检索结果-南通市图书馆

作者：费晓艳吉林大学

学位级别：硕士

大豆种子中含有丰富的营养物质,是非常有益的保健食品,也是世界上最重要的粮油作物之一。为改变我国大豆生产落后、供给不足和进口量逐年增加的局面,提高大豆的生产潜力已显得至关重要。而细胞质雄性不育(CMS)普遍存在于高等植物中,虽... 详细信息

大豆种子中含有丰富的营养物质,是非常有益的保健食品,也是世界上最重要的粮油作物之一。为改变我国大豆生产落后、供给不足和进口量逐年增加的局面,提高大豆的生产潜力已显得至关重要。而细胞质雄性不育(CMS)普遍存在于高等植物中,虽然其对植物自身来说是一个不利变异性状,但对育种来说却是杂种优势广泛利用的基础。因此开展大豆细胞质雄性不育的分子机理研究,以便大豆杂种优势更好的利用,具有非常重要的理论和实践意义。国内外的大量研究结果表明CMS与线粒体基因组的突变、重组或RNA编辑有密切关系,但是目前对CMS相关的机制研究还不够深入,而且由于线粒体基因组中存在高频重组和编码冗余现象,基因组的结构和大小变化很大,给研究工作带来了很多困难。随着分子生物学技术和理论的发展,虽然已经找到一些与CMS相关的基因,但是因为CMS过程牵涉到的因素十分复杂,所以现在的研究结果对于相关机理的解释来说还远远不够。为了更好的了解和线粒体基因组与细胞质雄性不育之间的关系和其导致雄性不育的相关机制,我们需要对这些已知的基因从DNA序列经过转录到翻译表达再到表型的一个系统研究。同玉米、水稻等其它作物细胞质雄性不育机理研究相比,关于大豆细胞质雄性不育的机理研究相关报道相对较少,还远远落后。因此制备大豆的线粒体基因组文库并进行测序,不仅能够为大豆细胞质雄性不育的分子生物学机理研究打下基础,而且也将为开展大豆线粒体功能基因组、蛋白质组研究及比较基因组的研究工作等提供一定基础。由于抽提到的线粒体DNA的纯度和浓度,在很大程度上决定着Shotgun文库的测序结果以及下一步构建的BAC文库的质量,所以本研究以栽培大豆细胞质雄性不育系(JLCMS1-1A)及其配套保持系(JLCMS1-1B)为材料,经过暗培养得到大豆黄化苗,以排除叶绿体的干扰。利用匀浆法破碎黄化苗组织,经差速离心粗提了线粒体,再进行蔗糖密度梯度离心纯化所粗提到的线粒体,最后采用酚氯仿抽提的方法抽提线粒体DNA。为了进一步确定抽提到的线粒体DNA有无细胞核DNA和叶绿体DNA的污染,我们根据大豆已知基因NARK、psbC和CO设计了3对引物,它们分别可以扩增细胞核、叶绿体和线粒体上的相关基因,PCR鉴定证实获得的大豆线粒体DNA无细胞核DNA和叶绿体DNA的干扰,纯度较高,适合进行下一步基因组的测序。分别构建了大豆细胞质雄性不育系及其配套保持系的线粒体基因组的Shotgun文库,大规模提取Shotgun文库的质粒,采用荧光标记的双脱氧法,通过MegaBACE 4500序列分析仪,使用通用引物M13进行双向测序以8-10倍的覆盖率进行测序。测得的序列在RedHat Linux平台并联的计算机群中,用Phred/Phrap/Consed程序进行拼接。但是线粒体自身结构的复杂性和序列的高度重复性,给序列的拼接组装造成困难,因此全基因组Shotgun测序法只能将目的基因拼接成几个大的重叠群(contig)。所以先用Shotgun进行整体测序,识别出无法测序的区域后,通过primer walking来进行DNA序列的补缺工作。为了确定各个重叠群(contig)之间的物理关系,进而填补物理缺口,我们将保持系的线粒体基因克隆化,即建立保持系线粒体基因组的BAC文库。经鉴定,所构建的文库的平均插入片段大小为50Kb,共保藏2000个单克隆,约约覆盖整个大豆保持系线粒体基因组250倍。在每个contig的两端分别设计向未知序列端进行扩增的引物,通过PCR反应粗略确定各个contig之间的位置关系;在每个contig的末端各设计一对引物,通过PCR反应寻找跨过“物理沟”的BAC克隆。寻找到的跨“沟”克隆,结合BAC末端测序的结果,blast比对进一步锁定其位置,将这个片段DNA克隆建立鸟枪文库进行测序和拼接,填补物理缺口。经线粒体全基因组Shotgun测序拼接和补“测序沟”,最终得到不育系的线粒体基因组由7个contig组成,全长约375Kb,其中最长的连续完整的序列为122,948bp;保持系的线粒体又经过补“物理沟”后由6个contig组成,全长约400Kb,其中最长的连续完整的序列为214,737bp,这是迄今为止得到的最长大豆的线粒体基因组序列。生物信息学分析结果显示,不育系和保持系的大豆线粒体基因组序列的G+C含量分别为45.12%和44.93%,两个线粒体基因序列在85%以上的区段是较为一致的,具有很高的同源性。基因注释和blast分析结果显示：不育系和保持系的线粒体基因共同编码了包括细胞色素氧化酶、NADH脱氢酶、ATP酶等在内的31种蛋白,3种rRNA和13种tRNA。其中nadl、nad2、nad5均含有多个外显子,均跨过较大的基因区域,这与其他已知物种线粒体的基因结构相似。本研究首次对大豆雄性不育系及其配套保持

关键词：大豆线粒体细胞质雄性不育基因组 BAC文库测序

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Learnsite平台在小学信息技术课堂中的为何与何为

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教育信息化论坛 2017年第1期1卷 33-34页

作者：费晓艳浙江省宁波市弇山小学

本文阐述了在实际运用过程中Learnsite平台解决了课堂教学的很多难题。它提供了学案导入、作品提交、交流互动、课堂检测、课堂签到和在线打字几大功能,解决了信息技术课堂的分层教学和小组互动的难题,实现了对学生的多元评价,生成了学... 详细信息

本文阐述了在实际运用过程中Learnsite平台解决了课堂教学的很多难题。它提供了学案导入、作品提交、交流互动、课堂检测、课堂签到和在线打字几大功能,解决了信息技术课堂的分层教学和小组互动的难题,实现了对学生的多元评价,生成了学生的成长档案袋。

关键词： Learnsite教学平台分层教学电子成长袋信息素养

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浅谈构建“学习共同体”的有效策略

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新西部 2013年第9期 152-152页

作者：费晓艳昆山震川高级中学

新课程背景下的教学要努力克服传统教学模式的弊端,构建以"学生为主体,教师为主导"的"学习共同体",引导学生不断改进学习方式与策略,促进教学相长,共同提高。

关键词：学习共同体合作互动学习构建有效策略

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探究性教学在生物教学中的应用——“植物生长素的发现”的教学案例

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考试周刊 2014年第3期 143-144页

作者：费晓艳震川高级中学

教学法是教师和学生为达到教育目标和教学目的而开展教学活动时,所采用的一切方式方法的总和。科学的教学方法在学生掌握知识的同时,还能培养各项能力,使学生具备勤于思考、勇于探索的精神。作为基础教育之一的生物教学,想要培养适应创... 详细信息

教学法是教师和学生为达到教育目标和教学目的而开展教学活动时,所采用的一切方式方法的总和。科学的教学方法在学生掌握知识的同时,还能培养各项能力,使学生具备勤于思考、勇于探索的精神。作为基础教育之一的生物教学,想要培养适应创新社会的人才,就要采用探究性教学。

关键词：探究性教学生长素 Z检验生物教学

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Learnsite平台在小学信息技术课堂中的为何与何为

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苏州教育信息化 2017年第6期 42-43页

作者：费晓艳太仓市弇山小学

关键词： LearnSite教学平台分层教学电子成长袋信息素养

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问题探究式教学模式下高中生物教学设计——以“物质跨膜运输的方式”一节为例

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学园 2020年第6期13卷 29-31页

作者：费晓艳昆山震川高级中学江苏苏州215300

高中生物教学实施对学生的发展具有非常积极的意义,如何带领学生深入探究生物知识并激发学生的学习欲望与学习兴趣是教师关注的重点。问题探究式教学为学生设计了符合他们学习需求与探索欲望的问题教学情境,有助于学生知识学习效率的提... 详细信息

高中生物教学实施对学生的发展具有非常积极的意义,如何带领学生深入探究生物知识并激发学生的学习欲望与学习兴趣是教师关注的重点。问题探究式教学为学生设计了符合他们学习需求与探索欲望的问题教学情境,有助于学生知识学习效率的提升。以"物质跨膜运输的方式"教学设计与实施为例,尝试通过问题探究教学模式培养学生的科学探究思维和能力,有效落实高中生物学科核心素养。

关键词：问题探究高中生物科学探究

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核心素养指导下的生物课堂教学设计——以“基因指导蛋白质合成”为例

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智力 2020年第13期 153-154页

作者：费晓艳昆山市教师发展中心

利用问题式教学方法,以环环相扣的问题化导学案为主线贯穿转录和翻译的过程,学生可以通过一系列图片观察、视频欣赏,变抽象为具体,突破重点难点;同时将相关知识及时归纳、比较和总结以增进学生对知识的理解。充分运用电子白板的交互功能... 详细信息

利用问题式教学方法,以环环相扣的问题化导学案为主线贯穿转录和翻译的过程,学生可以通过一系列图片观察、视频欣赏,变抽象为具体,突破重点难点;同时将相关知识及时归纳、比较和总结以增进学生对知识的理解。充分运用电子白板的交互功能,重点使用了白板的"拖放"功能来进行模型建构,充分调动学生积极性,让学生主动参与,积极探索,提高课堂效率。

关键词：基因表达转录电子白板问题导学

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