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慢性骨髓增殖性疾病JAK2基因突变发生情况及其靶向治疗的研究

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慢性骨髓增殖性疾病JAK2基因突变发生情况及其靶向治疗的研究

作者：费海荣苏州大学

学位级别：硕士

【背景与目的】JAK/STST信号转导途径在多种细胞生长、活化、分化和凋亡等功能表达中发挥着十分重要的作用,它可以促发带有酪氨酸残基的蛋白发生磷酸化,产生激酶活化的级联反应,并将活化的信号传导给下游的其他分子,引发一系列基因和蛋... 详细信息

【背景与目的】JAK/STST信号转导途径在多种细胞生长、活化、分化和凋亡等功能表达中发挥着十分重要的作用,它可以促发带有酪氨酸残基的蛋白发生磷酸化,产生激酶活化的级联反应,并将活化的信号传导给下游的其他分子,引发一系列基因和蛋白水平的变化。近年来国外学者发现PV、ET、IMF这一类的慢性骨髓增殖性疾病存在一致性的基因突变-JAK2V617F,这一发现对于理解这一类疾病的分子机理具有重要的意义,对于其诊断、鉴别诊断具有指导意义,同时为其靶向治疗提供了新的思路。鉴于国内尚无类似的报道,我们检测了137例MPD患者的JAK2V617F突变发生情况,研究其在国内CMPD患者中的分布,建立可行可信的方法用于临床检测,同时,通过体外实验研究酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼及JAK2激酶抑制剂AG490在这类疾病的靶向治疗中的潜能。【方法】在实验的第一部分中,我们检测了137例MPD患者的JAK2V617F突变发生情况。137例MPD患者为我院2000年4月至2006年4月就诊患者。按照WHO分型诊断标准,其中PV患者57例,ET患者68例,IMF患者12例,20例正常对照为我院体检正常者。主要研究方法为:(1)基因组DNA提取;(2)等位基因特异性PCR方法扩增JAK2基因第12号外显子,通过对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳的方法筛选出JAK2V617F阳性患者,对部分阳性患者的PCR产物回收后进行测序;(3)分析患者的临床及实验室资料以了解JAK2V617F阳性患者的细胞遗传学特征及临床特征;在实验的第二部分中,我们将不同浓度的伊马替尼、AG490作用于HEL细胞系和K562细胞系,在72小时用CCK-8kit试剂盒检测增殖抑制率,流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响。【结果】1.137例MPD患者共检出90例JAK2V617F阳性,总阳性率65.69%;其中PV57例,阳性率73.68%;ET68例,阳性率58.82%;IMF12例,阳性率66.67%;PV及ET患者JAK2V617F阳性组年龄比阴性组年龄高,差别有显著意义(P<0.05)。115例进行过染色体检查的病人中7例存在核型异常,其中JAK2V617F阳性5例,阳性率为71.43%;染色体核型正常者108例,JAK2V617F阳性74例,阳性率68.51%;两组差别无统计学意义。ET患者JAK2V617F阳性组白细胞计数较阴性组高,差别有显著意义(P<0.05);阳性组血红蛋白与血小板计数较阴性组高,但差别无显著意义。2.伊马替尼可显著抑制HEL细胞系的生长,呈剂量依赖性。其作用于HEL细胞系的IC50较K562细胞明显增高;AG490在50μM时可显著诱导两种细胞凋亡,其在72h时诱导K562细胞系凋亡的细胞占56.2%,诱导HEL细胞系凋亡的细胞占60.6%。低浓度AG490对细胞系作用效果不明显。【结论】1.中国PV、ET、IMF患者中JAK2V617F发生率较高,其发生与年龄存在相关性,年龄大者较易发生;2.进行JAK2V617F检测有助于CMPD的诊断;3.等位基因特异性PCR方法检测JAK2基因突变方法简单,结果可靠,适用于临床开展。4.存在染色体核型组JAK2V617F发生率较核型正常组略高。***2V617F突变阳性组患者外周血细胞计数较阴性组高。6.伊马替尼对HEL细胞系具有明显的抑制增殖作用和促进凋亡作用,呈剂量依赖性,但其IC50较作用于K562细胞高。7.50μM的AG490对HEL、K562细胞系具有明显的促进凋亡作用。

关键词：慢性骨髓增殖性疾病基因,JAK2 突变伊马替尼 AG490 靶向治疗

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低剂量利妥昔单抗治疗移植后膜性肾病一例

中华内科杂志 2014年第3期53卷 216-217页

作者：费海荣李颖王玲袁成录山东省青岛市中心医院血液科 266000

患者女，54岁。2009年6月确诊为慢性粒单核细胞白血病，口服羟基脲治疗。2009年10月3日行同胞人类白细胞抗原（HLA）全相合异基因外周m造I札干细胞移植。预处理方案：马利兰3．2mg·kg^-1·d^-1,4d；环磷酰胺50mg·kg^-1·d^-1，2d；共... 详细信息

患者女，54岁。2009年6月确诊为慢性粒单核细胞白血病，口服羟基脲治疗。2009年10月3日行同胞人类白细胞抗原（HLA）全相合异基因外周m造I札干细胞移植。预处理方案：马利兰3．2mg·kg^-1·d^-1,4d；环磷酰胺50mg·kg^-1·d^-1，2d；共回输单个核细胞10．99×10a/kg；应用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）、环孢素、甲氨蝶呤预防移植物抗宿主病（GVHD）；移植后第16天（＋16d）造血重建，

关键词：单抗治疗移植后膜性肾病慢性粒单核细胞白血病利妥昔低剂量抗胸腺细胞球蛋白人类白细胞抗原

异基因造血干细胞移植后肾脏病变3例临床分析

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山东医药 2011年第39期51卷 65-66页

作者：王玲史春雷黄俊彦费海荣青岛市中心医院山东青岛266042

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(HSCT)后肾脏病变的诊断与治疗。方法对3例异基因造血干细胞移植相关肾脏病变患者的诊治情况进行分析。结果 3例患者肾脏病变的原因分别为药物损害、白血病复发合并严重感染、慢性移植物抗宿主病膜... 详细信息

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(HSCT)后肾脏病变的诊断与治疗。方法对3例异基因造血干细胞移植相关肾脏病变患者的诊治情况进行分析。结果 3例患者肾脏病变的原因分别为药物损害、白血病复发合并严重感染、慢性移植物抗宿主病膜性肾病。例1调整免疫抑制剂、例3联合应用免疫抑制剂骁悉及甲基泼尼松龙,分别无病存活36、23个月;例2治疗无效死亡。结论 HSCT患者出现蛋白尿等肾脏病变时,应及时明确发病原因,采用相应的诊疗措施,必要时应及时进行肾穿刺活检;联合应用免疫抑制剂疗效较好。

关键词：蛋白尿肾病综合征异基因造血干细胞移植移植物抗宿主病

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可见光通信的研究与发展

微型机与应用 2015年第15期34卷 11-14页

作者：费海荣南京邮电大学通信与信息工程学院江苏南京210003

可见光通信是一种新型的无线通信技术。传统的无线通信技术例如蓝牙、Wi Fi等采用射频信号传输数据信息,而可见光通信在发射端采用白光发光二极管作为光源,在接收端采用光电传感器作为检测器进行数据传输。本文全面分析了可见光通信的优... 详细信息

可见光通信是一种新型的无线通信技术。传统的无线通信技术例如蓝牙、Wi Fi等采用射频信号传输数据信息,而可见光通信在发射端采用白光发光二极管作为光源,在接收端采用光电传感器作为检测器进行数据传输。本文全面分析了可见光通信的优势,列举了可见光通信技术在国内外的应用研究与发展,并给出了目前可见光通信发展中面临的一些挑战。

关键词：可见光通信智能交通室内定位无线接入

30例早期骨髓增殖性疾病疑似患者JAK2V617F和MPLW515L／K突变基因的表达

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中华血液学杂志 2008年第9期29卷 611-614页

作者：范峥张日沈益民费海荣朱子玲岑建农江苏省血液研究所、苏州大学附属第一医院血液科、卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的探讨BPC及Hb水平轻微升高，但未达真性红细胞增多症（PV）或原发性血小板增多症（ET）诊断标准的患者JAK2V617F及MPLW515L的表达情况与某些临床特征的相关性在早期骨髓增殖性疾病（MPD）中的诊断价值。方法、采用等位基因特异性PCR... 详细信息

目的探讨BPC及Hb水平轻微升高，但未达真性红细胞增多症（PV）或原发性血小板增多症（ET）诊断标准的患者JAK2V617F及MPLW515L的表达情况与某些临床特征的相关性在早期骨髓增殖性疾病（MPD）中的诊断价值。方法、采用等位基因特异性PCR方法，检测30例BPC或Hb值偏高的早期MPD疑似患者JAK2V617F和MPLW515L／K基因表达，并定期随访其病情进展。结果30例患者中有14例（46．7％）存在JAK2V617F突变，且此14例患者中有5例（35．7％）曾有血栓史；30例患者中无一例存在MPLW515L表达；有效随访22例，JAK2V617F阳性12例，阴性10例，12例阳性患者经过6至24个月后均发展为典型的MPD，而10例阴性患者只有2例发展成MPD。结论JAK2V617F阳性表达有可能作为诊断早期MPD的重要依据。

关键词：基因 JAK2V617F MPLW515L/K 突变骨髓增殖性疾病

骨髓增殖性疾病137例患者JAK2基因突变的研究

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中华内科杂志 2007年第4期46卷 271-273页

作者：费海荣张日陈苏宁潘金兰岑建农薛永权苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 215006

目的探讨信号分子 JAK2基因突变——JAK2V617F在骨髓增殖性疾病(MPD)患者中的发生情况及诊断价值。方法采用等位基因特异性 PCR 方法及序列测定,检测137例 MPD 患者骨髓及外周血单个核细胞 JAK2基因第12号外显子,研究 JAK2V617F 的发生... 详细信息

目的探讨信号分子 JAK2基因突变——JAK2V617F在骨髓增殖性疾病(MPD)患者中的发生情况及诊断价值。方法采用等位基因特异性 PCR 方法及序列测定,检测137例 MPD 患者骨髓及外周血单个核细胞 JAK2基因第12号外显子,研究 JAK2V617F 的发生情况,并结合细胞遗传学及分子生物学等检查结果分析其诊断价值。结果 137例 MPD 患者共检出90例 JAK2V617F 阳性,总阳性率65.7%;其中真性红细胞增多症(PV)57例,阳性率73.7%(42/57);原发性血小板增多症(ET)68例,阳性率58.8%(40/68);特发性骨髓纤维化(IMF)12例,阳性率66.7%(8/12);PV 及ET 患者突变型平均年龄高于野生型(P<0.05)。115例进行过染色体检查,其中7例存在核型异常,突变型5例,阳性率为71.4%(5/7);染色体核型正常者108例,突变型74例,阳性率68.5%;两组差异无统计学意义。结论 MPD 患者中 JAK2V617F 发生率较高,其发生与年龄相关,突变型平均年龄高于野生型。

关键词：骨髓增殖性疾病突变基因 JAK2

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基于态势感知的OTT智能调度研究与实践

江苏通信 2023年第1期39卷 49-54,63页

作者：顾一泓施益峰屠智玮秦磊费海荣中国移动通信集团江苏有限公司

针对现网OTT业务传统调度系统存在的痛点,从运营商的角度提出了一种基于态势感知的智能调度设想,构建了智能调度系统的框架,搭建了智能调度系统原型并投入现网应用,极大提升了OTT业务调度的智能化和精准度,进一步增强OTT业务系统整体运... 详细信息

针对现网OTT业务传统调度系统存在的痛点,从运营商的角度提出了一种基于态势感知的智能调度设想,构建了智能调度系统的框架,搭建了智能调度系统原型并投入现网应用,极大提升了OTT业务调度的智能化和精准度,进一步增强OTT业务系统整体运维和运营能力。

关键词： OTT 互联网电视智能调度态势感知

肥大细胞白血病合并嗜酸性粒细胞增多1例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2022年第5期43卷 420-423页

作者：孙玲洁黄俊霞王茜茜侯方许宏赵洪国王伟费海荣史雪青岛大学附属医院血液科青岛266003

肥大细胞白血病(mast cell leukemia, MCL)是系统性肥大细胞增生症(systemic mastocytosis, SM)中罕见的一种类型。2016年的WHO造血与淋巴组织肿瘤分类将SM分为五种亚型[1]:惰性SM(indolent SM, ISM)、冒烟型SM(smoldering SM, SSM)、SM伴血液系统肿瘤(SM with associated hematologic neoplasm, SM-AHN)、侵袭性SM(aggressive SM, ASM)和MCL。MCL病情进展快, 诊断困难, 而合并嗜酸性粒细胞增多又增加了MCL诊断和治疗的难度。现报告我院新近诊断的一例MCL合并嗜酸性粒细胞增多患者并对相关文献进行复习, 以提高对此罕见疾病诊疗的认识。

关键词：嗜酸性粒细胞增多肥大细胞白血病疾病诊疗淋巴组织肿瘤病情进展 neoplasm 血液系统肿瘤侵袭性

地西他滨联合CAG方案治疗急性髓系白血病22例

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山东医药 2014年第35期54卷 101-102页

作者：费海荣李颖王媛媛张希远史春雷王玲青岛市中心医院山东青岛266000

复发、难治性急性髓系白血病（ AML ）是血液病治疗的难题，其再缓解率及长期生存率低，病死率高，且治疗手段有限［1］。地西他滨（5-氮杂-2-脱氧胞嘧啶）是一种天然脱氧胞苷酸的腺苷类似物，在骨髓增生异常综合征（ MDS ）治疗中有明... 详细信息

复发、难治性急性髓系白血病（ AML ）是血液病治疗的难题，其再缓解率及长期生存率低，病死率高，且治疗手段有限［1］。地西他滨（5-氮杂-2-脱氧胞嘧啶）是一种天然脱氧胞苷酸的腺苷类似物，在骨髓增生异常综合征（ MDS ）治疗中有明显优势，近年来相继应用于白血病的治疗。2010年12月～2014年1月，我们采用地西他滨联合CAG方案治疗AML 22例，取得较好效果。现报告如下。

关键词：难治性急性髓系白血病 CAG方案地西他滨治疗骨髓增生异常综合征脱氧胞嘧啶长期生存率腺苷类似物