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亲和色谱技术在药物分析中的应用进展

西安交通大学学报（医学版） 2017年第6期38卷 777-784页

作者：王嗣岑贺晓双西安交通大学药学院陕西西安710061 陕西省心血管药物工程技术研究中心陕西西安710061

亲和色谱是依靠键合在固定相上的配位体与生物活性目标分子间特异性的识别与可逆的亲和作用,实现生物分子选择性分离的一种液相色谱分析方法。该方法具有高选择性、高回收率等特点,可同时进行色谱分离及活性筛选,广泛应用于活性产物的... 详细信息

亲和色谱是依靠键合在固定相上的配位体与生物活性目标分子间特异性的识别与可逆的亲和作用,实现生物分子选择性分离的一种液相色谱分析方法。该方法具有高选择性、高回收率等特点,可同时进行色谱分离及活性筛选,广泛应用于活性产物的筛选、分离和纯化。本文简述了生物特效亲和色谱、印迹分子亲和色谱、染料配基亲和色谱等几种常用亲和色谱技术,综述了近年来亲和色谱在手性药物拆分、天然药物中活性组分筛选、活性蛋白分离纯化及药物-蛋白相互作用研究中的应用,并对其应用前景进行了展望。

关键词：亲和色谱药物分析手性药物拆分活性成分筛选药物蛋白相互作用生物大分子

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莲子心中3种主要生物碱含量测定及提取优化

中国药学杂志 2018年第22期53卷 1901-1907页

作者：隋月贺晓双王嗣岑西安交通大学医学部药学院西安710061

目的对莲子心中莲心碱、甲基莲心碱和异莲心碱进行含量测定及超声波提取工艺优化。方法建立高效液相色谱法(HPLC)分离测定目标生物碱,利用Box-Behnken响应面设计对提取时间,提取剂浓度和料液比进行优化。结果方法学验证表明,对应浓度范... 详细信息

目的对莲子心中莲心碱、甲基莲心碱和异莲心碱进行含量测定及超声波提取工艺优化。方法建立高效液相色谱法(HPLC)分离测定目标生物碱,利用Box-Behnken响应面设计对提取时间,提取剂浓度和料液比进行优化。结果方法学验证表明,对应浓度范围内,3种生物碱线性关系较好(r^2> 0. 999),检测限在0. 17～0. 69μg·m L^(-1)之间,加标回收率在97. 06%～104. 12%之间,相对标准偏差为0. 08%～0. 87%(n=6)。响应面设计获得最优提取条件为料液比1∶30. 3,乙醇浓度69. 8%,超声时间29. 0 min,得到莲子心生物碱总提取量为(14. 82±0. 42) mg·g^(-1)。结论本试验建立的HPLC分析方法灵敏度高,重现性好,可用于目标生物碱的含量测定,响应面设计所获的最佳提取条件经验证合理,可以有效地提高莲子心中生物碱的提取量。

关键词：莲子心生物碱高效液相色谱法超声波提取响应曲面法

中心切割二维液相色谱同时测定牛奶中的蛋白质、人工添加剂和香精

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中心切割二维液相色谱同时测定牛奶中的蛋白质、人工添加剂和香精

细胞膜色谱法用于药物与受体相互作用研究进展

第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：陈亮贺晓双张平侯晓芳王嗣岑西安交通大学药学院

牛奶主要由蛋白质、脂肪、脂质、维生素、多糖和一些矿物质组成。一些商家为了使牛奶的外观、色泽、香味更加诱人,常在牛奶中加入一些人工添加剂和香精,而这些是不允许添加的。因此建立一种快速、准确的方法来测定牛奶中各种蛋白质,人... 详细信息

牛奶主要由蛋白质、脂肪、脂质、维生素、多糖和一些矿物质组成。一些商家为了使牛奶的外观、色泽、香味更加诱人,常在牛奶中加入一些人工添加剂和香精,而这些是不允许添加的。因此建立一种快速、准确的方法来测定牛奶中各种蛋白质,人工添加剂以及香精尤为重要。相对于单维液相色谱技术,二维液相色谱被认为拥有更高的分辨率、更大的峰容量和更快的分析速度,亦更适用于复杂样品的分析1]。本文建立了一种可以同时测定牛奶中的蛋白质(α-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-酪蛋白、β-乳球蛋白B和β-乳球蛋白A)、人工添加剂(糖精钠、苯甲酸、山梨酸)和香精(麦芽酚、乙基麦芽酚、乙基香草醛、香草醛)12种成分的中心切割二维液相色谱法。分别就固定相、流动相、接口技术和切割时间各因素对二维液相色谱系统进行了考察和优化2]。最终以Venusil XBP-C4柱作为D色谱柱,C18柱作为富集柱,Hypersil ODS-2 C18柱作为D分析柱。极性较大的人工添加剂和香味素在1D柱中保留弱,通过六通阀切换至捕集柱捕集、浓缩进入2D柱进行分离与分析。蛋白质在1D柱中有更强的保留,可在1D柱中进行分离与分析。对12种待测物的线性关系,检测限、定量限,日内、日间精密度,回收率等进行考察。结果表明线性关系良好(r2≥0.9990),日内、日间精密度较高,5种蛋白质的回收率范围为86.4%-105.2%,人工添加剂和香精的回收率范围为89.6%-105.4%。测得某品牌牛奶中α-酪蛋白、α-乳白蛋白、β-酪蛋白的含量分别为2.265g/100g,0.028g/100g和0.9g/100g,蛋白质总含量为3.19 g/100g,通过凯氏定氮法测得蛋白质总量为2.96g/100g,标示量为3.1g/100g,三者数据的RSD为3.0%。在本方法中,样品仅需经过稀释、过滤两个简单预处理步骤便可进样测定,与传统的样品预处理方法相比较,省去很多萃取、浓缩能步骤,整个分析时间仅需30分钟,显著提高分析效率。

关键词：中心切割二维液相色谱牛奶蛋白质人工添加剂

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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药学进展 2015年第12期39卷 882-888页

作者：侯晓芳杜晖贺晓双张平王嗣岑西安交通大学药学院陕西西安710061 西安市食品药品检验所陕西西安710054

药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用,其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响药物研发的效率。细胞膜色谱法是贺浪冲教授于1996年提出的一种基于生物色谱的方法,用于复杂体系活性成分筛选以及药物与受体相互... 详细信息

药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用,其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响药物研发的效率。细胞膜色谱法是贺浪冲教授于1996年提出的一种基于生物色谱的方法,用于复杂体系活性成分筛选以及药物与受体相互作用研究近20年。对细胞膜色谱法用于药物受体相互作用的研究进展进行综述。

关键词：细胞膜色谱法受体相互作用

左归丸加减联合地屈孕酮对肾阴虚证生育期排卵障碍异常子宫出血患者的临床疗效

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中成药 2024年第7期46卷 2481-2484页

作者：贺晓霞西南医科大学附属中医医院四川泸州646000

目的探讨左归丸加减联合地屈孕酮对肾阴虚证生育期排卵障碍异常子宫出血患者的临床疗效。方法100例患者随机分为对照组(45例)和观察组(48例),对照组给予地屈孕酮,观察组在对照组基础上加用左归丸加减,疗程3个月经周期。检测临床疗效、... 详细信息

目的探讨左归丸加减联合地屈孕酮对肾阴虚证生育期排卵障碍异常子宫出血患者的临床疗效。方法100例患者随机分为对照组(45例)和观察组(48例),对照组给予地屈孕酮,观察组在对照组基础上加用左归丸加减,疗程3个月经周期。检测临床疗效、中医证候评分、FSH、LH、T、E_(2)、P、基础体温双相占比率、妊娠率、不良反应发生率变化。结果观察组总有效率高于对照组(P双相占比率、妊娠率水平高于对照组(P0.05)。结论左归丸加减联合地屈孕酮可安全有效地改善生育期排卵障碍异常子宫出血肾阴虚证临床症状,恢复自发排卵。

关键词：左归丸地屈孕酮异常子宫出血排卵障碍生育期肾阴虚

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稀土金属基涂层织物的制备与性能表征

塑料 2024年第5期53卷 48-52页

作者：贺晓亚江西服装学院教务处

利用稀土金属吸收存储光能并再次释放的特性，采用稀土铝酸锶发光粉与水性聚氨酯混合制备的涂层剂对棉织物进行涂覆，开发具有发光功能的服用织物。研究表明，稀土铝酸锶发光粉与水性聚氨酯混合液的黏度与成膜后的断裂强度均随着稀土铝... 详细信息

利用稀土金属吸收存储光能并再次释放的特性，采用稀土铝酸锶发光粉与水性聚氨酯混合制备的涂层剂对棉织物进行涂覆，开发具有发光功能的服用织物。研究表明，稀土铝酸锶发光粉与水性聚氨酯混合液的黏度与成膜后的断裂强度均随着稀土铝酸锶发光粉含量的增加呈下降的趋势，当稀土铝酸锶发光粉含量大于20%时，下降速率逐渐增大；当稀土铝酸锶发光粉含量为30%时，涂层织物的团聚现象明显，因此，需要控制稀土铝酸锶发光粉含量在25%以内，可兼顾涂层织物的服用性能。涂层织物的荧光光谱在490 nm处，顶峰位置随着稀土铝酸锶发光粉含量的增加向左迁移。稀土铝酸锶发光粉含量的增加能提高涂层织物的亮度，改善余辉衰减，染色限制了涂层织物的余辉性能。因此，合理控制稀土铝酸锶发光粉的含量有利于稀土金属基涂层织物的开发与应用。

关键词：稀土荧光光谱余辉断裂强力悬垂性折皱回复性染色

陆在易三首女高音艺术歌曲演唱风格与审美特征

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陆在易三首女高音艺术歌曲演唱风格与审美特征

作者：贺晓菲太原师范学院

学位级别：硕士

功能磁共振评估宫内发育迟缓仔鼠肾脏微观结构及灌注改变

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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中国当代儿科杂志 2024年第3期26卷 289-296页

作者：梁灿李莹贺晓日中南大学湘雅二医院新生儿科中南大学湘雅二医院新生儿疾病研究室湖南长沙410011

目的探讨体素内不相干运动(intravoxel incoherent motion,IVIM)、纵向弛豫时间定量成像(T1 mapping)、横向弛豫时间定量成像(T2 mapping)等功能磁共振成像技术评估宫内发育迟缓(intrauterine growth restriction,IUGR)仔鼠的肾脏微观结构及灌注改变的价值。方法通过孕期低蛋白饮食法建立IUGR仔鼠模型。低蛋白饮食孕鼠所产仔鼠随机分为IUGR8周组、IUGR12周组,正常饮食孕鼠所产仔鼠随机分为正常8周组、正常12周组,各组n=8。比较各组仔鼠肾脏皮质、髓质的表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)、真实扩散系数(D_(t))、伪扩散系数(D*)、灌注分数(f)、T1值、T2值,以及血肌酐、血尿素氮水平。结果IUGR 12周组肾脏髓质Dt值高于IUGR 8周组,IUGR 12周组肾脏髓质D*值低于正常12周组与IUGR 8周组(P0.05)。各组血肌酐及血尿素氮含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。IUGR 8周组仔鼠肾脏可见肾小球增生肥大,未见明显纤维化改变;IUGR 12周组仔鼠肾脏可见肾小球萎缩,囊腔狭窄,间质出现炎性细胞浸润及纤维化。结论IVIM磁共振成像可用于评估及动态观察IUGR仔鼠肾脏微观结构及灌注损伤,T1 mapping磁共振成像可用于评估IUGR仔鼠肾脏损伤,T1 mapping联合T2 mapping磁共振成像可进一步分辨IUGR仔鼠的肾脏纤维化。

关键词：宫内发育迟缓肾脏体素内不相关运动纵向弛豫时间定量成像横向弛豫时间定量成像功能磁共振大鼠

丹酚酸B-葛根素联用对氧糖剥夺/复氧损伤的SH-SY5Y神经细胞焦亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 54-63页

作者：涂舒欣王艳贺晓丽中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的:基于细胞焦亡探讨丹酚酸B和葛根素合用对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤的SH-SY5Y神经细胞的保护作用及机制。方法:利用SH-SY5Y细胞构建OGD/R损伤模型,设立正常对照组(control)、模型组(OGD/R)、10μmol·L^(-1)丹酚酸B组(salvianolic acid B,Sal B)、100μmol·L^(-1)葛根素组(puerarin,Pue)、10μmol·L^(-1)丹酚酸B和100μmol·L^(-1)葛根素合用组(SP)及10μmol·L^(-1)NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950组。除正常组外,其余各组细胞在氧糖剥夺6 h后迅速复糖复氧12 h进行OGD/R造模。采噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,光学显微镜下观测细胞形态,分光光度计法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,Hoechst/PI染色检测细胞膜损伤情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、凋亡斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达水平,免疫荧光检测NLRP3和caspase-1蛋白表达的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和活化半胱氨酸蛋白酶1(cleaved caspase-1)蛋白表达的变化。结果:与正常组比较,模型组SHSY5Y细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞形态受损,培养上清中LDH渗漏率显著提高(P<0.01),细胞膜破损,细胞中NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β的mRNA表达水平显著提高(P<0.01),IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和cleaved caspase-1蛋白的表达水平显著提高(P<0.01)。与模型组相比,丹酚酸B、葛根素与丹酚酸B和葛根素合用均能显著提高OGD/R损伤后SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.01);与单用组相比,合用组具有更好的效果(P<0.01)。与模型组相比,丹酚酸B和葛根素合用及MCC950均能改善细胞形态,降低细胞上清液LDH的渗漏(P<0.05),减轻细胞膜损伤水平,降低SH-SY5Y细胞NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),降低IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和cleaved caspase-1蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:结果表明,丹酚酸B和葛根素合用能减轻OGD/R对SH-SY5Y细胞造成的损伤,这可能与其能够抑制细胞焦亡相关。

关键词：缺血性脑卒中氧糖剥夺/复氧模型丹酚酸B 葛根素细胞焦亡