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下肢创伤患者小腿肌间静脉血栓形成研究进展

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第2期 164-168页

作者：王烨毛永康贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤骨科广西桂林541001

小腿肌间静脉血栓形成(muscular calf vein thrombosis,MCVT)指血液非正常地在下肢肌肉静脉内凝结,多数发生在腓肠肌及比目鱼肌之间的静脉。由于下肢创伤后需要患者患肢制动并长期卧床,下肢小腿肌群活动幅度大大下降,进行功能运动减少,... 详细信息

小腿肌间静脉血栓形成(muscular calf vein thrombosis,MCVT)指血液非正常地在下肢肌肉静脉内凝结,多数发生在腓肠肌及比目鱼肌之间的静脉。由于下肢创伤后需要患者患肢制动并长期卧床,下肢小腿肌群活动幅度大大下降,进行功能运动减少,使得小腿肌肉间的静脉回流量大大降低,这为小腿肌间静脉血栓的形成的奠定了坚实的基础,而下肢小腿肌间静脉由于静脉瓣相比于其他部位静脉要少,再加上小腿肌间静脉周围没有筋膜等组织的硬性支撑,极易造成静脉内血液淤滞现象的发生,成为下肢骨折后的常见并发症。若不及时处理,会导致肺栓塞等严重后果。

关键词：下肢创伤 MCVT 下肢深静脉血栓肺栓塞治疗

慢病毒介导沉默P75神经生长因子受体基因对大鼠BMSCs成骨分化的影响研究

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中国修复重建外科杂志 2020年第8期34卷 1052-1058页

作者：王宁陈俊毅陈西淼朱伦井段江涛王烨贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤手外科广西桂林541000 桂林医学院广西桂林541000

目的探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)慢病毒介导沉默P75神经生长因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)基因对大鼠BMSCs成骨分化的影响。方法首先设计3条慢病毒介导P75NTR基因的siRNA序列(P75NTR-siRNA-1、2、3)以及阴性对照(negative control,NC)-siRNA,分别转染第3代SD大鼠BMSCs;倒置显微镜下观察细胞形态变化,实时荧光定量PCR及Western blot检测细胞P75NTR基因及蛋白表达情况,并筛选沉默效果最佳的P75NTR-siRNA进行后续成骨分化实验。取第3代SD大鼠BMSCs,随机分为实验组、阴性对照组及空白对照组;其中,阴性对照组及实验组分别采用NC-siRNA及筛选的P75NTR-siRNA慢病毒载体转染BMSCs,空白对照组为正常BMSCs。采用MTT法检测转染后细胞增殖情况;各组细胞经成骨诱导分化培养后,Western blot检测成骨相关蛋白[骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)及Runx相关转录因子2(Runx related transcription factor 2,Runx2)]表达,免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原表达情况,ALP检测以及茜素红染色观察成骨情况。结果慢病毒介导P75NTR基因转染BMSCs后,其P75NTR mRNA及蛋白表达量均明显降低(P<0.05),其中P75NTR-siRNA-3沉默效果最佳。P75NTR基因沉默后,MTT检测示实验组细胞增殖较两对照组明显增快(P<0.05)。成骨诱导分化培养后,实验组OCN及Runx2蛋白相对表达量、Ⅰ型胶原蛋白表达、ALP活力均明显高于两对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且随成骨诱导时间延长,矿化结节逐渐增多。结论siRNA慢病毒沉默P75NTR基因可以促进大鼠BMSCs成骨分化,为治疗骨缺损提供了新思路。

关键词： P75神经生长因子受体小干扰RNA 慢病毒基因沉默 BMSCs 成骨分化大鼠

解剖型钢板与动力髋螺钉治疗老龄股骨粗隆间骨折的疗效比较

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广西医科大学学报 2008年第4期25卷 575-577页

作者：贝朝涌林卓锋杨志赵劲民苏伟沙轲韦庆军花奇凯薄占东广西医科大学第一附属医院创伤骨科南宁530021

目的:比较老龄股骨粗隆间骨折两种不同内固定方法的疗效。方法:股骨粗隆间骨折患者127例,其中应用解剖型钢板62例,动力髋螺钉(DHS)65例,比较切口长度、手术时间、术中出血量、术后引流量、住院天数、骨折临床愈合时间、术后并发症。结果... 详细信息

目的:比较老龄股骨粗隆间骨折两种不同内固定方法的疗效。方法:股骨粗隆间骨折患者127例,其中应用解剖型钢板62例,动力髋螺钉(DHS)65例,比较切口长度、手术时间、术中出血量、术后引流量、住院天数、骨折临床愈合时间、术后并发症。结果:两组随访时间为12～18个月,平均14.2个月。无切口感染及死亡病例。按Merle Daubigne标准评估,解剖型钢板组髋关节功能优良率79.03%(49/62),DHS组优良率78.46%(51/65)。两组的切口长度、手术时间、住院天数、骨折愈合时间及术后并发症比较均差异无统计学意义(P>0.05),但解剖型钢板组术中出血量和术后引流量均低于DHS组(P<0.05)。结论:使用解剖型钢板和DHS治疗老龄股骨粗隆间骨折,临床疗效相似,但应用解剖型钢板治疗具有操作相对简单、创伤小和出血量少等优点。

关键词：股骨粗隆间骨折内固定

P75NTR在兔骨折不愈合局部组织中的表达及意义

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中国骨质疏松杂志 2017年第4期23卷 437-440页

作者：李家勇王铭彭称飞蒋林彬张顺贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤骨科广西桂林541001 桂林医学院生物技术学院广西桂林541001 桂林医学院附属医院广西桂林541001

目的探讨P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)在兔骨折不愈合局部组织中的表达及意义。方法30只新西兰大白兔随机分成A、B、C三组,每组10只。A组建立骨折不愈合模型,B组建立骨折模型,C组不予处理为正常组。骨折不愈... 详细信息

目的探讨P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)在兔骨折不愈合局部组织中的表达及意义。方法30只新西兰大白兔随机分成A、B、C三组,每组10只。A组建立骨折不愈合模型,B组建立骨折模型,C组不予处理为正常组。骨折不愈合造模成功、骨折模型愈合后,利用免疫组织化学、Western blotting及IPP6.0病理图像分析软件对三组组织中P75NTR的表达进行半定量分析,测定其平均吸光度值及P75NTR与β-action的比值。结果 P75NTR平均吸光度值骨折不愈合组为0.3287±0.0419,骨折组为0.0267±0.0187,正常组为0.0159±0.0136。骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(P0.05);P75NTR/β-action骨折不愈合组为3.6434±0.0596,正常组为0.1390±0.0294,骨折组为0.1489±0.0317。骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(P0.05)。骨折不愈合组高表达P75NTR,骨折组和正常组中P75NTR表达较低,骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(两种检测均显示P0.05)。结论 P75NTR在兔骨折不愈合局部组织中表达,且明显高于骨折组和正常组,它可能是骨折不愈合形成的一个重要因素。

关键词：骨折不愈合 P75NTR Western blotting 免疫组织化学

3D打印技术结合PBL教学模式在骨外科临床本科实习生中的教学应用

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中文科技期刊数据库（引文版）教育科学 2024年第9期 0196-0199页

作者：陈椿荣张静伍志海贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤手外科广西桂林541001

探究3D打印技术联合PBL教学模式在骨外科临床本科实习生中的应用效果。方法纳入2020年1月至2023年12月在我院骨外科临床实习的本科生60例,经随机投掷法分为对照组(给予传统教学)与观察组(给予联合教学);比较两组教学效果。结果观察组... 详细信息

探究3D打印技术联合PBL教学模式在骨外科临床本科实习生中的应用效果。方法纳入2020年1月至2023年12月在我院骨外科临床实习的本科生60例,经随机投掷法分为对照组(给予传统教学)与观察组(给予联合教学);比较两组教学效果。结果观察组教学效果与对照组比较,观察组效果更佳(P<0.05)。结论联合教学模式在该科临床本科实习生中教学效果显著,不仅可提高临床实践、自主学习能力,还可提升自我能力,且教学模式在带教中获取了高度满意值,适用推广。

关键词： PBL 骨外科实习生自主学习能力自我能力满意值

慢病毒介导沉默P75神经营养因子受体联合神经生长因子过表达促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖

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中国组织工程研究 2020年第25期24卷 3988-3993页

作者：王宁陈俊毅朱伦井段江涛王烨黎智君贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤手外科广西壮族自治区桂林市541000 桂林医学院广西壮族自治区桂林市541000

背景:P75神经营养因子受体(P75 Neurotrophin receptor,P75^NTR)是神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的受体之一。在各种细胞组织中发挥着促进增殖或凋亡的双重作用,且P75^NTR在骨折不愈合处存在高表达,而过量的NGF可关闭P75^NTR受... 详细信息

背景:P75神经营养因子受体(P75 Neurotrophin receptor,P75^NTR)是神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的受体之一。在各种细胞组织中发挥着促进增殖或凋亡的双重作用,且P75^NTR在骨折不愈合处存在高表达,而过量的NGF可关闭P75^NTR受体,从而挽救受损的细胞。因此研究沉默P75^NTR联合NGF过表达共转染对骨髓间充质干细胞增殖的影响,可为临床治疗骨折不愈合提供新思路。目的:观察慢病毒介导沉默P75^NTR联合NGF过表达共转染对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法:体外培养至第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞分为空白对照组、阴性对照组、沉默P75^NTR组、NGF过表达组、沉默P75^NTR联合NGF过表达组。将慢病毒介导沉默P75^NTR、过表达NGF转染至大鼠骨髓间充质干细胞,倒置荧光学显微镜观察慢病毒转染第3天细胞形态变化,流式细胞仪检测转染效率及Western blot方法检测P75^NTR和NGF的表达,最后用MTT法和CCK-8法检测各组细胞增殖活性。结果与结论:①共转染慢病毒后的细胞生长、分布良好;双基因慢病毒载体的转染效率已超过70%;②与空白对照组和阴性对照组比较,沉默P75^NTR联合NGF过表达组P75^NTR蛋白表达明显下调,NGF蛋白表达明显增加;③与空白对照组与阴性对照组相比,沉默P75^NTR联合NGF过表达组、沉默P75^NTR组、NGF过表达组细胞增殖明显加快,差异有显著性意义(P<0.05),其中沉默P75^NTR联合NGF过表达组增殖最快;④结果显示:沉默P75^NTR联合NGF过表达共转染可促进SD大鼠骨髓间充质干细胞的增殖。

关键词：骨髓间充质干细胞慢病毒 P75神经生长因子受体神经生长因子转染细胞增殖

脱钙骨基质与慢病毒介导沉默P75神经营养因子受体转染骨髓间充质干细胞构建组织工程骨

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中国组织工程研究 2021年第4期25卷 510-515页

作者：陈俊毅王宁彭称飞朱伦井段江涛王烨贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤骨科广西壮族自治区桂林市541001 广西壮族自治区南溪山医院广西壮族自治区桂林市541002

背景:P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)在骨组织中具有促进和抑制骨形成的双向作用,P75NTR过表达可抑制骨髓间充质干细胞的成骨矿化作用。P75NTR可抑制纤维蛋白的降解和骨折周围新生血管的生成导致骨折不愈合,其... 详细信息

背景:P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)在骨组织中具有促进和抑制骨形成的双向作用,P75NTR过表达可抑制骨髓间充质干细胞的成骨矿化作用。P75NTR可抑制纤维蛋白的降解和骨折周围新生血管的生成导致骨折不愈合,其抑制骨组织修复与其介导凋亡通道有关。目的:研究沉默P75NTR对骨髓间充质干细胞生长活性和碱性磷酸酶活性的影响,以及种植于脱钙骨基质构建组织工程骨复合体的体内异位成骨能力。方法:慢病毒介导沉默P75NTR转染大鼠骨髓间充质干细胞,荧光倒置相差显微镜和Western blot检测荧光蛋白表达和P75NTR蛋白表达;转染两三天后CCK-8实验检测细胞活性,成骨诱导分化培养7 d和14 d,酶标法检测碱性磷酸酶活性;慢病毒介导沉默P75NTR转染骨髓间充质干细胞复合脱钙骨基质培养,光学倒置相差显微镜和扫描电镜下观察脱钙骨基质和骨髓间充质干细胞黏附情况,进一步成骨诱导分化培养7 d,将组织工程骨复合体移植大鼠双侧背部皮下4周,苏木精-伊红染色和碱性磷酸酶染色观察成骨情况。结果与结论:①慢病毒介导沉默P75NTR转染率可达70%左右,P75NTR目的蛋白表达明显低于未转染组和阴性病毒对照组,差异有显著性意义(P<0.05);②与未转染组和阴性病毒对照组比较,沉默P75NTR转染组第5,6天的细胞活性明显增加,差异有显著性意义(P<0.05);与未转染组和阴性病毒对照组比较,沉默P75NTR转染组成骨诱导第7,14天的碱性磷酸酶活性显著增高(P<0.05);③沉默P75NTR转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质可以形成良好黏附,该组织工程骨复合体在皮下异位成骨能力显著增强;④结果表明,慢病毒介导沉默P7NTR转染大鼠骨髓基质干细胞种植于脱钙骨基质可制作成良好的骨组织工程骨复合体,该组织工程骨复合体具有一定的异位成骨作用,为骨组织工程治疗骨缺损提供重要的理论基础。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞材料因子异位成骨大鼠慢病毒

过表达P75神经生长因子受体负向调控骨髓间充质干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2020年第1期24卷 20-26页

作者：朱伦井段江涛黄义杰王宁陈俊毅马跃刚贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤骨科广西壮族自治区桂林市541001 桂林医学院药学院药物化学教研室广西壮族自治区桂林市541100

背景:P75^NTR广泛表达于神经组织及细胞中,并发挥着促进或抑制分化的双重作用;同时在骨折不愈合局部组织中也发现了P75^NTR存在着过表达,因此研究P75NTR对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用具有重要的意义,为临床上提高骨折不愈合修复的... 详细信息

背景:P75^NTR广泛表达于神经组织及细胞中,并发挥着促进或抑制分化的双重作用;同时在骨折不愈合局部组织中也发现了P75^NTR存在着过表达,因此研究P75NTR对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用具有重要的意义,为临床上提高骨折不愈合修复的疗效提供重要靶点。目的:观察P75NTR过表达对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导成骨分化的影响。方法:选取SD大鼠双侧股骨,用全骨髓分离贴壁法提取大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外传代培养;构建表达EGFP的P75^NTR过表达质粒GV358-P75^NTR,并用空慢病毒载体包装收集P75NTR过表达慢病毒载体;选取体外培养至原代10d的大鼠骨髓间充质干细胞,消化后种板,加入P75^NTR过表达慢病毒及相关感染试剂进行感染实验,感染7d后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测P75^NTR蛋白的过表达情况;感染后用常规培养基培养7d,更换成骨诱导分化培养基培养,诱导培养后第7,10,14天用酶标法定量检测碱性磷酸酶活力,诱导培养后第7,14天用茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果与结论:①P75NTR过表达慢病毒感染骨髓间充质干细胞后能表达出绿色荧光蛋白(感染效率约90%),且P75NTR蛋白表达量明显增多,与阴性病毒对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),过表达P75NTR细胞模型构建成功;②与阴性病毒对照组及未转染组相比,P75NTR过表达组细胞诱导分化后相应时间点的碱性磷酸酶活力明显降低,矿化结节形成减少,细胞聚集分布减弱,差异有显著性意义(P<0.05);③结果表明,P75NTR过表达负向调控了大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。局部组织中P75NTR过表达抑制周围骨髓间充质干细胞成骨分化可能是骨缺损或骨折不愈合的重要因素。

关键词： P75神经生长因子受体骨髓间充质干细胞成骨分化慢病毒碱性磷酸酶国家自然科学基金

慢病毒介导沉默P75神经营养蛋白受体联合NGF过表达转染BMSCs复合脱钙骨基质异位成骨的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2020年第11期34卷 1438-1445页

作者：陈俊毅王宁张衡张贤平赵利民朱伦井黎智君贝朝涌桂林医学院附属医院四肢创伤骨科广西桂林541000

目的探索沉默P75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,P75NTR)联合NGF过表达对大鼠BMSCs增殖活性和复合脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)构建组织工程骨异位成骨能力的影响。方法通过贴壁分离法培养SD大鼠BMSCs并传... 详细信息

目的探索沉默P75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,P75NTR)联合NGF过表达对大鼠BMSCs增殖活性和复合脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)构建组织工程骨异位成骨能力的影响。方法通过贴壁分离法培养SD大鼠BMSCs并传代。取第3代BMSCs,分别用慢病毒介导沉默P75NTR基因(B组)、NGF过表达基因(C组)、沉默P75NTR和NGF过表达双基因(D组)转染,以未转染细胞作为对照(A组)。转染7 d后荧光显微镜观察目的基因荧光蛋白表达;细胞计数试剂盒8法检测转染后连续8 d细胞的活性;Western blot检测各组P75NTR和NGF蛋白表达。倒置相差显微镜和扫描电镜分别观察沉默P75NTR和NGF过表达双基因转染后BMSCs与DBM的黏附情况。将上述4组转染后BMSCs分别与DBM共培养制备组织工程骨后,埋植于8周龄SD大鼠背侧皮下构建皮下异位成骨模型(n=6),术后4、8周行HE染色,术后8周ALP染色观察钙结节形成,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)表达。结果转染7 d A组未见荧光表达,B组呈红色荧光表达,C组呈绿色荧光表达,D组呈红绿色复合荧光表达;目的基因荧光表达率可达70%左右。Western blot检测示,A、C组P75NTR蛋白相对表达量显著高于B、D组,C、D组NGF蛋白相对表达量显著高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随时间推移,各组细胞增殖活性均上升,其中D组上升最明显,3~8 d细胞活性明显高于A组(P<0.05)。倒置相差显微镜和扫描电镜观察示,BMSCs能与DBM形成良好黏附。皮下异位成骨实验中,HE染色示术后4、8周,D组比其余3组有更多的骨组织形成。ALP染色示D组ALP活性最高,有更好的成骨表达。实时荧光定量PCR检测示,与A组比较,D组Runx2、ALP、OCN mRNA相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默P75NTR联合NGF过表达双基因共转染BMSCs复合DBM构建组织工程骨具有良好的异位成骨能力,通过提高NGF的水平、关闭P75NTR凋亡通道,不仅可以提高细胞活性,还能更好地促进骨组织再生。

关键词： P75神经营养蛋白受体 NGF BMSCs 细胞活性脱钙骨基质异位成骨大鼠