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培养条件对重组青霉素G酰化酶表达及后翻译的影响

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药物生物技术 2014年第1期21卷 48-52页

作者：蒋咏梅贺望兴章文贤福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建福州350108

青霉素G酰化酶(PGA)具有良好的催化酰化/去酰化特性,广泛应用于半合成及β-内酰胺抗生素工业中。由于嗜柠檬酸克鲁沃尔氏菌(Kc)产生的PGA具有良好的适于工业应用的特性,因此,对Kc来源的PGA在重组菌BL21(DE3)中的表达进行产酶条件优化。... 详细信息

青霉素G酰化酶(PGA)具有良好的催化酰化/去酰化特性,广泛应用于半合成及β-内酰胺抗生素工业中。由于嗜柠檬酸克鲁沃尔氏菌(Kc)产生的PGA具有良好的适于工业应用的特性,因此,对Kc来源的PGA在重组菌BL21(DE3)中的表达进行产酶条件优化。通过调整培养基装量、培养温度、起始pH值及诱导剂的浓度,结合对细胞生长量、蛋白表达量及酶活高低的检测,以期得到产生活性PGA的最优条件。发现起始pH值为7.0,装量30 mL,30℃培养,1.0 mmol/L IPTG诱导6 h时,菌浓为16.83,总酶活达到27 905 U/L,单位酶活1 658 U/L/OD600的最佳结果。通过分析培养条件对PGA蛋白表达量(SDS聚丙烯凝胶电泳)和酶活的影响,发现PGA前体表达后的后翻译过程是产生活性酶的关键因素,该结果将为后期研究和工业应用提供重要参考依据。

关键词：青霉素G酰化酶培养条件表达酶活后翻译聚丙烯酰胺凝胶电泳

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适合茶枝屑代料栽培的优良食用菌菌株筛选

江苏农业科学 2021年第11期49卷 110-115页

作者：贺望兴石旭平谢小群郭金蔡翔李琛江西省蚕桑茶叶研究所/江西省茶叶质量与安全控制重点实验室江西南昌330203

为筛选到适宜茶枝屑代料栽培的食用菌优良菌株,对灵芝、平菇、香菇、杏鲍菇以及榆黄菇等11个食用菌菌株在茶枝屑和常规杂木屑栽培基质配方上的菌丝生长状况、产量和商品经济性状等筛选指标进行比较试验。结果表明,与杂木屑配方相比,平... 详细信息

为筛选到适宜茶枝屑代料栽培的食用菌优良菌株,对灵芝、平菇、香菇、杏鲍菇以及榆黄菇等11个食用菌菌株在茶枝屑和常规杂木屑栽培基质配方上的菌丝生长状况、产量和商品经济性状等筛选指标进行比较试验。结果表明,与杂木屑配方相比,平菇菌株在茶枝屑配方上的菌丝生长状况更好、产量更高、商品经济性状更优;灵芝菌株在茶枝屑栽培配方上除菌丝生长速度显著低于杂木屑配方外,其他菌丝生长状况指标、产量以及商品经济性状指标间均差异不显著,其他食用菌菌株在茶枝屑配方上的筛选指标均显著差于杂木屑配方组,因此以灵芝和平菇分别作为复筛菌株。菌株复筛试验结果表明,在茶枝屑代料栽培配方上夏灰1号和灵芝92菌株菌丝长势最好,生长速度最快,分别为0.92、0.45 cm/d,产量最高,分别达436、45 g/棒,商品经济性状最优。经综合比较分析,筛选得到夏灰1号平菇以及灵芝92是适宜茶枝屑代料栽培的优良食用菌菌株。

关键词：茶枝屑代料栽培食用菌菌株筛选商品经济性状

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茶叶副产物资源化利用研究进展

蚕桑茶叶通讯 2017年第4期 32-34页

作者：贺望兴江西省蚕桑茶叶研究所 330202

近年来茶叶产业发展迅速,茶叶资源利用率不高,茶园效益提升困难;茶叶副产物资源化利用可以有效促进茶产业健康、可持续的发展。综述了近年来茶叶副产物资源化利用的最新研究进展,重点阐述了茶树花、茶渣、茶树枝的资源化利用现状。

关键词：茶叶副产物资源化利用研究进展

降解联苯菊酯微生物菌剂的制备及其稳定性测定

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江苏农业科学 2017年第19期45卷 257-260页

作者：胡桂萍石旭平管帮富张国彪贺望兴曹挥华庞博江西省蚕桑茶叶研究所江西南昌330202

为筛选适宜降解联苯菊酯降解菌,采用正交试验对克雷伯氏菌LB-1固体发酵基质进行筛选,在筛选结果的基础上,对LB-1固体发酵条件、储藏条件进行优化,并进行菌剂稳定性测定。结果表明,最佳载体配比为豆饼粉∶凹凸棒(90∶10)+10%麦麸+7%玉米... 详细信息

为筛选适宜降解联苯菊酯降解菌,采用正交试验对克雷伯氏菌LB-1固体发酵基质进行筛选,在筛选结果的基础上,对LB-1固体发酵条件、储藏条件进行优化,并进行菌剂稳定性测定。结果表明,最佳载体配比为豆饼粉∶凹凸棒(90∶10)+10%麦麸+7%玉米粉+3%茶渣;菌剂LB-1制备的最佳接种量为15%,最适发酵温度为30℃,最适发酵时间为30 h,最适烘干时间为36 h,此时菌剂的有效活菌数和降解率均最高。同时菌剂在避光、温度不高于25℃条件下90 d内可以保持较高降解活性。联苯菊酯微生物菌剂LB-1在优化后固体发酵培养基培养后降解性和稳定性高,可为今后产品的商品化奠定基础。

关键词：克雷伯氏菌农药降解联苯菊酯固体发酵

灵芝LaeA基因的电子克隆、表达及生物信息学分析

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华北农学报 2024年第2期39卷 47-54页

作者：贺望兴李文金蒋咏梅童忠飞陈华玲李延升谢小群李琛江西省经济作物研究所江西南昌330203 福建师范大学生命科学学院福建福州350001

为通过电子克隆得到灵芝LaeA基因序列,分析其基因序列信息,并初步探究其调控功能。采用电子克隆的方法,以已知桔青霉的LaeA蛋白序列为模板,在灵芝的EST数据库中进行序列相似性搜索比对(Blast),经序列拼接、序列验证和序列延伸等电子克... 详细信息

为通过电子克隆得到灵芝LaeA基因序列,分析其基因序列信息,并初步探究其调控功能。采用电子克隆的方法,以已知桔青霉的LaeA蛋白序列为模板,在灵芝的EST数据库中进行序列相似性搜索比对(Blast),经序列拼接、序列验证和序列延伸等电子克隆方法获得灵芝LaeA基因的cDNA序列;采用生物信息学软件对LaeA基因编码蛋白质的基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、信号肽、二级结构、三级结构及进化关系等方面进行了预测和分析。结果表明,LaeA基因全长1 134 bp,编码378个氨基酸,蛋白分子质量为42.895 3 ku,存在于细胞质中,是亲水性蛋白;LaeA蛋白结构主要由47.88%无规则卷曲、33.33%α-螺旋和18.78%延伸链组成,有S-腺苷甲硫氨酸结合位点,属于AdoMet_MTases超家族蛋白;系统进化分析结果显示,LaeA蛋白与云芝、污叉丝孔菌等白腐担子菌类的亲缘关系较为亲近;qRT-PCR结果表明,LaeA基因在灵芝细胞液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养方式。推测LaeA蛋白作为1种甲基转移酶蛋白,通过参与组蛋白的甲基化修饰,进而影响基因簇的表达水平。

关键词：灵芝 LaeA 电子克隆生物信息学

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茶树根际固氮菌研究进展

蚕桑茶叶通讯 2016年第6期 28-31页

作者：贺望兴胡桂萍石旭平李琛邓鹏江西省蚕桑茶叶研究所 330202

随着绿色生态农业兴起和发展,茶产业进入绿色、生态、环保的产业升级和转换期。生物固氮是指固氮菌将大气中的氮气还原成氨的过程,在绿色生态农业可持续发展、化肥减量减施、环境生态保护等方面具有重要的意义。茶树根际固氮菌是指分布... 详细信息

随着绿色生态农业兴起和发展,茶产业进入绿色、生态、环保的产业升级和转换期。生物固氮是指固氮菌将大气中的氮气还原成氨的过程,在绿色生态农业可持续发展、化肥减量减施、环境生态保护等方面具有重要的意义。茶树根际固氮菌是指分布于茶树根际表面土壤环境中的一类具有固氮能力的微生物,有利于茶树的生长发育、品质提升以及茶树抗逆性增强等作用。从茶树根际固氮菌的多样性、影响因素以及对茶树的作用、研究技术等方面综述茶树根际固氮菌的研究进展,同时探讨了固氮菌在农业可持续发展中的应用前景。

关键词：茶树根际固氮菌研究进展

灵芝14-3-3蛋白基因的电子克隆与表达分析

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华北农学报 2013年第5期28卷 15-22页

作者：章文贤蒋咏梅贺望兴郭文燕黄晓菊郑素云福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建福州350108

通过电子克隆技术,获得14-3-3基因的cDNA序列全长,并采用生物信息学方法,借助电子计算机和相关的生物信息学软件,对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了... 详细信息

通过电子克隆技术,获得14-3-3基因的cDNA序列全长,并采用生物信息学方法,借助电子计算机和相关的生物信息学软件,对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了预测和分析。该cDNA编码蛋白由257个氨基酸组成,相对分子质量为29.014 5 kDa,亲水性和疏水性比较平衡,定位于细胞质,不存在信号肽,无跨膜螺旋区,且二级结构由6.23%无规则卷曲,66.54%α-螺旋和27.24%延伸链组成。同源比对分析显示,该酶基因编码的氨基酸序列与污叉丝孔菌、双孢菇和木耳等蘑菇类高等真菌中的14-3-3基因所编码的氨基酸序列高度同源。实时荧光定量PCR结果表明,灵芝14-3-3基因在液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养。

关键词：灵芝 14—3-3蛋白电子克隆生物信息学表达

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茶园不同生态环境下昆虫结构变化研究

蚕桑茶叶通讯 2021年第1期 30-32页

作者：毛平生朱运华欧阳雪灵贺望兴谢小群江西省蚕桑茶叶研究所 330202 江西省经济作物研究所 330202 江西省茶叶质量与安全控制重点实验室 330202

对高复合度香樟生态茶园、较高复合度的樱茶观光茶园、低复合度的银杏茶园和纯茶园的主要害虫及益虫进行的调查表明,不同复合程度的茶园全年益害虫消长规律不同。纯茶园从6月1日开始至9月底,害虫数量大于益虫数量,且有3个明显的峰值,是... 详细信息

对高复合度香樟生态茶园、较高复合度的樱茶观光茶园、低复合度的银杏茶园和纯茶园的主要害虫及益虫进行的调查表明,不同复合程度的茶园全年益害虫消长规律不同。纯茶园从6月1日开始至9月底,害虫数量大于益虫数量,且有3个明显的峰值,是治虫的高峰期。低复合度茶园,在6月中旬出现一个大的峰值,且害虫与益虫数量相当,其他时间益虫数量始终高于害虫数量。高复合度香樟生态茶园、较高复合度的樱花观光茶园中益虫数量远远高于害虫数量。说明不同生态环境的茶园,益虫与害虫数量有较大的差异性,复合程度大的茶园,益虫数量远高于害虫数量,也说明良好的茶园生态环境可以降低茶园害虫的数量,减少生物、化学防治次数,对提高茶叶质量安全、改善茶园生态环境十分有益。

关键词：茶园害虫茶园益虫昆虫结构

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一株茶园草甘膦降解菌的筛选与鉴定

蚕桑茶叶通讯 2018年第2期 35-38页

作者：贺望兴杨普香石旭平谢小群朱运华蔡翔江西省蚕桑茶叶研究所 330202

采用生物富集、农药驯化等方式从茶园草甘膦污染土壤中筛选出一株潜在降解菌株CGL-1。该菌株经过形态学观察以及构建系统进化树等方法,初步鉴定为微球菌属Micrococcus sp.。菌株CGL-1能在以草甘膦为唯一碳源的无机盐培养基中生长良好,... 详细信息

采用生物富集、农药驯化等方式从茶园草甘膦污染土壤中筛选出一株潜在降解菌株CGL-1。该菌株经过形态学观察以及构建系统进化树等方法,初步鉴定为微球菌属Micrococcus sp.。菌株CGL-1能在以草甘膦为唯一碳源的无机盐培养基中生长良好,对草甘膦的最高耐受浓度为1200 mg/L,显示对草甘膦具有较好的降解效能。草甘膦降解菌株的筛选有望为草甘膦的生物降解提供新的微生物资源。

关键词：茶园草甘膦降解菌筛选