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卵丘细胞产生的一氧化氮促进小鼠卵母细胞的成熟

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科学通报 2002年第22期47卷 1730-1733页

作者：卜淑敏夏国良谢辉蓉郭勇中国农业大学生物学院北京100094

采用体内注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)和在体外培养基中分别加入L-NAME或次黄嘌呤以抑制卵母细胞自发成熟的3种模型,研究了一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对小鼠卵母细胞体内、外成熟的促进作用.结果表明,只... 详细信息

采用体内注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)和在体外培养基中分别加入L-NAME或次黄嘌呤以抑制卵母细胞自发成熟的3种模型,研究了一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对小鼠卵母细胞体内、外成熟的促进作用.结果表明,只有腹腔注射2.5mg/kg SNP这一剂量组能显著逆转10mg/kg L-NAME对卵母细胞第一极体(PBl)释放的抑制作用(P<0.05),而高剂量SNP(10mg/kg)使小鼠在注射药物半小时后全部死亡;10-7,10-6和10-5mol/L浓度的sNP能显著促进由4mmol/L次黄嘌呤抑制的卵丘卵母细胞复合体(CEO)中卵母细胞的体外成熟,而10-3,10-4,10-8 mol/L SNP对CEO中卵母细胞的体外成熟无影响;最适浓度的SNP(10-5和10-6mol/L)不影响裸卵(D0)的体外成熟;10-3mol/L L-NAME能显著抑制CEO PB1的释放,但对生发泡破裂(GVBD)无影响,而10-5mOL/L SNP能显著逆转其抑制.结果提示,卵丘细胞产生的生理剂量的NO可以促进体内、外卵母细胞的成熟.

关键词：硝普钠卯母细胞第一极体生发泡破裂小鼠胚胎工程发育成熟机理调控生殖生物学一氧化氮

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哺乳动物卵巢中的抑制素和活化素

农业生物技术学报 2002年第2期10卷 197-202页

作者：王海滨谢辉蓉夏国良中国农业大学生物学院中国农业大学生物学院北京100094

抑制素、活化素是卵巢分泌的重要激素,可通过内分泌、旁分泌和自分泌等途径调节卵泡的发育。结合本实验室的研究工作综述了抑制素、活化素在哺乳动物卵巢内的分布和对卵泡发育的可能调节作用。

关键词：哺乳动物卵巢抑制素活化素

体外重组的人促黄体素对小鼠早期胚胎发育的影响

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动物学报 2002年第6期48卷 754-758页

作者：郭勇夏国良王海滨谢辉蓉雷蕾卜淑敏中国农业大学生物学院北京100094

为了研究人的重组促黄体素 (r hLH)对小鼠早期胚胎发育的作用 ,我们用一定剂量的r hFSH (人促卵泡素 ,2 0IU)结合不同剂量的r hLH (0～ 2 0IU) ,或先与不同剂量r hLH配比 (5～ 2 0IU) ,再与一定剂量r hLH (15IU)结合 ,对性成熟前的小鼠... 详细信息

为了研究人的重组促黄体素 (r hLH)对小鼠早期胚胎发育的作用 ,我们用一定剂量的r hFSH (人促卵泡素 ,2 0IU)结合不同剂量的r hLH (0～ 2 0IU) ,或先与不同剂量r hLH配比 (5～ 2 0IU) ,再与一定剂量r hLH (15IU)结合 ,对性成熟前的小鼠进行超数排卵 ;并对从其输卵管冲出的早期胚胎进行体外培养 ,通过观察这些早期胚胎体外发育情况 ,再与PMSG hCG超排小鼠的早期胚胎体外培养结果进行比较。我们发现用重组激素处理的性成熟前小鼠 ,无论在平均冲胚数或桑囊率、囊胚率上 ,都以结合r hLH或配比r hLH的剂量为 15IU时最好 ,但各重组激素处理组在桑囊率和囊胚率上都极显著低于PMSG hCG对照组的相应指标。上述结果表明 ,r hLH对小鼠早期胚胎的发育 (尤其是囊胚的形成 )有明显的抑制作用 ,且与r hLH呈一定剂量依赖性关系。

关键词：体外重组人促黄体素小鼠早期胚胎发育影响 LH FSH 促卵泡素

人的重组促黄体生成素对小鼠卵母细胞体外受精的影响

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中国实验动物学报 2001年第4期9卷 227-229页

作者：郭勇夏国良雷蕾卜淑敏谢辉蓉中国农业大学生物学院 100094

目的　探讨人的重组促黄体生成素 (r hLH)对性成熟前的小鼠卵母细胞体外受精 (invitrofertilization ,IVF)后的分裂、以及IVF胚的体外培养 (invitroculture ,IVC)过程中发育状况的影响。方法　选用性成熟前的清洁级昆明小鼠 ,分别用r hF... 详细信息

目的　探讨人的重组促黄体生成素 (r hLH)对性成熟前的小鼠卵母细胞体外受精 (invitrofertilization ,IVF)后的分裂、以及IVF胚的体外培养 (invitroculture ,IVC)过程中发育状况的影响。方法　选用性成熟前的清洁级昆明小鼠 ,分别用r hFSH(人的重组促卵泡素 2 0IU) ,r hFSH +r hLH(各 2 0IU)或 2 0IUr hLH对其进行超排处理 ,通过对从各处理组小鼠卵巢中手工器械分离出来的卵丘卵母细胞复合体 (cumulusenclosedoocyte,CEO)进行体外受精之后 ,进一步观察这些CEO经IVF后的受精分裂状况 ,以及IVC后的发育情况。结果　r hFSH +r hLH处理组小鼠卵母细胞IVF率 (72 .2 % )极显著高于r hFSH单独处理组 (39.9% )或r hLH单独处理组 (37.2 % )的相应指标 ;r hFSH +r hLH处理组和r hFSH单独处理组的IVF胚 ,发育至 8～ 16细胞阶段的比例 (8～ 16细胞率 )趋于一致 (2 5 .15 %∶2 7.18% ) ,但是都极显著高于r hLH处理组的 8～ 16细胞率 (17 2 4% ) ;r hFSH处理组IVF胚发育至 16～ 32细胞阶段的总比例 (16～ 32细胞率∶33 0 1% ) ,极显著高于r hFSH +r hLH处理组及r hLH单独处理组的指标 (1.75 %和 0 )。结论　在IVF条件下 ,r hLH对小鼠卵母细胞的受精有明显的促进作用。

关键词： IVF LH FSH 处理促黄体生成素体外受精细胞性成熟发育超排

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重组人促性腺激素对小鼠排卵影响的机理

自然科学进展 2002年第8期12卷 857-860页

作者：雷蕾郭勇杨巍谢辉蓉王海滨夏国良中国农业大学生物学院北京100094

探讨不同剂量和组合的重组人促性腺激素对小鼠卵泡发育和排卵的影响及其与小鼠血清中雌、雄激素水平变化的相互关系。实验采用DNA重组技术合成的重组人促性腺激素对性成熟前雌性昆明白小鼠(22～24日龄)以不同剂量和组合进行超数排卵处理... 详细信息

探讨不同剂量和组合的重组人促性腺激素对小鼠卵泡发育和排卵的影响及其与小鼠血清中雌、雄激素水平变化的相互关系。实验采用DNA重组技术合成的重组人促性腺激素对性成熟前雌性昆明白小鼠(22～24日龄)以不同剂量和组合进行超数排卵处理,结果表明,一定剂量和组合的重组促性腺激素的处理对小鼠卵泡的发育和血清中雌、雄激素水平产生较大影响,卵泡的正常发育及最终的排卵要求一定的重组人卵泡刺激素(r-hFSH)、重组人促黄体生成素(r-hLH)、重组人绒毛膜促性腺激素(r-hCG)的配比组合和相应的剂量范围,重组促性腺激素处理后小鼠卵泡的发育和排卵与雌、雄激素生成的量有关。

关键词：重组人促性腺激素重组人卵泡刺激素重组人促黄体生成素重组人绒毛膜促性腺激素卵泡发育影响机理小鼠排卵

猪卵丘卵母细胞复合体和壁层颗粒细胞上LHR/hCGR的检测及性腺激素的分泌

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中国兽医学报 1999年第4期19卷 368-370页

作者：赫晨夏国良谢辉蓉苏友强傅国栋中国农业大学生物学院北京100094

用取自３～５ｍｍ卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐＣＥＯ），培养４８ｈ，用ＦＳＨ（１００ＩＵ／Ｌ）或ｈＣＧ（０、５０、１００、２００、５００ＩＵ／Ｌ）刺激ｐＣＥＯ分泌甾体... 详细信息

用取自３～５ｍｍ卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐＣＥＯ），培养４８ｈ，用ＦＳＨ（１００ＩＵ／Ｌ）或ｈＣＧ（０、５０、１００、２００、５００ＩＵ／Ｌ）刺激ｐＣＥＯ分泌甾体激素；用放射受体测定法（ＲＲＡ）比较ｐＣＥＯ的卵丘细胞及壁层颗粒细胞（ＭＧＣ）上促黄体激素受体／人绒毛膜促性腺激素受体（ＬＨＲ／ｈＣＧＲ）的数量；ＡＭｅＸ石蜡切片、免疫组织化学染色，检测ＬＨＲ／ｈＣＧＲ在ｐＣＥＯ以及ＭＧＣ的分布情况。在ＦＳＨ作用下，ｐＣＥＯ分泌的孕酮明显高于ｈＣＧ作用组和对照组（Ｐ＜００５）；平均每个壁层颗粒细胞上的ＬＨＲ／ｈＣＧＲ是每个卵丘细胞的１０５倍；ＬＨＲ／ｈＣＧＲ在基膜两侧分布较多，且卵母细胞上没有ＬＨＲ／ｈＣＧＲ，临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明，在体外试验中，可能由于ＣＥＯ上ＬＨＲ／ｈＣＧＲ的数量不足或生理活性降低，ＬＨ／ｈＣＧ不能促进卵母细胞恢复减数分裂。

关键词：猪卵丘卵母细胞复合体 LH hCG 受体孕酮

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褪黑素抑制小鼠卵母细胞的体外成熟

中国应用生理学杂志 2004年第2期20卷 197-200页

作者：汪建红卜淑敏夏国良王松波陶勇雷蕾谢辉蓉周波中国农业大学生物学院

目的 :探讨褪黑素 (MT)对小鼠卵母细胞的体外成熟的影响。方法 :通过卵母细胞自发、次黄嘌呤 (HX)阻滞和激素诱导成熟三种体外培养模型研究了褪黑素 (MT)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。结果 :① 0 .1g/L、0 .0 2g/L、0 .0 0 4 g/L及 0 ... 详细信息

目的 :探讨褪黑素 (MT)对小鼠卵母细胞的体外成熟的影响。方法 :通过卵母细胞自发、次黄嘌呤 (HX)阻滞和激素诱导成熟三种体外培养模型研究了褪黑素 (MT)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。结果 :① 0 .1g/L、0 .0 2g/L、0 .0 0 4 g/L及 0 .0 0 0 8g/L浓度的MT均能显著抑制小鼠卵丘卵母细胞复合体 (CEOs)自发成熟过程中第一极体 (PB1)的释放 (P <0 .0 1) ;②动力曲线分析表明 ,MT对自发成熟的CEOs的GVBD和PB1有显著的推后作用 ,与对照组相比 ,处理组的GVBD和PB1分别被推后 8～ 10h和 3～ 4h ;③ 0 .1g/L和 0 .0 2g/L两有效浓度的MT还能显著抑制促性腺激素 (FSH)诱导的HX阻滞的CEOsGVBD的发生 (P <0 .0 5 ) ,对PB1的排出虽有一定的抑制作用 ,但没有统计学意义 ;④MT和次黄嘌呤 (HX)对CEOs的自发成熟有协同抑制作用 (P <0 .0 1) ,但在裸卵 (DO)自发成熟的阻滞中没有协同效应。结论 :MT是调节哺乳动物卵母细胞成熟的重要激素之一 ,其作用机制可能是通过卵丘细胞实现的。

关键词：褪黑素小鼠卵母细胞体外成熟第一极体哺乳动物

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小鼠胚胎卵巢细胞体外重组形成卵泡的研究

小鼠胚胎卵巢细胞体外重组形成卵泡的研究

iNOS和eNOS活性与猪卵母细胞减数分裂成熟

第九次全国生殖生物学学术研讨会

作者：雷蕾谢辉蓉夏国良中国农业大学生物学院中国农业大学生物学院中国农业大学生物学院

＜正＞哺乳动物的原始生殖细胞在进行大量的有丝分裂后,随后进入减数分裂形成单细胞配子。该细胞分裂现象为我们在体外对生殖细胞进行转基因操作提供了有利的时机。由于卵母细胞的正常发育依赖于卵母细胞本身固有的发育程序和与其周围...

＜正＞哺乳动物的原始生殖细胞在进行大量的有丝分裂后,随后进入减数分裂形成单细胞配子。该细胞分裂现象为我们在体外对生殖细胞进行转基因操作提供了有利的时机。由于卵母细胞的正常发育依赖于卵母细胞本身固有的发育程序和与其周围的体细胞间通讯的复杂相互作用。因此,当生殖细胞定向分化为卵母细胞之后,必须以卵泡的形式存在才有可能完成其最终的生长发育。基于上述理论依据,我们以小鼠为模型,研究其卵泡在体外重构的现象,为利用卵母细胞携带外源基因生产转基因动物的方法提供实验依据。

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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iNOS和eNOS活性与猪卵母细胞减数分裂成熟