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基因修饰猪作为人类疾病模型的研究进展

科技导报 2011年第30期29卷 57-62页

作者：杨化强赖良学中国科学院广州生物医药与健康研究院中国科学院再生生物学重点实验室广州510530

对近来有关基因修饰猪作为人类疾病模型的研究进行综述。建立疾病动物模型有利于探索疾病的致病机制,开发治疗药物和诊治途径,是人类疾病临床前研究的重要环节,对实验到临床(B2B)的转化医学研究至关重要。通过基因修饰手段获得的带有人... 详细信息

对近来有关基因修饰猪作为人类疾病模型的研究进行综述。建立疾病动物模型有利于探索疾病的致病机制,开发治疗药物和诊治途径,是人类疾病临床前研究的重要环节,对实验到临床(B2B)的转化医学研究至关重要。通过基因修饰手段获得的带有人类疾病的模型动物具有遗传稳定性和来源的可重复性,对相应人类疾病的研究更具有举足轻重的作用。由于与人类生理特征具有诸多相似性,猪可以作为良好的人类疾病动物模型,并且比传统的啮齿类疾病动物模型更具有优势。随着大动物胚胎操作技术和基因操作技术的日渐成熟,近年来对通过基因修饰猪建立的人类疾病模型的研究进展也逐步加快。

关键词：猪转基因基因打靶疾病模型

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鸡中脑导水管及视叶脑室壁的扫描电镜观察

兽医大学学报 1991年第3期11卷 225-228页

作者：赖良学刘波杨维泰兽医大学解剖教研室

鸡中脑导水管及视叶脑室的底壁主要由多纤毛细胞构成.表面满布草丛状纤毛和微绒毛,无区域性差异;其顶壁的表面结构呈非均一性,主要由少纤毛细胞、无纤毛细胞及伸张细胞交错排列形成的嵌合体构成.在中脑导水管顶壁,除见有神经元样细胞、... 详细信息

鸡中脑导水管及视叶脑室的底壁主要由多纤毛细胞构成.表面满布草丛状纤毛和微绒毛,无区域性差异;其顶壁的表面结构呈非均一性,主要由少纤毛细胞、无纤毛细胞及伸张细胞交错排列形成的嵌合体构成.在中脑导水管顶壁,除见有神经元样细胞、神经胶质样细胞和类组织细胞外,还发现了神经元样复合体.

关键词：鸡脑导水管视叶脑室电镜观察

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利用人工核酸酶构建基因编辑猪的研究进展

生命科学 2018年第9期30卷 955-966页

作者：金琴王可品赖良学中国科学院广州生物医药与健康研究院中国科学院再生生物学重点实验室广州510530

猪不仅具有重要的农业生产价值,由于猪繁殖周期比灵长类动物短,产仔量多,以及猪器官大小、生理代谢过程和解剖结构,尤其是心血管系统及神经系统较啮齿类动物而言与人类更为接近,猪在生物医药领域也具有重要的用途。对猪基因组加以编辑,... 详细信息

猪不仅具有重要的农业生产价值,由于猪繁殖周期比灵长类动物短,产仔量多,以及猪器官大小、生理代谢过程和解剖结构,尤其是心血管系统及神经系统较啮齿类动物而言与人类更为接近,猪在生物医药领域也具有重要的用途。对猪基因组加以编辑,在农业上可以加速高生产性能猪新品种的培育;在生命科学领域可用于基因功能、胚胎发育及代谢过程等基础研究;在医学上,可提供与人体更为匹配的异种移植器官,可作为更能准确模拟人类疾病的大动物模型,用于新的药物和治疗手段的开发。人工核酸酶的出现,使基因编辑效率得到大大提高,克服了原有的基因编辑猪制备困难、成功率极低的问题。人工核酸酶技术不仅在猪上实现了高效而又精确的基因编辑,并且使各种基因突变模式,如基因敲除、基因敲入、基因组无痕点突变、多基因编辑、体内直接基因编辑以及条件性基因编辑等都成为可能。现将对利用不同人工核酸酶技术结合不同的基因编辑策略建立基因编辑猪的研究新进展进行综述。

关键词：基因编辑猪大动物模型人工核酸酶条件性基因编辑

家兔桑椹胚和早期囊胚在饲养层表面的贴壁行为

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中国兽医学报 1997年第2期17卷 161-165页

作者：赖良学郑瑞珍秦鹏春孙方臻中国科学院发育生物研究所

探讨了不同状态家兔３日龄桑椹胚和４日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明，去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚，离散胚在培养２４ｈ内即可贴壁，切割胚贴壁大多数发生于体外培养２４～４８ｈ之间。离散胚和切割胚都可能在培养... 详细信息

探讨了不同状态家兔３日龄桑椹胚和４日龄囊胚在饲养层上的贴壁规律。结果表明，去除或保留透明带和胶膜的全胚贴壁最晚，离散胚在培养２４ｈ内即可贴壁，切割胚贴壁大多数发生于体外培养２４～４８ｈ之间。离散胚和切割胚都可能在培养１２ｈ后重新聚集成中空的亚囊胚结构。亚囊胚的贴壁过程是某一部位首先附着于饲养层表面，然后滋胚层铺展形成向下的拉力，使其全部贴壁。

关键词：兔囊胚桑椹胚贴壁饲养层

IL-2对体外培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响

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中国兽医学报 1997年第3期17卷 294-297页

作者：罗国玲杨维泰刘波赖良学解放军农牧大学基础部

观察了不同浓度ＩＬ－２对原代分离培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响。结果表明，２０～５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２能促进鸡胚脑纹状体神经元的存活，增加神经元胞体的短直径，提高纹状体神经元中ＮＰＹ阳性反应神经元数目，其中５０... 详细信息

观察了不同浓度ＩＬ－２对原代分离培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响。结果表明，２０～５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２能促进鸡胚脑纹状体神经元的存活，增加神经元胞体的短直径，提高纹状体神经元中ＮＰＹ阳性反应神经元数目，其中５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２的作用最明显。而１５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２对鸡胚脑纹状体神经元的存活、生长及分化具有抑制作用。由此认为，ＩＬ－２对鸡胚纹状体神经元生长发育可能具有正。

关键词：鸡胚脑纹状体神经元体外培养发育

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鸡侧脑室壁的扫描电镜观察

兽医大学学报 1991年第1期11卷 23-26页

作者：赖良学刘波杨维泰兽医大学解剖教研室

扫描电镜观察结果表明,鸡侧脑室的室管膜有构造分区,在侧脑室顶壁布满密集、细长并交织成网状的纤毛,其内侧壁纤毛较稀疏,主要呈簇样分布,室管膜细胞表面显露,有长短不一的微绒毛,底壁纤毛非常稀疏,直径及长度与顶壁的相似,但纤毛呈簇... 详细信息

扫描电镜观察结果表明,鸡侧脑室的室管膜有构造分区,在侧脑室顶壁布满密集、细长并交织成网状的纤毛,其内侧壁纤毛较稀疏,主要呈簇样分布,室管膜细胞表面显露,有长短不一的微绒毛,底壁纤毛非常稀疏,直径及长度与顶壁的相似,但纤毛呈簇样分布,各簇纤毛之间存在无纤毛区,整个底壁室管膜细胞表面也分布有微绒毛.鸡侧脑室室管膜细胞可分为多纤毛细胞.少纤毛细胞和无纤毛细胞3种.同时还观察到,鸡侧脑室壁存在3种类型的室管膜上细胞,即神经元样细胞、神经胶质样细胞和类组织细胞.本文对上述各种细胞的功能进行了探讨.

关键词：鸡侧脑室扫描电镜

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体细胞核移植诱导的表观遗传学变化

生命科学 2009年第3期21卷 363-369页

作者：杨东山邓为樊娜娜赖良学中国科学院广州生物医药与健康研究院中国科学院再生生物学重点实验室广州510663

体细胞核移植技术是指将一个分化的体细胞核置入去核的卵母细胞中,并发育产生与供体细胞遗传背景一致的克隆后代的技术。目前,世界上通过体细胞核移植技术已经产生了许多的克隆动物。但克隆过程中还存在着很多问题,比如,克隆效率太低、... 详细信息

体细胞核移植技术是指将一个分化的体细胞核置入去核的卵母细胞中,并发育产生与供体细胞遗传背景一致的克隆后代的技术。目前,世界上通过体细胞核移植技术已经产生了许多的克隆动物。但克隆过程中还存在着很多问题,比如,克隆效率太低、克隆个体常伴有表型异常和早亡等,从而使该技术应有的应用潜力不能得到充分的发挥。体细胞表观遗传学重编程的不完全或紊乱是造成核移植诸多问题的主要原因。近十多年来,人们对体细胞核移植后的重编程进行了广泛的研究,其核心内容包括核及核外结构的重塑、DNA甲基化模式的重建、基因印迹和X染色体失活、组蛋白乙酰化模式的重建、端粒长度恢复等,以期能够对其重编程加以人为干预,从而提高动物克隆效率。本文拟对体细胞核移植诱导的重编程研究进展加以综述,希望对体细胞重编程机制的阐明有所启发。

关键词：体细胞核移植重编程表观遗传学甲基化

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克隆猪技术及其在转基因猪研究中的应用

生命科学 2009年第5期21卷 652-657页

作者：樊娜娜杨东山赖良学中国科学院广州生物医药与健康研究院中国科学院再生生物学重点实验室广州510663

哺乳动物核移植技术是一种可以获得基因组遗传信息完全相同的后代的生物技术。猪体细胞核移植技术包括以下几个环节:卵母细胞的体外成熟、供体细胞的分离和处理、体细胞的核转移、重构胚胎的人工激活、胚胎体外培养和胚胎移植。由于该... 详细信息

哺乳动物核移植技术是一种可以获得基因组遗传信息完全相同的后代的生物技术。猪体细胞核移植技术包括以下几个环节:卵母细胞的体外成熟、供体细胞的分离和处理、体细胞的核转移、重构胚胎的人工激活、胚胎体外培养和胚胎移植。由于该技术在最近几年的迅速发展,很多实验室已通过该技术成功获得了克隆猪后代。核移植克隆猪技术的出现为生产转基因猪提供了一种有效的方法,并且是目前生产基因打靶猪的惟一方法。至今利用克隆猪技术已经成功获得了一系列的转基因猪和基因敲除猪。以核移植技术产生基因修饰猪目前正处于从基础研究走向应用的过渡阶段。尽管猪体细胞核移植克隆的效率(出生克隆猪数占所用卵数的比例)还不高,但是由于通过该技术能够对猪基因组进行特定的修饰,确保生产的克隆动物100%为转基因动物,从而大大提高了转基因猪的制作效率,可以预料猪核移植技术将会对医药业和农业产生重大的影响。

关键词：猪核移植转基因基因打靶

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影响小鼠早期胚胎发育的几个重要因素

中国兽医学报 1998年第2期18卷 196-198页

作者：李光鹏赖良学李子义邹丽农东北农业大学生物工程系

以Ｗｈｉｔｅｎ氏液为基本培养液，研究了卵丘细胞、谷氨酰胺及不同浓度的葡萄糖对ＨＣＧ注射后１７～１８ｈ、２５～２７ｈ和３６～３８ｈ昆明小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明，不论葡萄糖或谷氨酰胺存在与否，卵丘细胞与受精卵的共... 详细信息

以Ｗｈｉｔｅｎ氏液为基本培养液，研究了卵丘细胞、谷氨酰胺及不同浓度的葡萄糖对ＨＣＧ注射后１７～１８ｈ、２５～２７ｈ和３６～３８ｈ昆明小鼠胚胎体外发育的影响。结果表明，不论葡萄糖或谷氨酰胺存在与否，卵丘细胞与受精卵的共同培养对胚胎克服体外发育阻断无明显效果。葡萄糖能抑制１－细胞胚胎发育，促进４－细胞以后的胚胎发育。谷氨酰胺是小鼠早期胚胎发育的良好能源物质，可使９６％（３０８／３２１）的体外发育到２－细胞的胚胎克服阻断而继续发育到４－细胞。谷氨酰胺与葡萄糖联合使用，则可使小鼠受精卵的囊胚发育率达５７．５％（２２９／３９８）。ＨＣＧ注射后３６～３８ｈ的小鼠胚胎能利用葡萄糖。

关键词：小鼠体外发育阻断卵丘细胞葡萄糖谷氨酰胺