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脊柱脊髓损伤患者深静脉血栓预防的研究进展

中国脊柱脊髓杂志 2016年第3期26卷 279-283页

作者：董忠礼赵学凌昆明医科大学第一附属医院骨科云南省昆明市650000

深静脉血栓（deep venous thrombosis,DVT）是脊柱脊髓损伤患者常见的并发症之一。Gould等研究表明,对于未采取预防措施的急性脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）患者,其DVT的发生率在所有科室住院患者中最高,高达80%-100%。

关键词：脊柱脊髓损伤急性脊髓损伤预防措施脊柱骨折依诺肝素普通肝素低分子肝素血栓事件长骨骨折完全性瘫痪

大剂量甲泼尼龙对脊髓损伤早期基因表达谱的影响

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中国修复重建外科杂志 2011年第3期25卷 327-333页

作者：黄颖王辉张春强王兵黄河赵学凌昆明医学院第一附属医院血液科昆明65003212 昆明医学院第一附属医院骨科昆明65003212

目的甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)是治疗急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的惟一有效药物,但其作用机制尚未明确。通过观察MP对SCI早期基因表达谱的影响,从基因表达层面探讨其机制。方法采用重复样本和重复基因芯片检测的方法... 详细信息

目的甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)是治疗急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的惟一有效药物,但其作用机制尚未明确。通过观察MP对SCI早期基因表达谱的影响,从基因表达层面探讨其机制。方法采用重复样本和重复基因芯片检测的方法进行实验。取9只健康成年日本大耳白兔,体重(3 100±140)g,随机分为对照组(A组)、模型组(B组)和药物组(C组),每组3只。A组仅进行椎板切除术,B、C组行椎板切除后采用Allen法建立急性SCI模型。C组在造模后2 h按人-兔等效剂量给予大剂量MP冲击治疗,B组注射等量生理盐水,A组不作处理。造模后8 h处死实验动物,分别获取以损伤区为中心长约8 mm的脊髓组织,采用Trizol法提取总RNA,用9张Agilent兔脊髓组织全基因4×44 K芯片进行检测。采用GeneSpring11.0统计软件,以P<0.05且倍数变化(fold change,FC)≥2筛选出差异表达基因,并对部分差异表达基因行RT-PCR验证。结果成功建立SCI动物模型并获得相应的组织标本。各组总RNA质量均能满足基因芯片检测要求。基因芯片结果显示:在SCI早期大剂量MP治疗后许多基因发生表达变化,主要涉及炎症、先天性免疫、离子通道、物质转运和转录因子等,IL-1α、IL-1β和防御素(defensin 4,NP-4)的RT-PCR检测结果与基因芯片结果相符。其中,先天性免疫相关基因如NP-3、NP-4、皮质素6、内源性抗菌肽CAP-18、抗菌肽等呈现显著的差异性表达。结论大剂量MP可能主要通过免疫调节机制发挥神经功能保护作用,其主效应细胞可能是中性粒细胞。

关键词：脊髓损伤甲泼尼龙先天性免疫抗菌肽基因芯片

骨科关节置换、植入物置入等较大创伤型手术后静脉血栓前状态的基因预测诊断

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中国组织工程研究 2012年第26期16卷 4898-4902页

作者：王强赵学凌昆明医学院第一附属医院骨科云南省昆明市650032

背景:目前创伤或骨科手术后的静脉血栓栓塞症早期基因诊断日益受到重视。目的:综述目前用于预测诊断骨科术后静脉血栓栓塞症较为成熟的一些基因的研究进展。方法:通过网络检索CNKI和PubMed数据库等2000-01/2011-01关于骨科术后静脉血栓... 详细信息

背景:目前创伤或骨科手术后的静脉血栓栓塞症早期基因诊断日益受到重视。目的:综述目前用于预测诊断骨科术后静脉血栓栓塞症较为成熟的一些基因的研究进展。方法:通过网络检索CNKI和PubMed数据库等2000-01/2011-01关于骨科术后静脉血栓基因诊断的文章,在标题和摘要中以"静脉血栓形成,深静脉血栓,肺栓塞,基因,诊断"或"thrombosis;DVT;PE;gene"为关键词。结果与结论:近年来临床和基础研究证实,骨科术后的静脉血栓栓塞症是人类典型的多基因遗传性疾病,至今发现了一些和血液高凝有关的突变基因与静脉血栓形成有密切关系,分别是:凝血因子V,抗凝血酶Ⅲ,蛋白C,蛋白S,纤溶酶原,纤维蛋白原,肝素辅因子Ⅱ,血栓调节蛋白和凝血因子Ⅻ。了解骨科术后静脉血栓栓塞症的遗传性致病基因机制,有利于早诊断、早治疗,降低其危害。

关键词：深静脉血栓骨科术后静脉血栓形成肺栓塞基因诊断人工关节植入体

动物模型血栓长度及重量比较探索深静脉血栓形成病变分期

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中国修复重建外科杂志 2014年第4期28卷 507-510页

作者：白云城赵学凌周如丹周志化吴雪梅昆明医科大学第一附属医院骨科昆明650032

目的比较大鼠下腔静脉血栓模型不同时间点血栓长度及重量变化情况,探讨血栓开始形成、状态稳定、消退等血栓形成病变分期。方法取健康雌性SD大鼠48只,体重180～230 g,采用狭窄法阻断下腔静脉大部分血流,制备下腔静脉血栓模型。造模后2... 详细信息

目的比较大鼠下腔静脉血栓模型不同时间点血栓长度及重量变化情况,探讨血栓开始形成、状态稳定、消退等血栓形成病变分期。方法取健康雌性SD大鼠48只,体重180～230 g,采用狭窄法阻断下腔静脉大部分血流,制备下腔静脉血栓模型。造模后2、4、8、12、24、48 h及3、7、14 d开腹观察,取材,称量血栓组织长度和重量,并行组织学染色观察。结果 2 h开始有血栓形成,2、4 h血栓长度和重量比较差异无统计学意义（P〉0.05）;6 h开始血栓长度和重量显著上升,6～48 h与2、4 h时比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,6～48 h内各时间点间比较差异无统计学意义（P〉0.05）,进入稳定期;造模后3 d血栓开始出现消退,血栓长度、重量较术后48 h均显著降低（P〈0.01）;7 d血栓长度、重量较3 d时进一步降低（P〈0.05）;21 d未观察到血栓,下腔静脉血管再通。HE染色示造模后2 h有血栓形成;6～48 h,随造模时间延长,管腔内充血加剧,并有炎性细胞浸润,以中性粒细胞为主;3 d可观察到血栓机化现象;7 d机化现象进一步加剧;21 d血栓和机化的肉芽组织均已消退。结论大鼠狭窄法造模结束至造模后6 h是血栓形成的起始期,造模后6～48 h是血栓形成的稳定期,造模后3 d开始进入血栓消退期,至21 d血栓完全消退,下腔静脉再通。

关键词：静脉血栓血管生物学动物模型大鼠

经后路联合使用侧块钢板螺钉和椎弓根钉内固定治疗下颈椎损伤

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中华外科杂志 2005年第4期43卷 215-217页

作者：赵学凌赵宏斌王兵李林芝朱晓松张春强昆明医学院第一附属医院骨科 650032

目的探讨经颈后正中入路联合使用侧块钢板螺钉和T1椎弓根钉内固定手术在治疗下颈椎C6～C7损伤的应用.方法应用此项技术治疗下颈椎损伤8例.其中,C6～76例,C7 2例.术前ASIA分级3例为C级,5例为D级.手术采用颈椎侧块钢板螺钉和T1椎弓根钉联... 详细信息

目的探讨经颈后正中入路联合使用侧块钢板螺钉和T1椎弓根钉内固定手术在治疗下颈椎C6～C7损伤的应用.方法应用此项技术治疗下颈椎损伤8例.其中,C6～76例,C7 2例.术前ASIA分级3例为C级,5例为D级.手术采用颈椎侧块钢板螺钉和T1椎弓根钉联合内固定.结果本组8例患者平均随访15个月(5～37个月),术后脊髓损伤无加重,脊髓功能均有改善, 无血管、神经并发损伤.结论经颈后正中入路联合颈椎侧块钢板螺钉和椎弓根钉内固定是治疗下颈椎损伤的一种好方法.

关键词：椎弓根钉治疗下颈椎损伤颈椎侧块钢板钢板螺钉后路联合使用神经

IL-18激活NF-κB细胞信号通路对人脐静脉内皮细胞损伤作用的体外研究

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重庆医学 2017年第24期46卷 3313-3317页

作者：李光第赵学凌周如丹贵州医科大学附属医院骨科贵阳550004 昆明医科大学第一附属医院骨科昆明650032

目的探讨促炎因子白细胞介素-18(IL-18)通过激活核因子-κB(NF-κB)介导的细胞信号通路,对静脉内皮细胞功能的影响及其与深静脉血栓形成(DVT)的联系。方法利用重组人IL-18作用体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并以NF-κB激活抑制剂... 详细信息

目的探讨促炎因子白细胞介素-18(IL-18)通过激活核因子-κB(NF-κB)介导的细胞信号通路,对静脉内皮细胞功能的影响及其与深静脉血栓形成(DVT)的联系。方法利用重组人IL-18作用体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并以NF-κB激活抑制剂进行干预,通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光、流式细胞仪等检测手段,验证IL-18是否通过激活NF-κB介导的细胞信号转导通路,影响HUVECs正常状态及血管性血友病因子(vWF)、P-选择素(P-selectin)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)等内皮细胞功能标记物的表达,结合既往研究对IL-18参与DVT的机制进行综合分析。结果 IL-18可激活内皮细胞内NF-κB,使细胞核内p65表达增高、细胞内IκBα表达降低,并使HUVECs早期凋亡细胞明显增多;添加QNZ(EVP4593)可使IL-18对NF-κB的激活作用明显抑制,细胞损伤、凋亡的发生显著减少;IL-18可促使vWF、P-selectin和t-PA等DVT相关的内皮细胞标志物发生表达异常(P<0.05),而各标志物可在NF-κB激活抑制后恢复常规表达。结论 IL-18及NF-κB间的相互作用导致HUVECs生长状态和功能异常,可能是与DVT发病相关的疾病机制。

关键词：白细胞介素18 NF-κB 内皮细胞静脉血栓形成

低氧与低氧模拟剂对BMSCs成骨分化影响的对比研究

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中国修复重建外科杂志 2016年第7期30卷 903-908页

作者：张磊龚跃昆赵学凌周厚俊云南省第一人民医院康复医学科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院骨科昆明医科大学第一附属医院神经外二科

目的对比低氧培养与常氧条件下低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸（dimethyloxalylglycine,DMOG）对小鼠BMSCs成骨分化的影响。方法原代分离培养健康3～4周龄昆明小鼠BMSCs,采用流式细胞术对细胞CD29、CD44、CD90、CD34表面标志进行检测,... 详细信息

目的对比低氧培养与常氧条件下低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸（dimethyloxalylglycine,DMOG）对小鼠BMSCs成骨分化的影响。方法原代分离培养健康3～4周龄昆明小鼠BMSCs,采用流式细胞术对细胞CD29、CD44、CD90、CD34表面标志进行检测,行成骨、成脂、成软骨诱导分化染色鉴定。取第3代BMSCs分为对照组（A组,常氧条件下培养）、低氧培养组（B组,1%O2低氧条件下培养）及DMOG干预组（C组,常氧条件下加入0.5 mmol/L DMOG培养）。分别于培养1、2、3、4 d采用MTT法检测BMSCs增殖情况,7、14 d检测ALP含量,24 h后采用Western blot法检测低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor,HIF-1α）蛋白表达,3、7 d采用实时荧光定量PCR检测RUNX2、Osterix基因表达,21 d行茜素红染色观察。结果 BMSCs流式细胞术表面标志鉴定示CD29（＋）、CD44（＋）、CD90（＋）、CD34（-）;成骨、成脂、成软骨诱导分化后茜素红染色、油红O染色及甲苯胺蓝染色均呈阳性。MTT法检测示,培养1 d,3组细胞增殖比较差异无统计学意义（P〉0.05）;2、3、4 d,与A组比较,C组均抑制细胞增殖,但差异无统计学意义（P〉0.05）;而B组则促进细胞增殖,差异有统计学意义（P〈0.05）。培养各时间点,B、C组ALP含量、HIF-1α蛋白相对表达量及RUNX2、Osterix基因相对表达量均显著高于A组,ALP含量及RUNX2、Osterix基因相对表达量C组高于B组,而HIF-1α蛋白相对表达量B组高于C组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。培养21 d茜素红染色示,A组可见少许结节状红染物质,B组可见中等量红染物质,而C组可见大量红染物质。结论低氧能明显促进BMSCs增殖,DMOG对BMSCs增殖无明显影响;低氧与DMOG均能促进BMSCs成骨分化,且DMOG促BMSCs成骨分化能力更强。

关键词：低氧低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸成骨分化小鼠

低氧对成骨生长肽诱导的小鼠间充质干细胞成骨分化的影响

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中国骨质疏松杂志 2016年第11期22卷 1380-1385页

作者：张磊龚跃昆赵学凌周厚俊云南省第一人民医院康复医学科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院骨科昆明650032 昆明医科大学第一附属医院神经外二科昆明650032

目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,... 详细信息

目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,1%O2条件下培养);OGP组(C组,常氧条件下添加OGP培养)、1%O2联合OGP组(D组,1%O2条件下添加OGP)。分别于培养后1天、2天、3天、4天收集细胞,噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法观察BMSCs增殖能力;培养7、14天后收集细胞,可见光比色法检测细胞碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP);培养1天后收集细胞,ELISA法检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)表达,培养3、7天后收集细胞,实时荧光定量PCR检测RUNX2、Osterix表达。结果 MTT结果显示,与C组相比,在培养第2、3、4天D组能明显促进BMSCs增殖(P<0.05)。与C组相比,在培养第7、14天D组能明显上调ALP表达(P<0.05)。与C组相比,在培养第3、7天D组能明显上调RUNX2、Osterix信使RNA表达(P<0.05)。在培养后1天,A组及C组未能检测到HIF-1α蛋白,B组与D组HIF-1α表达明显增加(P<0.001)。结论低氧明显增强了OGP促进BMSCs增殖及成骨分化的作用。

关键词：低氧成骨生长肽骨髓间充质干细胞成骨分化

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海洛因注射致股动脉损伤并感染

中国修复重建外科杂志 1998年第6期12卷 345-346页

作者：赵学凌李林芝赵宏斌曾才铭王宏邦昆明医学院第一附属医院骨科

对海洛因注射引起股动脉损伤致假性动脉瘤并发感染的原因进行分析，并就所收治的６例患者的损伤特点、治疗方法及治疗中应注意的问题进行讨论。认为，毒品注射导致的股动脉损伤不同于工农业生产、生活及交通事故伤，损伤有其特点。必须... 详细信息

对海洛因注射引起股动脉损伤致假性动脉瘤并发感染的原因进行分析，并就所收治的６例患者的损伤特点、治疗方法及治疗中应注意的问题进行讨论。认为，毒品注射导致的股动脉损伤不同于工农业生产、生活及交通事故伤，损伤有其特点。必须依据其损伤特点。

关键词：海洛因注射股动脉损伤感染