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体外抑制鸡传染性支气管炎病毒的多肽鉴定

中国科学（C辑） 2005年第6期35卷 527-531页

作者：彭博陈汉阳谭亚娣金梅林陈焕春郭爱珍华中农业大学动物医学院动物病毒学研究室武汉430070

使用纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV),从12肽噬菌体随机展示肽库中筛选特异性结合多肽．经过四轮淘筛,得到10个阳性噬菌体,进一步进行测序、血凝抑制活性及病毒抑制特性鉴定．所有阳性噬菌体均能特异性阻断IBV对HeLa细胞的感染,并能抑... 详细信息

使用纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV),从12肽噬菌体随机展示肽库中筛选特异性结合多肽．经过四轮淘筛,得到10个阳性噬菌体,进一步进行测序、血凝抑制活性及病毒抑制特性鉴定．所有阳性噬菌体均能特异性阻断IBV对HeLa细胞的感染,并能抑制IBV对鸡红细胞的血凝活性．人工合成其中一条病毒抑制效价最高的线性多肽“GSH HRH VHS PFV”,其细胞抑制试验证实该多肽同样具有病毒抑制特性．以上结果为研制抗病毒分子及鉴定病毒与细胞相互作用功能域等奠定了基础．

关键词：鸡传染性支气管炎病毒噬菌体展示多肽

家猫ACE2基因克隆、测序及生物信息学分析

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武汉大学学报（理学版） 2005年第6期51卷 739-743页

作者：王冲谭亚娣郭爱珍陈焕春华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

本研究从家猫组织中扩增并鉴定血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因,为阐明SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)感染家猫的机制提供理论依据.从家猫肺脏中提取总RNA,以Oligo dT-Adaptor为引物合成第一链cDNA,根据人及... 详细信息

本研究从家猫组织中扩增并鉴定血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因,为阐明SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)感染家猫的机制提供理论依据.从家猫肺脏中提取总RNA,以Oligo dT-Adaptor为引物合成第一链cDNA,根据人及小鼠的ACE2基因mRNA序列设计系列引物,通过聚合酶链式反应,分段扩增出家猫ACE2基因的编码区的特异性片段并测序鉴定.家猫ACE2基因mRNA编码区共包括2 418个核苷酸,推测编码蛋白含805个氨基酸残基.其氨基酸序列与人、小鼠、大鼠ACE2氨基酸序列的同源性分别达到85%,81%和81%.利用多种生物信息学工具软件对家猫ACE2蛋白的理化及生物学性质进行分析.比较人、家猫、果子狸、小鼠、大鼠等ACE2序列中与SARS-CoV结合有关的3个功能区,发现家猫ACE2与人ACE2的同源性最高,提示家猫ACE2在SARS病毒跨种感染中可能发挥重要作用.

关键词：家猫血管紧张素转换酶2 序列分析生物信息学严重急性呼吸系统综合征冠状病毒

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我国亟待加强奶牛重大疫病预警体系建设

中国奶牛 2006年第2期 7-12页

作者：陈焕春郭爱珍谭亚娣华中农业大学动物医学院武汉430070

我国奶牛业近年来的飞速发展给奶牛疫病防治带来巨大压力。虽然我国已初步建成了动物疫病的监测与预警系统,但尚不能满足疫情的实时测报和预警的实际需求。需要从支撑技术、网络建设、信息系统等各方面加强我国奶牛重大疫病的检测与预... 详细信息

我国奶牛业近年来的飞速发展给奶牛疫病防治带来巨大压力。虽然我国已初步建成了动物疫病的监测与预警系统,但尚不能满足疫情的实时测报和预警的实际需求。需要从支撑技术、网络建设、信息系统等各方面加强我国奶牛重大疫病的检测与预警体系建设,以保证奶业可持续发展和人民健康。

关键词：奶牛疫病预警体系

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人发制备蛋白基表面活性剂及性能研究

西部皮革 2019年第14期41卷 30-32页

作者：谭亚娣宋梓慧王全杰烟台大学

我国每年产生几十万吨的废弃毛发,因未得到有效处理和合理利用,造成了严重的环境污染及资源浪费。本文采用"碱氧化"法水解人发,并探讨碱氧化水解发渣的机理;研究了在"碱氧化"水解过程中,碱用量、双氧水、温度等对发渣水解的影响。用人... 详细信息

我国每年产生几十万吨的废弃毛发,因未得到有效处理和合理利用,造成了严重的环境污染及资源浪费。本文采用"碱氧化"法水解人发,并探讨碱氧化水解发渣的机理;研究了在"碱氧化"水解过程中,碱用量、双氧水、温度等对发渣水解的影响。用人发水解率为标准,综合考虑成本及纯度等因素来确定最佳条件,实验测得在水解时间为1h、固液比为1:8,NaOH浓度为30wt%、H2O2浓度为30wt%、水解温度为90℃时,水解率达到90. 5%。通过酰氯反应制得的表面活性剂起泡性较好,泡沫稳定性较高,有望在洗涤剂,加溶剂中得到良好的应用。

关键词：人发发渣角蛋白碱水解缩合反应表面活性剂

SARS冠状病毒刺突蛋白S144-643的表达及免疫原性分析

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华中农业大学学报 2006年第1期25卷 1-5页

作者：费小战卢海松郭红燕谭亚娣陈焕春郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070

将SARS冠状病毒(SARS-CoV)表面的主要结构蛋白刺突蛋白S144-643的基因片段(nt430-nt1929)克隆入表达质粒pET-28b中,并在大肠杆菌中表达。S144-643蛋白分子质量为55 ku左右,以包涵体形式存在于细菌中。ELISA及Western blot证明,S144-643... 详细信息

将SARS冠状病毒(SARS-CoV)表面的主要结构蛋白刺突蛋白S144-643的基因片段(nt430-nt1929)克隆入表达质粒pET-28b中,并在大肠杆菌中表达。S144-643蛋白分子质量为55 ku左右,以包涵体形式存在于细菌中。ELISA及Western blot证明,S144-643可以与SARS康复病人的阳性血清发生特异性反应,免疫新西兰大白兔可以诱发产生较高水平的特异性抗体,因而证明原核表达的S144-643具有良好的免疫原性。

关键词： SARS冠状病毒(SARS-CoV) 刺突蛋白(S蛋白) 原核表达免疫原性

禽流感血凝素基因的原核表达及其在H9亚型诊断中的应用

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生物工程学报 2005年第2期21卷 315-319页

作者：张瑞华金梅林王贵华喻正军赵思婷李红超谭亚娣陈焕春华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070

根据H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因序列设计并合成引物 ,从本室分离并保存的H9N2亚型禽流感病毒中扩增了预计约 16 83bp的血凝素基因 ,将此扩增产物克隆进pMD18_T载体 ,限制性酶切及序列测定后 ,进一步将其亚克隆到pGEX_KG中 ,与GST蛋... 详细信息

根据H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因序列设计并合成引物 ,从本室分离并保存的H9N2亚型禽流感病毒中扩增了预计约 16 83bp的血凝素基因 ,将此扩增产物克隆进pMD18_T载体 ,限制性酶切及序列测定后 ,进一步将其亚克隆到pGEX_KG中 ,与GST蛋白融合表达。SDS_PAGE和Western印迹表明缺失信号肽后的HA基因在大肠杆菌中获得了表达 ,表达产物具有免疫学活性 ,融合蛋白的分子量约为 90kD ,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理 ,利用复性产物作为抗原包被酶标板建立了检测H9亚型禽流感抗体ELISA方法。结果表明应用HA重组蛋白作为诊断H9亚型禽流感抗原具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点 ,可用于H9亚型禽流感抗体的检测。

关键词：禽流感病毒血凝素基因原核表达 ELISA

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基于文献分析的食管癌精准治疗研究

中国肿瘤外科杂志 2021年第4期13卷 362-366,371页

作者：谭亚娣赵萌张秀梅赵杰翟运开美康福瑞医药科技有限公司北京100019 万方数据股份有限公司北京100036 中国科学技术信息研究所北京100036 郑州大学第一附属医院互联网医疗系统与应用国家工程实验室河南郑州450052 郑州大学管理工程学院河南郑州450001

目的探寻食管癌精准治疗的研究进展和未来的发展方向,为患者的个体化治疗或精准治疗临床研究提供参考信息。方法检索万方医学网和科学引文索引(SCI)网络版数据库中关于食管癌精准医学相关文献,并从文献的年发文量、发表期刊、发文机构... 详细信息

目的探寻食管癌精准治疗的研究进展和未来的发展方向,为患者的个体化治疗或精准治疗临床研究提供参考信息。方法检索万方医学网和科学引文索引(SCI)网络版数据库中关于食管癌精准医学相关文献,并从文献的年发文量、发表期刊、发文机构、国家和地区、学科分布和关键词频率等对检索结果进行计量分析。结果共检索到中文文献6 869篇,英文文献7 773篇。近10年中文文献总体呈逐年下降趋势,而英文文献正好相反,且英文文献中发文量最大的国家为中国(4 136篇,53.2%),远超过排名其次的美国(1 657篇,21.3%)和日本(835篇,10.7%);在中外文献中高发文机构均为中国高校,分别以河北医科大学第四医院(中文文献187篇,20.0%)和郑州大学(英文文献442篇,5.7%)为首;中英文文献内容均以肿瘤学为主,分别为5 082篇(83.0%)和3 946篇(50.8%)。研究热点主要是食管鳞状细胞癌的发病机制、诊断标志物和预后改善。结论近10年食管癌的研究主要偏向于早期癌变基因及其致癌作用机制探索的基础研究,根据食管癌患者的基因型、表型、环境和生活方式等各方面因素的异质性从而制定出个性化诊断和治疗措施,是临床研究的关注重点。

关键词：食管癌文献计量精准医学个体化医学

牛分枝杆菌MPB70和MPB83蛋白的原核表达、纯化及免疫活性研究

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牛分枝杆菌MPB70和MPB83蛋白的原核表达、纯化及免疫活性研究

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会

作者：晁彦杰吕文万学济陈焕春谭亚娣华中农业大学动物医学院华中农业大学生命科学技术学院武汉市蔬菜科技研究所农业微生物学国家重点实验室

牛结核病是严重危害我国奶牛养殖业和人类食品安全的B类传染病,2001年和2002年的部分统计结果表明我国个别省市奶牛结核病阳性率高达10%以上。当前我国牛结核病的诊断主要靠传统的牛PPD(Purified protein deprived bovine)皮试法进行检... 详细信息

牛结核病是严重危害我国奶牛养殖业和人类食品安全的B类传染病,2001年和2002年的部分统计结果表明我国个别省市奶牛结核病阳性率高达10%以上。当前我国牛结核病的诊断主要靠传统的牛PPD(Purified protein deprived bovine)皮试法进行检测,但是由于PPD成份复杂,特异性易受其他分支杆菌影响而出现假阳性,同时敏感性也较低,诊断效果不佳,造成我国"检疫-扑杀"政策实施效果大打折扣。目前国际上诊断试剂的研究趋势是使用成分明确的抗原蛋白代替PPD进行牛结核病诊断。MPB70是一种牛分枝杆菌特异性分泌蛋白质,分泌量占培养基蛋白总量10%,是分枝杆菌感染过程中重要的体液和细胞免疫目标抗原。国外利用MPB70开发出的牛结核病免疫荧光偏振测定(FPA)诊断方法敏感性和特异性高达92.9%和98.3%。MPB83是与MPB70是非常相似的同源蛋白质,亦是***体外高效表达抗原,但其一部分分泌到培养基中,另一部分结合在细胞壁上。MPB83是被***感染的牛血清中主要的抗原之一,能很好地被T细胞识别,据报道能够很好地区分出感染牛和BCG免疫接种牛。本研究为研究新型牛结核病诊断试剂,克隆并表达了牛分枝杆菌特异性抗原蛋白质MPB70和MPB83并进行了其免疫活性研究。根据Genbank发表的牛分枝杆菌标准株序列设计两对特异性引物,从牛分枝杆菌临床分离株基因组中扩增出mpb70和mpb83基因片段,亚克隆进入原核表达载体pET28a(+)中,经酶切和序列测定验证其正确性。在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导其表达,发现MPB70和MPB83蛋白质均可被诱导大量表达且以包涵体形式存在。从包涵体中提纯获得mg数量级MPB70和MPB83蛋白质。初步用于酶联免疫吸附反应方法,并进一步优化反应条件,通过检测近百份新鲜牛奶和奶牛血清样品,检出部分样品为阳性,和其他检测方法(如PPD-ELISA检测)结果有80%-100%的符合率,包括MPB70和MPB83-ELISA在内的血清学方法和皮内变态反应相比,有一定的符合率,但也有一定比例的差异。据此结果推断,本研究所表达的牛分枝杆菌特异性蛋白质MPB70和MPB83均具有免疫活性,并有希望用于牛结核病的诊断,特别是有可能用于检验牛奶,对监视结核病及保障食品安全发挥作用,其原核表达系统及ELISA方法的建立为进一步研制牛结核病特异性诊断试剂奠定了基础,可能对我国人畜结核病疫情控制起到重要作用。

关键词：牛结核病 MPB70 MPB83 原核表达纯化 ELISA 牛奶

来源： cnki会议评论

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中链化学品微生物制造

微生物学杂志 2021年第5期41卷 1-13页

作者：朱志伟谭亚娣张乔馨薛闯大连理工大学生物工程学院辽宁大连116024 大连理工大学宁波研究院浙江宁波315016

中链脂肪酸(C_(6)-C_(12))衍生的化学品包括脂肪醇、脂肪烃、中链酯、ω-修饰脂肪酸等,这些化合物是生物燃料、聚合物、日用化学品、特种化学品的重要组分。天然微生物底盘不能合成中链脂肪酸,而通过操纵脂肪酸合成、逆β-氧化等碳链延... 详细信息

中链脂肪酸(C_(6)-C_(12))衍生的化学品包括脂肪醇、脂肪烃、中链酯、ω-修饰脂肪酸等,这些化合物是生物燃料、聚合物、日用化学品、特种化学品的重要组分。天然微生物底盘不能合成中链脂肪酸,而通过操纵脂肪酸合成、逆β-氧化等碳链延伸途径,尤其是表达生成游离中链脂肪酸的硫酯酶,可使大肠埃希菌、酿酒酵母等微生物细胞合成超过1 g/L的中链脂肪酸。引入脂肪酸衍生反应,如羧基还原、脱羧、ω-氧化等,可合成许多中链化学品。本文综述了中链化学品合成的酶学基础以及代谢工程策略,为中链化学品高效生物制造提供参考和思路。

关键词：脂肪酸中链化学品生物制造代谢工程蛋白质工程