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卵巢组织冷冻技术在女性生育力保存中的应用

中华生殖与避孕杂志 2018年第10期38卷 812-816页

作者：谷瑞环孙贻娟孙晓溪复旦大学附属妇产科医院上海集爱遗传与不育诊疗中心 200011 上海市女性生殖内分泌相关疾病重点实验室 200011

卵巢是雌性动物的重要生殖器官,富含许多不同发育阶段的卵泡,是一种天然的卵泡池。原始卵泡对冷冻保护剂的耐受性要高于生长卵泡,而卵巢皮质是原始卵泡的聚集地,因此卵巢皮质组织冷冻保存是一种更安全、有效、极具开发潜能的女性生育力... 详细信息

卵巢是雌性动物的重要生殖器官,富含许多不同发育阶段的卵泡,是一种天然的卵泡池。原始卵泡对冷冻保护剂的耐受性要高于生长卵泡,而卵巢皮质是原始卵泡的聚集地,因此卵巢皮质组织冷冻保存是一种更安全、有效、极具开发潜能的女性生育力保存方式。卵巢组织冷冻可以一次性保存大量的配子。然而,目前卵巢组织冷冻技术还是一个试验性的技术,临床应用面临很多困难和阻碍。本文将从卵巢组织冷冻技术、移植、临床应用及发展方向作一综述。

关键词：卵巢组织冷冻生育力保存

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卵子被“激活”了吗?

科学生活 2024年第12期 104-105页

作者：谷瑞环复旦大学附属妇产科医院上海集爱遗传与不育诊疗中心胚胎实验室

卵子胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic Sperm Injection,ICSI)是指在体外借助显微注射操作系统,将制动后精子直接注射到卵子胞浆内(图1),避开了自然受精过程中精子与卵子透明带的结合、顶体反应及与卵子细胞膜的融合等事件。ICSI技术... 详细信息

卵子胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic Sperm Injection,ICSI)是指在体外借助显微注射操作系统,将制动后精子直接注射到卵子胞浆内(图1),避开了自然受精过程中精子与卵子透明带的结合、顶体反应及与卵子细胞膜的融合等事件。ICSI技术操作过程中的机械注射可以激活卵子,达到助孕目的。

关键词：直接注射胞浆内单精子注射透明带顶体反应受精过程显微注射卵子操作过程

治疗周期中优质胚胎移植数量对妊娠结局的影响

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中华妇产科杂志 2012年第4期47卷 307-308页

作者：陆小激张爱军孙贻娟谷瑞环牛志宏冯云上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心 200025

在进行体外受精一胚胎移植（IVF—ET）过程中，为保证临床妊娠率，大多数生殖医学中心往往在1个移植周期中植入2—3个胚胎，导致多胎妊娠的发生率为普通妊娠的10倍以上，而多胎妊娠又可能给孕妇和胎儿带来一系列的并发症，给家庭和社会... 详细信息

在进行体外受精一胚胎移植（IVF—ET）过程中，为保证临床妊娠率，大多数生殖医学中心往往在1个移植周期中植入2—3个胚胎，导致多胎妊娠的发生率为普通妊娠的10倍以上，而多胎妊娠又可能给孕妇和胎儿带来一系列的并发症，给家庭和社会带来负担[1]。

关键词：胚胎移植妊娠结局治疗周期生殖医学中心数多胎妊娠临床妊娠率移植周期

种植窗期宫腔液单核细胞趋化蛋白(MCP)-1预测冻融胚胎移植妊娠结局

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生殖与避孕 2015年第3期35卷 154-158,171页

作者：叶瑶牛志宏谷瑞环冯云上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心上海200025

目的:探讨体外受精-冻融胚胎移植(IVF-FET)周期种植窗期宫腔液和血清生物因子表达谱与胚胎植入的关系。方法:收集87例患者行FET前的血清及宫腔液,根据妊娠结局分为妊娠组和非妊娠组,分析患者血清和宫腔液中27种调节因子的表达谱。结果:... 详细信息

目的:探讨体外受精-冻融胚胎移植(IVF-FET)周期种植窗期宫腔液和血清生物因子表达谱与胚胎植入的关系。方法:收集87例患者行FET前的血清及宫腔液,根据妊娠结局分为妊娠组和非妊娠组,分析患者血清和宫腔液中27种调节因子的表达谱。结果:宫腔液中妊娠组单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平低于非妊娠组(11.67±23.68 ng/L vs 17.02±33.67 ng/L),差异有统计学意义(P0.05)。结论:种植窗期宫腔液MCP-1可预测FET妊娠结局,且其表达水平与妊娠结局呈负相关。

关键词：体外受精-胚胎移植(IVF-ET) 冻融胚胎移植(FET) 反复种植失败(RIF) 临床妊娠率

人卵母细胞形态学指标预测受精和胚胎发育潜能

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北京大学学报（医学版） 2013年第6期45卷 848-851页

作者：孙贻娟谷瑞环陆小溦赵甡冯云上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心上海200025

目的:探讨卵母细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)周期中人卵母细胞形态学测量的指标与受精和胚胎发育潜能之间的关系。方法:利用OCTAX Eye-ware software系统在对卵母细胞行ICSI前,逐一采集卵母细胞图像,测量... 详细信息

目的:探讨卵母细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)周期中人卵母细胞形态学测量的指标与受精和胚胎发育潜能之间的关系。方法:利用OCTAX Eye-ware software系统在对卵母细胞行ICSI前,逐一采集卵母细胞图像,测量透明带厚度、卵母细胞大小、极体位置的卵间隙大小和极体形态(完整或破碎),将ICSI后的卵母细胞和受精后的胚胎进行单孔培养,记录每个卵母细胞的受精情况、胚胎发育情况。对卵母细胞的形态数据与受精情况、胚胎发育情况进行逐步多元因素Logistic回归分析。结果:共测量卵母细胞436枚,受精率84.9%(370/436),胚胎可用率60.8%(225/370),卵母细胞形态学指标中,透明带厚度、极体位置的卵间隙大小和卵母细胞受精与否有关,受精卵较未受精卵有较厚的透明带[(18.0±2.3)μm vs.(16.9±2.7)μm]和较大的卵间隙[(14.4±3.3)μm vs.(13.2±3.9)μm];而卵母细胞的大小和极体形态均与取卵后72 h的胚胎发育质量有关,发育为可用胚胎的卵母细胞较发育为废用胚胎者有较大的直径[(116.6±3.7)μm vs.(114.7±3.6)μm]和较高的极体完整率(86.2%vs.66.7%)。结论:人卵母细胞形态学测量的指标可预示卵子受精和胚胎发育的潜能。

关键词：卵母细胞受精,体外胚胎发育

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激光辅助孵化对冻融胚胎移植临床结局的影响

上海交通大学学报（医学版） 2012年第4期32卷 485-490页

作者：谷瑞环张爱军孙贻娟陆小溦冯云上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心上海200025

目的探讨激光削薄法辅助孵化(AH)对冷冻第3天胚胎移植结局的影响。方法选取行第3天冷冻胚胎移植患者的1 024周期,其中964个周期行常规的第3天冻存胚胎移植(非AH组),60个周期于第3天冻存胚胎复苏后,用激光将1/4透明带削薄2/3后移植(AH组)... 详细信息

目的探讨激光削薄法辅助孵化(AH)对冷冻第3天胚胎移植结局的影响。方法选取行第3天冷冻胚胎移植患者的1 024周期,其中964个周期行常规的第3天冻存胚胎移植(非AH组),60个周期于第3天冻存胚胎复苏后,用激光将1/4透明带削薄2/3后移植(AH组);分析两组的种植率、临床妊娠率、多胎率、活产率、流产率及生化妊娠率。结果两组的种植率、临床妊娠率、多胎率、活产率、流产率及生化妊娠率分别为43.2%和24.2%、58.3%和43.2%、45.7%和26.9%、78.4%和77.7%、21.6%和22.3%、6.7%和4.4%;其中AH组的种植率、临床妊娠率及多胎率与非AH组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论采用激光削薄方法进行AH可以提高冷冻复苏第3天胚胎移植后的种植率及临床妊娠率,而对活产率无明显影响。

关键词：激光辅助孵化冻存复苏移植

人卵泡液氨基酸谱影响卵母细胞发育潜能的初步研究

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中国优生与遗传杂志 2012年第6期20卷 100-102,80页

作者：林楠冯云牛志宏谷瑞环上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心上海200025

目的分析体外受精(IVF)患者单卵泡液氨基酸谱含量与卵母细胞发育潜能的相关性。方法利用高效液相色谱(HPLC)分析技术检测49份IVF患者优势卵泡的单卵泡液氨基酸谱,并追踪所获卵母细胞发育结局。依据取卵后第三天(D3)胚胎评分分为可用胚胎... 详细信息

目的分析体外受精(IVF)患者单卵泡液氨基酸谱含量与卵母细胞发育潜能的相关性。方法利用高效液相色谱(HPLC)分析技术检测49份IVF患者优势卵泡的单卵泡液氨基酸谱,并追踪所获卵母细胞发育结局。依据取卵后第三天(D3)胚胎评分分为可用胚胎组(A组)与不可用胚胎组(B组),比较两组氨基酸谱含量差异。结果①两组患者的年龄、不孕年限、体重指数、基础性激素及用药支数均无统计学差异(P>0.05);②A组患者的取卵数、受精率及卵裂率略高于B组,但无统计学意义(P>0.05);A组患者的可用胚胎数及可用胚胎率(7.41±4.64、65.15%)显著高于B组(5.00±3.38、49.75%)(P0.05)。④利用ROC曲线确定卵泡液中Ala含量预测可用胚胎形成的临界值为325.4μmol/ml,灵敏度63%,特异度81.8%。结论优势卵泡的发育可在一定程度上反映IVF患者的总体情况,卵泡液中Ala含量可作为预测卵母细胞受精后早期胚胎发育的参考指标之一。

关键词：卵泡液氨基酸卵母细胞发育潜能可用胚胎

多囊卵巢综合征患者体重指数与卵泡液氧化应激指标的相关研究

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中华内分泌代谢杂志 2012年第8期28卷 627-630页

作者：牛志宏吴丹丹谷瑞环程美玉吴铃冯云上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心 200025

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者体重指数与卵泡液氧化应激指标活性氧簇（ROS）和总抗氧化能力（TAC）之间的相关性。方法所有纳入者均为实施体外受精一胚胎移植助孕技术的不孕症患者。55例PCOS患者分为超重组（23例）和正常体重组... 详细信息

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者体重指数与卵泡液氧化应激指标活性氧簇（ROS）和总抗氧化能力（TAC）之间的相关性。方法所有纳入者均为实施体外受精一胚胎移植助孕技术的不孕症患者。55例PCOS患者分为超重组（23例）和正常体重组（32例），55名年龄匹配月经正常的非PCOS妇女分为正常对照组（30名）和超重组（25名），测定血中基础性激素水平、总胆固醇、甘油三酯水平。在经过促排卵治疗后，取卵目测定卯泡液中ROS与TAC。结果超重和超重PCOS组患者甘油三酯水平高于正常对照和正常体重PCOS组患者[分别为（1．9±1．1、1．7±0．9、1．0±0．5、1．2±0．7）mmol／L，均P〈0．05]，超重和超重PCOS组患者总胆固醇水平高于正常对照组[分别为（4．8±1．2、5．2±1．1、4．0±0．6）mmol／L，均P〈0．05]。与PCOS正常体重组及非PCOS女性相比，超重PCOS组患者，卵泡液内ROS和ROS／TAC分别为（35．4±6．7）RLU／S及39．8＋22．0，均比其他3组患者明显升高，而TAC为（0．8±0．5）Mm，较其他3组明显下降（均P〈0．05）。在正常体重女性，PCOS患者ROS／TAC高于非PCOS组（26．5±14．5对14．2±12．5．P〈0．05）。PCOS患者卵泡液ROS、ROS／TAC均与体重指数呈正相关（r=0．34和r=0．32，均P〈0．05）。结论PCOS患者卯泡液内存在氧化应激状态的异常，且其异常状态与体重指数有正相关性。

关键词：多囊卵巢综合征体重指数氧化应激

应用RNA干扰技术体外抑制兔成纤维细胞HGPRT的表达及其核移植研究(英文)

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生物化学与生物物理进展 2009年第7期36卷 872-879页

作者：郭毅张传山李善刚李锋谷瑞环邢凤英李垚姚刚陈学进上海交通大学医学院实验动物科学部上海200025 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052

次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(hypoxanthine guaninephos phoribosyltransferase,HGPRT)的功能缺失与痛风、肾结石和雷纳综合症(Lesch-Nyhan Syndrome)等疾病相关.制作HGPRT基因表达降低的模式动物,将有利于人们对这种疾病的发病机... 详细信息

次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(hypoxanthine guaninephos phoribosyltransferase,HGPRT)的功能缺失与痛风、肾结石和雷纳综合症(Lesch-Nyhan Syndrome)等疾病相关.制作HGPRT基因表达降低的模式动物,将有利于人们对这种疾病的发病机理和治疗做进一步的研究.构建了针对HGPRT基因表达的shRNA干扰载体,并将质粒转染兔成纤维细胞,获得携带该干扰片段的转基因细胞系,经PCR鉴定转基因成纤维细胞克隆阳性率为83.3%.RT-PCR及Western blot检测结果表明转基因干扰成纤维细胞系HGPRT mRNA和蛋白质表达量明显降低.最后,以转基因成纤维细胞进行核移植,囊胚率为27.8%,与正常来源的成纤维细胞囊胚率相比较差异不显著.说明,通过RNAi可稳定干扰兔成纤维细胞HGPRT基因的表达,为进一步通过核移植技术建立HGPRT RNAi转基因兔模型创造条件.

关键词： RNA干扰兔成纤维体细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HGPRT) 核移植