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芍药种子休眠解除过程的酵母杂交cDNA文库构建

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北京林业大学学报 2023年第7期45卷 120-129页

作者：费日雯樊富伟孙天祎辛如洁宋文慧关士鑫孙晓梅沈阳农业大学园艺学院辽宁沈阳110866 沈阳农业大学林学院辽宁沈阳110866

【目的】芍药具有极佳的观赏价值,但其种子的双重休眠难以解除,严重阻碍芍药的育种进程。本研究利用gateway技术构建芍药种子休眠解除关键时期的酵母杂交cDNA文库,可用于筛选调控芍药种子休眠解除相关基因的转录因子及互作蛋白。本文库... 详细信息

【目的】芍药具有极佳的观赏价值,但其种子的双重休眠难以解除,严重阻碍芍药的育种进程。本研究利用gateway技术构建芍药种子休眠解除关键时期的酵母杂交cDNA文库,可用于筛选调控芍药种子休眠解除相关基因的转录因子及互作蛋白。本文库的构建可为丰富芍药种子休眠调控研究提供科学支撑,能为芍药栽培育种和野生资源保护及利用奠定分子理论基础。【方法】本研究以休眠解除过程中5个关键时期的芍药种子为试验材料,进行总RNA的提取和m RNA的分离,使用gateway方法构建cDNA初级文库,再通过LR重组,将初级文库重组到pGADT7-DEST次级文库载体上,构建出次级文库,最后经过酵母转化试验,将次级文库质粒转化到酵母Y187感受态细胞中,构建出芍药种子休眠解除过程的酵母文库。【结果】经鉴定,cDNA初级文库库容量为1.28×10^(7) CFU,平均插入片段长度在1000 bp以上,重组率为100%;cDNA次级文库库容量为1.12×10^(7) CFU,平均插入片段长度在1000 bp以上,重组率为100%;酵母文库滴度为7.0×10^(7) CFU/mL,平均插入片段长度在1000 bp以上,重组率为96%。23个阳性克隆测序结果经NCBI比对后,按照功能将20个已知蛋白序列划分为8类,其中7个序列已被报道参与种子的休眠与萌发。【结论】芍药种子休眠解除过程的酵母杂交cDNA文库构建的质量较高,具有较完整的基因信息,符合酵母文库筛选试验所需的标准,为构建芍药种子休眠解除过程的分子调控网络提供基础。

关键词：芍药种子休眠与萌发酵母杂交 cDNA文库 gateway技术

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芍药种子变温层积过程中的解剖结构观察

沈阳农业大学学报 2017年第3期48卷 354-359页

作者：费日雯孙晓梅杨盼盼陈志婧麻永磊沈阳农业大学林学院沈阳110161 南京林业大学风景园林学院南京210000

通过对芍药种子萌发过程中形态特征及物质消化情况变化的比较研究,探索出打破芍药种子休眠的关键时间节点,为深入揭示芍药种子双重休眠形成和解除双重休眠的机制提供依据。本研究选用筛选出的饱满芍药种子进行变温沙藏层积处理,并利用... 详细信息

通过对芍药种子萌发过程中形态特征及物质消化情况变化的比较研究,探索出打破芍药种子休眠的关键时间节点,为深入揭示芍药种子双重休眠形成和解除双重休眠的机制提供依据。本研究选用筛选出的饱满芍药种子进行变温沙藏层积处理,并利用石蜡切片技术观察此过程中芍药种子的解剖结构变化,特别是种胚的结构和形态变化。结果表明:用于沙藏层积的芍药种子的种胚已经分化出子叶、胚根、胚轴和胚芽,即芍药自然成熟的种子,种胚在形态上已经发育完全,因此不存在胚的形态休眠;15℃沙藏生根过程中胚的形态变化较大,而胚的结构与未沙藏种胚的结构相似;15℃沙藏层积45d(芍药种子裂口露白),胚乳细胞伸长且内含物质消耗明显,随着胚根的生长下胚轴的分生细胞显著伸长,大量细胞核伸长,细胞分裂旺盛,因此该阶段是打破下胚轴休眠的关键时间节点;胚根突破种皮后继续15℃沙藏层积,此过程中根逐渐伸长,待15℃沙藏层积122d(芍药种子根长3~4cm)时,胚芽已经分化出初生叶的形态,此时进行4℃低温层积催芽,待4℃低温层积28d时,胚周围的胚乳细胞已经解体且排列疏松,上胚轴明显伸长并汇聚大量分裂旺盛的细胞,因此该阶段是打破上胚轴休眠的关键时间节点。通过对变温层积过程中芍药种胚的形态和结构及胚乳组织的观察,获得打破芍药种子双重休眠的关键时间节点,对芍药种子休眠萌发在学术和生产实践中的进一步研究提供了准确的技术支持。

关键词：芍药种子休眠石蜡切片解剖结构

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芍药品种间杂交亲和性及种子破眠方法研究

西北农业学报 2019年第5期28卷 837-842页

作者：孙晓梅辛如洁董召阳麻永磊费日雯李雪婷沈阳农业大学林学院

以16个芍药品种为父本与芍药‘粉玉奴’为母本进行定向杂交,研究其杂交亲和性,并以隔年和当年种子为材料对种子休眠的解除进行研究。结果表明:不同杂交组合的亲和性不同,父本为‘红羽球’‘粉面桃花’‘西施粉’‘蓝田飘香’4个杂交组... 详细信息

以16个芍药品种为父本与芍药‘粉玉奴’为母本进行定向杂交,研究其杂交亲和性,并以隔年和当年种子为材料对种子休眠的解除进行研究。结果表明:不同杂交组合的亲和性不同,父本为‘红羽球’‘粉面桃花’‘西施粉’‘蓝田飘香’4个杂交组合的亲和性表现最佳,种子结实率为4粒/朵以上;父本为‘老来红’的杂交组合亲和性最差,种子结实率为1.91粒/朵,其余杂交组合均介于两者之间。不同杂交组合的种子生根率也不同,父本为‘西施粉’的杂交组合种子生根率最高,达到54.00%;父本为‘乌龙探海’的杂交组合种子生根率最低,仅为17.39%。通过破除种子下胚轴和上胚轴休眠的试验发现,用质量浓度为100mg/LGA3处理的当年种子更有利于解除下胚轴休眠,生根率最高,为65.33%;低温30d+300mg/LGA3浸泡4h处理的种子更有利于打破上胚轴休眠,发芽率最高,为76.67%。

关键词：芍药杂交亲和性破除休眠

洋水仙Dutch Master愈伤组织的诱导、分化及植株再生

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沈阳农业大学学报 2018年第4期49卷 465-470页

作者：孙晓梅孙琪费日雯麻永磊李雪婷姚希诺沈阳农业大学林学院沈阳110161

以洋水仙品种Dutch Master的鳞茎、叶、花葶及无菌苗叶片作为外植体,选用MS为基本培养基,分别添加不同质量浓度的NAA(0.5,1.0,1.5mg·L^(-1))、IBA(0,0.5,1.0mg·L^(-1))、2,4-D(0,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mg·L^(-1))、6-BA(0.5,1.0,1.5,2.0,3.0mg·L^(-1))和KT(0.1,0.3,0.5mg·L^(-1)),研究不同外植体和不同外源激素配比对小鳞茎的诱导,愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响。结果表明:在Dutch Master初代培养阶段,6-BA的影响效应最大,随着6-BA质量浓度的升高,诱导率呈上升趋势,最适宜的初代培养基配比为:MS+6-BA 3.0mg·L^(-1)+NAA 0.5mg·L^(-1)+2,4-D 0.2mg·L^(-1);以带鳞茎盘的双鳞片作为外植体诱导小鳞茎效果最好,诱导率达76.7%;鳞片部位以鳞茎外层鳞片的培养效果最好,分化率达97.5%;在Dutch Master愈伤组织诱导阶段,2,4-D的影响效应最大,当2,4-D浓度为1mg·L^(-1)时,愈伤组织诱导率的均值(K2)为峰值,最适宜的愈伤组织诱导培养基配比为:MS+2,4-D 1mg·L^(-1)+6-BA 1.5mg·L^(-1)+KT 0.1mg·L^(-1),Dutch Master无菌苗叶片愈伤组织诱导率可以达到81.3%;在Dutch Master愈伤组织继代培养阶段,最适宜的继代培养基配比为:MS+2,4-D 0.5mg·L^(-1)+6-BA 1mg·L^(-1),可以增殖分化得到没有玻璃化的小植株。

关键词：洋水仙外植体愈伤组织植株再生

恩格斯“两种决定”作用思想的系统方法论意蕴

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系统科学学报 2023年 36-39页

作者：李雯高日升江西省区域发展研究院华中师范大学马克思主义学院

“两种决定”作用是恩格斯历史合力论思想中的一个关键议题，体现了社会系统的整体性、层次性和动态性等特征，反映了恩格斯对系统方法论的精妙运用。其中，经济要素的“总体决定”和其他诸要素的“具体决定”分别反映了恩格斯对社会系... 详细信息

“两种决定”作用是恩格斯历史合力论思想中的一个关键议题，体现了社会系统的整体性、层次性和动态性等特征，反映了恩格斯对系统方法论的精妙运用。其中，经济要素的“总体决定”和其他诸要素的“具体决定”分别反映了恩格斯对社会系统要素的分析和社会系统层次的把握，“总体决定”与“具体决定”之间如何通达一致则体现了恩格斯对社会系统的动态理解。

关键词：恩格斯 “两种决定” 相互作用系统方法论

通腑逐瘀方治疗支气管哮喘的疗效观察及对FeNO的干预作用

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通腑逐瘀方治疗支气管哮喘的疗效观察及对FeNO的干预作用

作者：费倩雯南京中医药大学

学位级别：硕士

目的探讨通腑逐瘀方对支气管哮喘患者临床症状积分、中医证候疗效、ACT评分、血清IgE、肺功能、呼出气一氧化氮(FeNO)的影响,初步研究通腑逐瘀方对支气管哮喘发作期的临床疗效及对FeNO的干预情况。方法 1.门诊选取40例支气管哮喘中度... 详细信息

目的探讨通腑逐瘀方对支气管哮喘患者临床症状积分、中医证候疗效、ACT评分、血清IgE、肺功能、呼出气一氧化氮(FeNO)的影响,初步研究通腑逐瘀方对支气管哮喘发作期的临床疗效及对FeNO的干预情况。方法 1.门诊选取40例支气管哮喘中度发作的患者,随机分为实验组和对照组,每组20例。采集两组患者FeNO值,同时测定患者临床症状积分、证候疗效、ACT评分、血清IgE、肺功能等情况并记录。2.对照组20例患者予布地奈德福莫特罗吸入剂(信必可都保)吸入治疗,一吸／次,一日两次,连续使用3个月;实验组在吸入信必可都保基础上联合通腑逐瘀方口服,治疗持续3个月。疗程结束后再次对患者进行临床症状积分、证候疗效、ACT评分、血清IgE、肺功能、FeNO等采集比较。结果 1.两组患者治疗后FeNO较前降低,症状积分、ACT评分、血清IgE、肺功能亦较治疗前改善,有统计学差异(P0.05)。结论通腑逐瘀方治疗中度发作支气管哮喘者能降低FeNO,控制气道炎症,在临床症状缓解上优于单纯的激素吸入治疗,在一定程度上体现了中西医结合治疗支气管哮喘的优势,从而实现更多患者对支气管哮喘的控制。

关键词：支气管哮喘通腑逐瘀方 FeNO 气道炎症

国产达沙替尼治疗慢性髓系白血病急髓变伴Y253H突变1例报告

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临床血液学杂志 2017年第3期30卷 388-391页

作者：费琴雯张日何川崔腾吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏苏州215006

慢性髓系细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一种以出现t（9;22）特征性染色体核型改变导致骨髓造血干细胞克隆性增殖的血液系统恶性肿瘤。随着第一代酪氨酸激酶抑制剂（TKI）甲磺酸伊马替尼的问世及广泛应用,慢性期CML的疗... 详细信息

慢性髓系细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）是一种以出现t（9;22）特征性染色体核型改变导致骨髓造血干细胞克隆性增殖的血液系统恶性肿瘤。随着第一代酪氨酸激酶抑制剂（TKI）甲磺酸伊马替尼的问世及广泛应用,慢性期CML的疗效与预后已大为改观,作为一线治疗的异基因造血干细胞移植已经被TKI所取代。

关键词：白血病,髓系,慢性急变期 Y253H基因突变国产达沙替尼

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证券虚假陈述中会计师事务所侵权责任承担类型研究

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证券虚假陈述中会计师事务所侵权责任承担类型研究

作者：费雯雯西北政法大学

学位级别：硕士

在注册制下,关于证券虚假陈述中会计师事务所涉诉的案件越来越多,使得司法实践中通用的连带责任制的过责不统一问题得到越来越多的关注,出现了连带责任与按份责任之争,在责任承担类型方面也有连带责任一元说和连带责任与按份责任两分法... 详细信息

在注册制下,关于证券虚假陈述中会计师事务所涉诉的案件越来越多,使得司法实践中通用的连带责任制的过责不统一问题得到越来越多的关注,出现了连带责任与按份责任之争,在责任承担类型方面也有连带责任一元说和连带责任与按份责任两分法、连带责任与补充责任两分法等不同的学说,其中两分法的核心都是要依据会计师事务所的主观过错来区分其责任承担类型。实践中也出现了康美案、五洋案等适用比例连带责任的证券虚假陈述责任纠纷案件,因此,学界与实践研究的重点从会计师事务所是否应当担责转移到了会计师事务所具体应当承担何种责任类型,首先,需要肯定按份责任是证券虚假陈述中会计师事务所责任承担的合理类型;其次,为了合理分配会计师事务所的责任承担,应该实行区分责任制即当会计师事务所是故意时,应对虚假陈述造成的投资人损失承担连带责任,而当会计师事务所为过失时,就应按照其过失的大小承担相应的赔偿责任;当会计事务所为重大过失时应承担比例连带责任,而当其为一般审计执业过失时应承担补充责任。最后,通过会计师事务所的主观故意和客观做出的不实报告来确定其连带责任范围,通过注意义务来判断过错程度并综合考虑过错与原因力大小确定按份责任的比例。

关键词：虚假陈述共同侵权按份责任连带责任

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习近平著作的海外传播研究

传媒 2022年第15期 8-11页

作者：费雯俪中国外文局当代中国与世界研究院中国外文局-北京外国语大学

党的十八大以来,习近平总书记在领导推进新时代治国理政的实践中对国家实力、世界秩序、时代主题做了客观理性的战略把握,提出了许多具有创新性、指导性、前瞻性的思想观点,创立了习近平新时代中国特色社会主义思想,实现了马克思主义理... 详细信息

党的十八大以来,习近平总书记在领导推进新时代治国理政的实践中对国家实力、世界秩序、时代主题做了客观理性的战略把握,提出了许多具有创新性、指导性、前瞻性的思想观点,创立了习近平新时代中国特色社会主义思想,实现了马克思主义理论中国化的又一次飞跃,为实现中华民族伟大复兴提供了行动指南,为推动构建人类命运共同体贡献了智慧方案。

关键词：习近平新时代中国特色社会主义思想党的十八大以来世界秩序海外传播马克思主义理论中国化人类命运共同体治国理政行动指南