究 2024年第3期46卷 21-36页

作者：赵宏北京大学法学院

私人的程序权利是其拥有的公法权利的重要构成。在双边法律关系下,有关程序权利的讨论,常在程序瑕疵的实体法效果和司法审查的双重视角下展开。在三边法律关系下,程序法关系与实体法关系共同呈现于行政处理私人利益的多边冲突框架下,对... 详细信息

私人的程序权利是其拥有的公法权利的重要构成。在双边法律关系下,有关程序权利的讨论,常在程序瑕疵的实体法效果和司法审查的双重视角下展开。在三边法律关系下,程序法关系与实体法关系共同呈现于行政处理私人利益的多边冲突框架下,对第三人程序权利的司法保护,不仅需要考虑程序权利是否具有独立性的问题,还应避免对一方程序法地位的强化不当缩减甚至牺牲利益相对方的实体法地位,避免程序瑕疵的风险分配成为利益冲突权衡框架下决定风险分配的唯一要素。在公权论下,第三人的程序权利与相对人的程序权利一样,原则上仅具有相对性,绝对的不依赖于实体决定的程序权利只是例外,法院对程序瑕疵的审查不能摆脱实体决定而进行。在保留法院实体审查空间的同时,程序权利的保护目标可通过尽可能开放诉权、更多地承认绝对程序权利以及压缩法院对实体内容的审查等方式实现。

关键词：行政第三人分配行政冲突调和模式绝对程序权利相对程序权利

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割离与限缩:行政拘留的困境与破局

中国法律评论 2024年第3期 70-85页

作者：赵宏北京大学法学院

我国自清末民初起就实现了违警罚法与刑法的单列,但违警罚法中却始终保留了人身罚,而行政拘留直至2005年《治安管理处罚法》颁布也一直都属于行政保留的事项。这就使我国在剥夺和限制人身自由领域实行的是行政与司法二元论。这导致行政... 详细信息

我国自清末民初起就实现了违警罚法与刑法的单列,但违警罚法中却始终保留了人身罚,而行政拘留直至2005年《治安管理处罚法》颁布也一直都属于行政保留的事项。这就使我国在剥夺和限制人身自由领域实行的是行政与司法二元论。这导致行政拘留完全由公安机关裁断而无司法介入。除裁断主体一元外,实质入罚标准的匮乏以及程序约束机制的松弛都进一步加剧了行政拘留的法治困境。鉴于治安违法与犯罪的同质性,就有必要将刑法中的法益观念和比例原则同样引入治安领域,并作为权衡是否应设置拘留的实质标准,由此才能在形式合法性之外,使治安管理处罚同样具备实质正当性。

关键词：违警罚法行政与司法二元论程序优化法益比例原则

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作为主观权利的程序公权

中外法学 2024年第1期36卷 123-142页

作者：赵宏北京大学法学院

因受私法影响,公权论明显带有实体性特征,这使公法上的程序权利自始就被归入形式公权。相比实质公权,形式公权只是个人一种不完整的法地位,这种不完满性又尤其表现于诉讼可能的欠缺。程序瑕疵的相对性使违反程序规范并不能成为个人行使... 详细信息

因受私法影响,公权论明显带有实体性特征,这使公法上的程序权利自始就被归入形式公权。相比实质公权,形式公权只是个人一种不完整的法地位,这种不完满性又尤其表现于诉讼可能的欠缺。程序瑕疵的相对性使违反程序规范并不能成为个人行使撤销请求权的独立事由,程序权违反也唯有和实体权损害存在明确的违法性关联时,才符合诉讼的权利侵害要件。但伴随“经由程序的基本权利保障”的观念兴起以及欧盟法的作用辐射,德国法开始越来越多地承认绝对程序公权。绝对程序公权独立于实体法规范之外,对此类程序条款的违反可单独成为诉请撤销行政行为的理由。但在行政诉讼作为主观诉讼的定位不改变的前提下,绝对程序公权只是例外而非原则。对程序公权发展演替的体系梳理构成了对程序瑕疵司法审查的前理解,其不仅有助于澄清我们对于程序瑕疵司法审查的认知分歧,亦会将相关讨论从现有的规范阐释引向对程序公权本质的挖掘。

关键词：行政程序的服务功能相对程序权绝对程序权经由程序的基本权利保障

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限制从业类处罚设定之反思

法学 2024年第3期 46-61页

作者：赵宏北京大学法学院

对违法行为人予以限制从业甚至是终身禁业迄今已成为通行的行政惩戒手段。这一惩戒方式在《行政处罚法》修改后被明确纳入处罚种类并受处罚法约束。这种约束首先表现为其法律依据必须是法律法规,而不能诉诸规章及下位的规范性文件。尽... 详细信息

对违法行为人予以限制从业甚至是终身禁业迄今已成为通行的行政惩戒手段。这一惩戒方式在《行政处罚法》修改后被明确纳入处罚种类并受处罚法约束。这种约束首先表现为其法律依据必须是法律法规,而不能诉诸规章及下位的规范性文件。尽管全国人大常委会的备案审查意见将终身禁业的法律依据限定为法律和行政法规,但其本质应属更严格的立法保留事项。除形式合法性要件外,此类处罚的设定还需接受比例原则、禁止不当联结原则的实质正当性检视。在此框架中,限制从业所欲维护的公益类型及其重要性和迫切性,当事人的职业自由、再犯可能与社会危险,以及违法行为与职业的密切关联等要素,都需放在天平两端细致称量。立法者不能仅为抽象公益或基于对违法风险的过度防御,就过度限制甚至彻底剥夺当事人的职业自由;国家也不应借由对私德有亏的违法行为人予以终身禁业的重罚,来对社会道德予以强制性塑造。基于上述原因所导致的限制从业类处罚的无节制滥用应加以特别防范。

关键词：行业禁入限制从业罚特别预防比例原则不当联结禁止

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法律关系在行政法上的功能定位与体系结构

环球法律评论 2024年第5期46卷 72-88页

作者：赵宏北京大学法学院

法律关系学理在行政法中伴随学科的方向之争而复兴,但与其展现出的功能优势并不相符。行政法律关系要么被作为行政行为的对立和替代,要么被排挤入特别行政法领域,在行政法总论中难获明确定位,在我国行政法上也一直处于备而不用的状态,... 详细信息

法律关系学理在行政法中伴随学科的方向之争而复兴,但与其展现出的功能优势并不相符。行政法律关系要么被作为行政行为的对立和替代,要么被排挤入特别行政法领域,在行政法总论中难获明确定位,在我国行政法上也一直处于备而不用的状态,并未展现出对学科的支配性作用。但无论从实体法还是诉讼法上看,法律关系都已对行政法产生深刻影响,并与行政行为、主观公权利等范畴一起,发挥着行政法学的体系枢纽作用。法律关系学理揭示出行政法旧范畴中的“盲点”,并对传统教义的内部缺陷予以填补和完善,行政法学也因此真正呈现主客观的双重面向。它与学科其他范畴的互动交流,使行政法总论中原本并不相连的单项教义和结构要素,借由法律关系而被统合入一个结构化整体,由此促进了学科体系的统一和行政法秩序的透明。

关键词：行政法律关系行为方式法教义学主观公权利请求权审查模式