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斑鳢ghr基因克隆、表达分析及性类固醇激素诱导的响应

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农业生物技术学报 2024年第6期32卷 1371-1384页

作者：吴玉霞张啸天张扬赵建罗青刘海洋费树站陈昆慈欧密中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部热带亚热带水产种质资源利用与养殖重点实验室上海海洋大学水产与生命学院湖南科技大学生命科学与健康学院

生长激素(growth hormone, GH)-胰岛素样生长因子(insulin-like growth, IGF)轴是调控鱼类生长的主要内分泌轴线。为探讨生长激素受体(growth hormone receptor, GHR)在斑鳢(Channa maculata)雌、雄生长差异中的调控机制，本研究克隆了... 详细信息

生长激素(growth hormone, GH)-胰岛素样生长因子(insulin-like growth, IGF)轴是调控鱼类生长的主要内分泌轴线。为探讨生长激素受体(growth hormone receptor, GHR)在斑鳢(Channa maculata)雌、雄生长差异中的调控机制，本研究克隆了斑鳢ghr基因序列，分析了基因结构，解析了ghr在成鱼不同组织和不同发育时期肝脏中的表达模式及其对外源性类固醇激素刺激的响应表达。结果表明，斑鳢ghr基因cDNA序列全长2 602 bp，包括100 bp 5'-UTR,1 872 bp开放阅读框，编码623个氨基酸，630 bp 3'-UTR。斑鳢ghr基因组序列长18 118 bp，包含9个外显子和8个内含子，在5'-端上游鉴定到899 bp的侧翼序列，经分析发现，ghr 5'-端侧翼序列含有雄激素受体(androgen receptor, AR)、含溴结构域蛋白4 (bromodomaincontaining protein 4, BRD4)和抑制元素-1-沉默转录因子(repressor element-1-silencing transcription factor,REST)等多种转录因子结合位点。成鱼组织表达分析证实ghr在斑鳢肝脏中高表达，且在雄性中的表达极显著高于雌性(P<0.01)；不同发育时期表达分析表明，ghr基因在365 d的雄性斑鳢肝脏中表达量最高，且极显著高于同时期雌性斑鳢(P<0.01)。激素诱导实验显示，长期注射17α-乙炔基雌二醇(17α-ethynylestradiol, EE2)会抑制雌、雄斑鳢ghr基因的表达；长期注射17α-甲基睾丸酮(17α-methyltestosterone, MT)会抑制雌性斑鳢ghr的表达，但在一定时间内会促进雄性斑鳢ghr的表达。以上结果表明，GHR可能在斑鳢雌雄生长二态性中发挥作用，其表达受性类固醇激素调控，本研究为进一步探究GHR调控斑鳢生长发育的分子机理研究提供参考。

关键词：斑鳢生长激素受体基因(ghr) 基因克隆表达分析激素诱导

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乌鳢三种性腺组织的转录组比较分析

农业生物技术学报 2024年第2期32卷 379-395页

作者：黄苏静吴玉霞夏威威张啸天赵建李凯彬罗青刘海洋费树站陈昆慈欧密中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业农村部热带亚热带水产种质资源利用与养殖重点实验室上海海洋大学水产与生命学院

乌鳢(Channa argus)是我国重要的淡水经济鱼类，具有显著的性别二态性。为了研究乌鳢性别分化和性腺发育的分子机制，挖掘精、卵巢差异表达的功能基因和信号通路，本研究采用Illumina HiSeq 2000测序平台对6月龄乌鳢XX雌鱼(XX-F)、XY雄... 详细信息

乌鳢(Channa argus)是我国重要的淡水经济鱼类，具有显著的性别二态性。为了研究乌鳢性别分化和性腺发育的分子机制，挖掘精、卵巢差异表达的功能基因和信号通路，本研究采用Illumina HiSeq 2000测序平台对6月龄乌鳢XX雌鱼(XX-F)、XY雄鱼(XY-M)和YY超雄鱼(YY-M)的性腺组织进行了转录组测序(RNA-seq)分析。性腺组织两两样品的表达量相关性分析显示，XY-M精巢和YY-M精巢具有相似的表达模式，与XX-F卵巢表达模式相差甚远，与性腺的组织学结果一致。三种性腺组织的基因差异表达分析显示，XY-M vs XX-F中有12 317个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)，其中5 427个上调、6 890个下调；XY-M vs YY-M中有212个DEGs，其中59个上调、153个下调；YY-M vs XX-F中有11 282个DEGs，其中5 038个上调、6 244个下调。利用qRT-PCR对性别分化和性腺发育相关的DEGs进行验证，发现抗缪勒管激素2型受体(anti-müllerian hormone receptor type 2, Amhr2)、抗缪勒管激素(anti-müllerian hormone, Amh)、double sex和mab3相关转录因子1(double sex and mab3-related transcription factor1,Dmrt1)、性腺体细胞衍生因子(gonadal somatic cell-derived factor, Gsdf)等10个基因在XY-M和YY-M精巢中高表达，骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15, Bmp15)、性腺型芳香化酶基因Cyp19a1a(cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1a)、叉头框转录因子2(forkhead transcription factor gene 2, Foxl2)等9个基因在XX-F卵巢中高表达。qRT-PCR验证结果与转录组分析结果一致，说明Amhr2、Amh、Dmrt1和Gsdf等基因与乌鳢精巢发育调控相关，Bmp15、Cyp19a1a和Foxl2等基因与乌鳢卵巢发育调控相关。另外，对DEGs进行KEGG代谢通路富集分析，发现较多的DEGs富集在性别分化和代谢相关通路，如丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)、无翅型MMTV整合位点家族成员(wingless-type MMTV integration site family, Wnt)以及转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)信号通路等。本研究筛选出了大量乌鳢性别分化和性腺发育相关的候选基因和信号通路，为后续深入研究乌鳢的性别分化和性腺发育的分子机制及性别相关基因的功能提供了基础资料。

关键词：乌鳢转录组差异表达基因(DEG) 性别分化性腺发育

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贵阳市花溪河水生生物现状研究

凯里学院学报 2017年第3期35卷 115-120页

作者：费树站周贤君贵州大学贵州贵阳550025

2016年7月对贵阳市花溪河各河段的水生生物进行了初步调查.调查结果显示:花溪河现有浮游植物共5门34种,其中以硅藻门最多15种,占44.12%;绿藻门次之9种,占26.47%;蓝藻门5种,占14.71%;甲藻门和金藻门各2种,占11.76%.分布较广的藻类有针杆... 详细信息

2016年7月对贵阳市花溪河各河段的水生生物进行了初步调查.调查结果显示:花溪河现有浮游植物共5门34种,其中以硅藻门最多15种,占44.12%;绿藻门次之9种,占26.47%;蓝藻门5种,占14.71%;甲藻门和金藻门各2种,占11.76%.分布较广的藻类有针杆藻、脆杆藻、直链藻、草履波纹藻等.浮游动物在各采样点均未检测到.底栖动物为包括软体动物门和环节动物门在内16种,其中软体动物门占主要优势,以中国圆田螺、具角无齿蚌、狭萝卜螺和梨形环棱螺为优势种;环节动物门种类少,占总数的17.65%,其中以水丝蚓为优势种,分布较为广泛.大型水生植物共10科16种,沉水植物4科8种,挺水植物有6科8种,其中以苦草、水车前、轮叶黑藻、金鱼藻和喜旱莲子草分布较为广泛,为优势种.近年来花溪河水生生物种类资源有所下降,种群生态系统结构变得单一.

关键词：浮游植物浮游动物底栖动物大型水生植物种群结构

不同饲料原料对黄颡鱼表观消化率及消化酶活性的影响

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水生生物学报 2020年第2期44卷 357-363页

作者：费树站刘昊昆韩冬金俊琰杨云霞朱晓鸣解绶启中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室武汉430072 中国科学院大学北京100049

实验研究黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)对分别含有豆粕、发酵豆粕、菜粕和发酵菜粕的4种饲料以及这4种原料的干物质、蛋白、能量及氨基酸的表观消化率,为黄颡鱼饲料的配制提供科学依据,同时测定不同原料对消化道胰蛋白酶、糜蛋白酶... 详细信息

实验研究黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)对分别含有豆粕、发酵豆粕、菜粕和发酵菜粕的4种饲料以及这4种原料的干物质、蛋白、能量及氨基酸的表观消化率,为黄颡鱼饲料的配制提供科学依据,同时测定不同原料对消化道胰蛋白酶、糜蛋白酶及淀粉酶活性以及血液指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白及碱性磷酸酶的影响。结果显示:黄颡鱼对4种原料的干物质的表观消化率有显著差异,其利用率由高到低依次为豆粕、发酵豆粕、菜粕及发酵菜粕(P0.05)。黄颡鱼对各原料蛋氨酸和组氨酸的表观消化率没有显著性差异且低于83%(P>0.05),而对各原料中其他氨基酸的表观消化率均有显著性差异,在85%—98%之间,发酵菜粕各氨基酸的表观消化率显著低于其他3种原料(P中后肠>胃的趋势,糜蛋白酶活力在不同原料间无显著差异,糜蛋白酶活力呈现胃>前肠>中后肠的趋势,淀粉酶活性呈现前肠>胃>中后肠。血液指标谷草转氨酶在豆粕组显著高于其他原料组(P0.05)。综上所述,豆粕、发酵豆粕、菜粕和发酵菜粕均可以作为黄颡鱼饲料中优质的蛋白源。

关键词：黄颡鱼饲料原料表观消化率消化酶

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草海麦穗鱼的资源现状研究

凯里学院学报 2017年第6期35卷 75-77页

作者：费树站周贤君安苗林艳红贵州大学贵州贵阳550025

以生活在贵州威宁草海国家级自然保护区的麦穗鱼为研究对象,以鳞片作为鉴定年龄的材料,对其种群年龄结构与生长特性展开研究。实验对180尾麦穗鱼进行了测量,其体长范围7.3~97 mm,其中体长50~70 mm的个体数占群体总数的65%;其体长-体重... 详细信息

以生活在贵州威宁草海国家级自然保护区的麦穗鱼为研究对象,以鳞片作为鉴定年龄的材料,对其种群年龄结构与生长特性展开研究。实验对180尾麦穗鱼进行了测量,其体长范围7.3~97 mm,其中体长50~70 mm的个体数占群体总数的65%;其体长-体重关系为Wi=0.0128 3 Li3,平均丰满度为0.97;草海麦穗鱼种群的年龄组成包括0~3龄共4个年龄组;其中以1龄个体为主,占群体总数的73.89%。实验结果表明草海麦穗鱼的年龄结构简单,低龄鱼比例较大,但其种群数量偏大,并在该生态系统中相对占据优势.

关键词：草海麦穗鱼年龄鳞片生长

饲料脂肪水平对长养殖周期异育银鲫“中科3号”生长和脂代谢的影响

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水生生物学报 2022年第1期46卷 48-57页

作者：费树站巫丽云郭伟刘昊昆韩冬金俊琰杨云霞朱晓鸣解绶启中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室武汉430072 中国科学院大学北京100049

实验以初重为(11.33±0.03)g的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为研究对象,分别投喂脂肪水平为4%(L4)、8%(L8)、12%(L12)、16%(L16)和20%(L20)的5种等氮饲料进行为期340d的长养殖周期实验,以探究饲料脂肪水平对长养殖周期异育银鲫... 详细信息

实验以初重为(11.33±0.03)g的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为研究对象,分别投喂脂肪水平为4%(L4)、8%(L8)、12%(L12)、16%(L16)和20%(L20)的5种等氮饲料进行为期340d的长养殖周期实验,以探究饲料脂肪水平对长养殖周期异育银鲫生长性能、消化酶活性和脂代谢的影响。期间共取样5次,生长阶段分为63d(D63,幼鱼期)、110d(D110,养成前期)、223d(D223,越冬期)、275d(D275,越冬后)和340d(D340,养成中后期)。实验结果显示,以增重率为评价指标,幼鱼期D63的异育银鲫适宜脂肪水平为8%,养成前期D110的异育银鲫适宜脂肪水平为12%,而其他生长阶段饲料脂水平对增重率无显著影响。饲料脂肪水平对幼鱼期异育银鲫肠道消化酶活性有显著影响,脂肪酶活性随脂肪水平的升高呈现先降低后升高的趋势,幼鱼期(D63)异育银鲫肠道胰蛋白酶和淀粉酶活性高于越冬期和养成中后期的异育银鲫,表明幼鱼期的异育银鲫对脂肪的利用较低。幼鱼期(D63)异育银鲫脂肪合成相关基因pparγ和fas的表达量饲料脂肪水平升高呈先升高后下降的趋势,且在L8组表达量最高,而脂解基因lpl和cpt1a的表达量在低脂组L4显著低于其他各组。pparγ和cpt1a在越冬后期(D275)的表达量随饲料脂肪水平的升高呈现先上升后下降,而fas表达量在L4组显著高于其他组,表明不同生长阶段异育银鲫对饲料脂肪摄入的响应策略不一致,摄入过高或过低均会导致代谢紊乱。适宜的脂水平(8%—12%)可促进幼鱼期和养成前期异育银鲫的生长,增强脂肪利用率和脂代谢能力,而较大规格的异育银鲫对脂肪的变化不敏感。

关键词：异育银鲫饲料脂肪生长性能消化酶活性脂代谢越冬

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几种畜禽粪便浸出液培养小球藻的比较研究

凯里学院学报 2015年第6期33卷 74-76页

作者：简启刚廖前柳费树站熊利周贤君贵州大学贵州贵阳550025

通过室内培养法,利用鸡粪、牛粪和猪粪浸出液对淡水小球藻进行培养,并对其培养效果进行比较.试验结果表明:小球藻在鸡粪、牛粪和猪粪浸出液中均能生长和增殖;在鸡粪浸出液中的延缓期较牛粪长,而在猪粪浸出液中几乎没有延缓期;小球藻在... 详细信息

通过室内培养法,利用鸡粪、牛粪和猪粪浸出液对淡水小球藻进行培养,并对其培养效果进行比较.试验结果表明:小球藻在鸡粪、牛粪和猪粪浸出液中均能生长和增殖;在鸡粪浸出液中的延缓期较牛粪长,而在猪粪浸出液中几乎没有延缓期;小球藻在猪粪浸出液中增殖较快,增殖倍数多,最高可以达到25倍,而在鸡粪中只增殖6倍左右.相比较而言,猪粪浸出液是小球藻的最佳培养液,其次为牛粪浸出液,鸡粪浸出液最差.

关键词：鸡粪猪粪牛粪小球藻培养

基于转移依赖Lyapunov函数离散时间切换系统的异步l_(2)-l_(∞)滤波

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控制与决策 2024年第4期39卷 1231-1239页

作者：王瑞华李福鹏胡硕洋费树珉青岛理工大学信息与控制工程学院山东青岛266520 东南大学自动化学院南京210096

主要研究离散时间切换系统在容许路径依赖混合驻留时间(AED-IDT)切换下异步l_(2)-l_(∞)滤波器的设计问题.不同于以往的研究结果,提出一种异步转移依赖凸Lyapunov函数,得到了低保守性稳定性判据.所设计Lyapunov函数的创新之处在于其构... 详细信息

主要研究离散时间切换系统在容许路径依赖混合驻留时间(AED-IDT)切换下异步l_(2)-l_(∞)滤波器的设计问题.不同于以往的研究结果,提出一种异步转移依赖凸Lyapunov函数,得到了低保守性稳定性判据.所设计Lyapunov函数的创新之处在于其构建不再依赖系统模态,而是依赖当前激活的滤波器模态和刚刚运行结束的滤波器模态.鉴于所设计Lyapunov函数具有凸性质,这为所提出方法提升自由度和灵活性创造了空间.采用转移依赖凸Lyapunov函数和AED-IDT切换策略,能够得到保证滤波误差系统全局一致指数稳定,且具有l_(2)-l_(∞)性能的充分条件.在此基础上,提出异步l_(2)-l_(∞)滤波器的设计方法.最后,通过一个数值实例和一个切换RLC应用电路来验证所得结果的有效性,并经过仿真实验验证了所提出设计方法能够保证更紧的驻留时间界和较小的滤波误差结果.

关键词：离散时间切换系统转移依赖凸Lyapunov函数容许路径依赖混合驻留时间全局一致指数稳定异步l_(2)-l_(∞)滤波切换RLC电路

沙利度胺辅助治疗血行播散性结核病伴发矛盾反应1例

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中华结核和呼吸杂志 2024年第5期47卷 455-459页

作者：郭晶费贤树张侠林霏申南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)结核科南京211131

本研究报道了1例接受英夫利西单抗治疗克罗恩病继发活动性结核病患者。患者男,52岁,因发热伴头痛1个月余入院。既往有克罗恩病史13年,入院前曾使用英夫利西单抗2次。通过腰椎穿刺术、支气管镜在脑脊液、灌洗液中发现结核分枝杆菌DNA阳性... 详细信息

本研究报道了1例接受英夫利西单抗治疗克罗恩病继发活动性结核病患者。患者男,52岁,因发热伴头痛1个月余入院。既往有克罗恩病史13年,入院前曾使用英夫利西单抗2次。通过腰椎穿刺术、支气管镜在脑脊液、灌洗液中发现结核分枝杆菌DNA阳性,诊断结核性脑膜炎、肺结核、支气管结核、淋巴结结核。给予规律抗结核、激素等治疗,治疗期间反复发热、病灶进展、气管腔内多发肉芽形成,考虑合并矛盾反应,予沙利度胺联合糖皮质激素治疗。经1 HREZLfxLzd/8 HEZCsLzd/1 HEZCs/8 HZCs 18个月治疗后,患者临床状况显著改善,胸部CT及气管镜下表现均提示病灶明显吸收,脑脊液、灌洗液病原学阴性,予停药观察。

关键词：结核性脑膜炎克罗恩病淋巴结结核停药观察支气管结核灌洗液肉芽形成腰椎穿刺术