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过表达Notch配体Delta-like基因的MLO-Y4骨细胞株的建立及其对骨髓基质细胞成骨分化的作用

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第三军医大学学报 2020年第9期42卷 899-907页

作者：冯玮谢正松罗岑涂小林重庆医科大学生命科学研究院骨发育与再生平台重庆400016

目的建立稳定表达外源Dll1、Dll3、Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,研究骨细胞Notch信号Delta-like配体Dll1、Dll3、Dll4对骨髓基质细胞成骨分化的影响。方法用过表达Dll1、Dll3、Dll4基因的重组慢病毒液感染MLO-Y4样骨细胞,嘌呤霉素筛选分... 详细信息

目的建立稳定表达外源Dll1、Dll3、Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,研究骨细胞Notch信号Delta-like配体Dll1、Dll3、Dll4对骨髓基质细胞成骨分化的影响。方法用过表达Dll1、Dll3、Dll4基因的重组慢病毒液感染MLO-Y4样骨细胞,嘌呤霉素筛选分别稳定表达Dll1、Dll3及Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株。采用实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative,qPCR)对筛选出来的MLO-Y4骨细胞株中Dll1、Dll3及Dll4基因的表达进行鉴定。将3种细胞株分别与野生型小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)进行共培养,采用碱性磷酸酶(ALP)染色及ALP定量检测共培养3 d ALP活性变化;qPCR检测共培养3 d成骨相关标志基因及Notch信号靶基因的表达水平,在使用Notch信号抑制剂DAPT后检测上述指标。结果与阴性对照组相比,Dll1、Dll3及Dll4转染组中Dll1、Dll3及Dll4 mRNA的水平显著增加(P<0.05)。共培养3 d后,骨细胞中Dll4基因的过表达促进了BMSC的ALP活性,与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05)。qPCR结果显示,MLO-Y4-Dll4组的ALP、Runx2、OPN及CollagenⅠ成骨相关标志基因的表达均有所升高(P<0.05),Notch信号靶基因Hey1、HeyL、Hes1及Hes7的表达也有所升高(P<0.05)。而在加入DAPT后,MLO-Y4-Dll4组的ALP活性下降,成骨相关标志基因及Notch信号靶基因的表达有所下降(P<0.05)。结论建立了稳定表达外源Dll1、Dll3或Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,在骨细胞中过表达Dll4能促进骨髓基质细胞的早期成骨分化,经典Notch信号通路在其中可能发挥了重要作用。

关键词：慢病毒 Delta-like基因过表达小鼠骨样细胞骨髓基质细胞成骨分化 DAPT

Notch信号介导骨细胞过表达BMP4促进骨髓基质细胞成骨分化

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第三军医大学学报 2021年第16期43卷 1550-1558页

作者：谢正松赵怡心吕子灵刘宏涂小林重庆医科大学生命科学研究院骨发育与再生实验室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院生殖健康与不孕症中心重庆400016 重庆医科大学第一临床学院重庆400016

目的探究骨细胞MLO-Y4过表达骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein-4,BMP4)通过Notch信号对骨髓基质细胞ST2成骨分化的影响。方法使用BMP4重组腺病毒(Ad-BMP4)以及阴性对照(Ad-GFP)分别感染MLO-Y4后与ST2共培养,分为GFP组及BMP4组;Western blot检测MLO-Y4细胞BMP4蛋白表达;采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MLO-Y4的BMP4和Notch配体基因、共培养体系中成骨标志基因、Notch靶基因以及促血管生成因子表达;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及生化定量检测ALP活性;在共培养体系中加入Notch信号抑制剂DAPT后,再次检测上述指标。结果MLO-Y4过表达BMP4,上调Notch配体Jag1、Jag2、Dll4表达;ALP染色以及生化定量结果显示共培养第1天GFP组和BMP4组ALP活性差异无统计学意义,在第3、5天,BMP4组ALP活性更高(P<0.05);BMP4组成骨标志基因在第1天仅Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)显著升高(P<0.05),第3、5天BMP4组Alp、Runx2、骨钙蛋白(osteocalcin,Ocn)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)均显著增高(P<0.05);第3天BMP4组Notch信号靶基因Hey1、Hey2,血管内皮生长因子(vascular endothlial growth factor,VEGF)、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)的表达也显著增高(P<0.05);加入DPAT抑制Notch信号后,BMP4组ALP活性、成骨标志基因以及促血管生成因子表达均显著下降(P<0.05)。结论MLO-Y4过表达BMP4可以促进ST2成骨分化,该过程可能与Notch信号增强有关。

关键词：骨细胞骨形态发生蛋白4 骨髓基质细胞成骨分化 Notch信号

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中学体育俱乐部营业模式探究及其对策

新课程学习 2011年第2期 47-48页

作者：谢正松四川省攀枝花市盐边中学

生本教育就是以学生发展为本,这种教育理念符合新课改和素质教育的要求。因此,在教育教学中我们应合理利用生本教育,提高教育教学质量。本人在初中教育教学中通过实践,提出了自己关于生本教育的几点建议。

关键词：初中生本教育建议

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普通高校实施体育健康课程浅论

西昌学院学报（自然科学版） 2005年第2期19卷 140-142页

作者：吴勇谢正松西昌学院体育系四川西昌615022 攀枝花盐边中学四川攀枝花617410

面对体育教育改革的新发展,从大学体育教育应具有的时代性特征入手,从健康教育的角度,对大学体育健康课程的实施提出一些观点,以期为教学实践提供参考。

关键词：体育健康课程普通高校

Myonectin在心血管疾病和代谢性疾病中的研究进展

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生理科学进展 2024年

作者：谢正裴芳广东省人民医院赣州医院(赣州市立医院)心血管内科

肌肉因子对心血管疾病和代谢性疾病具有显著的改善作用。肌联素（myonectin）是新近发现的肌肉因子，与多种心血管疾病和代谢性疾病如冠心病、糖尿病、肥胖等密切相关。本文围绕myonectin的生物学特性、其在心血管疾病和代谢性疾病发生... 详细信息

肌肉因子对心血管疾病和代谢性疾病具有显著的改善作用。肌联素（myonectin）是新近发现的肌肉因子，与多种心血管疾病和代谢性疾病如冠心病、糖尿病、肥胖等密切相关。本文围绕myonectin的生物学特性、其在心血管疾病和代谢性疾病发生发展中的作用及可能的作用机制进行综述，以期为心血管疾病和代谢性疾病的防治提供新的靶点和策略。

关键词： myonectin 心血管疾病代谢性疾病

“新农人”短视频传播:叙事内容、时代特征与效果探赜

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中国出版 2024年第11期 58-61页

作者：谢正发刘中才长江师范学院管理学院吉首大学旅游学院

“新农人”作为数字乡村建设中最具话语表达权和思维活跃度的社会群体,借助短视频平台参与传播乡土文化、多维重塑乡村印象,业已成为助推乡村振兴的重要力量。文章基于“新农人”短视频传播的叙事结构,分析平台经济下互联网“新农人”... 详细信息

“新农人”作为数字乡村建设中最具话语表达权和思维活跃度的社会群体,借助短视频平台参与传播乡土文化、多维重塑乡村印象,业已成为助推乡村振兴的重要力量。文章基于“新农人”短视频传播的叙事结构,分析平台经济下互联网“新农人”短视频传播的时代特征,聚焦乡土文化认同现象作以效果探赜,为提升“新农人”之于乡土文化短视频传播的作用效度和价值张力提供理论支撑和实践策略。

关键词：新农人乡土文化短视频叙事形态传播效果

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低动静刚度比天然胶类减震制品的配方设计

安徽化工 2018年第6期44卷 78-80页

作者：章维国谢正松章于川吴兵安徽中鼎密封件股份有限公司安徽宁国242300 安徽安大中鼎橡胶技术开发有限公司安徽合肥230088

为改善减震橡胶制品的动静刚度比K_d/K_s,通过采用纯天然橡胶NR、天然胶与顺丁橡胶并用胶NR/BR(并用比85/15)、天然胶与丁苯橡胶并用胶NR/SBR(并用比85/15)等三种不同生胶体系和相同硫化体系的配方,以及相同生胶并用体系NR/BR(并用比70/... 详细信息

为改善减震橡胶制品的动静刚度比K_d/K_s,通过采用纯天然橡胶NR、天然胶与顺丁橡胶并用胶NR/BR(并用比85/15)、天然胶与丁苯橡胶并用胶NR/SBR(并用比85/15)等三种不同生胶体系和相同硫化体系的配方,以及相同生胶并用体系NR/BR(并用比70/30)和三种不同硫化体系的配方,分别按照日本JISK6394标准制备试样,然后对各标准试样进行动静刚度比K_d/K_s测试试验。测试结果表明,纯天然橡胶NR配方的K_d/K_s最小,当NR与BR、SBR等橡胶并用后,其K_d/K_s都有所提高;而NR/BR(70/30)标准试样中,高硫低促硫化体系配方试样的K_d/K_s最小,当使用低硫高促和全硫载体硫化体系时,试样的K_d/K_s均有所增大,其中全硫载体硫化体系配方试样的K_d/K_s最高。因此,制造减振性能优良的天然胶类减震橡胶制品时,应优先考虑采用高硫低促硫化体系的基本配方。

关键词：减震橡胶制品动静刚度比(动倍率) 天然橡胶的并用胶微相分离多相结构滞后效应高硫低促硫化体系

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超硬材料六面顶液压机铰链梁断裂失效分析

超硬材料工程 2011年第6期23卷 5-9页

作者：农建中谢正松吴一胡毅胜桂林桂冶实业有限公司广西桂林541001 桂林理工大学广西桂林541004

通过对超硬材料六面顶液压机铰链梁断口表面进行宏观观察,材料化学分析,力学性能测试,断口扫描电镜观察,能谱分析和显微组织分析,找出了铰链梁的断裂失效原因。综合理化数据分析研究得出结论,超硬材料六面顶液压机铰链梁铸件中的氧化物... 详细信息

通过对超硬材料六面顶液压机铰链梁断口表面进行宏观观察,材料化学分析,力学性能测试,断口扫描电镜观察,能谱分析和显微组织分析,找出了铰链梁的断裂失效原因。综合理化数据分析研究得出结论,超硬材料六面顶液压机铰链梁铸件中的氧化物和硫化物严重夹杂是产生断裂的主要原因,铸件中的缩松、成分偏析、也加速了疲劳和裂纹的扩展,最终使铰链梁断裂。

关键词：六面顶液压机铰链梁氧化物硫化物夹杂断裂失效分析

基于修正DEVA模型的云服务型企业价值评估研究 ——以金山办公为例

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基于修正DEVA模型的云服务型企业价值评估研究 ——以金山办公为例

作者：谢正霄山西财经大学

学位级别：硕士