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高效聚磷菌的筛选、鉴定及AJ-3、MK-6菌株污水除磷条件优化

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高效聚磷菌的筛选、鉴定及AJ-3、MK-6菌株污水除磷条件优化

作者：谢祥聪浙江师范大学

学位级别：硕士

富营养化会对水体环境产生恶劣的影响,如降低其透明度,产生有害物质,减少水体中溶解氧量,造成水生生物死亡并破坏水体中生物多样性,影响人、畜的健康及旅游和航运,增加水体治理的成本等。从2010年到2013年水质监测结果表明,我国水体富... 详细信息

富营养化会对水体环境产生恶劣的影响,如降低其透明度,产生有害物质,减少水体中溶解氧量,造成水生生物死亡并破坏水体中生物多样性,影响人、畜的健康及旅游和航运,增加水体治理的成本等。从2010年到2013年水质监测结果表明,我国水体富营养化比较严重,且从监测结果显示的主要污染指标中,均含有导致富营养化关键的因素,即磷这一污染指标。所以当前最有效的限磷防治富营养化的方法之一,是通过除磷工艺等方式降低生活污水、工业污水、农业污水中磷等元素的含有量。目前,相比较如化学污水除磷等工艺,以聚磷菌为除磷执行者的生物除磷工艺拥有化学药剂用量较少、相对运行费用不高等特点。因此,筛选具有高效聚磷能力的聚磷菌,对扩大聚磷菌菌种库,降低工业、生活等污水磷含量,提高水质,具有实际意义。本实验从环境中筛选高效聚磷菌株,并鉴定了筛选所得高效聚磷菌株的种属,研究了其生长及除磷特性。具体结果如下：1. phoU基因已经突变的高效聚磷菌的筛选phoU基因发生突变是菌株聚磷能力提高的重要因素之一。实验利用phoU基因发生突变的菌株在含5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯的限磷和富磷固体培养基上均能够将5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯水解而被染色的机理,结合测定菌株在有氧条件下对合成污水的去磷能力的方法,筛选phoU基因突变且具有高效聚磷能力的菌株。实验共筛得21株phoU基因突变菌株,再将这些菌株于合成污水中进行好氧培养并测定其对合成污水的去磷能力,发现AJ-3、MK-6菌株的去磷率分别是48.0%、40.7%,明显高于其它19株菌株,最终确定AJ-3、MK-6菌株为高效聚磷菌株。2.高效聚磷菌AJ-3、MK-6菌株的鉴定通过鉴定AJ-3、MK-6菌株的菌落和细胞形态以及生理生化特性,并结合对16S rDNA基因序列的测序和blast比对,鉴定AJ-3、MK-6菌株分别为约翰逊不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)和解角质素微杆菌(Microbacterium keratanolyticum)。3.约翰逊不动杆菌AJ-3、解角质素微杆菌MK-6除磷条件的研究通过研究初始pH、装液量、培养温度、培养转速、接种量、醋酸钠浓度、铜离子浓度、铅离子浓度、钾离子浓度对约翰逊不动杆菌AJ-3、解角质素微杆菌MK-6生长、除磷的影响。优化后结果表明：(1)以接种量为1%、初始pH为8.0、装液量为40.0mL,醋酸钠浓度为1400 mg/L(原为677 mg/L),其它成分未变的改良后的合成污水作为实验组,在培养温度和转速分别是30 ℃、210 r/min的条件下,进行好氧培养9 h,约翰逊不动杆菌AJ-3对合成污水(P043--p浓度为14.9 mg/L)的去磷率达到90.93%,比对照组去磷率提高了35.50%;(2)以醋酸钠浓度为600 mg/L(原为677 mg/L),铜离子浓度为1.00 mg/L,钾离子浓度为30mg/L,铅离子浓度为0.50 mg/L,初始pH为6.0,装液量为40.0 mL,其它成分未变的改良后的合成污水作为实验组,接种10%的种子液,在培养温度和转速分别是30 ℃、220r/min的条件下,进行好氧培养20 h,解角质素微杆菌MK-6对合成污水(PO43--p浓度为14.9 mg/L)的去磷率达到70.81%,比对照组去磷率提高了36.95%。

关键词：聚磷菌 phoU基因约翰逊不动杆菌AJ-3 解角质素微杆菌MK-6

基于空间句法传统村落公共空间活力研究及影响因素分析

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水利规划与设计 2023年第1期 108-110,127页

作者：谢祥聪贵州大学建筑与城市规划学院贵州贵阳550025

以传统村落鲍家屯村为例,基于空间句法研究村落公共空间的空间活力,并分析其活力空间分布分异的影响因素,以期为乡村振兴建设提供新思路、新方法。研究结果表明:全局整合度下鲍家屯村活力空间刚好占据着村落的中心位置,合理的利用了空间... 详细信息

以传统村落鲍家屯村为例,基于空间句法研究村落公共空间的空间活力,并分析其活力空间分布分异的影响因素,以期为乡村振兴建设提供新思路、新方法。研究结果表明:全局整合度下鲍家屯村活力空间刚好占据着村落的中心位置,合理的利用了空间;局部整合度下鲍家屯的活力空间没有发生较大距离的迁移,但局部有较小的变迁,但村落新建区域缺乏能承载社交活动的空间;村落整体的可理解较高,表明鲍家屯村能够较好地通过局部空间来感知村落的整体空间,但新建区域同样存在街巷感较弱,空间形态不够丰富。

关键词：空间活力传统村落空间句法影响因素

淡色生赤壳菌Bo-1菌株拮抗物质的分离纯化、解析及活性分析

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植物保护学报 2014年第1期41卷 41-44页

作者：刘琴英蒋冬花齐育平陈璨谢祥聪孙蕾浙江师范大学化学与生命科学学院金华321004

从浙江省金华市郊水稻内生菌中筛选到1株拮抗水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)P6生理小种的淡色生赤壳菌Bionectria ochroleuca Bo-1菌株。该菌株的菌体和发酵液对Xoo P6生理小种均表现出较强的拮抗能力。以P6生理小种作为... 详细信息

从浙江省金华市郊水稻内生菌中筛选到1株拮抗水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae ***,Xoo)P6生理小种的淡色生赤壳菌Bionectria ochroleuca Bo-1菌株。该菌株的菌体和发酵液对Xoo P6生理小种均表现出较强的拮抗能力。以P6生理小种作为指示菌进行活性跟踪,通过分步萃取、硅胶柱层析、高效液相色谱等,分离纯化获得拮抗活性物质结晶;对所获得的结晶物进行核磁共振氢谱分析和质谱分析,通过解析与比对,该物质分子量为344.0835,分子式为C_(18)H_(16)O_7,鉴定为松萝酸(usnic acil)。将纯化的松萝酸以20%叶枯唑(bismerthiazol)和3%中生菌素(zhongshengmycin)为对照,采用96孔板法测定对Xoo P6生理小种的抑菌活性,最低抑制浓度为200μg/mL,表明松萝酸具有较强的抑菌活性,但较中生菌素弱,与20%叶枯唑效果相近。

关键词：淡色生赤壳菌水稻白叶枯病菌分离纯化松萝酸

高产色素红曲霉菌株的筛选、鉴定和固体发酵条件优化

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浙江农业学报 2015年第9期27卷 1639-1645页

作者：蒋冬花孙蕾陈璨谢祥聪嵇豪浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

从全国各地民间收集的红曲米中分离筛选到1株高产红曲色素的红曲霉Mp-41菌株,依据形态和ITS序列鉴定该菌株为紫色红曲霉（Monascus purpureus）。对Mp-41菌株的固体发酵基质和发酵条件进行响应面优化。结果表明,Mp-41菌株产生红曲色素... 详细信息

从全国各地民间收集的红曲米中分离筛选到1株高产红曲色素的红曲霉Mp-41菌株,依据形态和ITS序列鉴定该菌株为紫色红曲霉（Monascus purpureus）。对Mp-41菌株的固体发酵基质和发酵条件进行响应面优化。结果表明,Mp-41菌株产生红曲色素的适宜条件为：以籼米为固体发酵基质,初始含水量44.81%,初始p H 6.0,培养温度32℃,接种量为2.65 m L·30g-1,发酵时间为10.19 d。在此条件下,Mp-41菌株发酵生产红曲米色价最高,可达5 340.4 U·g-1,为市售红曲米色价的2～3倍。

关键词：红曲霉红曲色素固体发酵条件优化

淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)Bo-1菌株产生抗菌物质的发酵条件优化

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生物技术通报 2014年第1期30卷 166-170页

作者：刘琴英蒋冬花齐育平孙蕾陈璨谢祥聪浙江师范大学化学与生命科学学院金华321004

以淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)Bo-1菌株发酵液乙酸乙酯粗提物对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas ***,Xoo)抑菌活性为检测指标,采用单因素试验优化Bo-1菌株产生抗菌物质培养所需的碳源、氮源、无机盐;通过正交试验优化培养基配方和... 详细信息

以淡色生赤壳菌(Bionectria ochroleuca)Bo-1菌株发酵液乙酸乙酯粗提物对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas ***,Xoo)抑菌活性为检测指标,采用单因素试验优化Bo-1菌株产生抗菌物质培养所需的碳源、氮源、无机盐;通过正交试验优化培养基配方和摇瓶发酵条件。研究结果表明,Bo-1菌株产生抗菌物质适宜的碳源、氮源和无机盐分别为淀粉、蛋白胨、MgSO4·7H2O;优化的培养基配方为:淀粉30 g/L,蛋白胨2 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L;适宜的发酵条件为:温度30℃,转速150 r/min,装液量80 mL/250 mL,pH 6.5。

关键词：淡色生赤壳菌正交试验发酵优化抑菌活性

短乳杆菌发酵液中γ-氨基丁酸的脱色和纯化工艺探讨

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发酵科技通讯 2015年第3期44卷 12-17页

作者：吴巧玉谢祥聪高爱同蒋冬花浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

探讨了短乳杆菌(Lactobacillus brevis)L2菌株利用麦麸为培养基原料发酵生产γ-氨基丁酸(GABA),并对GABA的分离纯化工艺进行了研究。对6种大孔树脂和活性炭进行脱色效果筛选,ADS-7树脂对L2菌株发酵液具有最高的脱色率和GABA得率;优化了A... 详细信息

探讨了短乳杆菌(Lactobacillus brevis)L2菌株利用麦麸为培养基原料发酵生产γ-氨基丁酸(GABA),并对GABA的分离纯化工艺进行了研究。对6种大孔树脂和活性炭进行脱色效果筛选,ADS-7树脂对L2菌株发酵液具有最高的脱色率和GABA得率;优化了ADS-7大孔树脂脱色条件:在pH 5.0,脱色温度25℃,脱色时间1 h时,脱色效率大于95%,GABA得率达93%。优化了阳离子交换树脂D001分离纯化GABA的工艺条件:在25℃、上样脱色发酵液p H 5.0,流速为1 BV/h下,用去离子水和1 mol/L氨水分步洗脱效果最好。通过收集、浓缩及结晶等工艺得到针状GABA晶体,氢核磁共振(1H NMR)分析氢谱图与GABA标准品一致。

关键词：短乳杆菌 γ-氨基丁酸脱色分离纯化结晶

乳酸菌发酵小米糠生产γ-氨基丁酸的配方和条件优化

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浙江师范大学学报（自然科学版） 2013年第1期36卷 6-10页

作者：蒋冬花高爱同毕珂谢祥聪陈璨浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

以廉价的农副产品小米糠为培养基原料,L-谷氨酸钠(L-MSG)为合成底物,利用实验室筛选的短乳杆菌发酵生产γ-氨基丁酸(GABA).通过单因子实验探讨了短乳杆菌发酵生产γ-氨基丁酸过程中pH、培养温度、培养时间、小米糠及底物添加量的影响.... 详细信息

以廉价的农副产品小米糠为培养基原料,L-谷氨酸钠(L-MSG)为合成底物,利用实验室筛选的短乳杆菌发酵生产γ-氨基丁酸(GABA).通过单因子实验探讨了短乳杆菌发酵生产γ-氨基丁酸过程中pH、培养温度、培养时间、小米糠及底物添加量的影响.结果表明:适宜的培养条件为pH 4.00,30℃,培养72 h;优化的培养基组分为小米糠70 g/L,谷氨酸钠50 g/L.在优化的培养基和发酵条件下,发酵液中γ-氨基丁酸的产量可达32.037 g/L.

关键词： γ-氨基丁酸乳酸菌小米糠培养条件

一株高效聚磷菌解角质素微杆菌的分离、鉴定及其除磷条件优化

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山西农业科学 2015年第8期43卷 986-991页

作者：谢祥聪吴巧玉冯青青蒋冬花浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

利用蓝白斑法从金华市市郊池塘的水体样品中分离筛选得到1株高效聚磷MK-6菌株。经鉴定,MK-6菌株为解角质素微杆菌(Microbacterium keratanolyticum)。对MK-6菌株的培养条件和合成污水培养基配方进行综合优化,结果表明,该菌株的适宜除磷... 详细信息

利用蓝白斑法从金华市市郊池塘的水体样品中分离筛选得到1株高效聚磷MK-6菌株。经鉴定,MK-6菌株为解角质素微杆菌(Microbacterium keratanolyticum)。对MK-6菌株的培养条件和合成污水培养基配方进行综合优化,结果表明,该菌株的适宜除磷条件为:初始p H值6.0,装液量40.0 m L,温度30℃,转速220 r/min,接种量10%,醋酸钠浓度600 mg/L,且适宜浓度的铜离子、铅离子和钾离子对该菌株的除磷起着促进作用。经优化,该菌株对改良后合成污水(PO43--P浓度为14.9 mg/L)的去磷率达到了70.81%。该菌株的获得,对于扩大聚磷菌菌种库、防治富营养化具有实际意义。

关键词：聚磷菌解角质素微杆菌去磷率条件优化

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惩罚对齐法:测量不变性检验的新方法

心理科学进展 2025年第1期33卷 176-190,I0008-I0013页

作者：温聪聪厦门大学国际学院厦门361005

Asparouhov和Muthén在2023年提出了一种全新的惩罚结构方程模型框架。惩罚对齐法是该模型框架在测量不变性检验领域的应用范例。惩罚对齐法继承了多组探索性因子分析在探索性因子分析框架内进行测量不变性检验和可以估计交叉载荷等优点... 详细信息

Asparouhov和Muthén在2023年提出了一种全新的惩罚结构方程模型框架。惩罚对齐法是该模型框架在测量不变性检验领域的应用范例。惩罚对齐法继承了多组探索性因子分析在探索性因子分析框架内进行测量不变性检验和可以估计交叉载荷等优点,继承了对齐法使用成分损失函数、允许模型中存在一定量不等参数等优点,同时继承了贝叶斯结构方程模型对模型参数设置先验分布、通过检验模型参数的近似测量不变性达到潜因子均值比较的目的等优点。此外,惩罚对齐法还克服了传统测量不变性检验方法的一些不足。本文以大学生职业价值观研究为例,比较了多组验证性因子分析、基于验证性因子分析的惩罚对齐法分析、基于探索性结构方程模型的惩罚对齐法分析拟合样本数据的效果,演示了如何使用惩罚对齐法进行测量不变性检验和多组比较。

关键词：测量不变性检验惩罚对齐法贝叶斯结构方程模型探索性结构方程模型对齐先验分布

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