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血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子活性测定的酶联免疫分析试剂盒的研制及临床应用

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血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子活性测定的酶联免疫分析试剂盒...

作者：谷颖苏州大学

学位级别：硕士

研究背景: 血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）是一种大分子量的具有粘附功能的多聚体糖蛋白,在止血和血栓过程中发挥着重要怍用。首先,vWF可通过与血小板膜糖蛋白（glycoprotein,GP）Ⅰb和受损伤内皮细胞暴露的胶原之... 详细信息

研究背景: 血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）是一种大分子量的具有粘附功能的多聚体糖蛋白,在止血和血栓过程中发挥着重要怍用。首先,vWF可通过与血小板膜糖蛋白（glycoprotein,GP）Ⅰb和受损伤内皮细胞暴露的胶原之间的桥联作用介导血小板粘附到血管壁;其次,vWF作为凝血因子Ⅷ的载体,保护因子Ⅷ免受活化的蛋白C降解。vWF量的减少或质的异常均能导致血管性血友病（von Willebrand’s diseases,vWD）的发生。vWD是一组高度异质性、最常见的出血性疾病之一,资料表明其患病率约为社会人群的0.1～1%,有出血表现需要治疗者约1/1万。由于vWD患者vWF抗原水平可能正常,因此除检测vWF抗原外,还应同时检测vWF的活性。血浆vWF瑞斯托霉素辅因子活性（vWF ristocetin cofactor activity,vWF: RCof）测定是最常用的vWF活性检测试验,有利于血管性血友病诊断、分型和治疗监测。国内目前主要应用血液凝集仪检测vWF: Rcof,但其批内变异和批间变异都较大;2000年Vanhoorelbeke等报道了应用抗血小板GPIbα单克隆抗体2D4建立血管性血友病因子瑞斯托霉素辅因子活性测定的酶联免疫分析方法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）,该法与聚集法相比批内和批间差异小;重复性好;不需要使用血小板,而使用重组真核表达GPIbαH1-V289片段（rfGPIbα,H1-V289）。本研究研制了具有自主知识产权的抗血小板GPIbα单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）SZ-151替代国外的2D4,降低检测成本,建立一种操作简单,特异性、敏感性高的检测方法,并可制成国产化的ELISA试剂盒,更易于临床推广应用。为中国人群中vWD患者尤其是2型vWD的分子病理机制研究及明确诊断和分型提供更可靠的依据,有助于临床医生对vWD的诊断和治疗,将具有较大的经济和社会效益。目的: （1）制备能用于临床检测血浆vWF: RCof的抗GPIbα的mAb,为开发诊断试剂盒打下基础。（2）制备重组血小板膜糖蛋白Ibα（rfGPIbα）纯品。（3）应用抗GPIbαmAb和rfGPIbα建立vWF: Rcof-ELISA方法,对其进行灵敏度、批内和批间差异等方法学考核。（4）将该方法用于临床标本检测并评价其临床诊断价值。方法: （1）应用标准的杂交瘤技术,制备1株抗GPIbα的mAb SZ-151。（2）用真核细胞（CHO细胞）培养表达rfGPIbαH1-V289（包含IgG Fc段）,用亲和层析法纯化rfGPIbαH1-V289,并用生化手段鉴定其纯度、免疫学活性和生物学活性。（3）vWF: RCof-ELISA的建立:以抗GPIbα单抗SZ-151-IgG包板,加入rfGPIbαH1-V289反应后,再加入待测血浆和瑞斯托霉素,小剂量瑞斯托霉素可诱导血浆vWF和GPIbα结合,最后加入辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）标记兔抗人vWF多克隆抗体,四甲基联苯胺（Tetramethylbenzidine,TMB）显色后,酶标仪读取吸光度值（OD）。（4）应用该方法检测36名正常人及25名vWD患者血浆vWF的瑞斯托霉素辅因子活性,对其灵敏度及批内、批间差异进行方法学评估,与国外的抗GPIbα单抗2D4-IgG包板所测结果进行比较,并分析与vWF抗原、胶原结合实验的相关性。结果: （1）成功制备和鉴定了1株抗人GPIbαmAb,命名为SZ-151。ELISA结果显示,SZ-151对瑞斯托霉素辅因子活性无抑制作用。（2）每1 L培养上清液可纯化获得2 mg rfGPIbαH1-V289蛋白纯品。（3）成功建立Rcof-ELISA检测试剂盒。（4）其灵敏度:该方法最低检出限（detection limit,DL）为0.01U/ dL。重复性:该方法测定血浆vWF的瑞斯托霉素辅因子活性的批内差异和批间差异分别8%和12%。（5）临床应用:应用本法测定36名正常人及25名vWD患者血浆vWF的瑞斯托霉素辅因子活性,正常人均值为91.5U/dL（47.3-169.2 U/dL）,1型vWD均值为31.8U/dL（22.3-56.9 U/dL）,2A型vWD均值为4.8U/dL（0.6-11.8U/dL）,2B型vWD均值为8.6U/dL（1.6-19.7U/dL）,2M型vWD均值为3.9U/dL（1.0-6.8U/dL）,3型vWD均值为1.0U/dL

关键词：单克隆抗体糖蛋白Ⅰb 血管性血友病因子 vWD 酶联免疫吸附试验

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电站锅炉水动力研究

动力工程学报 2011年第8期31卷 590-597,618页

作者：俞谷颖朱才广上海发电设备成套设计研究院上海200240

综述了我国电站锅炉水动力研究发展历史和现状,阐述了我国早期的电站锅炉水动力研究,亚临界直流锅炉研制,自然循环锅炉水动力研究,超临界压力直流锅炉水动力特性研究,并提出了我国电站锅炉水动力今后工作的发展方向和重点:发电设备将向... 详细信息

综述了我国电站锅炉水动力研究发展历史和现状,阐述了我国早期的电站锅炉水动力研究,亚临界直流锅炉研制,自然循环锅炉水动力研究,超临界压力直流锅炉水动力特性研究,并提出了我国电站锅炉水动力今后工作的发展方向和重点:发电设备将向着更高参数、更大容量发展,超超临界锅炉的蒸汽参数将达到700°C、35 MPa,这就要求针对该参数开展锅炉水动力研究;三大发电设备制造集团相继从国外引进了各种锅炉炉型配以不同的燃烧方式,应针对不同炉型、燃烧方式及煤种开展水动力研究,以确保锅炉运行的安全性;上世纪80年代编制出版了JB/Z 201—1983《电站锅炉水动力计算方法》,受出版时间的限制,许多新的技术和研究成果亟待补充.

关键词：电站锅炉水动力与传热混合器分配集箱超压水动力调整水动力超临界

满族说部《恩切布库》与《乌布西奔妈妈》比较研究

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古籍整理研究学刊 2009年第6期 87-92页

作者：谷颖东北师范大学文学院长春师范学院萨满文化研究所

满族说部《恩切布库》与《乌布西奔妈妈》是满—通古斯语族著名的上古史诗,它们都讲述了女神带领族人建立文明社会的艰辛历程,反映了满族先民在不同历史时期的生活状态。通过对两部史诗的比较研究,能够清晰地辨识两位女神不同的性格特征... 详细信息

满族说部《恩切布库》与《乌布西奔妈妈》是满—通古斯语族著名的上古史诗,它们都讲述了女神带领族人建立文明社会的艰辛历程,反映了满族先民在不同历史时期的生活状态。通过对两部史诗的比较研究,能够清晰地辨识两位女神不同的性格特征,更能透视出史诗所反映的深刻文化内涵。

关键词：满族文学原始传说满族说部恩切布库乌布西奔萨满文化

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秦博士伏生事略考

东北师大学报（哲学社会科学版） 2015年第6期 135-139页

作者：谷颖长春师范大学萨满文化研究所吉林长春130032

伏生为一代儒学宗师,乃今文《尚书》之传授始祖,然其生平史籍载录较略,鲜为世人所知。清代学者陈蜚声曾在《伏乘》一书中考证伏生其人其事,舛误颇多,须详加辨识。其中,陈氏错推晁错受《尚书》之年,致使其考辨伏生生年多有讹误;伏生受《... 详细信息

伏生为一代儒学宗师,乃今文《尚书》之传授始祖,然其生平史籍载录较略,鲜为世人所知。清代学者陈蜚声曾在《伏乘》一书中考证伏生其人其事,舛误颇多,须详加辨识。其中,陈氏错推晁错受《尚书》之年,致使其考辨伏生生年多有讹误;伏生受《书》于李克之说,陈氏所引诸史料皆不可信,不足为据,故伏生应师从他人。通过考证伏生为秦博士,辨析秦博士官与《尚书》之关联,以探究今文《尚书》缘何得以传世。伏生虽为大儒,然去今已远,史载其事谬误必多,今厘清诸书讹误,还历史以原貌。

关键词：伏生《尚书》生年秦博士

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西林安班玛发形象解析

满族研究 2014年第2期 96-103页

作者：谷颖长春师范大学萨满文化研究所吉林长春130032

满族说部《西林安班玛发》是萨满创世神话《天宫大战》的子篇,全书热情讴歌了西林色夫辉煌的一生。从以神祇的身份被派往人间到重返人间,从以部落大萨满的身份久住人间到变为镇海石,西林色夫的种种事迹无不凸显着他独特的神性、人性,及... 详细信息

满族说部《西林安班玛发》是萨满创世神话《天宫大战》的子篇,全书热情讴歌了西林色夫辉煌的一生。从以神祇的身份被派往人间到重返人间,从以部落大萨满的身份久住人间到变为镇海石,西林色夫的种种事迹无不凸显着他独特的神性、人性,及非凡的萨满神能。说部通过对西林色夫身份、行为、语言、心理等多方面的描写,塑造了一个善良、刚毅、果敢的男性萨满形象。

关键词：西林安班玛发形象解析

基于马尔可夫等效模块化的核电站DAS系统可靠性分析

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核电子学与探测技术 2024年

作者：夏林路谷颖中核控制系统工程有限公司

核电站多样性驱动系统（DAS）是保护系统发生共因失效时用于抵御核电站发生的设计基准事件，对DAS进行可靠性分析至关重要。针对马尔可夫方法的组合爆炸问题，本文提出了一种等效模块化的分析方法。所提方法能够将DAS的马尔可夫模型分... 详细信息

核电站多样性驱动系统（DAS）是保护系统发生共因失效时用于抵御核电站发生的设计基准事件，对DAS进行可靠性分析至关重要。针对马尔可夫方法的组合爆炸问题，本文提出了一种等效模块化的分析方法。所提方法能够将DAS的马尔可夫模型分解成若干的部分，并对这些复杂度相对低的部分进行定量分析，根据计算的结果将每个部分再等效为一个设备或模块，最后整合所有部分等效的设备来组成一个等效系统，构建该等效系统的马尔可夫模型，以替代原系统的马尔可夫模型进行定量分析。最后采用所提方法对核电站DAS系统平台进行了定量计算，并采用动态可靠性框图法（DRBD）对结果进行验证。结果显示了所提方法的有效性。

关键词：马尔可夫多样性驱动系统(DAS) 模块化可靠性框图

本科护生科研创新能力强化培养模式的实践研究

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卫生职业教育 2025年第2期 68-71页

作者：姚英杰李东洋丘清帆孙佳乐宁桂林广西医科大学护理学院

探究强化培养模式对本科护生科研创新能力的实践应用效果，为护理教育教学改革提供参考依据。2022年10月至2023年3月，在广西某高校313名具有科研经历的2021级本科护生中，以自愿报名原则设立62名护生为实验组，在剩余护生中随机抽取62... 详细信息

探究强化培养模式对本科护生科研创新能力的实践应用效果，为护理教育教学改革提供参考依据。2022年10月至2023年3月，在广西某高校313名具有科研经历的2021级本科护生中，以自愿报名原则设立62名护生为实验组，在剩余护生中随机抽取62名护生设立为对照组。实验组以本科护生科研创新能力强化培养模式为依托，在常规课程的基础上强化培训；对照组通过学校常规课程自然学习，不另设强化培训。培训结束后，比较两组护生科研创新能力得分和产出情况，比较实验组培训前后科研能力得分、论文质量得分，并收集培训后教学效果评价。结果表明，以强化培养模式为载体、以成果为导向的本科护生科研创新培训实践能够提高护生的科研能力，培养其创新思维。

关键词：本科护生科研创新能力强化培养

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象山港海域富营养化与赤潮的关系

海洋环境科学 2002年第3期21卷 67-69页

作者：谷颖项有堂宁波市海洋环境监测中心浙江宁波315040

根据 2 0 0 0年 5月 2 4日至 6月 7日对象山港口门附近海域由原甲藻和多甲藻引发的赤潮进行跟踪监视监测的资料 ,用相关分析的方法探究了赤潮发生时各水化要素间的关系 ,分析了象山港海域富营养化的程度、范围、形成原因及其与赤潮的关... 详细信息

根据 2 0 0 0年 5月 2 4日至 6月 7日对象山港口门附近海域由原甲藻和多甲藻引发的赤潮进行跟踪监视监测的资料 ,用相关分析的方法探究了赤潮发生时各水化要素间的关系 ,分析了象山港海域富营养化的程度、范围、形成原因及其与赤潮的关系。结果表明 ,在赤潮发生期间 ,水体中赤潮生物———原甲藻数量与溶解氧呈现明显的正相关 ,多甲藻和裸甲藻数量与无机氮呈现明显的负相关 ,可见此次赤潮是以无机氮为营养盐主要限制因子。象山港海域的有机污染、富营养化现象 ,是赤潮发生的物质基础和必要条件。

关键词：赤潮富营养化象山港海域海洋污染

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政策性银行财务数字化转型的几点思考

财务与会计 2022年第13期 75-76页

作者：谷颖捷中国进出口银行

(一)加强财务数字化转型的顶层设计1.将财务数字化转型与银行战略和金融科技目标同规划、同部署、同落实。决策层应客观分析评价政策性银行所处的外部环境和自身金融科技水平,结合自身特点和优势确定财务数字化转型的关键路径。在研判... 详细信息

(一)加强财务数字化转型的顶层设计1.将财务数字化转型与银行战略和金融科技目标同规划、同部署、同落实。决策层应客观分析评价政策性银行所处的外部环境和自身金融科技水平,结合自身特点和优势确定财务数字化转型的关键路径。在研判市场化通用金融科技平台资源和政策性金融支持高质量发展战略的基础上,有侧重地选择相关金融基础设施应用合作领域纳入转型项目的实施内容和总体实施计划。

关键词：金融基础设施数字化转型政策性银行关键路径顶层设计科技平台政策性金融支持外部环境