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红豆草抗甲硫氨酸变异体的筛选

Acta Botanica Sinica 1996年第4期38卷 268-275页

作者：赵忠贾敬芬兰州大学细胞生物学研究室

用ＮａＮ３诱变过的红豆草（ＯｎｏｂｒｙｃｈｉｓｖｉｃｉａｅｆｏｌｉａＳｃｏｐ．）愈伤组织筛选得到了能抗８０ｍｍｏｌ／Ｌ甲硫氨酸的变异细胞系——ＯＮｍｅｔｒ，并得到了再生植株。ＯＮｍｅｔｒ脱离选择压力６个月后... 详细信息

用ＮａＮ３诱变过的红豆草（ＯｎｏｂｒｙｃｈｉｓｖｉｃｉａｅｆｏｌｉａＳｃｏｐ．）愈伤组织筛选得到了能抗８０ｍｍｏｌ／Ｌ甲硫氨酸的变异细胞系——ＯＮｍｅｔｒ，并得到了再生植株。ＯＮｍｅｔｒ脱离选择压力６个月后，其抗性仍比野生型的高５．６倍。同时还表现出对乙硫氨酸的交叉抗性，其抗性是野生型的６．５倍，表明该抗性系抗性表达稳定。ＯＮｍｅｔｒ愈伤组织中甲硫氨酸、赖氨酸、苏氨酸含量分别是野生型的４．００、１．０９、１．５０倍。ＯＮｍｅｔｒ再生植株中甲硫氨酸、赖氨酸、苏氨酸、异亮氨酸含量分别为野生型的２．０、３．５、３．５、２．５倍。在ＯＮｍｅｔｒ愈伤组织可溶性蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱中，出现了两条新多肽（３０ｋＤ、２６ｋＤ）。ＯＮｍｅｔｒ细胞系过氧化物酶同工酶谱中亦出现了两条新酶带。

关键词：红豆草甲硫氨酸变异体筛选

铝电解车间粉尘有机提取物及其组分遗传毒性的研究

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环境与健康杂志 1996年第5期13卷 197-199页

作者：王毓美贾敬芬兰州大学生物系

采用化学分离与体外微核试验、姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）试验的方法，研究了铝电解车间粉尘有机提取物及其５个组分的遗传毒性。结果表明，粉尘有机提取物及其有机酸、多环芳烃、极性化合物可使微核率和ＳＣＥ率显著增高，并有一定的... 详细信息

采用化学分离与体外微核试验、姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）试验的方法，研究了铝电解车间粉尘有机提取物及其５个组分的遗传毒性。结果表明，粉尘有机提取物及其有机酸、多环芳烃、极性化合物可使微核率和ＳＣＥ率显著增高，并有一定的剂量－反应关系。有机碱和脂肪烃的微核率和ＳＣＥ率无明显增高。研究结果提示，铝电解车间粉尘有机提取物及其有机酸、多环芳烃、极性化合物中含有遗传毒物。

关键词：粉尘有机提取物淋巴细胞微核试验遗传毒性

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小冠花组织培养中的植株再生及其组织学观察

西北植物学报 1989年第4期9卷 212-215页

作者：贾敬芬余芳兰州大学细胞生物学研究室

小冠花无菌苗的根、下胚轴、子叶和叶子切段在附加(?).2毫克/升的激动素和1毫克/升2,4—D的MS培养基上诱导产生了松软的愈伤组织。将这些愈伤组织转移到不同激素组合的分化培养基上继续培养后,出现了器官分化。不同来源的外植体也可通... 详细信息

小冠花无菌苗的根、下胚轴、子叶和叶子切段在附加(?).2毫克/升的激动素和1毫克/升2,4—D的MS培养基上诱导产生了松软的愈伤组织。将这些愈伤组织转移到不同激素组合的分化培养基上继续培养后,出现了器官分化。不同来源的外植体也可通过体细胞胚胎发生途径再生小植株。对愈伤组织的起始和器官形成过程进行了组织学观察。

关键词：小冠花组织培养植株再生

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沙蒿组织培养植株再生

西北植物学报 1995年第2期15卷 100-103页

作者：徐子勤贾敬芬兰州大学细胞生物学研究室

沙蒿种子灭菌后，接入ＭＳ无激素培养基得到无菌苗。取２０天无菌苗子叶切成小块，接入含２，４一Ｄ的ＭＳ培养基诱导愈伤组织，并在同样培养基上进行继代增殖。愈伤组织在含６－ＢＡ、ＮＡＡ的ＭＳ培养基上分化得到芽。将芽转至含ＩＡ... 详细信息

沙蒿种子灭菌后，接入ＭＳ无激素培养基得到无菌苗。取２０天无菌苗子叶切成小块，接入含２，４一Ｄ的ＭＳ培养基诱导愈伤组织，并在同样培养基上进行继代增殖。愈伤组织在含６－ＢＡ、ＮＡＡ的ＭＳ培养基上分化得到芽。将芽转至含ＩＡＡ的１／２ＭＳ培养基上形成根，从而得到完整植株。同时对影响沙蒿组织培养的一些因素进行了研究。结果表明培养基中２，４一Ｄ含量（０．５一２ｍｇ／Ｌ）越高，沙蒿愈伤组织生长越快，而褐化发生时间却提前；活性碳对抑制沙蒿愈伤组织褐化有明显作用，与水解乳蛋白相比，水解酪蛋白对沙蒿愈伤组织的生长更为有利；ＩＡＡ对沙蒿苗根的分化是必需的。

关键词：白沙蒿组织培养子叶植株再生

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中麻黄悬浮培养体系的建立

西北植物学报 1995年第5期15卷 1-5页

作者：孟玉玲贾敬芬兰州大学生物系

本文用中麻黄无菌苗为外植体，其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上，全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２... 详细信息

本文用中麻黄无菌苗为外植体，其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上，全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养，培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基，得到分散性好，细胞形状接近圆形，细胞大小均一，细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ，细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期，条件培养不能提高分裂指数，１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。

关键词：中麻黄悬浮培养有丝分裂指数

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青稞hblt14.2基因的克隆及功能分析

作物学报 2009年第2期35卷 295-300页

作者：何涛贾敬芬青海大学生物科学系青海西宁810016 西北大学生命科学学院陕西西安710069

根据大麦blt14.2基因序列设计引物,用青稞基因组DNA为模板扩增低温反应基因的全长序列,命名为hblt14.2,在GenBank登录号为EF514912。该基因含470bp,包括249bp的开放阅读框、69bp的5'非翻译区和152bp的3'非翻译区,编码82个氨基酸残基,富... 详细信息

根据大麦blt14.2基因序列设计引物,用青稞基因组DNA为模板扩增低温反应基因的全长序列,命名为hblt14.2,在GenBank登录号为EF514912。该基因含470bp,包括249bp的开放阅读框、69bp的5'非翻译区和152bp的3'非翻译区,编码82个氨基酸残基,富含Gly、Ala、Leu和Val,与其他冷诱导基因编码蛋白具相似性。与大麦blt14.2基因具98.9%同源性,所编码的蛋白存在2个氨基酸的差别。将hblt14.2基因连接CaMV35S启动子和NOS终止子后定向插入质粒pCAMBIA1301的多克隆位点中,构建植物表达载体pCAMBIA-BI-hblt,通过农杆菌介导转化烟草,并对转基因烟草进行抗寒性检测。结果表明,青稞hblt14.2基因与植物的抗寒性有一定关系。

关键词：青稞低温 hblt14.2基因功能分析

Arresten在烟草中的表达及其生物学活性分析

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生物工程学报 2008年第9期24卷 1520-1525页

作者：李红民郝建国贾敬芬西北大学生命科学学院陕西省生物技术重点实验室西安710069

采用5′端引入His-tag的引物从携带有Arresten基因的质粒pCA中扩增血管生成抑制因子Arresten编码基因,构建其植物表达载体pCAMBIAarr并通过冻融法转化根癌农杆菌LBA4404,获得携带目的基因的重组农杆菌。采用叶盘法以重组农杆菌转化烟草,... 详细信息

采用5′端引入His-tag的引物从携带有Arresten基因的质粒pCA中扩增血管生成抑制因子Arresten编码基因,构建其植物表达载体pCAMBIAarr并通过冻融法转化根癌农杆菌LBA4404,获得携带目的基因的重组农杆菌。采用叶盘法以重组农杆菌转化烟草,在50μg/mL潮霉素B为选择压力下获得再生烟草植株,经过Southern杂交、RT-PCR和Western blotting检测,获得稳定整合有Arresten编码基因的烟草转基因植株。牛血管内皮细胞BCE增殖抑制实验表明,采用镍离子螯合次氨基三乙酸亲和层析法从转基因烟草叶片中分离纯化的重组Arresten蛋白具有明显的抑制牛血管内皮细胞增殖的生物活性。

关键词：血管生成抑制因子 Arresten 转基因烟草生物学活性

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小麦叶基切段愈伤组织的诱导和植株再生

西北大学学报（自然科学版） 2003年第4期33卷 489-491页

作者：郝建国贾敬芬西北大学生命科学学院陕西西安710069

从3～5d龄小麦籽苗幼叶基部切段诱导出大量愈伤组织。诱导可再生的愈伤组织的培养基为MS+1.5mg/L2,4-D+0.2mg/L,激动素(KT)+500mg/L,水解酪蛋白(CH)+120mg/L,天冬酰胺+100mg/L,肌醇+3%蔗糖+0.7%琼脂粉。当愈伤组织转移到生长调节物质改... 详细信息

从3～5d龄小麦籽苗幼叶基部切段诱导出大量愈伤组织。诱导可再生的愈伤组织的培养基为MS+1.5mg/L2,4-D+0.2mg/L,激动素(KT)+500mg/L,水解酪蛋白(CH)+120mg/L,天冬酰胺+100mg/L,肌醇+3%蔗糖+0.7%琼脂粉。当愈伤组织转移到生长调节物质改变为2mg/LKT,1mg/LNAA和0.1mg/L2,4-D的MS培养基上培养后,出现了苗的分化。当分化苗在无机盐分减半的MS培养基上培养后,产生了根。愈伤组织的形成和植株再生的频率与外植体的位置和籽苗的发育阶段密切相关,3～4d龄苗叶基1cm处的切段效果最好。叶基愈伤组织的分化能力可保持3～4个月。

关键词：小麦叶基切段愈伤组织植株再生组织培养分化能力遗传育种培养基

Ti T—DNA基因在天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞中的导入、表达及再生

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中国科学（B辑） 1989年第5期 488-493页

作者：许耀贾敬芬郑国錩中山大学生物工程研究中心兰州大学生物系

携带章鱼碱型Ti质粒和胭脂碱型Ti质粒的根癌农杆菌不同菌株分别与天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞经共培养离体转化程序后,Ti T-DNA基因在受体细胞中获得了转移与表达。虽然细菌处理对受体细胞的植板率具有一定的影响,但其激素自主型频率... 详细信息

携带章鱼碱型Ti质粒和胭脂碱型Ti质粒的根癌农杆菌不同菌株分别与天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞经共培养离体转化程序后,Ti T-DNA基因在受体细胞中获得了转移与表达。虽然细菌处理对受体细胞的植板率具有一定的影响,但其激素自主型频率为33.9—76.8％,表现冠瘿碱合成酶活性的频率为9.7—47.5％。从转化细胞克隆再生的苗不易长大、难于生根,且其基部产生大量的次生瘤组织。在这种再生苗的叶组织及次生瘤组织中仍可检测到相应冠瘿碱合成酶的活性。

关键词：细胞转化 T-DNA转移冠瘿碱合成酶