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一种制备复制缺陷型重组水疱性口炎病毒新方法的建立

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中国兽医科学 2010年第3期40卷 221-225页

作者：贺番葛金英郝永清仇华吉内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了提高复制缺陷型重组水疱性口炎病毒(VSV△G*G)的制备效率,对传统制备方法进行了改良,在制备过程中先用VSV△G*G转导细胞1h后,再对其进行转染,24h后收集细胞上清并进行毒价测定。并与用传统方法制备的重组病毒的毒价进行比较,结果表... 详细信息

为了提高复制缺陷型重组水疱性口炎病毒(VSV△G*G)的制备效率,对传统制备方法进行了改良,在制备过程中先用VSV△G*G转导细胞1h后,再对其进行转染,24h后收集细胞上清并进行毒价测定。并与用传统方法制备的重组病毒的毒价进行比较,结果表明,用改良方法与传统方法制备的重组病毒具有相同的毒价,但改良方法比传统方法节省了20～48h,同时减少了表达的G蛋白诱导细胞融合所造成的细胞损伤。表明改良方法能够代替传统方法制备出高毒价的复制缺陷型重组病毒。

关键词：复制缺陷型重组水疱性口炎病毒转染转导病毒毒价

'3+1'模式下当代大学生需要提高哪些素养

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赣新KG——4782遥控彩电亮度通道的原理及常见故障速修

长江丛刊 2019年第12期 131-132页

作者：贺番集宁师范学院

随着当今中国经济的速猛发展,我国需要越来越多地应用型专业技术人才.为了适应社会经济发展的需要,全国各高等院校均在探索着对人才培养模式进行改革,因此'3+1'培养模式应运而生.然而,作为培养主体的大学生,在新的时代、新的模式下该如... 详细信息

随着当今中国经济的速猛发展,我国需要越来越多地应用型专业技术人才.为了适应社会经济发展的需要,全国各高等院校均在探索着对人才培养模式进行改革,因此'3+1'培养模式应运而生.然而,作为培养主体的大学生,在新的时代、新的模式下该如何调整自己,积极去适应以便更好的锻炼、培养自己?本文即对当代大学生在新培养模式下需要着重注意及有待提高的方面进行分析与总结,希望对大学生自身素养的加深及培养方向的指导提供参考依据.

关键词： '3+1'培养模式主体素养提高

来源：评论

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家电检修技术 1996年第4期 7-8页

作者：贺番文

赣新 KG—4782遥控彩电属索尼 XE—3机芯,是以索尼 KV-1882为蓝本生产的,国内采用相同机芯的彩电还有孔雀 KQ47—1882,该机芯彩电社会上有一定的拥有量。笔者多年的维修实践中发现,赣新彩电的亮度通路故障率较高,所以我认为对该部分电... 详细信息

赣新 KG—4782遥控彩电属索尼 XE—3机芯,是以索尼 KV-1882为蓝本生产的,国内采用相同机芯的彩电还有孔雀 KQ47—1882,该机芯彩电社会上有一定的拥有量。笔者多年的维修实践中发现,赣新彩电的亮度通路故障率较高,所以我认为对该部分电路进行较详细的分析以及掌握与该电路的有关直流参数是快速排除各有关故障的首要任务。

关键词：彩电故障维修

基于高通量测序技术分析家兔感染猪瘟兔化弱毒株后脾脏的转录组学变化

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病毒学报 2016年第3期32卷 316-323页

作者：侯玉臻赵丹彤刘国英贺番刘斌付绍印郝永清张文广内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018 动物遗传育种与繁殖内蒙古自治区重点实验室呼和浩特010018 金宇保灵生物药品有限公司呼和浩特010018 集宁师范学院生物系乌兰察布012000 内蒙古自治区农牧业科学院呼和浩特010031 内蒙古农业大学兽医学院呼和浩特010018 内蒙古ATCG生物信息研究所呼和浩特010020

本研究基于高通量测序技术对感染猪瘟兔化弱毒株(C株)后0h,12h,24h,30h,36h,48h的家兔脾脏组织进行测序,以家兔基因组作为参考,筛选感染后各时间点和对照组(0h)之间的差异基因。利用Uniprot和NCBI数据库查找各组中变化水平显著的前10个... 详细信息

本研究基于高通量测序技术对感染猪瘟兔化弱毒株(C株)后0h,12h,24h,30h,36h,48h的家兔脾脏组织进行测序,以家兔基因组作为参考,筛选感染后各时间点和对照组(0h)之间的差异基因。利用Uniprot和NCBI数据库查找各组中变化水平显著的前10个差异基因的生物学功能。结果发现,感染后12h,24h,30h的前10个差异基因只有少数与炎症、免疫、凋亡等相关;感染后36h,48h的前10个差异基因完全相同,其中B2M、RLA-DR-ALPHA、CD74和IGJ参与抗病毒过程。GO功能注释结果显示:感染后各时间点的差异基因都和免疫、代谢、调控途径紧密相关。KEGG通路富集分析发现,感染后24h的差异基因富集到RIG-I样受体信号通路,感染后30h的差异基因富集到黏着斑和细胞外基质-受体相互作用通路,感染后36h和48h的差异基因共同富集到的通路有20个,其中蛋白酶体,溶酶体,核糖体,趋化因子信号通路,B细胞受体信号通路,抗原加工提呈通路和FcγR介导的吞噬通路与抗病毒相关。本研究建立的家兔感染C株后脾脏组织的差异表达基因数据库,将为进一步阐述家兔适应C株的分子机制奠定基础。

关键词：猪瘟兔化弱毒株家兔脾脏转录组分析

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猪瘟病毒核心蛋白研究进展

病毒学报 2015年第5期31卷 579-584页

核心蛋白是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的结构蛋白之一,除了构成病毒核衣壳保护内部的基因组RNA外,还参与转录调节,并可和多种宿主蛋白相互作用,在病毒感染过程中发挥重要作用。本文结合当前对CSFV核心蛋白的无序性,结... 详细信息

核心蛋白是猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的结构蛋白之一,除了构成病毒核衣壳保护内部的基因组RNA外,还参与转录调节,并可和多种宿主蛋白相互作用,在病毒感染过程中发挥重要作用。本文结合当前对CSFV核心蛋白的无序性,结构特点,功能特点,以及和病毒的非结构蛋白NS3、NS5B,宿主蛋白SUBMO-1、UBC9、OS9、IQGAP1相互作用的研究,综述了CSFV核心蛋白在猪瘟病毒致病力、毒力和基因组RNA复制中发挥的重要作用,以期为CSFV核心蛋白的进一步研究提供参考。

关键词：猪瘟病毒核心蛋白相互作用

猪瘟病毒NS3蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

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中国兽医科学 2010年第2期40卷 144-149页

作者：常天明孙元李宏宇贺番李淼黄俊华仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

以含有猪瘟病毒(CSFV)石门株全长cDNA的重组质粒pOKShimen为模板,经PCR扩增获得NS3基因,利用原核表达载体pMAL-c2X、pET32a以及杆状病毒表达载体pFastBacH T B表达CSFV石门株NS3基因,获得3种重组蛋白:MBP-NS3、His-NS3和rNS3。Western-blot分析及间接免疫荧光试验证实,这3种不同载体表达的NS3蛋白均能被猪瘟阳性血清所识别。利用直链淀粉树脂柱对重组蛋白MBP-NS3进行纯化后,用其免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA筛选,获得2株能稳定传代并分泌针对抗CSFVNS3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为1D10和1H10。Western-blot分析及间接免疫荧光试验结果证明,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均可识别CSFVNS3蛋白。

关键词：猪瘟病毒 NS3基因单克隆抗体

盆底重建术治疗女性盆底功能障碍性疾病的护理

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护理实践与研究 2011年第6期8卷 55-56页

作者：张弋廷郭健贺番新疆自治区人民医院妇科 830000

盆底功能障碍性疾病（PFD）主要包括盆底脏器脱垂（POP）、压力性尿失禁（SUD）、性功能障碍（SD）和粪失禁（FI）等。随着人们生活质量的提高和人口的老龄化,PFD的发病率逐年升高,是中老年妇女的常见疾病,

关键词：盆底功能障碍性疾病盆底重建术压力性尿失禁护理女性治疗性功能障碍中老年妇女

猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选

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中国预防兽医学报 2013年第9期35卷 707-710页

作者：廖亚金李素贺番何文瑞董泓冯烁孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为研究猪瘟病毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA。纯化双链cDNA并与载体pGADT7-... 详细信息

为研究猪瘟病毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA。纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库。以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证。结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒 PBMC cDNA文库酵母双杂交 E2蛋白

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猪γ干扰素的表达及其抗病毒活性的安全检测

生物工程学报 2010年第4期26卷 439-447页

作者：贺番孙元葛金英李淼常天明步志高仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018

为了提高干扰素抗病毒活性测定的生物安全性,本研究使用含有GFP的复制缺陷型水疱性口炎病毒(VSV△G*G)为指示病毒,分别对经原核表达系统和杆状病毒表达系统表达的重组猪γ干扰素(PoIFN-γ)在MDBK细胞上进行抗病毒活性测定。结果显示:由... 详细信息

为了提高干扰素抗病毒活性测定的生物安全性,本研究使用含有GFP的复制缺陷型水疱性口炎病毒(VSV△G*G)为指示病毒,分别对经原核表达系统和杆状病毒表达系统表达的重组猪γ干扰素(PoIFN-γ)在MDBK细胞上进行抗病毒活性测定。结果显示:由杆状病毒表达的重组PoIFN-γ具有高度抗病毒活性,其抗病毒活性为105IU/mL,原核表达的重组PoIFN-γ纯化后经缓慢复性也会产生一定的抗病毒活性,其抗病毒活性为32IU/mL。该方法与利用表达GFP的重组水疱性口炎病毒(VSV*GFP)所检测的干扰素抗病毒活性结果完全一致,表明复制缺陷型病毒VSV△G*G可作为复制型重组病毒的替代品,使得干扰素抗病毒活性检测更加安全、准确。

关键词：猪γ干扰素杆状病毒抗病毒活性检测