检索结果-南通市图书馆

低能离子注入诱变法选育新硫肽类抗生素166A高产菌株

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国抗生素杂志 2024年第9期49卷 995-1003页

作者：戴剑漉李艳青李欣蒋忠科赫卫清孙承航中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所“天然药物活性物质与功能”国家重点实验室北京100050 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室北京100050 中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所微生物化学研究室和抗感染药物研究北京市重点实验室北京100050 广东医科大学南方海洋科学与工程广东省实验室湛江524023

目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果... 详细信息

目的为进一步提高产量,以小单孢菌Micromonospora ***166-MU1为出发菌株,采用低能离子注入技术,研究不同离子注入参数对菌株存活率、正负突变率的影响,通过突变株抑菌活性变势参数分析,初步探讨N+离子注入对166A生产菌所产生的诱变效果,并结合卡那霉素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选,获得高产菌株。方法利用低能N+离子注入技术对出发菌株TMD166-MU1的孢子进行辐照诱变,以卡那霉素耐受性为选择压力,不同诱变条件处理的菌悬液涂布在含有卡那霉素培养基平板上培养后获得单菌落,并以牛津杯固体发酵高通量筛选方法进行高产菌株初筛,之后对高产菌株进行摇瓶复筛,利用高效液相法检测突变株摇瓶发酵的化学效价。结果通过研究30和60 keV能量下不同注入剂量与小单孢菌正突变率的生物学效应关系,确定了在注入能量为30 keV、注入剂量4×10^(13)ions/cm^(2)、卡那霉素抗性筛选浓度为6 mg/L条件下,可获得最高达36.33%的正突变率。复筛效价是出发菌株1.5倍以上的有4株,其中突变株IK-3的166A产量是菌株TMD166-MU1的1.8倍。结论采用低能N+离子注入诱变方式,再结合抗生素抗性筛选及牛津杯固体发酵高通量筛选的集成方法能简单、高效地获得166A高产突变菌株。

关键词：新硫肽类抗生素166A 低能离子注入诱变抗生素抗性筛选高通量筛选高产菌株

外源水杨酸干预高钙胁迫下苍术差异代谢物的分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽宁农业科学 2024年第5期 8-14页

作者：赫卫王嘉琳潘嘉仪罗梅罗娟贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025

利用代谢组学方法筛选了外源水杨酸干预高钙胁迫下苍术差异代谢物。结果显示,高钙胁迫组与对照组之间的显著差异代谢物有55个,其中26个上调,29个下调,且差异代谢物主要集中在脂质类。水杨酸干预高钙胁迫组与高钙胁迫组之间的显著差异代... 详细信息

利用代谢组学方法筛选了外源水杨酸干预高钙胁迫下苍术差异代谢物。结果显示,高钙胁迫组与对照组之间的显著差异代谢物有55个,其中26个上调,29个下调,且差异代谢物主要集中在脂质类。水杨酸干预高钙胁迫组与高钙胁迫组之间的显著差异代谢物有38个,其中26个上调,12个下调,且差异代谢物主要集中在脂质和氨基酸类。HCA分析表明,d-脱硫生物素、异锗脲、猴头菇素C、11-脱乙酰戊二酸11-(3-羟基-3-甲基丁酸)、9,10-二羟基-12Z-十八碳一烯酸、13(S)-氢过氧-(9Z,11E,15Z)-十八碳三烯酸、Nap-Asn-OH、肉豆蔻酰甘氨酸、玻璃蛋白C等代谢物含量在高钙胁迫下上升或下降,水杨酸干预后含量有恢复,表明外源水杨酸能有效缓解高钙胁迫对苍术代谢的影响。

关键词：苍术钙胁迫代谢组学

可利霉素产生菌中糖基转移酶基因ssp803的功能鉴定及酶学特性分析

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医药生物技术 2024年第5期19卷 432-442页

作者：高晓杰李可萌赫卫清中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫健委抗生素生物工程重点实验室/医科院合成生物学重点实验室北京100050

目的通过体内基因阻断和体外酶促反应鉴定可利霉素产生菌中糖基转移酶基因ssp803功能和酶学特性,以及与可利霉素生物合成的关系。方法在可利霉素产生菌54-IA中利用CRISPR-Cas9基因编辑系统敲除ssp803基因,将组成型启动子kasOp*控制的s... 详细信息

目的通过体内基因阻断和体外酶促反应鉴定可利霉素产生菌中糖基转移酶基因ssp803功能和酶学特性,以及与可利霉素生物合成的关系。方法在可利霉素产生菌54-IA中利用CRISPR-Cas9基因编辑系统敲除ssp803基因,将组成型启动子kasOp*控制的ssp803及其同源基因oleD分别转化到54-IA和?803变株中进行回复和高表达实验,通过HPLC分析?803变株、回复株和高表达株中可利霉素主组分异戊酰螺旋霉素的产量变化。再将ssp803基因连接至冷休克表达载体pColdI上,利用大肠杆菌Transetta(DE3)中进行表达和纯化。以大环内酯类抗生素为糖苷配体和以UDP-葡萄糖为供体进行Ssp803催化反应,通过HPLC-MS检测酶催化后的产物,通过UDP-Glo试剂盒测定Ssp803的酶促动力学参数。结果利用PCR筛选出了ssp803基因框内缺失突变株?803,在?803中异戊酰螺旋霉素产量与54-IA出发菌株相似,而在54-IA和?803中高表达ssp803完整基因时,异戊酰螺旋霉素的含量明显下降,导入高表达oleD基因的质粒后产量下降得更多。通过体外酶促反应证实Ssp803催化的最适温度是37℃,最适pH是9.06。Ssp803对所测的大环内酯类抗生素都具有糖基化失活作用,对异戊酰螺旋霉素I等16元环的大环内酯类抗生素的催化活性要低于14元环大环内酯类抗生素,对索利霉素的催化效率最高。结论 Ssp803对大环内酯类抗生素具有糖基化失活作用,对14元环大环内酯类抗生素的活性更高,最适底物是索利霉素;在可利霉素产生菌中高表达ssp803和oleD基因会抑制异戊酰螺旋霉素的生物合成。

关键词：糖基转移酶可利霉素异戊酰螺旋霉素大环内酯类抗生素

辣椒R2R3-MYB转录因子的全基因组鉴定及响应疫霉菌的表达模式分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2021年第4期29卷 641-655页

作者：赫卫张慧贵州中医药大学药学院黑龙江省农业科学院园艺分院

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与多种生理生化过程。为探讨辣椒(Capsicum annuum) MYB转录因子家族功能,本研究对辣椒R2R3-MYB转录因子家族进行全基因组鉴定和生物信息学分析,并利用转录组技术检测辣椒疫霉菌(Phyto... 详细信息

MYB转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,广泛参与多种生理生化过程。为探讨辣椒(Capsicum annuum) MYB转录因子家族功能,本研究对辣椒R2R3-MYB转录因子家族进行全基因组鉴定和生物信息学分析,并利用转录组技术检测辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)对该家族成员基因转录水平的影响。结果显示,辣椒基因组中共鉴定出102个R2R3-MYB类转录因子,在各条染色体上均有分布。系统进化树分析发现,辣椒R2R3-MYB可分为11个亚家族,其中Ⅺ亚家族的保守结构域、共有基序和基因结构与其他亚家族有明确的区别;保守结构域包括差异显著的2类,每个类别中的保守结构域高度相似;R2R3-MYB基因结构在亚家族间有明显区别;辣椒基因组中有5对来自串联复制的同源R2R3-MYB基因;与拟南芥(Arabidopsis thaliana)、番茄(Solanum lycopersicum) R2R3-MYB基因进行系统发生分析,102个辣椒R2R3-MYB转录因子可分为22个亚家族。上述结果表明,R2R3-MYB蛋白最初通过基因组复制、内含子插入和结构域改组而多样化,但在随后的植物进化过程中相对保守。进一步利用辣椒转录组数据分析R2R3-MYB基因的表达模式,发现部分R2R3-MYB转录因子能够响应疫霉菌的侵染,多个R2R3-MYB基因在抗病品种中上调表达,提示疫霉菌可诱导MYB转录因子的表达。本研究为深入探讨辣椒R2R3-MYB转录因子家族参与疫霉菌抗性的机制提供参考依据。

关键词：辣椒 R2R3-MYB 全基因组疫霉菌

吸水链霉菌17997格尔德霉素部分生物合成基因簇的克隆和分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2006年第6期22卷 902-906页

作者：赫卫清王以光中国医学科学院/中国协和医科大学医药生物技术研究所北京100050

吸水链霉菌17997(Streptomyceshy groscopicus17997)是我所从中国云南土壤中分离到的格尔德霉素(geldanamycin,GDM)产生菌,GDM具有良好的抗肿瘤和抗病毒活性,但其肝毒性和水溶性差的缺点限制了其在临床上的应用。为了实现对GDM结构的生... 详细信息

吸水链霉菌17997(Streptomyceshy groscopicus17997)是我所从中国云南土壤中分离到的格尔德霉素(geldanamycin,GDM)产生菌,GDM具有良好的抗肿瘤和抗病毒活性,但其肝毒性和水溶性差的缺点限制了其在临床上的应用。为了实现对GDM结构的生物学改造,首先要获得GDM的生物合成基因。根据GDM后修饰基因——氨甲酰基转移酶基因(gdmN)的保守序列筛选***17997的柯斯质粒基因组文库,共获得6个阳性克隆,选择CT-4阳性柯斯质粒进行亚克隆和测序,又通过PCR延伸的方法获得了与CT4连锁的将近5kb的外源序列,共获得28.356kb的外源DNA序列,其中包含了13个可能阅读框架,通过同源比较证实该序列与***3602中的GDM生物合成基因有很高的同源性。为进一步研究GDM生物合成基因的功能,并通过组合生物学的方法改造GDM的结构奠定了基础。

关键词：吸水链霉菌17997 格尔德霉素(geldanamycin,GDM) 氨甲酰基转移酶基因生物合成基因簇

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辣椒疫病抗性的浸根接种鉴定方法

植物保护 2020年第6期46卷 159-163,169页

作者：赫卫张慧贵州中医药大学药学院贵安550025 黑龙江省农业科学院园艺分院哈尔滨150069

为建立规模化的辣椒疫病苗期抗性鉴定技术,将辣椒疫霉人工接种于抗疫病辣椒品种‘ICPN21-03’和感病辣椒品种‘B16144’,研究了接种菌液浓度、接种时期、病情调查时期和接种方法等对人工接种鉴定效果的影响。结果表明,接种菌液游动孢子... 详细信息

为建立规模化的辣椒疫病苗期抗性鉴定技术,将辣椒疫霉人工接种于抗疫病辣椒品种‘ICPN21-03’和感病辣椒品种‘B16144’,研究了接种菌液浓度、接种时期、病情调查时期和接种方法等对人工接种鉴定效果的影响。结果表明,接种菌液游动孢子浓度为10个/mL时,感病品种病情指数为73.37,可以满足寄主发病的需要;1~10真叶期接种均能使植株发病,但5~6真叶期接种能反映抗感病品种真实抗性;接种5 d调查抗感病品种病情指数分别为9.32和73.37,可明显区别抗感病品种。使用浸根法进行鉴定,需菌量小,对接种环境要求小。用37个辣椒品种进行验证,鉴定结果表明该苗期抗性鉴定技术可很好地对辣椒品种进行抗性水平分级鉴定。

关键词：辣椒疫病抗性鉴定

皓首穷经不知倦,不求惊世鸿志安——中国抗生素事业执灯人王以光

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国抗生素杂志 2023年第6期48卷 601-609页

作者：赫卫清吴小林中国医学科学院医药生物技术研究所北京100021 成都大学成都610106

在中国抗生素领域,有位耄耋之年的学者,为我国抗生素事业默默坚守六十余年,她就是中国第一代生物工程学探路人,国际首位人工合成生物抗菌素药物发明者--王以光教授。

关键词：生物工程学抗菌素药物人工合成抗生素发明者事业

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

励磁变压器电流不对称原因分析

电力系统自动化 2006年第3期30卷 80-83,101页

作者：许其品赫卫国仲旻国电自动化研究院/南瑞集团公司江苏省南京市210003

在详细分析励磁系统中励磁变压器三相电流不对称原因的基础上,对比了由励磁电压源不对称和同步回路故障引起的励磁变压器输出电流不对称的异同,并用仿真的方法进行了验证,即当励磁电压源不对称时,励磁变压器输出电流一相变大,而其他两... 详细信息

在详细分析励磁系统中励磁变压器三相电流不对称原因的基础上,对比了由励磁电压源不对称和同步回路故障引起的励磁变压器输出电流不对称的异同,并用仿真的方法进行了验证,即当励磁电压源不对称时,励磁变压器输出电流一相变大,而其他两相变小;而同步回路不正常时,励磁变压器输出电流是一相变小,其他两相或者都变大或者一相变大而另一相几乎不变。这一结论对于分析励磁系统电流不对称原因具有实际的指导意义。

关键词：励磁变压器电流电压源同步回路

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微电网能量管理系统中的公共信息模型扩展

电力系统自动化 2012年第6期36卷 45-51页

作者：刘海璇吴福保董大兴姚虹春汪春赫卫国国网电力科学研究院/南京南瑞集团公司江苏省南京市210003

能量管理系统应用程序接口标准IEC 61970的出现,促进了电力系统自动化向网络化、集成化发展。在IEC 61970的基础上进行公共信息模型扩展,提出了支路的概念,建立了光伏、风电、储能等不同支路模型;在此基础上建立高效低碳的微电网具体公... 详细信息

能量管理系统应用程序接口标准IEC 61970的出现,促进了电力系统自动化向网络化、集成化发展。在IEC 61970的基础上进行公共信息模型扩展,提出了支路的概念,建立了光伏、风电、储能等不同支路模型;在此基础上建立高效低碳的微电网具体公共信息模型,构建完整的微电网信息模型,并将其应用到光储微电网能量管理系统的设计中,为进一步开发微电网能量管理系统高级应用程序提供了统一接口。

关键词：能量管理系统 IEC 61970 公共信息模型微电网建模