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转Cry1Ab-Ma基因抗虫玉米植株的获得及其后代分析

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分子植物育种 2015年第9期13卷 1943-1948页

作者：杨小艳翁建峰谢树章雷开荣重庆市农业科学院生物技术研究中心逆境农业研究重庆市重点实验室重庆401329 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

本研究使用In-Fusion TM试剂盒构建植物表达载体p TF101.1-P35S::Cry1Ab-Ma,以玉米杂交种HiⅡ幼胚为受体材料,采用农杆菌介导法将P35S驱动的抗虫基因Cry1Ab-Ma基因转入玉米,经双丙氨膦筛选后的抗性愈伤分化出43株玉米幼苗,经目的基因PC... 详细信息

本研究使用In-Fusion TM试剂盒构建植物表达载体p TF101.1-P35S::Cry1Ab-Ma,以玉米杂交种HiⅡ幼胚为受体材料,采用农杆菌介导法将P35S驱动的抗虫基因Cry1Ab-Ma基因转入玉米,经双丙氨膦筛选后的抗性愈伤分化出43株玉米幼苗,经目的基因PCR及表达蛋白检测,其中的28株呈阳性。T1代植株叶片蛋白粗提物经Cry1Ab免疫试纸条检测,结果表明目的基因表现出分离,在部分转基因植株后代中获得了表达。本研究为培育优良的抗虫玉米自交系奠定了基础。

关键词：玉米 Cry1Ab-Ma基因载体构建遗传转化

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转Bt毒蛋白基因玉米的研究进展

中国农学通报 2011年第7期27卷 1-5页

作者：谢树章雷开荣林清重庆市农业科学院生物技术研究中心逆境农业研究重庆市市级重点实验室重庆401329

此文首先回顾了国内外抗虫转基因玉米研究发展历程,归纳总结了转Bt毒蛋白基因玉米的常用转化方法和转基因玉米转化体的鉴定方法,对转Bt毒蛋白基因玉米后续实验的抗虫性分析鉴定及遗传稳定性评价与利用也进行了介绍。进而探讨了Bt毒蛋白... 详细信息

此文首先回顾了国内外抗虫转基因玉米研究发展历程,归纳总结了转Bt毒蛋白基因玉米的常用转化方法和转基因玉米转化体的鉴定方法,对转Bt毒蛋白基因玉米后续实验的抗虫性分析鉴定及遗传稳定性评价与利用也进行了介绍。进而探讨了Bt毒蛋白基因在玉米遗传转化上善待解决的问题以及未来的发展方向。认为应加大力度对瓶颈技术进行深入研究,以期转Bt毒蛋白基因玉米能够获得更好的发展。

关键词： Bt毒蛋白基因转基因玉米研究进展

玉簪‘钟情玛格丽特’组培快繁技术体系的建立

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分子植物育种 2023年

作者：韩垚秦小婷杨小艳吴红谢树章重庆市农业科学院生物技术研究所逆境农业研究重庆市重点实验室重庆市巴南区农业技术推广站

为建立玉簪‘钟情玛格丽特’组培快繁体系，本研究开展试验分析外植体取材部位，激素种类及浓度对芽诱导、增殖、生根培养的影响。结果表明：75%乙醇消毒30 s+0.1%的氯化汞溶液消毒10 min为最适消毒方法，外植体成活率可达95%；芽诱导... 详细信息

为建立玉簪‘钟情玛格丽特’组培快繁体系，本研究开展试验分析外植体取材部位，激素种类及浓度对芽诱导、增殖、生根培养的影响。结果表明：75%乙醇消毒30 s+0.1%的氯化汞溶液消毒10 min为最适消毒方法，外植体成活率可达95%；芽诱导、增殖的最适培养基是MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L；生根的最适培养基是1/2 MS+ IBA 0.5 mg/L，生根率可达97%，植株健壮、根多且数量均匀整齐，质量较好。本研究建立了‘钟情玛格丽特’玉簪组培快繁体系，为花叶玉簪优良种苗的快速繁育和品系改良提供技术支撑。

关键词：玉簪‘钟情玛格丽特’ 组织培养快速繁育

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非晶合金变压器对节能和环保作用

中国勘察设计 2010年第9期 64-68页

作者：谢树章北京城市亮点电气工程有限公司

本文从概况、发展、优势、特点等方面介绍了非晶合金变压器,是目前节能效果较理想的配电变压器,适用于发展中地区和负载率较低的地方。

关键词：非晶合金变压器干式变压器

重庆中高海拔区玉米灰斑病的发生危害特点及综合防控技术

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农业科技通讯 2019年第10期 179-180,183页

作者：杨小艳吴红谢树章重庆市农业科学院生物技术研究中心/逆境农业研究重庆市市级重点实验室

文章介绍了重庆中高海拔区玉米灰斑病的发生概况、危害特征与流行特点,提出了选用抗病力强的品种、合理耕作、控减病害、适期播种、平衡施肥、合理用药、化学防治等玉米灰斑病综合防控技术。

关键词：重庆中高海拔区玉米灰斑病防控技术

苏云金芽孢杆菌Cry1A.301-Vip3A融合杀虫蛋白原核表达及生物活性分析

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南方农业学报 2024年第10期55卷 3046-3055页

作者：杨小艳韩垚吴红雷开荣谢树章重庆市农业科学院生物技术研究所/逆境农业研究重庆市市级重点实验室重庆401329

【目的】对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的杀虫蛋白基因(Cry1A.301和Vip3A)进行原核融合表达及生物活性分析,为玉米抗虫基因资源发掘和品种创制提供科学参考。【方法】利用连接肽构建不同杀虫机理的Cry1A.301和Vip3A融合... 详细信息

【目的】对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的杀虫蛋白基因(Cry1A.301和Vip3A)进行原核融合表达及生物活性分析,为玉米抗虫基因资源发掘和品种创制提供科学参考。【方法】利用连接肽构建不同杀虫机理的Cry1A.301和Vip3A融合基因,构建其原核表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,对融合蛋白进行理化性质和结构域预测分析及定量检测,并采用人工饲料混合饲喂法测定融合蛋白对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)、棉铃虫(Helicoverpaarmigera)和草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)的杀虫活性。【结果】构建的融合基因基本骨架为5'-Cry1A.301-Vip3A-3',中间由编码连接肽(8个氨基酸)的核苷酸序列(TCCACCTGCTCCACCTGCTCCACC)组装而成,经诱导表达形成融合蛋白Cry1A.301-Vip3A。该融合蛋白含有1409个氨基酸,分子量约为157 kD,为稳定的酸性蛋白,包含Cry1A.301和Vip3A蛋白家族的4个特征结构域。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中成功表达,且Cry1A.301和Vip3A蛋白的表达量无显著差异(P>0.05,下同)。饲喂Cry1A.301-Vip3A融合蛋白7 d后,亚洲玉米螟、草地贪夜蛾和棉铃虫幼虫校正死亡率达100.00%。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白与Cry1A.301蛋白对亚洲玉米螟的杀虫活性无显著差异,均显著高于Vip3A蛋白(P<0.05,下同)。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白、Vip3A蛋白和Cry1A.301蛋白对棉铃虫的杀虫活性无显著差异。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白和Vip3A蛋白对草地贪夜蛾的杀虫活性无显著差异,均显著高于Cry1A.301蛋白。【结论】原核表达的Cry1A.301-Vip3A融合蛋白结构稳定,对亚洲玉米螟、棉铃虫和草地贪夜蛾均具有较好的杀虫活性。

关键词：苏云金芽孢杆菌(Bt) 融合蛋白原核表达生物活性

耐草甘膦菌株Pantoea rodasii S1536全基因组测序及比较基因组分析

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基因组学与应用生物学 2020年第5期39卷 2063-2070页

作者：杨小艳王忠伟吴红韩垚雷开荣谢树章重庆市农业科学院生物技术研究中心逆境农业重庆市重点研究室重庆401329

耐草甘膦菌株泛菌属S1536(Pantoea rodasii S1536)是从草甘膦污染土壤中分离筛选出来的一种革兰氏阴性菌,对草甘膦的抗性能高达400 mmol/L。本研究首次通过PacBio RSII平台对泛菌属S1536进行全基因组测序,使用SMRT portal软件对reads进... 详细信息

耐草甘膦菌株泛菌属S1536(Pantoea rodasii S1536)是从草甘膦污染土壤中分离筛选出来的一种革兰氏阴性菌,对草甘膦的抗性能高达400 mmol/L。本研究首次通过PacBio RSII平台对泛菌属S1536进行全基因组测序,使用SMRT portal软件对reads进行组装,获得10个contigs,最终获得高质量且无间隔的泛菌属S1536基因组包含1条染色体和2个质粒,序列全长为5.16 Mb,其GC含量为55.16%。本研究进一步对基因组序列进行基因预测与功能注释、COG和GO聚类分析,预测了次级代谢产物合成基因簇及草甘膦抗性机制,最终得到编码基因有4843个,4656个蛋白获得COG功能注释,预测到2个NRPS类基因簇、1个thiopeptide类基因簇和1个hserlactone-arylpolyene类基因簇。莽草酸代谢途径关键酶EPSP合酶基因分析表明,泛菌属S1536中的EPSP合酶属于ClassⅠ型EPSPS。根据已报道的3株同一种Pantoea rodasii strain ND03、Pantoea rodasii strain DSM 26611和Pantoea rodasii strain LMG 26273的基因组信息进行全基因组关联比较分析,结果显示4株菌虽然属于同一种,但在进化中产生了较大差异。相关研究结果将为泛菌属S1536功能基因组学研究、耐除草剂机制的研究及耐除草剂基因的挖掘提供基础数据。

关键词：耐草甘膦菌株全基因组测序比较基因组分析

耐除草剂转基因玉米CM8401的获得及功能性状鉴定

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玉米科学 2023年第5期31卷 42-48页

作者：谢树章翁建峰韩垚吴红雷开荣杨小艳重庆市农业科学院生物技术研究所/逆境农业研究重庆市市级重点实验室重庆401329 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

耐草甘膦和耐草铵膦是转基因作物育种重要的目标性状。将耐草甘膦基因MC1-EPSPS构建到含有bar基因的植物表达载体p TF101.1中,通过农杆菌介导法转入玉米材料Hi-II中,从而获得兼具耐受草甘膦和草铵膦性状的转基因玉米材料CM8401。目的基... 详细信息

耐草甘膦和耐草铵膦是转基因作物育种重要的目标性状。将耐草甘膦基因MC1-EPSPS构建到含有bar基因的植物表达载体p TF101.1中,通过农杆菌介导法转入玉米材料Hi-II中,从而获得兼具耐受草甘膦和草铵膦性状的转基因玉米材料CM8401。目的基因PCR检测显示,MC1-EPSPS和bar基因稳定整合到玉米基因组中。目的蛋白试纸条检测结果显示,MC1-EPSPS蛋白和PAT蛋白在转基因玉米世代间中表达稳定。田间除草剂耐受性鉴定试验表明,转基因玉米CM8401对草甘膦和草铵膦都具有良好耐受性,可耐受4倍推荐中剂量的草甘膦和草铵膦。

关键词：玉米耐除草剂草甘膦

水稻OsmTERF基因过表达载体构建及生物信息学分析

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分子植物育种 2024年第24期22卷 8023-8033页

作者：韩垚王忠伟杨小艳谢树章吴红重庆市农业科学院生物技术研究所逆境农业研究重庆市市级重点实验室重庆401329

为深入解析水稻线粒体转录终止因子(OsmTERF)家族基因在水稻生长发育调控中的作用,以OsmTERF家族成员Os06g0225100基因为研究对象,克隆获得该基因,并利用同源重组成功构建植物超表达载体。分析发现该基因CDS序列为1215 bp,编码404个氨基... 详细信息

为深入解析水稻线粒体转录终止因子(OsmTERF)家族基因在水稻生长发育调控中的作用,以OsmTERF家族成员Os06g0225100基因为研究对象,克隆获得该基因,并利用同源重组成功构建植物超表达载体。分析发现该基因CDS序列为1215 bp,编码404个氨基酸,该基因编码的蛋白具有典型的mTERF motif,属于OsmTERF蛋白家族,该蛋白不含信号肽,是线粒体转运肽。利用RiceXPro数据库预测到该基因表达能够贯穿整个生育期,可能参与植株对逆境胁迫的响应和生长发育过程中细胞分化。本研究为阐明该基因在水稻中的功能及分子机理提供了重要信息,为亲缘关系较近的谷子、高粱、玉米和小麦等粮食作物的品种改良提供理论依据和参考。

关键词：水稻(Oryza sativa) OsmTERF基因生物信息学分析