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晚期糖基化终产物对脂肪干细胞功能、血管新生能力的影响及丹红注射液保护作用的实验研究

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中国中西医结合杂志 2014年第7期34卷 839-845页

作者：伍锋贺治青纪睿圳王新梁春吴宗贵中国人民解放军第二军医大学附属长征医院心血管内科上海200003

目的观察糖尿病机体主要的晚期糖基化终产物亚型-Nε羧甲基赖氨酸修饰白蛋白[Nε-(carboxymethyl)lysine albumin,CMLs]对脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)功能及血管新生作用的影响及丹红注射液(Danhong Injection,DH)的保护作用。方法采用酶消法从人皮下脂肪组织中分离培养人ADSCs,并通过光学显微镜进行形态学观察、分化能力评估。进一步采用WST-1增殖试剂盒、Transwell小室、流式AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡检测试剂盒以及人VEGF的ELISA试剂盒分别观察对照组、BSA组(60μg/mL)、CML-BSA组(60μg/mL)、DH组(100μL/mL)、联合用药组(60μg/mL CML-BSA加100μL/mL DH),共5组干预液对ADSCs增殖、迁移、凋亡和分泌功能的影响。并通过体外血管新生实验观察其对ADSCs血管新生能力变化情况的影响。结果与BSA组比较,CML-BSA组能显著抑制ADSCs增殖和迁移的能力,增加凋亡,减少VEGF的分泌,减弱其血管新生能力(P<0.05);与对照组比比较,100μl/mL DH能显著促进ADSCs增殖和迁移的能力,抑制其凋亡,增加VEGF的分泌,改善其血管新生能力(P<0.05);与CML-BSA组比较,联合治疗组能显著逆转CML-BSA对ADSCs增殖和迁移能力的抑制作用,改善CML-BSA对ADSCs凋亡的促进作用,增加VEGF的分泌,提高其血管新生能力(P<0.05)。结论 CMLs能抑制ADSCs的增殖和迁移能力,促进其凋亡,抑制其血管新生能力。DH能改善CMLs的作用。

关键词：丹红注射液脂肪干细胞晚期糖基化终产物血管新生

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移植肝细胞增殖与分化的转录调控

中华肝脏病杂志 2005年第9期13卷 712-714页

作者：贺治青曾欣林勇谢渭芬第二军医大学长征医院消化内科上海200003

近年来一系列动物及临床实验结果已肯定了肝细胞移植(hepatocyte transplantation,HT)技术治疗急慢性肝功能衰竭及肝脏功能基因缺陷所致代谢性疾病的疗效,但移植肝细胞在体内较低的分化和增殖水平制约了HT的临床应用,已有研究表明利用... 详细信息

近年来一系列动物及临床实验结果已肯定了肝细胞移植(hepatocyte transplantation,HT)技术治疗急慢性肝功能衰竭及肝脏功能基因缺陷所致代谢性疾病的疗效,但移植肝细胞在体内较低的分化和增殖水平制约了HT的临床应用,已有研究表明利用基因修饰等技术可有效改善供体肝细胞某些功能.

关键词：基因表达调控细咆分化肝细咆肝细胞增殖肝细胞移植转录调控分化慢性肝功能衰竭细胞生物学活性移植肝细胞

血清剥夺促进成纤维细胞向内皮细胞转分化的体外研究

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第二军医大学学报 2017年第5期38卷 602-608页

作者：赵晓峰贺治青吴宗贵梁春第二军医大学长征医院心血管内科上海200003

目的模拟体内急性心肌梗死缺血缺氧微环境,探讨血清剥夺是否能激活心肌成纤维细胞向内皮细胞转分化。方法取新鲜分离的C57BL/6新生小鼠心脏组织,获取成纤维细胞进行培养,用白血病抑制因子(LIF)促进成纤维细胞自我更新、长程维持干性和... 详细信息

目的模拟体内急性心肌梗死缺血缺氧微环境,探讨血清剥夺是否能激活心肌成纤维细胞向内皮细胞转分化。方法取新鲜分离的C57BL/6新生小鼠心脏组织,获取成纤维细胞进行培养,用白血病抑制因子(LIF)促进成纤维细胞自我更新、长程维持干性和抑制其向终末分化。将第3代成纤维细胞分为:对照组[DMEM+10%胎牛血清(FBS)培养]、血清剥夺24 h组(不含FBS的DMEM培养24 h)、血清剥夺48 h组(不含FBS的DMEM培养48 h)、血清剥夺72 h组(不含FBS的DMEM培养72 h)。经过不同处理后,采用q PCR法检测各组细胞谱系特异性基因的表达变化,采用体外血管新生实验和Dil-Ac-LDL吞噬实验检测血清剥夺后成纤维细胞的功能学变化,采用ELISA法检测血清剥夺后成纤维细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的情况。结果血清剥夺不同时间组成纤维细胞形成血管分叉的数目与对照组相比均增加(P<0.05),但均未发现诱导细胞吞噬Dil-Ac-LDL的现象。与对照组比较,血清剥夺48 h组成纤维细胞中内皮特异性基因CD31和VE-herin的表达均升高(P<0.05);其中血清剥夺48 h组成纤维细胞中CD31的表达是对照组的13.7倍(P<0.05),血清剥夺72 h组是对照组的2倍(P<0.05)。ELISA检测结果显示,血清剥夺48h组成纤维细胞分泌的VEGF是对照组的7倍(P<0.05),血清剥夺72 h组是对照组的3.7倍(P<0.05)。结论血清剥夺可以激活心肌成纤维细胞向内皮细胞谱系的转分化。

关键词：成纤维细胞内皮细胞细胞转分化缺血性心脏病血管新生血清剥夺

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慢性乙型肝炎病毒感染与冠心病的相关性

第二军医大学学报 2018年第7期39卷 794-797页

作者：赵健望云魏博贺治青梁春海军军医大学(第二军医大学)长征医院心血管内科上海200003 海军军医大学(第二军医大学)长征医院影像诊断科上海200003 海军军医大学(第二军医大学)长征医院感染科上海200003

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(H B V)感染与冠心病的相关性,为冠心病的预防提供决策依据。方法纳入2013年1月至2017年6月在我院行冠状动脉计算机断层扫描血管造影(CTA)检查,且既往无冠心病史的健康体检者759例,按照乙型肝炎病毒表面抗原检... 详细信息

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(H B V)感染与冠心病的相关性,为冠心病的预防提供决策依据。方法纳入2013年1月至2017年6月在我院行冠状动脉计算机断层扫描血管造影(CTA)检查,且既往无冠心病史的健康体检者759例,按照乙型肝炎病毒表面抗原检查结果将其分为HBV感染组(38例,均为慢性HBV感染)和对照组(721例),比较两组冠状动脉病变情况,并分析慢性HBV感染与冠心病的相关性。结果经冠状动脉CTA检查,两组冠心病的患病率差异无统计学意义[21.05%(8/38)vs 28.02%(202/721),P>0.05]。HBV感染组的冠状动脉病变血管支数、斑块类型及斑块病变血管支分布与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。双变量相关分析结果显示慢性HBV感染与冠心病无相关关系(r=0.034,P>0.05)。结论慢性HBV感染与冠心病之间无临床相关性。

关键词：乙型肝炎病毒冠心病冠状动脉计算机断层扫描血管造影相关性

通心络下调RAGE-MAPK信号通路拮抗AGEs诱导的人内皮祖细胞内皮分化异常

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中国中医基础医学杂志 2014年第8期20卷 1062-1064页

作者：武双平贺治青袁国强王永恒梁春河北以岭医院石家庄050091 第二军医大学附属上海长征医院上海200003

目的:观察通心络对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导人内皮祖细胞(human endothelial progenitor cells,hEPCs)内皮分化的影响及其分子机制。方法:自健康人外周血体外培养hEPCs,给予AGEs和或不同浓度的通心... 详细信息

目的:观察通心络对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导人内皮祖细胞(human endothelial progenitor cells,hEPCs)内皮分化的影响及其分子机制。方法:自健康人外周血体外培养hEPCs,给予AGEs和或不同浓度的通心络(tongxinluo,TXL)刺激,首先观察其对置于体外matrigel环境中hEPCs内皮分化的影响,随后针对相关的受体分子信号通路进行干预,明确上述信号通路哪些参与TXL的保护作用。结果:1单纯TXL刺激即可显著提高hEPCs的内皮分化水平,并呈一定的剂量依赖性;2与AGEs刺激组比较,TXL干预并可显著改善AGEs导致的hEPCs内皮分化异常;3RAGE-MAPK通路介导了TXL的内皮分化保护作用。结论:TXL干预可通过下调RAGE-MAPK信号通路,显著改善AGEs介导的hEPCs内皮分化异常,这可能是TXL发挥其血管保护作用,特别是糖尿病病理环境下的重要机制之一。

关键词：通心络信号道路内皮祖细胞内皮分化 RAGE-MAPK

基于网络药理学探讨麝香通心滴丸治疗心力衰竭的潜在机制

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中西医结合心脑血管病杂志 2022年第1期20卷 11-18页

作者：权力牛文豪赵健张艳达贺治青梁春海军军医大学附属长征医院上海200003

目的应用网络药理学方法分析麝香通心滴丸治疗心力衰竭的潜在机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中药综合数据库(TCMID)筛选麝香通心滴丸潜在的活性成分与靶点,通过GeneCards数据库检索心力衰竭相关的靶点,采用STR... 详细信息

目的应用网络药理学方法分析麝香通心滴丸治疗心力衰竭的潜在机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中药综合数据库(TCMID)筛选麝香通心滴丸潜在的活性成分与靶点,通过GeneCards数据库检索心力衰竭相关的靶点,采用STRING数据库构建共有靶点的蛋白互作网络,最后应用R Studio的clusterProfiler包进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果根据口服生物利用度(OB)≥30%且类药性(DL)≥0.18为标准筛选出化合物92个有效成分。从GeneCards数据库中获得13194个与心力衰竭相关的靶基因,有效成分靶点与疾病靶点共筛选出140个共有基因。这些基因主要参与细胞对药物的反应、循环系统血管过程、对类固醇激素的反应、管径的调节、血管直径的调节等生物学过程。分子功能主要包括神经递质受体活性、G蛋白偶联氨受体活性、突触后神经递质受体活性、肾上腺素能受体活性等。活性物质主要作用于神经活动配体-受体相互作用、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、人巨细胞病毒感染等通路。结论麝香通心滴丸中的有效成分可能通过调节血管直径、改变激素作用、改善代谢等机制对心力衰竭产生治疗作用。

关键词：心力衰竭麝香通心滴丸网络药理学信号通路靶点作用机制

营卫调节方对兔血管外膜损伤致内膜增生性病变的干预作用

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上海医学 2010年第8期33卷 740-743,I0003页

作者：刘星梁春贺治青王华吴宗贵第二军医大学附属长征医院心内科上海200003

目的探讨营卫调节方在兔颈动脉外膜损伤致动脉粥样硬化中的作用。方法新西兰大白兔高脂喂养2周后,剔除血脂水平不高者,采用胶原酶消化+机械分离的方法建立兔单侧颈动脉外膜损伤模型,对侧行假手术。术后继续高脂饮食喂养,随机分为正常对... 详细信息

目的探讨营卫调节方在兔颈动脉外膜损伤致动脉粥样硬化中的作用。方法新西兰大白兔高脂喂养2周后,剔除血脂水平不高者,采用胶原酶消化+机械分离的方法建立兔单侧颈动脉外膜损伤模型,对侧行假手术。术后继续高脂饮食喂养,随机分为正常对照组、外膜损伤组以及营卫调节方+外膜损伤组,分别于术后1、2、4、8周处死,取目标颈动脉行苏木精-伊红染色观察动脉粥样硬化病变情况,采用免疫组织化学法检测血管局部病变成分,酶联免疫吸附试验检测组织及外周血中炎性因子水平。结果与外膜损伤组相比,营卫调节方+外膜损伤组的兔颈动脉内膜增生病变减轻,表现为外膜损伤2周后仅出现内膜轻度增生,损伤4～8周后内膜增生逐渐消退;此外,血管平滑肌细胞的迁移以及血管局部组织和循环中的白细胞介素-6及肿瘤坏死因子-α的水平也显著降低(P值均<0.05)。结论颈动脉外膜损伤结合高脂饲料饮食能建立动脉粥样硬化动物模型,营卫合剂治疗后可缩小斑块面积以及降低体内炎性因子水平,抑制动脉粥样硬化的进展。

关键词：营养调节方外膜损伤内膜新生新西兰兔

急性冠状动脉综合征患者外周血单个核细胞节律基因与病变严重程度的相关性

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上海医学 2012年第4期35卷 309-312页

作者：李颖贺治青伍峰梁春吴宗贵湖北省宜昌市中心人民医院心电图室三峡大学第一临床医疗系 443003 第二军医大学附属长征医院心内科

目的分析急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)节律基因表达水平的变化及其与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法选择2011年9月—2012年2月疑诊为冠状动脉性心脏病并行冠状动脉造影检查的85例住院患者,按临床症状、心... 详细信息

目的分析急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)节律基因表达水平的变化及其与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法选择2011年9月—2012年2月疑诊为冠状动脉性心脏病并行冠状动脉造影检查的85例住院患者,按临床症状、心电图、心肌酶谱及冠状动脉造影检查结果分为稳定型心绞痛(SAP)组(40例)和ACS组(45例),所有患者留取全血,经Ficoll离心分离PBMCs,体外培养过程中经血清撤离诱导节律性;采用定量聚合酶链反应检测相关节律基因的表达情况,再经Chronos-fit软件评估其节律性。采用Gensini积分评价冠状动脉病变严重程度。结果与SAP组比较,ACS组的PBMCs节律性表现为峰值时间改变且整体表达水平降低。Gensini积分与PBMCs节律基因Per1的峰值时间呈正相关(r=0.855,P<0.01),与其表达水平呈负相关(r=-0.753,P<0.05),与节律基因Rev-erbα的相关性则相反(r值分别为-0.721和0.832,P值均<0.05)。结论 ACS患者PBMCs的节律性明显异常,且与冠状动脉病变的严重程度密切相关,这可能是患者整体节律性紊乱的表现,其将可能应用于临床患者冠状动脉病变的早期预测。

关键词：急性冠状动脉综合征外周血单个核细胞节律基因

病理环境下血管内源性修复干细胞功能异常的机制及干预研究

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病理环境下血管内源性修复干细胞功能异常的机制及干预研究