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急性肾盂炎84例临床分析

中华内科杂志 1957年第10期5卷 803-806页

作者：赵存真青岛医学院附属医院内科

急性肾盂炎是一种较常见的疾病,国内文献只在1950年曾有肾盂炎之病案讨论两例,特将本院近四年所见之84例加以分析报道。

关键词：

腺病毒介导的MAT2B过表达促进猪肌内脂肪细胞分化

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畜牧兽医学报 2017年第5期48卷 802-809页

作者：赵存真李黄琨马云杨公社信阳农林学院牧医工程学院信阳464000 信阳师范学院生命科学学院信阳464000 西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

本研究旨在通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶(MAT2B)对猪肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以猪脂肪组织为试验材料,提取总RNA,并反转录得到cDNA,参考GenBank收录的猪MAT2B基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并连接... 详细信息

本研究旨在通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶(MAT2B)对猪肌内脂肪细胞分化的影响。本研究以猪脂肪组织为试验材料,提取总RNA,并反转录得到cDNA,参考GenBank收录的猪MAT2B基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并连接到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,进行测序鉴定。结果表明,构建的穿梭载体与骨架载体pAdEasy-1可以实现同源重组,即腺病毒重组载体pAd-MAT2B构建成功;用PacⅠ限制性内切酶酶切线性化pAd-MAT2B载体并回收质粒大片段转染293A细胞可以实现病毒的成功包装,病毒滴度测定可满足原代细胞侵染需要。转染猪原代肌内脂肪细胞后,MAT2B的mRNA和蛋白水平实现了显著的上调。油红O染色结果表明,过表达MAT2B促进了肌内脂肪细胞脂质积累;实时定量结果证明,MAT2B促进成脂标志基因PPARγ和aP2表达的显著上调。综上所述,腺病毒介导的体外表达载体可以成功的实现MAT2B基因超表达;MAT2B正向调控猪肌内脂肪细胞分化。

关键词：腺苷甲硫氨酸转移酶2B 重组腺病毒肌内脂肪细胞猪

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氯霉素所致之过敏性紫癜症一例报告

中华儿科杂志 1954年第4期 309-310页

作者：王胜淼赵存真青岛山东大学医学院内科

过敏性紫癜症,又名 Schulein-Henoch 二氏紫癜症,为包括皮肤、内脏、关节病变以及血小板正常之一种症候群。引起此症候群之可能性很多,如细菌、患者体内自自生之组织氨基毒、食物、呼吸进入之灰尘异物、以及血清、药物等皆可为原因之

关键词：

慢病毒介导shRNA干扰MAT2A与MAT2B基因抑制猪肌内脂肪细胞分化

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中国农业科学 2019年第15期52卷 2706-2715页

作者：赵存真易本驰陈培荣李建柱赵云焕朱忠珂信阳农林学院牧医工程学院

【目的】腺苷甲硫氨酸转移酶（MAT）在ATP的作用下,催化生成体内重要的甲基供体S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）。通过构建慢病毒介导的pLenti-H1干扰载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶MAT2A和MAT2B对猪肌内脂肪细胞分化的影响。【方法】无菌条件下采... 详细信息

【目的】腺苷甲硫氨酸转移酶（MAT）在ATP的作用下,催化生成体内重要的甲基供体S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）。通过构建慢病毒介导的pLenti-H1干扰载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶MAT2A和MAT2B对猪肌内脂肪细胞分化的影响。【方法】无菌条件下采集3—7日龄小猪背最长肌,采用差速贴壁法分离猪肌内脂肪细胞。根据GenBank中猪MAT2A基因序列（***;01167650.1）和MAT2B基因序列（***;01142832.1）,获得其CDS序列。利用Invitrogen公司在线软件BLOCK-iTTM RNAi Designer分别设计shRNA靶序列,将合成的单链寡核苷酸退火形成双链,与经过Bam H I和Xho I （TaKaRa）双酶切后的pLenti-Hl载体连接,转化,并提取质粒进行酶切和测序鉴定。采用X-tremeGENE-HP DNA转染试剂与测序成功的重组质粒以及包装质粒（CMV-Δ8.9和CMV-VSVG）共转染293T细胞,48 h后观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达,并进行滴度测定。在猪原代脂肪细胞密度达到70%—80%时,侵染病毒;细胞密度融合时诱导分化。提取分化第8天的猪肌内脂肪细胞的RNA,按照反转录试剂盒操作说明进行反转录,合成cDNA第一链。采用primer primer 5软件设计MAT2A、MAT2B、PPARγ、aP2、CEBP/α、β-actin基因的定量引物,实时定量和Western blot试验检测MAT2A和MAT2B基因的干扰效率。油红O染色和实时定量鉴定MAT2A和MAT2B基因对猪肌内脂肪脂质积累的影响。【结果】酶切及测序证明重组慢病毒载体pLenti-Hl-MAT2A/MAT2B构建成功;包装的慢病毒sh-MAT2A和sh-MAT2B病毒滴度分别为6.7×107和7×107 pfu/mL,侵染肌内脂肪细胞72 h后,可出现90%的绿色荧光蛋白（GFP）,表明所包装的病毒可满足侵染猪前体肌内脂肪细胞需要。实时定量结果显示其显著抑制了MAT2A和MAT2B的m RNA水平表达,其干扰效率分别在70%和60%以上;进一步采用Western blot试验及蛋白分析表明,干扰MAT2A基因后,MAT2A蛋白表达水平降低40%左右,差异达到极显著水平（P<0.01）;干扰MAT2B基因后,MAT2B蛋白表达水平降低25%左右,差异达到显著水平（P<0.05）。油红O染色和吸光度定量结果显示,与sh-scramble对照组相比,干扰MAT2A和MAT2B基因后,脂滴聚积能力显著抑制猪肌内脂肪细胞脂质积累。实时定量结果显示,干扰MAT2A和MAT2B基因抑制成脂标志基因PPARγ,aP 2及CEBP/α的表达。【结论】成功构建了猪MAT2A和MAT2B基因的慢病毒sh-MAT2A和sh-MAT2B干扰载体。获得的重组慢病毒感染细胞后,能有效降低猪肌内前体脂肪细胞内MAT2A和MAT2B基因的m RNA和蛋白水平表达;进一步试验证明,干扰MAT2A及MAT2B基因后,显著抑制猪肌内脂肪细胞的脂质积累以及成脂关键基因表达。

关键词：腺苷甲硫氨酸转移酶2A 腺苷甲硫氨酸转移酶2B 慢病毒肌内脂肪细胞猪

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营养性巨初红血球性贫血一例

中华医学杂志 1955年第7期41卷 660-662页

作者：王胜淼赵存真史镜铭青岛山东大学医学院内科

巨初红血球性贫血,在我国为比较罕见之症。至目前为止,文献上已报告者,不过仅20例左右,其中以营养性者居多。本院内科于1954年四月曾诊治一例巨初红血球性贫血之患者,经肝精及维生素乙12治疗,效果甚佳。吾人认为该例为营养缺乏所致,特...

巨初红血球性贫血,在我国为比较罕见之症。至目前为止,文献上已报告者,不过仅20例左右,其中以营养性者居多。本院内科于1954年四月曾诊治一例巨初红血球性贫血之患者,经肝精及维生素乙12治疗,效果甚佳。吾人认为该例为营养缺乏所致,特报告于下。

关键词：

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血紫质病一例报告

中华内科杂志 1957年第5期5卷 424-425页

作者：王念斌马瑞珍赵存真胡维祯青岛山东大学医学院内科

血紫质病是临床上比较罕见的疾病,且往往误诊为其他疾病。国内邝氏等报告二例,杜、沈二氏报告一例,并曾误诊为部分性肠梗阻而进行剖腹手术。我院近来见到一例,在院外不但延误诊断一月以上,且误诊为胃肠神经官能症,今报告如下。

关键词：

热休克蛋白70生物学功能及在家禽组织中的表达

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畜牧与兽医 2018年第4期50卷 144-148页

作者：唐雪峰李建柱赵存真赵云焕陈敏赵聘信阳农林学院牧医工程学院

热休克蛋白（Heat Shock Protein,HSP）是生物细胞在受到热应激等应激源刺激后所产生一类多肽类蛋白质,其中HSP70是HSP家族中最重要、最保守且表达最广泛的蛋白之一,其普遍存在于各种生物体之中。现对HSP70调节细胞凋亡、增强细胞耐热... 详细信息

热休克蛋白（Heat Shock Protein,HSP）是生物细胞在受到热应激等应激源刺激后所产生一类多肽类蛋白质,其中HSP70是HSP家族中最重要、最保守且表达最广泛的蛋白之一,其普遍存在于各种生物体之中。现对HSP70调节细胞凋亡、增强细胞耐热、细胞抗氧化、机体免疫和分子伴侣等生物学功能进行综述,并对其分子调控机制及在家禽组织中的表达水平作了阐述,为进一步探讨HSP70调控家禽的热应激反应及分子机制奠定理论基础。

关键词： HSP70 生物学功能基因调控组织表达

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过表达MAT2A基因促进猪肌内脂肪细胞分化的研究

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中国畜牧兽医 2018年第9期45卷 2425-2432页

作者：赵存真吴海港唐雪峰焦凤超马云刘纪成信阳农林学院牧医工程学院河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心信阳464000 信阳师范学院生命科学学院信阳464000

本研究通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶2A(methionine adenosyltransferase 2A,MAT2A)基因在猪肌内脂肪细胞分化中的作用。根据GenBank中猪MAT2A基因mRNA序列(登录号:NM_001167650.1)设计引物,提取猪脂肪组... 详细信息

本研究通过构建腺病毒介导的体外超表达载体,探究腺苷甲硫氨酸转移酶2A(methionine adenosyltransferase 2A,MAT2A)基因在猪肌内脂肪细胞分化中的作用。根据GenBank中猪MAT2A基因mRNA序列(登录号:NM_001167650.1)设计引物,提取猪脂肪组织细胞总RNA并反转录获得cDNA,以此为模板进行PCR扩增并连接到pAdTrack-CMV腺病毒穿梭载体中,对重组质粒pAd-MAT2A进行测序鉴定;pAd-MAT2A载体经PacⅠ限制酶酶切线性化,经质粒大片段回收纯化后转染293A细胞进行病毒包装;采用实时荧光定量PCR检测MAT2A基因表达情况,并提取蛋白进行Western blotting分析,取分化第8天的细胞进行油红O染色。结果表明,穿梭载体pAdTrack-CMV-MAT2A构建成功,并能与骨架载体pAdEasy-1实现同源重组;腺病毒载体pAd-MAT2A转染293A细胞后,病毒滴度达到1E+6PFU/mL,可满足侵染猪肌内脂肪细胞的需要。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,MAT2A基因mRNA和蛋白水平均显著上调。油红O染色结果显示,过表达MAT2A基因可促进猪肌内脂肪细胞内脂滴聚积。结果表明,腺病毒介导的MAT2A基因过表达在猪肌内脂肪细胞中呈上调趋势,MAT2A基因可促进脂质积累。

关键词：腺苷甲硫氨酸转移酶2A(MAT2A)基因重组腺病毒猪肌内脂肪细胞

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