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用原位杂交法研究猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位

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南京农业大学学报 2002年第1期25卷 80-84页

作者：王红星雷治海丁菲谭湘陵南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南通医学院分子神经生物学实验室江苏南通226001

用体外转录方法合成了瘦素 (leptin)长形受体 (Ob Rb)反义和正义RNA探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位。结果表明 ,猪瘦素长形受体mRNA分布于下丘脑的弓状核、腹内侧核、背内侧核、室旁核。

关键词：猪瘦素长形受体 mRNA 下丘脑原位杂交法分布定位

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小鼠SP2/0细胞移植瘤的遗传修饰位点

癌症 2008年第7期27卷 703-709页

作者：季俐俐钱晓伟谭湘陵南通大学医学院病理教研室江苏南通226001 南通大学生命科学学院江苏南通226007

背景与目的:我们的研究发现BALB/c小鼠是SP2/0细胞移植瘤的敏感小鼠,而C57BL/6J小鼠则是抗性小鼠。本研究利用这两种近交系小鼠和它们杂交的F2代进行移植肿瘤重量遗传修饰位点的检测。方法:对208只BALB/c×C57BL/6J的F2代小鼠左后腿皮... 详细信息

背景与目的:我们的研究发现BALB/c小鼠是SP2/0细胞移植瘤的敏感小鼠,而C57BL/6J小鼠则是抗性小鼠。本研究利用这两种近交系小鼠和它们杂交的F2代进行移植肿瘤重量遗传修饰位点的检测。方法:对208只BALB/c×C57BL/6J的F2代小鼠左后腿皮下注射5.0×106个SP2/0细胞,在注射后第17天处死小鼠,记录移植瘤的数量和重量。采用覆盖小鼠所有染色体的85个微卫星标记,对208只F2代小鼠进行全基因组扫描,并进行复合区间作图。结果:发现8个变异解释率>10%的位点与肿瘤生长有关(P<0.01),它们分别位于1号(D1Mit113,55cM和D1Mit407,52cM)、4号(D4Mit226,41cM)、9号(D9Mit302,55cM)、10号(D10Mit264,42cM)、11号(D11Mit115,35cM)、14号(D14Mit125,45cM)和18号染色体(D18Mit123,31cM)上。结论:个体对SP2/0细胞移植瘤的易感性受多位点变异控制,找到目标位点有助于基因单倍型确认和肿瘤易感性/抗性基因的精细研究。

关键词：移植瘤 SP2/0细胞修饰位点小鼠

淹涝和低温胁迫对小麦幼根ADH与BADH表达的影响

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江苏农业科学 2011年第6期39卷 153-154页

作者：严建萍梁燕谭湘陵南通高等师范学校江苏南通226001 南通大学生物工程研究所江苏南通226019

测定淹涝和低温胁迫下小麦幼根中乙醇脱氢酶(ADH)和甜菜碱醛脱氢酶(BADH)表达变化。扬麦13号种子,种植于花盆土壤中,待幼苗生长至1 cm左右时,随机分为对照组、淹涝胁迫组和低温胁迫组,对照组和淹涝胁迫组均置25℃植物培养箱中,其中淹涝... 详细信息

测定淹涝和低温胁迫下小麦幼根中乙醇脱氢酶(ADH)和甜菜碱醛脱氢酶(BADH)表达变化。扬麦13号种子,种植于花盆土壤中,待幼苗生长至1 cm左右时,随机分为对照组、淹涝胁迫组和低温胁迫组,对照组和淹涝胁迫组均置25℃植物培养箱中,其中淹涝组淹没于水中;低温组置5℃植物培养箱中,光照/黑暗12 h交替,每日适量浇水。各组分别在0 h、12 h、1 d、2 d、4 d和8 d时取根,剪取根尖处1 cm组织,提取总RNA,逆转录,荧光定量PCR法测定ADH2a和BADH表达。结果显示:低温和淹涝对ADH表达均具有极为显著的刺激作用,且淹涝胁迫的作用又远大于低温胁迫;低温对BADH表达的刺激作用主要表现在1 d时,淹涝对BADH表达在2 d和4 d时表现出较为显著的抑制作用;小麦ADH和BADH在低温和淹涝胁迫下表达变化可能与抗逆性有关。

关键词：小麦乙醇脱氢酶甜菜碱醛脱氢酶淹涝低温

低温胁迫下水稻幼根乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶基因表达变化

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江苏农业科学 2012年第3期40卷 43-45页

作者：梁燕严建萍谭湘陵南通高等师范学校江苏南通226001 南通大学生物工程研究所江苏南通226019

为研究低温胁迫下水稻幼根中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)基因表达变化,选取南粳44号水稻种子,常规促发芽,待幼根发至长1cm时,将其随机分为对照组和试验组,分别置于25℃和5℃环境下,两组均分别在0、6、12、24、48、96 h取根,提取R... 详细信息

为研究低温胁迫下水稻幼根中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)基因表达变化,选取南粳44号水稻种子,常规促发芽,待幼根发至长1cm时,将其随机分为对照组和试验组,分别置于25℃和5℃环境下,两组均分别在0、6、12、24、48、96 h取根,提取RNA,逆转录,用荧光定量PCR法测定ADH和ALDH基因的表达量。结果显示ADH和ALDH表达量均呈现出先降后升的变化趋势;试验组的表达量均显著高于对照组。结果表明水稻ADH和ALDH在低温胁迫下表达量升高可能与低温抗逆性有关。

关键词： ADH基因 ALDH基因低温胁迫表达

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Flamingo钙黏蛋白亚家族的进化研究

解剖学报 2008年第1期39卷 74-78页

作者：施李丽谭湘陵朱新宇南通大学江苏省神经再生重点实验室南通226001 南通大学生命科学学院南通226007

目的对flamingo钙黏蛋白亚家族进行系统发育研究,探索脊椎动物与非脊椎动物中flamingo钙黏蛋白的进化差异。方法构建系统发育树,进行蛋白质结构域比较和基因结构分析。结果Flamingo钙黏蛋白亚家族起源于真后生动物;在脊椎动物进化过程... 详细信息

目的对flamingo钙黏蛋白亚家族进行系统发育研究,探索脊椎动物与非脊椎动物中flamingo钙黏蛋白的进化差异。方法构建系统发育树,进行蛋白质结构域比较和基因结构分析。结果Flamingo钙黏蛋白亚家族起源于真后生动物;在脊椎动物进化过程中发生了两次基因重复获得3个同源拷贝;脊椎动物flamingo蛋白序列结构域中含有保守的内含子插入及胞质区含有两个高度保守模序作为其进化特征。结论Flamingo钙黏蛋白在脊椎动物与非脊椎动物中存在明显的进化差异,结合小鼠flamingo同源拷贝之一Celsr1基因位于已获得的小鼠脊髓发育相关数量性状基因座(QTL)内,可将Celsr1基因作为小鼠脊髓发育的候选基因进行进一步的研究。

关键词： flamingo钙黏蛋白亚家族系统发育基因重复内含子插入

杜仲对去势大鼠股骨与腰椎骨的显微和超微结构的影响研究

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中国药房 2009年第24期20卷 1855-1857页

作者：张贤蔡建平赵春谭湘陵江苏无锡市中医医院骨伤科无锡市214001 南通大学生命科学学院南通市226007

目的:研究杜仲对去势大鼠股骨与腰椎骨的显微和超微结构的影响。方法:80只4月龄雌性SD大鼠随机分成4组,即假手术、模型、阿法骨化醇及杜仲组。除假手术组打开腹腔、暴露卵巢后即缝合外,其余3组均摘除双侧卵巢。大鼠手术10d后灌胃给药。... 详细信息

目的:研究杜仲对去势大鼠股骨与腰椎骨的显微和超微结构的影响。方法:80只4月龄雌性SD大鼠随机分成4组,即假手术、模型、阿法骨化醇及杜仲组。除假手术组打开腹腔、暴露卵巢后即缝合外,其余3组均摘除双侧卵巢。大鼠手术10d后灌胃给药。3个月后解剖取股骨和第一腰椎骨,4%戊二醛固定,3d后浸入4%EDTA溶液中脱钙,4周后进行光镜和电镜观察。结果:光镜中去势大鼠的股骨和腰椎骨中大量充斥着脂肪,骨小梁密度显著下降,而阿法骨化醇和杜仲干预的骨组织中,脂肪显著减少,骨小梁密度和厚度上升。电镜观察结果表明,去势大鼠的股骨和腰椎骨中破骨细胞的粗面内质网、溶酶体和线粒体发达,部分成骨细胞萎缩,内质网等细胞器含量显著降低,部分细胞出现凋亡;而阿法骨化醇和杜仲干预的骨组织中,上述变化得到较大程度的纠正。结论:杜仲对去势大鼠所致的骨质疏松具有良好的干预作用,其机制主要体现在抑制脂肪合成和破骨细胞活力、提高成骨细胞活力、抑制细胞凋亡。

关键词：杜仲去势大鼠骨质疏松显微结构超微结构

杜仲水/醇提取物对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

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中国老年学杂志 2010年第22期30卷 3313-3314页

作者：张艳红谢焕松夏树林赵春谭湘陵南通大学生命科学学院江苏南通226007 南通大学生物工程研究所

目的观察杜仲水提取物和醇提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法 SD大鼠骨髓细胞体外培养并传代3次后进行成骨化诱导,诱导物分为水/醇提取物的102、103、104和1054个稀释度。诱导6 d后,测定细胞增殖活力和细胞碱性... 详细信息

目的观察杜仲水提取物和醇提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法 SD大鼠骨髓细胞体外培养并传代3次后进行成骨化诱导,诱导物分为水/醇提取物的102、103、104和1054个稀释度。诱导6 d后,测定细胞增殖活力和细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,14 d后水溶性茜素红S染色法钙化测定结节形成。结果杜仲水/醇提取物对MSCs的增殖活力均无明显影响,对ALP活力均有上调作用。水/醇提取物在103到105稀释度下,对钙化结节的形成具有显著刺激作用,醇提取物对ALP活性和钙化结节形成的促进作用大于水提取物。结论杜仲水/醇提取物能促进骨髓MSCs成骨分化,醇提取物的作用大于水提取物。

关键词：杜仲大鼠间充质干细胞成骨分化

骨质疏松症大鼠血液中碱性磷酸酶来源方式探讨

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山东医药 2011年第19期51卷 8-9页

作者：林社裕谭湘陵南通大学生命科学学院江苏南通226007

目的探讨骨质疏松症大鼠的血液碱性磷酸酶(ALP)的来源方式。方法 40只4个月龄雌性SD大鼠,分为两组,模型组和假手术组(对照组),模型组进行双侧卵巢摘除,对照组只打开腹腔。实验动物颈椎脱臼处死后,取股骨,去尽肌肉与结缔组织,截取相应的... 详细信息

目的探讨骨质疏松症大鼠的血液碱性磷酸酶(ALP)的来源方式。方法 40只4个月龄雌性SD大鼠,分为两组,模型组和假手术组(对照组),模型组进行双侧卵巢摘除,对照组只打开腹腔。实验动物颈椎脱臼处死后,取股骨,去尽肌肉与结缔组织,截取相应的骨组织浸入4%多聚甲醛中固定3 d,然后浸入4%EDTA溶液中,室温脱钙4周,每周换液1次。采用原位杂交和免疫组化法分别检测骨组织中ALP表达情况。结果对照组骨组织中的ALP蛋白及ALP mRNA表达含量均明显高于模型组,P均<0.01。结论骨质疏松症大鼠血液中的ALP主要来源于成骨细胞破坏;骨组织ALP水平可作为其他细胞向成骨细胞分化的一个鉴定指标。

关键词：骨质疏松症碱性磷酸酶成骨细胞

Sox6基因和Col2a1在大鼠bMSCs体外成软骨分化中表达及其意义

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江苏医药 2012年第19期38卷 2240-2243,F0002页

作者：钱晓伟谭湘陵张贤蔡建平南通大学生物工程研究所江苏省226019 无锡中医医院骨伤科

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Sox6基因和Ⅱ型胶原α1(Col2α1)表达水平的变化及其意义。方法 2个月龄SD大鼠分离bMSCs,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养。传至第3代后,细胞分为诱导组和未诱导组,诱导... 详细信息

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Sox6基因和Ⅱ型胶原α1(Col2α1)表达水平的变化及其意义。方法 2个月龄SD大鼠分离bMSCs,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养。传至第3代后,细胞分为诱导组和未诱导组,诱导组在培养基中添加含转化生长因子β1(TGF-β1)的诱导剂,分别在诱导后3、6、12、24h、3、7和14d提取细胞总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Sox6基因和Col2α1基因的表达。同时应用细胞免疫化学法检测诱导14d的Col2α1的表达。结果与未诱导组细胞比较,bMSCs在TGF-β1的诱导下,形态上发生软骨样细胞变化;诱导后6h,Sox6基因的表达上升6.3倍(P<0.01),随后迅速下降,3-14d维持在4.0-4.7倍水平;Col2α1基因的表达量在诱导后3d达1.9倍,7d和14d分别达14.3和35.8倍(P<0.01)。诱导组可见大量Ⅱ型胶原阳性细胞。结论 bMSCs在体外可以分化为软骨样细胞,Sox6基因在bMSCs的成软骨分化的早期和晚期都发挥了一定的作用。

关键词：骨髓间充质干细胞成软骨分化 Ⅱ型胶原α1 Sox6基因