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增龄对正常和胰岛素抵抗wistar大鼠胰岛β细胞功能的影响及机制初探

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增龄对正常和胰岛素抵抗wistar大鼠胰岛β细胞功能的影响及机制初...

作者：谷昭艳中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的本文以不同月龄组wistar大鼠作为动物增龄模型,从动物、细胞和分子生物水平对正常大鼠和胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠进行了研究,旨在探讨增龄对正常和IRwistar大鼠胰岛β细胞功能的影响及可能的作用机制。本研究共包括... 详细信息

目的本文以不同月龄组wistar大鼠作为动物增龄模型,从动物、细胞和分子生物水平对正常大鼠和胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠进行了研究,旨在探讨增龄对正常和IRwistar大鼠胰岛β细胞功能的影响及可能的作用机制。本研究共包括以下三部分:1、增龄对正常大鼠胰岛β细胞功能的影响及机制探讨;2、增龄对IR大鼠胰岛β细胞功能的影响及机制探讨;3、增龄对正常和胰岛素抵抗wistar大鼠胰岛β细胞功能影响的比较研究。方法1.研究对象为2月龄、12月龄和22月龄的正常雄性wistar大鼠,分别代表青年组、中年组和老年组。经普通饲料饲养两个月,观察如下指标: (1).大鼠的一般特征:饮食情况、体重和生化指标。 (2).大鼠胰岛素的敏感性:使用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术。 (3).大鼠胰岛β细胞功能的变化:①体内实验:葡萄糖耐量试验。②体外实验:分离大鼠原代胰岛细胞进行葡萄糖刺激试验和棕榈酸刺激试验。 (4).增龄对胰岛β细胞功能影响的机制探讨:①氧化应激的影响:监测大鼠血清中总SOD活性、CuZn-SOD活性、GSH-Px活性和MDA活性。②胰岛增生与调亡的改变:使用免疫组化双染法分别分析胰腺组织中胰岛素与Ki67增生、胰岛素与TUNEL凋亡、胰岛素与胰高血糖素之间的关系。③基因水平的改变:使用基因芯片技术分析各组原代大鼠胰岛的差异基因。④mRNA及蛋白表达改变:使用实时PCR和western blot验证差异基因的表达情况。 2.将2月龄、12月龄、22月龄正常雄性wistar大鼠以高糖高脂饲料饲养两个月,造成IR模型。观察指标同1。 3.通过比较正常组与IR组wistar大鼠观察结果的差异,分析增龄对正常和IR大鼠胰岛β细胞功能影响的差异及可能机制。综合结果1.①一般状况:随着月龄的增加,大鼠体重增长程度减缓(P＜0.05):IR大鼠增长速度快于正常大鼠(P＜0.05)。②与青年大鼠相比,老年大鼠TG、TC、LDL-CH、FFA水平升高,HDL-CH水平降低;与青年IR大鼠相比,中、老年IR大鼠上述指标紊乱更为显著(P＜0.05)。 2.胰岛素敏感性的改变:HOMA-IR随大鼠月龄增加而增加(P＜0.05),且IR组高于正常组(P＜0.05)。高胰岛素-正葡萄糖钳夹结果显示葡萄糖输注速率(GIR)随着月龄的增加而降低(P＜0.05);IR组GIR低于正常组(P＜0.05)。 3.胰岛功能的改变:①OGTT试验血糖的变化:与青年大鼠比较,中、老年大鼠血糖达峰时间延长,OGTT2h血糖增高,AUCg增加;在IR大鼠,这一表现更为显著。②OGTT试验胰岛素分泌功能的变化:随着月龄增加,大鼠FINS水平逐步升高(P＜0.01);葡萄糖刺激后,与青年大鼠相比,老年组出现胰岛素达峰时间延迟,ΔI/ΔG降低,AUCi增加(P均＜0.05)。③随大鼠月龄增加,胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素释放指数(GSIR index)和棕榈酸刺激的胰岛素释放(PSIR)均减少(P均＜0.05),IR组低于正常组(P＜0.05)。 4.增龄对正常和IR大鼠胰岛β细胞功能影响差异的可能机制:①氧化应激的影响:随月龄增加,总SOD、CuZn-SOD、GSH-Px活性均降低,而MDA活性升高;IR组内上述指标改变更明显。②胰岛增生与凋亡的改变:随着大鼠月龄增加,胰高血糖素和TUNEL凋亡表达增多,胰岛素和Ki67增生表达减少;IR组内上述指标改变更明显。③基因水平的改变:将正常和IR组内的中、青年大鼠胰岛的共同差异表达基因进行分析发现,与细胞周期、糖脂代谢、信号传导、蛋白合成及基因转录调控有关的基因在已知功能基因中占了绝大部分,其中调控细胞周期和糖脂代谢的基因改变最明显,如Spp1、Anxa1、Cyclin A2、CDK4表达上调,而Cyclin D2表达下调。④mRNA及蛋白表达改变:在实时PCR中,随着月龄增加,胰岛内Anxa1、CDK4基因表达上调;在western blot中,随月龄增加,Anxa1的蛋白表达增加,但CDK4蛋白表达未见明显变化。结论随着月龄增加,正常大鼠和IR大鼠都表现出胰岛β细胞功能减退,这种改变在IR组更为显著,这可能与增龄过程中体重增加、代谢紊乱加重、机体氧化应激加重、胰岛的增生与凋亡失衡、以及某些与糖脂代谢调节有关的基因如Anxa1等表达差异有关。IR可以加重上述改变。

关键词：增龄大鼠胰岛分泌功能胰岛素抵抗机制

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原代大鼠主动脉内皮细胞衰老模型的建立

细胞与分子免疫学杂志 2019年第3期35卷 230-235页

作者：苗新宇朱潇潇龚燕平谷昭艳李春霖解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853

目的建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H_2O_2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用。方法取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD3... 详细信息

目的建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H_2O_2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用。方法取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD31的表达并进行鉴定。分别应用30 mmol/L葡萄糖(HG)、 10μmol/L AngⅡ、 100μmol/L H_2O_2、 0.5 mmol/L PA处理原代RAEC 24 h。采用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况,实时荧光定量PCR检测衰老相关基因P16 mRNA的水平, Western blot法检测衰老相关基因P16、 P21、 P53蛋白水平;免疫荧光细胞化学染色观察P16的表达, CCK-8法观察细胞存活率。结果与对照组相比,各处理组RAEC中β-半乳糖苷酶染色细胞增加,以H_2O_2、 PA处理组更明显; HG、 AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增加RAEC的P16 mRNA水平; AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增强RAEC的P16、 P21蛋白水平,以H_2O_2组最显著。各处理组细胞P16表达均增强,与对照组相比, HG组与AngⅡ组细胞存活率变化不大, H_2O_2组与PA组细胞存活率显著降低。结论 HG、 AngⅡ、 H_2O_2及PA均可诱导建立RAEC衰老模型,以H_2O_2诱导衰老作用最强。

关键词：衰老大鼠主动脉内皮细胞(RAEC) 原代培养

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膜联蛋白1(ANXA1)功能的研究进展

军医进修学院学报 2012年第4期33卷 415-417页

作者：谷昭艳刘瑜李春霖解放军总医院南楼内分泌科北京100853

膜联蛋白(Annexins)是一类钙依赖的磷脂结合蛋白超家族,研究发现其普遍存在于除细菌外的动物、植物及菌类多种生物体内,几乎所有器官中均有表达。ANXA1是该家族第一个被发现的成员,参与抗炎症反应、细胞分化和增殖、细胞死亡信号调控、... 详细信息

膜联蛋白(Annexins)是一类钙依赖的磷脂结合蛋白超家族,研究发现其普遍存在于除细菌外的动物、植物及菌类多种生物体内,几乎所有器官中均有表达。ANXA1是该家族第一个被发现的成员,参与抗炎症反应、细胞分化和增殖、细胞死亡信号调控、凋亡细胞吞噬清除等许多细胞生命活动。本文对ANXA1功能的研究进展作一综述。

关键词：膜联蛋白1 抗炎症反应增殖凋亡胰岛素分泌

Android平台下游戏引擎库的设计与实现

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作者：谷艳昭内蒙古师范大学

学位级别：硕士

随着3G移动互联网地正式商用普及，智能手机等移动设备硬件性能的不断提高，越来越多的人关注手机应用程序。以手机游戏为代表的移动多媒体无线增值业务逐渐成为热点。面对广阔的市场和无限的潜在用户群体，中国三大主要移动运营商都在... 详细信息

随着3G移动互联网地正式商用普及，智能手机等移动设备硬件性能的不断提高，越来越多的人关注手机应用程序。以手机游戏为代表的移动多媒体无线增值业务逐渐成为热点。面对广阔的市场和无限的潜在用户群体，中国三大主要移动运营商都在积极致力于发展手机游戏业务，力求使手机游戏变得更加丰富多彩，以满足消费者日益增长的娱乐需求。手机游戏引擎研究，对开发手机游戏有着极其重要的应用价值。本文主要研究了如何来实现一个高性能的手机游戏引擎，性能和算法优化是本论文关注的重点，因为性能问题是在android手机上开发游戏的最大瓶颈。游戏引擎就是用于控制所有游戏功能的主循环，从计算物体碰撞、物理系统和物体的相对位置，到接受玩家的输入，处理输入的信息，显示提示信息，以及按照正确的音量输出声音、提供各种工具和插件等等。每一款游戏都有自己的引擎，但是能真正能获得他人认可并成为标准的引擎并不多，所以游戏引擎的研究成为游戏开发领域发展的一个重要方向。本文在对Android平台分析与研究的基础上，设计与实现了该平台上游戏引擎库以辅助开发人员快速高效的开发出高性能的手机游戏，实现对代码的高度复用以达到软件设计中所说的“低耦合，高聚合”的效果。

关键词： Android 游戏引擎智能手机手机游戏

成年人群血清C肽与胰岛素的相关性及对应值的分析

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中华医学杂志 2023年第15期103卷 1127-1133页

作者：方福生王宁孙菁刘星宇王薇孙般若谷昭艳傅晓敏李红闫双通解放军总医院第二医学中心保健一科北京100853 解放军总医院第二医学中心健康医学科北京100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853 解放军总医院第一医学中心内分泌科北京100853

目的探讨成年人群血清C肽与胰岛素的相关性,建立血清C肽对应的胰岛素值。方法横断面研究。回顾性纳入2017年1月至2021年12月于解放军总医院第二医学中心行健康体检的成年人群的临床资料,根据糖尿病诊断标准将受试者分为2型糖尿病组、糖... 详细信息

目的探讨成年人群血清C肽与胰岛素的相关性,建立血清C肽对应的胰岛素值。方法横断面研究。回顾性纳入2017年1月至2021年12月于解放军总医院第二医学中心行健康体检的成年人群的临床资料,根据糖尿病诊断标准将受试者分为2型糖尿病组、糖尿病前期组和正常血糖组。采用Pearson相关分析、线性回归分析和非线性回归分析等方法探讨血清C肽与胰岛素的相关性,并建立血清C肽对应的胰岛素值。结果共纳入48008名成年受试者,男31633名(65.9%),女16375名(34.1%),年龄(50.1±9.9)岁(18~89岁);其中2型糖尿病组8160例(17.0%),糖尿病前期组13263例(27.6%),正常血糖组26585名(55.4%)。3组血清空腹C肽[FCP,M(Q_(1),Q_(3))]分别为2.76(2.18,3.47)、2.54(1.99,3.21)和2.18(1.71,2.79)μg/L;3组空腹胰岛素[FINS,M(Q_(1),Q_(3))]分别为10.98(7.57,16.09)、10.06(6.95,14.47)和8.43(5.86,12.12)mU/L。FCP与FINS(r=0.82)、餐后2 h C肽(2 h CP)与餐后2 h胰岛素(2 h INS)(r=0.84)均呈正相关(P<0.001)。FCP与FINS(R^(2)=0.68)、2 h CP与2 h INS(R^(2)=0.71)均呈线性相关(P<0.001)。FCP与FINS(R^(2)=0.74)、2 h CP与2 h INS(R^(2)=0.78)均呈幂函数相关(P<0.001),不同糖代谢状态亚组分析结果相似。幂函数模型拟合度高于线性模型,幂函数模型为最佳模型,幂函数方程分别为FINS=2.96×FCP^(1.32)、2 h INS=1.64×(2 h CP)^(1.60)。多因素线性回归分析显示,在调整相关混杂因素后,FCP是FINS(R^(2)=0.70,P<0.001)的相关因素,2 h CP是2 h INS(R^(2)=0.73,P<0.001)的相关因素。结论成年人群FCP与FINS、2 h CP与2 h INS均呈幂函数相关。本研究建立血清C肽水平分别对应的胰岛素值。

关键词：糖尿病,2型糖尿病前期 C肽胰岛素相关性成年人

不同糖代谢状态成年人血红蛋白与血尿酸的关联分析

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中华预防医学杂志 2023年第4期57卷 516-521页

作者：方福生王宁孙菁孙般若刘星宇王薇谷昭艳傅晓敏李红闫双通解放军总医院第二医学中心保健一科北京100853 解放军总医院第二医学中心健康医学科北京100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853 解放军总医院第一医学中心内分泌科北京100853

目的探讨不同糖代谢状态成年人群血红蛋白与血尿酸的关联。方法收集2018年1月至2021年12月在解放军总医院第二医学中心进行健康体检的成年人群的人口学资料及生化指标,按血尿酸水平分为正常血尿酸和高尿酸血症2组,采用Pearson相关分析、... 详细信息

目的探讨不同糖代谢状态成年人群血红蛋白与血尿酸的关联。方法收集2018年1月至2021年12月在解放军总医院第二医学中心进行健康体检的成年人群的人口学资料及生化指标,按血尿酸水平分为正常血尿酸和高尿酸血症2组,采用Pearson相关分析、logistic回归分析血红蛋白(按四分位分为Q1~Q44个亚层)与血尿酸的关联性,并分析年龄和糖代谢状态对血红蛋白与血尿酸关联的影响。结果共纳入研究对象33183名,年龄(50.6±10.0)岁。正常血尿酸组血红蛋白(142.61±14.24)g/L显著低于高尿酸血症组(151.79±11.24)g/L,差异有统计学意义(P<0.001)。单因素Pearson相关分析显示,血红蛋白与血尿酸呈正相关(r=0.444,P<0.001)。在调整相关混杂因素后,多因素logistic回归分析显示,血红蛋白与血尿酸之间存在关联,与血红蛋白Q1组相比,血红蛋白Q2~Q4组出现高尿酸血症的OR(95%CI)值分别为1.29(1.13~1.48)、1.42(1.24~1.62)和1.51(1.32~1.72),P_(趋势)<0.001;亚组和交互分析显示,随着血红蛋白升高,年龄<60岁、正常血糖、糖尿病前期的成年人血尿酸均随之升高(P_(趋势)<0.05,P_(交互)<0.001)。结论成年人血红蛋白与血尿酸关联受年龄和糖代谢状态的影响。

关键词：血红蛋白血尿酸 2型糖尿病糖尿病前期横断面研究

基于C肽的胰岛素抵抗指数可准确评估健康体检者的胰岛素抵抗与血尿酸水平的相关性

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南方医科大学学报 2023年第9期43卷 1509-1514页

作者：方福生王宁刘星宇王薇孙菁李红孙般若谷昭艳傅晓敏闫双通解放军总医院第二医学中心保健一科北京100853 解放军总医院第二医学中心健康医学科北京100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京100853 解放军总医院第二医学中心第一医学中心内分泌科北京100853

目的探讨基于C肽的胰岛素抵抗指数在评估健康体检人群胰岛素抵抗与血尿酸(Ua)水平关联中的作用。方法回顾性收集2017年1月~2021年12月在解放军总医院第二医学中心进行健康体检的资料46017例,根据Ua水平分为两组:Ua≤420μmol/L和Ua>420... 详细信息

目的探讨基于C肽的胰岛素抵抗指数在评估健康体检人群胰岛素抵抗与血尿酸(Ua)水平关联中的作用。方法回顾性收集2017年1月~2021年12月在解放军总医院第二医学中心进行健康体检的资料46017例,根据Ua水平分为两组:Ua≤420μmol/L和Ua>420μmol/L,比较两组胰岛素抵抗指数(HOMA2-IR)、基于C肽的胰岛素抵抗指数(HOMA2 IR-CP)水平的差异,采用Pearson相关分析、线性回归分析HOMA2-IR、HOMA2 IR-CP与Ua的相关性,分层交互分析不同亚组间HOMA2-IR、HOMA2 IR-CP与Ua的关联是否存在差异,利用ROC曲线评价HOMA2-IR、HOMA2IR-CP对Ua升高的预测能力。结果Ua≤420μmol/L组HOMA2-IR、HOMA2IR-CP水平均显著低于Ua>420μmol/L(P<0.001)。单因素Pearson相关分析显示HOMA2-IR与Ua(r=0.262,P<0.001)弱相关,HOMA2 IR-CP与Ua(r=0.409,P<0.001)中等强度相关。多因素线性回归分析提示在调整相关混淆因素后HOMA2-IR(R2=0.445,P<0.001)或HOMA2IR-CP(R2=0.461,P<0.001)均是Ua水平的影响因素。分层交互分析发现不同性别、年龄、糖代谢亚组间胰岛素抵抗指数与Ua的关联均存在差异(P<0.001)。ROC曲线显示HOMA2-IR、HOMA2 IR-CP预测Ua升高的曲线下面积分别为0.662、0.722。结论HOMA2IR-CP更为准确地评估胰岛素抵抗与血尿酸水平关联。

关键词：胰岛素抵抗血尿酸血清胰岛素血清C肽 2型糖尿病

三亚市农村绝经期女性骨质疏松社区护理干预效果的评价

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中国病案 2020年第10期21卷 109-112页

作者：唐果潘丽茹谷昭艳方翠解放军总医院第一医学中心干部诊疗科北京市100853 解放军总医院第一医学中心普通外科北京市100853 解放军总医院第二医学中心内分泌科北京市100853 解放军总医院第一医学中心内分泌科北京市100853

目的观察社区护理对绝经后骨质疏松女性的干预效果。方法选取三亚市2017年6月1日-2019年1月1日某区农村187例60岁以上无重大疾病的绝经期女性,根据随机数字表进行分组,分为干预组(n=93)和对照组(n=92),均对其24小时尿钙值进行检测,其中... 详细信息

目的观察社区护理对绝经后骨质疏松女性的干预效果。方法选取三亚市2017年6月1日-2019年1月1日某区农村187例60岁以上无重大疾病的绝经期女性,根据随机数字表进行分组,分为干预组(n=93)和对照组(n=92),均对其24小时尿钙值进行检测,其中干预组需定期进行社区(心理、运动、饮食)护理,干预1年时间。对比两组前后1年时间24小时尿钙值的变化,及对24小时尿钙值与骨质疏松之间的关系进行横断面相关性分析,进而评价干预效果。结果通过护理1年后对两组的尿钙值及骨密度比较发现,24小时尿钙值确实有不同程度的下降,干预组与对照组尿钙值情况比较(2.39±0.39 VS 3.55±0.41)及骨质异常情况比较均有统计学意义。通过尿钙与骨量的拟合曲线的结果发现,24小时尿钙值在3.62mmol/天以上的绝经期女性骨量减少的风险明显上升。结论对农村绝经期女性骨质疏松进行积极社区护理干预措施可以有效降低24小时尿钙值,并可能预防或延缓骨质疏松的发生发展。24小时尿钙检测作为评价骨质疏松护理干预效果的一个辅助指标,可以推广。

关键词：骨质疏松绝经期女性 24小时尿钙社区护理干预

格列喹酮干预治疗对糖尿病大鼠肾脏组织及核因子-κB与炎症因子表达影响的观察

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中国糖尿病杂志 2015年第8期23卷 742-746页

作者：闫双通李春霖陆菊明田慧肖彧君刘瑜谷昭艳解放军总医院老年内分泌科北京100853 解放军总医院内分泌科北京100853

目的探讨格列喹酮干预治疗对糖尿病肾脏病变中肾小球病理改变的影响以及对核因子-κB(NF-κB)、环氧合酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法将8月龄雄性Wistar大鼠24只分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组和格列喹酮干... 详细信息

目的探讨格列喹酮干预治疗对糖尿病肾脏病变中肾小球病理改变的影响以及对核因子-κB(NF-κB)、环氧合酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法将8月龄雄性Wistar大鼠24只分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组和格列喹酮干预(GI)组,每组8只。NC组予普通饮食喂养,糖尿病大鼠采用高糖高脂饮食及腹腔注射STZ制备。GI组在成模后予格列喹酮喂养干预。喂养2月后处死,留取各组肾脏标本,观察肾脏病理改变。采用分子生物学方法检测肾脏组织NF-κB、COX-2和iNOS表达情况。结果与NC组相比,DM、GI组肾脏均有不同程度受损表现,其中,DM组病理改变最明显。与NC组相比,DM、GI组肾脏组织NF-κB、COX-2和iNOS表达均增加,GI组表达低于DM组(P<0.05)。结论 NF-κB激活及其启动的下游炎症因子在DN发生发展过程中可能起重要作用,格列喹酮干预治疗可抑制NF-κB激活及相应炎症因子表达,间接起到肾脏保护作用。

关键词：糖尿病格列喹酮肾脏炎症因子大鼠