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大豆疫霉基因编辑回补技术体系构建及验证

大豆疫霉基因编辑回补技术体系构建及验证

作者：谭新伟山东农业大学

学位级别：硕士

疫霉菌（Phytophthora）是一类重要的植物病原菌,在分类上属于卵菌而非真菌。卵菌营养体为二倍体,其自身发生同源重组的概率极低,因此广泛应用于真菌中的基因敲除技术无法有效应用于卵菌。长期以来,卵菌的基因功能研究受限于低效率的遗... 详细信息

疫霉菌（Phytophthora）是一类重要的植物病原菌,在分类上属于卵菌而非真菌。卵菌营养体为二倍体,其自身发生同源重组的概率极低,因此广泛应用于真菌中的基因敲除技术无法有效应用于卵菌。长期以来,卵菌的基因功能研究受限于低效率的遗传转化系统而进展较慢,亟待开发新的基因研究平台。近年来,CRISPR/Cas9技术发展迅速,为定向编辑卵菌基因组提供了新的解决方案。该系统能够稳定将卵菌基因组中的靶标基因敲除,被广泛应用于卵菌基因组编辑。然而,目前用于卵菌遗传转化实验的筛选标记非常有限,主要利用新霉素磷酸转移酶（NPT II）赋予卵菌对遗传霉素（G418）抗性。若对含有NPT II基因的转化子再次进行基因回补或基因敲除,就需使用新的筛选标记。因此,在卵菌研究中至今未能开发出类似真菌的高效基因编辑体系,极大地限制了卵菌的研究。现阶段,开发新型卵菌转化筛选标记基因,通过基因回补实现卵菌遗传操作的多样性,是卵菌基因功能研究的迫切需求。在酵母等模式物种研究中使用的诺尔丝菌素（NTC）可通过抑制蛋白质合成从而抑制真核生物生长。本研究发现,诺尔丝菌素可以有效抑制大豆疫霉生长,推测能够应用于卵菌转化子筛选。本研究构建了以Nat1基因为基础的卵菌遗传转化载体,成功借助诺尔丝菌素筛选获得转化子。对转化子进一步分析发现,Nat1基因能够赋予大豆疫霉对诺尔丝菌素的抗性,对疫霉菌自身生长发育没有影响。RxLR类效应子是疫霉菌的外泌蛋白,理论上敲除外泌蛋白不会对菌株生长发育造成负面影响。因此,借助CRISPR/Cas9技术与Nat1基因编辑RxLR类效应子编码基因,能够检测该系统是否影响疫霉菌生长发育。本研究中,对大豆疫霉菌RxLR效应子编码基因PsAvh109进行基因敲除和基因回补。经过实验证明,筛选标记基因Nat1及CRISPR/Cas9技术对于疫霉菌生长发育没有影响。为充分验证这一结论,以大豆疫霉菌RxLR效应子编码基因PsAvh31为研究对象进行重复实验,得到相同结论。本研究成功将Nat1作为筛选标记基因应用于卵菌遗传转化实验,丰富了卵菌的遗传操作手段,完善了卵菌遗传转化体系,为未来深入研究卵菌基因功能提供了技术支撑。

关键词：卵菌效应子遗传转化筛选标记 CRISPR/Cas9

Ti含量对高强钢奥氏体区中碳化物析出行为的影响

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金属热处理 2015年第2期40卷 26-31页

作者：谭新伟郭成佺中国舰船研究设计中心湖北武汉430064

在Gleeble3500热模拟试验机上采用应力松弛的方法研究了Ti-Mo系高强钢在奥氏体区中的应变诱导析出行为。应力松弛结果表明,Ti含量的提高能明显增加其在奥氏体区中的析出动力学,且当Ti含量增加至0.27%时,Ti在奥氏体区中的析出存在两个鼻... 详细信息

在Gleeble3500热模拟试验机上采用应力松弛的方法研究了Ti-Mo系高强钢在奥氏体区中的应变诱导析出行为。应力松弛结果表明,Ti含量的提高能明显增加其在奥氏体区中的析出动力学,且当Ti含量增加至0.27%时,Ti在奥氏体区中的析出存在两个鼻点温度区间,从而析出动力学更明显,更有利于纳米粒子在奥氏体的析出。对比研究了理论计算值和试验测定值,随着Ti含量的增加,无论是试验值,还是计算值,纳米粒子析出的开始温度和温度区间均有增大的趋势,且理论计算与试验测定值的误差逐渐变小。理论计算表明纳米粒子析出完成时间随着温度降低显著增加,且这种趋势相对于适当Ti含量(0.13%)来说明显小于过低Ti(0.05%)或过高Ti(0.27%)的情况。

关键词：碳化物析出-温度-时间曲线形变储能

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大豆疫霉基因定向编辑工具包

大豆疫霉基因定向编辑工具包

中国农村“三产融合”与日本“六次产业化”政策机制的比较研究

中国植物病理学会2023年学术年会

作者：谭新伟贺峥王群青山东农业大学植物保护学院

大豆疫霉(Phytophthora sojae)是病原卵菌效应子功能研究的重要模式物种。随着CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术在大豆疫霉中被成功应用,基因编辑逐渐成为卵菌基因功能研究中至关重要的手段。随着研究的不断深入,生物学界正在形成一种共... 详细信息

大豆疫霉(Phytophthora sojae)是病原卵菌效应子功能研究的重要模式物种。随着CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术在大豆疫霉中被成功应用,基因编辑逐渐成为卵菌基因功能研究中至关重要的手段。随着研究的不断深入,生物学界正在形成一种共识——对于基因功能的研究需要一套完整的基因敲除回补系统。然而,由于卵菌的特殊性,能够应用于卵菌遗传转化的筛选标记基因极为稀少,截至目前仅有NPTⅡ被广泛应用于卵菌遗传转化实验。因此,缺乏有效的筛选标记基因成为阻碍完整基因功能研究系统形成的重要原因。通过对常用于动植物及微生物研究的筛选标记基因进行筛查,发现了可用于疫霉菌遗传转化的标记基因,并以此为基础结合CRISPR/Cas9技术构建了基因定向编辑、敲除及回补工具包。笔者以大豆疫霉基因组中2个同源的GH7家族糖苷水解酶编码基因为研究对象,对2个基因分别进行了多次的单基因敲除、双基因敲除和多种基因回补替换实验,充分验证了该系统的可行性。该技术成功解决了疫霉菌无法进行二次或多次基因编辑的局限性,为卵菌的功能基因研究提供了完整的工具包,必将迅速加快卵菌的研究。

关键词：大豆疫霉 CRISPR/Cas9 基因编辑筛选标记基因

来源： cnki会议评论

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中国农村“三产融合”与日本“六次产业化”政策机制的比较研究

作者：谭新伟河北大学

学位级别：硕士

“六次产业化”的概念最早由日本学者于上世纪90年代提出。当时的日本社会面临着农业后继无人、农村衰落。为了激发农业发展活力,日本开始推动农业生产向二、三产业延伸,通过三次产业的相互融合,形成生产、加工、销售、服务一体化的完... 详细信息

“六次产业化”的概念最早由日本学者于上世纪90年代提出。当时的日本社会面临着农业后继无人、农村衰落。为了激发农业发展活力,日本开始推动农业生产向二、三产业延伸,通过三次产业的相互融合,形成生产、加工、销售、服务一体化的完整产业链。日本的“六次产业化”是一个形象的说法,与我国一直提倡的要使农业“接二连三”的内涵是一致的。与我国当前农村推进“三产融合”有着相似的内在规律和背景。尽管中日两国发展“六次产业”的历史时期、经济社会发展的阶段不同,发展环境发生很大的变化,发展模式和发展理论创新有所不同。但日本“六次产业”发展的政策机制和制度创新值得借鉴和学习。本文以中日“六次产业化”动因、政策机制、成效等进行比较分析为切入点,通过比较分析探索“六次产业化”的内在规律和政策机制实施成效,旨在探索出符合我国农村“三产融合”发展的政策机制,从而推动农业现代化的发展。

关键词：六次产业化三产融合政策机制

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废旧铁路价值再生及其改造推进路径

铁道工程学报 2024年第2期41卷 100-104页

作者：谭新建吕颖戴志仁中铁第一勘察设计院集团有限公司西安710043

研究目的:随着高质量发展进程的深度推进,城市建设、经济发展逐步从“量”的增加转变为“质”的提升,由规模扩张转化为内涵提高。盘活铁路资产成为城市更新与乡村振兴的重要内容。因此,应立足废旧铁路的形成原因及存在问题,提出合适的... 详细信息

研究目的:随着高质量发展进程的深度推进,城市建设、经济发展逐步从“量”的增加转变为“质”的提升,由规模扩张转化为内涵提高。盘活铁路资产成为城市更新与乡村振兴的重要内容。因此,应立足废旧铁路的形成原因及存在问题,提出合适的废旧铁路利用方式。研究结论:(1)结合当前铁路遗产的再利用模式,引入再生理念剖析废旧铁路改造的多元价值以及各功能价值的组合关系,提出了基于新时代发展背景下废旧铁路改造的推进路径与发展建议;(2)明确了增加铁路自身“造血”能力与鼓励民营资本介入创新投融资模式两大重点突破方向,以期达到废旧铁路改造升级与国家发展战略的有机融合,实现既有铁路综合价值的最大化挖潜释放;(3)本研究结论可为下一阶段废旧铁路的改造利用提供借鉴与参考。

关键词：废旧铁路再生价值挖掘城市更新推进路径

创业制度环境何以激发科技人才创业意愿?——基于AMO理论视角

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科学学研究 2024年第4期42卷 817-827页

作者：谭新雨华东理工大学社会与公共管理学院上海200237

以高质量创业制度环境“磁吸”全球科技人才创新创业,俨然成为新形势下高水平人才高地和国际科技创新中心建设的迫切现实需求。于是,本研究基于新制度主义理论与AMO理论的整合视角,构建创业制度环境影响科技人才创业意愿的多重中介模型... 详细信息

以高质量创业制度环境“磁吸”全球科技人才创新创业,俨然成为新形势下高水平人才高地和国际科技创新中心建设的迫切现实需求。于是,本研究基于新制度主义理论与AMO理论的整合视角,构建创业制度环境影响科技人才创业意愿的多重中介模型。本研究面向长三角地区三省一市展开多阶段、多来源的问卷调查,并运用结构方程建模方法进行实证分析,结果表明:创业制度环境会通过规制维度、规范维度、认知维度3种形式影响科技人才的创业意愿,其中,创业效能感、创业激情、创业机会认知在创业制度环境与科技人才的创业意愿之间发挥部分中介效应。本研究系统呈现创业制度环境影响科技人才创业的深层次心理机制,为提升创业制度环境对科技人才创业的激励效果提供政策“着力点”。

关键词：创业制度环境创业意愿科技人才创业效能感创业激情

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不被治理的艺术:作为生命政治学批判的启蒙

山东社会科学 2024年第4期 62-70页

作者：王庆丰谭新凤吉林大学哲学基础理论研究中心暨哲学社会学院吉林大学哲学社会学院

表面上看来,福柯把康德的启蒙观念从启蒙推进到了批判,而实质上福柯是把启蒙的问题从知识转向了社会和政治。在福柯看来,康德的启蒙观念——“运用你自己的理智”并没有使人类变成成年,也就是说,我们现在仍未成年。福柯认为这是因为现... 详细信息

表面上看来,福柯把康德的启蒙观念从启蒙推进到了批判,而实质上福柯是把启蒙的问题从知识转向了社会和政治。在福柯看来,康德的启蒙观念——“运用你自己的理智”并没有使人类变成成年,也就是说,我们现在仍未成年。福柯认为这是因为现代人类仍然处于生命政治的规训和管控中,这种社会治理更加隐蔽和严密,人类依然无法做到主动运用自己的理智,于是生命政治学批判成了一种新的启蒙。作为生命政治学批判的启蒙就是一种不被治理的艺术,不被治理并不是不想被治理而是不能被那样治理,即不想被资本主义治理术规训和管控,因为其造成的后果是制造出驯顺且有用的主体。启蒙不仅是主动运用自己理智的勇气,更重要的是反抗生命政治治理、解除主体屈从状态的勇气。由此,权力关系中主体的自我治理就成了启蒙的出路。

关键词：现代性启蒙理性治理自我治理

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微生态制剂在养殖业中的应用

河南畜牧兽医（市场版） 2020年第3期41卷 39-40页

作者：谭新伟河南省舞钢市畜牧局河南舞钢462599

微生态制剂又叫益生素、生菌剂、促生素、利生素、活菌制剂,是在微生物理论指导下,对宿主有益的活性微生物及其代谢产物和促生长物质的制剂。微生态制剂是利用微生物之间的相互拮抗、共生和互生的关系,以及这些微生物所具有的产酸,降解... 详细信息

微生态制剂又叫益生素、生菌剂、促生素、利生素、活菌制剂,是在微生物理论指导下,对宿主有益的活性微生物及其代谢产物和促生长物质的制剂。微生态制剂是利用微生物之间的相互拮抗、共生和互生的关系,以及这些微生物所具有的产酸,降解蛋白质,分解糖和脂肪,降解NH3和H2S等功能而发挥其抑制病原微生物,分解饲料中蛋白质为多肽或氨基酸,降解水中残留的氨氮和亚硝酸盐等。

关键词：微生态制剂降解蛋白质病原微生物活性微生物活菌制剂益生素促生长物质生菌剂

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植物免疫诱抗剂在诸城烟区的探索与研究

园艺与种苗 2022年第10期42卷 81-83页

作者：闫凯王微棕于涛刘冰鞠虎毕雪窦晓英谭新伟吴秋里山东潍坊烟草有限公司山东潍坊261205

[目的]探究植物免疫诱抗剂对烤烟的影响。[方法]分别在烤烟苗期喷施3种植物免疫诱抗剂,研究不同植物免疫诱抗剂对烤烟抗病性、生育期、农艺性状和经济性状的影响。[结果]植物免疫诱抗剂的施用,能够提高烤烟对病毒病的抗性,且可以在一定... 详细信息

[目的]探究植物免疫诱抗剂对烤烟的影响。[方法]分别在烤烟苗期喷施3种植物免疫诱抗剂,研究不同植物免疫诱抗剂对烤烟抗病性、生育期、农艺性状和经济性状的影响。[结果]植物免疫诱抗剂的施用,能够提高烤烟对病毒病的抗性,且可以在一定程度上提高烤后烟叶的叶片结构、身份、油分和色度,烟叶产量及品质均有进一步提高。[结论]植物免疫诱抗剂在烤烟上具有广阔的推广前景。

关键词：烤烟植物免疫诱抗剂病害产值