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昆虫病毒学

鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28-α亚单位基因克隆、鉴定及时空转录分析

1991年

作者：谭业平陶涛

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鲤鱼蛋白酶体激活因子PA28-α亚单位基因克隆、鉴定及时空转录分析

作者：谭业平吉林大学

学位级别：硕士

本研究以鲤PA28-α亚单位cDNA3′端部分片段为核酸探针,应用核酸杂交法筛选有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库,克隆了PA28-α亚单位cDNA,全长1097bp,含有编码249个氨基酸的开放阅读框,推测的蛋白序列与斑马鱼PA28-α同源性高达9... 详细信息

本研究以鲤PA28-α亚单位cDNA3′端部分片段为核酸探针,应用核酸杂交法筛选有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库,克隆了PA28-α亚单位cDNA,全长1097bp,含有编码249个氨基酸的开放阅读框,推测的蛋白序列与斑马鱼PA28-α同源性高达92%,GenBank获得注册号为DQ453126。PCR方法克隆了PA28-α基因组DNA,全长3583bp,含有11个外显子和10个内含子且内含子外显子剪接位点均遵守GT-AG规则,获得GenBank注册号为EF051469。此外,根据PA28-αcDNA设计引物,半定量RT-PCR方法分析了正常白细胞和丝列原刺激的白细胞中该基因不同时间的转录差异,还分析了其组织转录谱。结果显示:丝裂原刺激白细胞中PA28-α转录增强,尤其是ConA刺激后增强尤为显著,但是随着时间的延长增强幅度下降。提示PA28-α的转录对于不同的诱导物敏感程度不同,也说明细胞受刺激早期发挥免疫作用;在鲤鱼鳃、肾、脾脏、肌肉、脑、心、肝七个组织均有转录,嗜水气单胞菌Ahcs01菌株刺激鲤鱼48小时后转录不同程度增强,其中与免疫相关的组织增强明显,脾脏尤为显著,这与PA28-α在MHCⅠ类分子介导的抗原呈递过程中具有重要作用相一致。

关键词：鲤鱼 PA28-α cDNA克隆基因组DNA克隆序列分析转录分析

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腺病毒载体及其在狂犬病疫苗研究中的应用

中国人兽共患病学报 2008年第10期24卷 965-969页

作者：谭业平祝艳蕾郭霄峰华南农业大学兽医学院广州510642 华中农业大学动物医学院武汉430070

疫苗是目前人类可以彻底控制某一传染性疾病的唯一武器,预防接种不但保护了个体免受传染病病原体的侵袭,而且在群体中也限制了病原微生物的传播。传统疫苗因其独特的优势至今仍然是人类控制疾病的主要力量,但这些疫苗也存在一些缺点,如... 详细信息

疫苗是目前人类可以彻底控制某一传染性疾病的唯一武器,预防接种不但保护了个体免受传染病病原体的侵袭,而且在群体中也限制了病原微生物的传播。传统疫苗因其独特的优势至今仍然是人类控制疾病的主要力量,但这些疫苗也存在一些缺点,如病毒返祖、无法提供完全保护及潜在感染等。多项研究证实,基因工程载体表达的单个病毒抗原与全病毒引起的免疫应答效果可以相当。[第一段]

关键词：狂犬病疫苗腺病毒载体传染性疾病免疫应答效果病原微生物预防接种传统疫苗潜在感染

用重组杆状病毒在昆虫细胞中表达苏芸金杆菌的δ-内毒素基因

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科学通报 1993年第19期38卷 1794-1798页

作者：齐义鹏黄永秀沈英谭业平武汉大学病毒学研究所武昌430072

昆虫杆状病毒(IBV)是防治农林害虫的生物杀虫剂,由于其杀虫速度慢、宿主范围窄,限制了它的使用。从80年代初开始,人们不得不转向利用IBV的多角体蛋白基因(ocu)构建转移载体,表达外源基因。80年代后期,学者们再次用基因工程技术把IBV的... 详细信息

昆虫杆状病毒(IBV)是防治农林害虫的生物杀虫剂,由于其杀虫速度慢、宿主范围窄,限制了它的使用。从80年代初开始,人们不得不转向利用IBV的多角体蛋白基因(ocu)构建转移载体,表达外源基因。80年代后期,学者们再次用基因工程技术把IBV的研究转到了杀虫剂方面。

关键词：苏云金杆菌毒素重组基因病毒

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狂犬病病毒反向遗传学研究进展

中国兽医学报 2010年第2期30卷 282-288页

作者：谭业平祝艳蕾郭霄峰华南农业大学兽医学院广东广州510642 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

反向遗传学(Reverse genetics)是由基因结构认识基因功能的科学,与之相关的研究技术称为反向遗传学技术(Reverse genetic manipulation)。RNA病毒的反向遗传学是采用病毒的遗传物质,在培养细胞或易感宿主中重新拯救出活病毒或类似病毒... 详细信息

反向遗传学(Reverse genetics)是由基因结构认识基因功能的科学,与之相关的研究技术称为反向遗传学技术(Reverse genetic manipulation)。RNA病毒的反向遗传学是采用病毒的遗传物质,在培养细胞或易感宿主中重新拯救出活病毒或类似病毒物质。[第一段]

关键词：狂犬病痛毒反向遗传学 RNA病毒

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狂犬病毒体内移行研究进展

中国人兽共患病学报 2009年第11期25卷 1107-1110页

作者：梁红茹谭业平江飚张靖郭霄峰华南农业大学兽医学院微生物学与免疫学教研室广州510642

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的一种高度致死性中枢神经系统感染的疾病,在我国曾一度得到有效的控制,但是近年来该病疫情又有抬头和回升的趋势。针对存世已有4000余年的狂犬病至今仍“可防不可治”的特点:首先应该... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的一种高度致死性中枢神经系统感染的疾病,在我国曾一度得到有效的控制,但是近年来该病疫情又有抬头和回升的趋势。针对存世已有4000余年的狂犬病至今仍“可防不可治”的特点:首先应该加大安全、高效,廉价狂犬病新型疫苗的研究,扩大犬只免疫覆盖率;此外,深入狂犬病毒致病机制的研究也是极其重要的一面,这不仅为解决“不可治”问题开辟途径,而且也为诊断和更加有效预防该病提供坚实的理论支撑。研究病毒宿主侵染、[第一段]

关键词：狂犬病毒体内移行中枢神经系统感染免疫覆盖率新型疫苗致病机制致死性

枯草杆菌表达载体的构建及乙肝病毒e基因的克隆与表达

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高技术通讯 1992年第5期2卷 14-16页

作者：马晓雯黄永秀谭业平齐义鹏武汉大学病毒学系

构建了枯草杆菌表达载体,并在枯草杆菌细胞中首次实现了HBeAg的高效表达,为乙肝的早期诊断和疫苗生产开辟了一条新的途径。

关键词：乙肝病毒 e基因枯草杆菌

一株携带犬细小病毒VP2融合基因的重组狂犬病毒的构建

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江苏农业学报 2018年第4期34卷 866-870页

作者：谭业平赵静郭霄峰何孔旺江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 华南农业大学兽医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510642

为构建预防狂犬病毒和犬细小病毒的疫苗候选毒株,将编码狂犬病毒G蛋白的中和抗原表位的碱基序列插入犬细小病毒VP2基因中,再将VP2融合基因插入狂犬病毒全基因组的G和L基因之间,然后应用反向遗传操作技术构建重组狂犬病毒。直接免疫荧光... 详细信息

为构建预防狂犬病毒和犬细小病毒的疫苗候选毒株,将编码狂犬病毒G蛋白的中和抗原表位的碱基序列插入犬细小病毒VP2基因中,再将VP2融合基因插入狂犬病毒全基因组的G和L基因之间,然后应用反向遗传操作技术构建重组狂犬病毒。直接免疫荧光染色结果显示成功获得重组狂犬病毒r HEP-r VP2;生物学特性研究结果显示重组病毒随着在BHK-21细胞上传代次数的增加,病毒滴度逐渐升高,呈现良好繁殖特性;RT-PCR结果显示携带VP2融合基因的重组病毒具有良好遗传稳定性,重组病毒免疫小鼠可诱导产生保护性抗狂犬病毒和犬细小病毒抗体。

关键词：狂犬病毒犬细小病毒VP2基因反向遗传技术