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多器官功能障碍综合征大鼠小肠深肌层Cajal间质细胞的凋亡现象

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中华危重病急救医学 2015年第6期27卷 504-508页

作者：谢明征齐清会大连医科大学附属第一医院腹部急症外科辽宁大连116011

目的：观察多器官功能障碍综合征（MODS）大鼠小肠深肌层Cajal间质细胞（ICC-DMP）的凋亡现象，以及表型标志酪氨酸激酶受体（c-kit）、线粒体凋亡信号通路Bcl-2和Bax表达的变化，揭示MODS状态下胃肠运动功能障碍的机制。方法健康成年Wi... 详细信息

目的：观察多器官功能障碍综合征（MODS）大鼠小肠深肌层Cajal间质细胞（ICC-DMP）的凋亡现象，以及表型标志酪氨酸激酶受体（c-kit）、线粒体凋亡信号通路Bcl-2和Bax表达的变化，揭示MODS状态下胃肠运动功能障碍的机制。方法健康成年Wistar大鼠40只，按随机数字表法分为对照组（20只）和MODS组（20只）。经腹腔注射8×10^8 cfu/mL大肠杆菌混悬液1 mL制备细菌性腹膜炎致MODS大鼠模型；对照组给予等量生理盐水。制模24 h后，取大鼠上段小肠肌层制作全厚标本，分别应用透射电镜扫描、免疫荧光双标染色、激光扫描共聚焦显微镜，观察两组大鼠小肠ICC-DMP的超微结构、网络结构及c-kit和Bax/Bcl-2的表达。结果大体标本观察显示：对照组大鼠胃肠蠕动正常；MODS组大鼠麻痹性胃肠梗阻症状明显。透射电镜下观察显示：ICC-DMP中间丝结构清晰，无肿胀线粒体，染色质分布均匀，核周聚集少量异染色质；MODS组ICC-DMP中间丝模糊，线粒体肿胀明显，细胞核内有大量染色体聚集。共聚焦显微镜下观察显示：对照组ICC-DMP网络结构清晰，c-kit和Bcl-2表达强烈且区域重合，而Bax表达较弱并呈散点样分布；MODS组ICC-DMP数量较对照组显著减少（个/HP：15.80±2.30比25.70±3.97，t＝6.819，P＝0.000），网络完整性损伤明显；c-kit和Bcl-2的表达较对照组明显降低〔c-kit（荧光强度）：129.56±36.90比307.23±40.07，t＝10.314， P＝0.000；Bcl-2（荧光强度）：103.23±25.19比378.92±43.79，t＝17.259，P＝0.000〕，而Bax表达较对照组明显增加（荧光强度：270.94±36.98比92.57±20.92，t＝-13.277，P＝0.000）。结论 MODS致胃肠动力障碍的机制可能与ICC-DMP超微结构损伤、c-kit表型改变和线粒体凋亡途径的激活密切相关。

关键词：多器官功能障碍综合征深肌层Cajal间质细胞细胞凋亡 Bax Bcl-2

Effects of Dachengqi Decoction(大承气汤) on Morphological Changes in Enteric Nerve System of Rats with Multiple Organ Dysfunction Syndrome

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Chinese Journal of Integrative Medicine 2015年第8期21卷 624-629页

作者：谢明征齐清会张盛林卫明明 Department of General Surgery First Affiliated HospitalDalian Medical University Gansu Province Hospital of Traditional Chinese Medicine

Objective： To observe the morphological changes in enteric nerve system （ENS） of rats with multiple organ dysfunction syndrome （MODS） treated by Dachengqi Decoction （大承气汤, DCQD）. Methods： Fifty Wistar rats were randomly assigned to the control group, MODS model group and DCQD treated group. The rats in MODS model group and DCQD treated group were injected Escherichia coil （E. coli） suspension into abdominal cavity under sterile condition. The DCQD treated group was gavaged with DCQD 2 days before the E. coil suspension was injected. Twenty-four hours after injection, the proximal segment of intestine was resected and studied by immunohistofluorescence using vesicular acetylcholine transporter, vasoactive intestinal polypeptide （VIP）, substance P （SP） and neuronal nitric oxide synthase （nNOS） antibodies. The whole-mount preparations were observed by laser scanning confocal microscope to detect the changes of quantity and fluorescence integral optical density （IOD） value of intestine enteric nerves. Results： Compared with the control group, the quantity and IOD value of acetylcholine （ACh）, VIP, SP and nitric oxide （NO） nerves of intestine in the MODS group were significantly decreased （P〈0.01）, and the network of enteric nerves was remarkably disrupted. Compared with the MODS group, the quantity and fluorescence IOD value of ACh, VIP, SP and NO nerves in the DCQD group were significantly increased （P〈0.01）, and the network of enteric nerves was remarkably recovered. Conclusions： DCQD can protect and repair damage in the network of ACh, SP, NO and VIP nerves in rats with MODS, which may be one of mechanisms involved in promoting gastrointestinal motility by DCQD.

关键词： multiple organ dysfunction syndrome enteric nerve system neurotransmitter Chinese medicine

大承气汤修复多器官功能障碍综合症肠神经-CAJAL间质细胞—平滑肌细胞网络损伤实验研究

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大承气汤修复多器官功能障碍综合症肠神经-CAJAL间质细胞—平滑肌...

作者：谢明征大连医科大学

学位级别：硕士

背景:多器官功能障碍综合症(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)是一种在严重感染、创伤、休克及大手术等原发病发生后,机体同时或序贯发生两个或两个以上器官或系统功能障碍的临床综合征,以高代谢、高动力循环状态、过度失控... 详细信息

背景:多器官功能障碍综合症(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)是一种在严重感染、创伤、休克及大手术等原发病发生后,机体同时或序贯发生两个或两个以上器官或系统功能障碍的临床综合征,以高代谢、高动力循环状态、过度失控的炎症反应和器官功能障碍为特征的临床综合征,是腹部外科患者死亡的重要原因。现在观点认为,MODS一般由全身炎症反应综合征(systemic inflammation response syndrome, SIRS )和代偿性抗炎性反应综合征( Compensatroy anti-inflammatory response syndrome, CARS)发展而来。胃肠道被认为是促发SIRS和MODS的始动器官与靶部位。胃肠功能状态被认为是判断危重病人预后的一项重要指标。胃肠运动功能的恢复有助于有效地阻断MODS的进一步发展。胃肠道Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)相互间形成网络状结构广泛分布于胃肠道各节段和各肌层。目前认为ICC有三个主要功能:①是胃肠肌肉的起搏细胞,能产生和传导生理性慢波,控制胃肠道平滑肌的收缩和蠕动。肌间ICC(ICC-MY)具有基本节律起搏和传播功能,能够产生慢波;②是胃肠道肠神经系统(enteric nerve system, ENS)信号向平滑肌细胞(smooth muscle cells, SMC)的传送的信息整合中转站。深部肌间神经丛ICC(ICC-DMP)是肠神经作用的首要靶细胞,肠神经释放的递质主要是通过ICC-DMP来调节;从而在调控胃肠动力的发生与变化。另外ENS运动末梢、肌间ICC、SMC相互联系形成网络,构成胃肠动力基本功能单位( basic functional unit of gastrointestinal motility, BFUGM),肠神经-ICC-平滑肌网络与胃肠运动功能障碍密切相关;③促进电活动扩布。目的:以细菌性腹膜炎致MODS大鼠模型为研究对象,观察MODS大鼠模型小肠神经- ICC-平滑肌网络的形态学变化以及大承气汤(Da-Cheng-Qi-Tang, DCQT)治疗的影响,探讨MODS致胃肠运动障碍的产生机制和大承气汤治疗MODS机理。方法:健康成年Wistar大鼠100只,雌雄各半,体重200g-250g,随机分组如下:对照组(20只)、MODS模型组(40只)和DCQT治疗2组(40只)。对照组每只大鼠予腹腔注射1ml生理盐水。MODS模型组和DCQT治疗组每只大鼠予腹腔注射1ml ***.混悬液,建立细菌性腹膜炎致MODS模型。DCQT治疗组于造模前2日给予DCQT灌胃,2次/日,每次1ml/100g。造模24小时后取存活大鼠上段小肠组织制作肠肌层全厚组织标本,进行c-Kit抗体和囊泡装乙酰胆碱转运体(VAChT)抗体,血管活性肠肽(VIP)抗体,P物质(SP)抗体以及神经型一氧化氮合酶(nNOS)抗体免疫荧光双标记染色后用于激光扫描共聚焦显微镜检测、分析。结果:⒈大体标本较之对照组,MODS组大鼠胃肠极度扩张,胃肠梗阻征象明显;DCQT治疗组胃肠扩张、梗阻较MODS组明显减轻。⒉免疫荧光共聚焦显微镜检测①ICC-DMP网络:与对照组相比,MODS组大鼠ICC-DMP数量明显减少(p征象明显;DCQT

关键词：多器官功能障碍综合征 Cajal间质细胞肠神经大承气汤

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浅谈影响ERCP操作的制约因素

世界华人消化杂志 2017年第19期25卷 1735-1742页

作者：谢明征梁国刚大连医科大学附属第一医院腹部急症外科辽宁省大连市116000

内镜下逆行性胆胰管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)由于具有创伤小、时间短的优点,已在胆胰疾病的诊治方面具有举足轻重的作用,尤其在胆总管结石、胆囊切除术后的胆管复发结石的治疗方面已经成为了首选.... 详细信息

内镜下逆行性胆胰管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)由于具有创伤小、时间短的优点,已在胆胰疾病的诊治方面具有举足轻重的作用,尤其在胆总管结石、胆囊切除术后的胆管复发结石的治疗方面已经成为了首选.但随着ERCP的广泛开展和认识的不断提高,大量研究显示局部解剖因素,尤其是十二指肠周围憩室、乳头嵌顿结石和乳头狭窄是影响ERCP操作成功的主要解剖因素.同时医护患三者间的配合也是影响ERCP操作成功的重要原因.本文系统复习相关文献资料,对ERCP操作失败的原因作一综述.

关键词：内镜下逆行性胆胰管造影术操作失败十二指肠壶腹周围憩室乳头嵌顿性结石乳头狭窄

大承气汤通过线粒体途径减轻多器官功能障碍综合征大鼠小肠平滑肌的损伤

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中华危重病急救医学 2015年第2期27卷 106-109页

作者：罗鹏谢明征齐清会大连医科大学附属第一医院腹部急症外科辽宁大连116011

目的通过检测大鼠小肠平滑肌线粒体凋亡信号通路Bc1-2、Bax以及核转录因子-kB（NF-kB）的蛋白表达，探讨大承气汤促进多器官功能障碍综合征（MODS）胃肠动力恢复的机制。方法健康成年Wistar大鼠100只，按随机数字表法分为对照组（20... 详细信息

目的通过检测大鼠小肠平滑肌线粒体凋亡信号通路Bc1-2、Bax以及核转录因子-kB（NF-kB）的蛋白表达，探讨大承气汤促进多器官功能障碍综合征（MODS）胃肠动力恢复的机制。方法健康成年Wistar大鼠100只，按随机数字表法分为对照组（20只）、模型组（40只）和大承气汤组（40只）。经腹腔注射1mL大肠杆菌混悬液（8×10^8cfu／mL）制备细菌性腹膜炎致MODS大鼠模型，对照组则腹腔注射1mL生理盐水；大承气汤组于制模前2d灌胃大承气汤，每次10mL／kg，每日2次。各组于制模24h后脱颈活杀大鼠取上段小肠，采用免疫组化法检测小肠平滑肌Bcl-2、Bax和NF—KB的蛋白表达。结果对照组可见小肠平滑肌有大量分布均匀的Bcl-2蛋白表达及少量分布均匀的Bax、NF—kB蛋白表达。与对照组比较，模型组小肠平滑肌Bcl-2蛋白表达分布稀疏，呈散块状区域表达，Bcl-2蛋白表达明显减少（积分A值：7115．3±1797．2比22085．5±4892．2，P〈0．05），以环层肌中尤为明显；Bax、NF—kB蛋白分布密集，表达均明显升高[Bax（积分A值）：33802．6±5778．0比7984．4±1804．5，NF—KB（积分A值）：2465．9±664．8比1572．6±256．0，均P〈0．05]，尤以环行肌中升高明显。与模型组比较，大承气汤组大鼠小肠平滑肌中Bcl-2蛋白表达明显升高（积分A值：12458．6±2491．1比7115．3±1797．2，P〈0．05），Bax、NF—kB蛋白表达明显减少（Bax（积分A值）：12529．2±2018．5比33802．6±5778．0，NF—KB（积分A值）：1843．1±373．6比2465．9±664．8，均P〈0．05]，以环行肌中尤为显著。结论大承气汤可能通过增加线粒体外膜Bcl-2表达，抑制Bax向线粒体膜移位，从而减轻MODS大鼠小肠平滑肌线粒体的损伤，促进胃肠动力的恢复。

关键词：多器官功能障碍综合征大承气汤平滑肌线粒体胃肠动力

微课-翻转课堂-CBL混合教学法在中西医结合外科学的实践

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中国中医药现代远程教育 2023年第6期21卷 9-11页

作者：赵亮关溪尚东蒋健谢明征大连医科大学附属第一医院中西医结合外科辽宁大连116011

目的观察微课-翻转课堂-案例教学(CBL)混合教学法在中西医结合外科学中的教学效果。方法将中西医结合临床专业2017级31名本科生作为实验组,采用微课-翻转课堂-CBL混合教学法;对照组为2016级29名本科生。采用问卷形式,调查2017级本科生... 详细信息

目的观察微课-翻转课堂-案例教学(CBL)混合教学法在中西医结合外科学中的教学效果。方法将中西医结合临床专业2017级31名本科生作为实验组,采用微课-翻转课堂-CBL混合教学法;对照组为2016级29名本科生。采用问卷形式,调查2017级本科生对新教学法的满意度,并比较2组的期末考核成绩。结果实验组对新教学法的满意度较高,且期末考核成绩高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);客观题平均得分2组间差异无统计学意义(P>0.05);主观题实验组得分明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论微课-翻转课堂-CBL混合教学法改革成效明显,有助于激发学习兴趣及自主性,提高对知识的掌握程度。

关键词：翻转课堂微课 CBL 混合教学法中西医结合外科学

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肠神经胶质细胞形态学研究方法进展

世界华人消化杂志 2019年第8期27卷 521-526页

作者：许英谢明征梁国刚大连医科大学附属第一医院腹部急症外科/大连医科大学中西医结合研究院辽宁省大连市116000

肠神经胶质细胞(enteric glial cells, EGCs)是肠神经系统的重要组成部分,其数量约是肠神经元数量的4倍.在形态和功能上与中枢神经系统的星形胶质细胞相似.在营养、支持肠神经、维持胃肠道稳态、调节胃肠道功能等方面发挥着重要作用.由... 详细信息

肠神经胶质细胞(enteric glial cells, EGCs)是肠神经系统的重要组成部分,其数量约是肠神经元数量的4倍.在形态和功能上与中枢神经系统的星形胶质细胞相似.在营养、支持肠神经、维持胃肠道稳态、调节胃肠道功能等方面发挥着重要作用.由于其在肠道中发挥的作用复杂而多样,成为研究的焦点.对其形态学的观察和研究是非常重要的.EGCs发现至今,针对其发挥功能的作用机制已得到深入研究,相应的研究方法也在不断的进步与改进中.本文主要介绍EGCs在胃肠道生理及病理状态下形态学特点及目前形态学研究方法,以期对未来研究EGCs提供实验方法的借鉴及参考意义,推进这一领域的发展.

关键词：肠神经胶质细胞免疫组织化学电镜技术全层铺片技术

香砂六君子汤对脾气虚证大鼠胃Cajal间质细胞、缝隙连接损伤的修复作用研究

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中国中西医结合杂志 2014年第10期34卷 1216-1219页

作者：李冉齐清会谢明征丁伯龙张盛林大连医科大学附属第一医院中西医结合研究院大连116011

目的探讨脾气虚证(Pi qi deficiency syndrome,PQDS)大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)、缝隙连接(gap junction,GJ)损伤和香砂六君子汤的修复作用。方法选择30只健康Wistar大鼠,采用苦寒泻下法建立脾气虚证模型。... 详细信息

目的探讨脾气虚证(Pi qi deficiency syndrome,PQDS)大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)、缝隙连接(gap junction,GJ)损伤和香砂六君子汤的修复作用。方法选择30只健康Wistar大鼠,采用苦寒泻下法建立脾气虚证模型。造模成功后分为脾气虚组(模型组)和香砂六君子汤治疗组(治疗组),每组各15只。另选择15只健康Wistar大鼠作为健康组。治疗组灌胃香砂六君子汤(2 mL/100 g),14天;健康组和模型组按照治疗组方法予等量生理盐水灌胃14天。分别于造模前、干预前及干预后取各组胃肌层组织,采用透射电镜观察ICC和GJ的超微结构改变;免疫组织化学法检测连接蛋白43(Cx43)的数量和分布。结果透射电镜显示:与健康组比较,模型组大鼠ICC和GJ明显损伤;经治疗组干预后ICC和GJ有明显修复趋势。与本组造模前比较,模型组干预前后胃肌层Cx43 IOD值均降低(P<0.05)。与本组干预前比较,治疗组干预后Cx43 IOD值升高(P<0.05)。与健康组比较,模型组干预前后胃肌层Cx43 IOD值均降低(P<0.05)。与模型组比较,治疗组干预后Cx43 IOD值升高(P<0.05)。结论脾气虚证大鼠胃肌层中ICC和GJ超微结构破坏,香砂六君子汤可修复脾气虚证状态下ICC和Cx43的损伤。

关键词：香砂六君子汤 Cajal间质细胞缝隙连接连接蛋白43

从解剖角度探讨成年女性腹腔镜腹股沟疝修补术中子宫圆韧带的处理

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中国临床解剖学杂志 2023年第2期41卷 240-244页

作者：王雪娜谢明征李生龙冶福林吴兆丰益西平措仁增罗布大连医科大学附属第一医院血液科辽宁大连116011 那曲市人民医院重症监护室西藏那曲852000 大连医科大学附属第一医院普外三科辽宁大连116011 那曲市人民医院外一科西藏那曲852000

腹股沟疝发病人群中女性仅占6%[1],其发生机制和临床特点与男性有着较大差异。女性腹股沟疝中股疝比例高达26.07%,远高于男性的5.09%[2],因此发生嵌顿的比例也比较大。以往由于对女性腹股沟疝的解剖结构和临床特点认知不足,导致女性腹... 详细信息

腹股沟疝发病人群中女性仅占6%[1],其发生机制和临床特点与男性有着较大差异。女性腹股沟疝中股疝比例高达26.07%,远高于男性的5.09%[2],因此发生嵌顿的比例也比较大。以往由于对女性腹股沟疝的解剖结构和临床特点认知不足,导致女性腹股沟疝的手术策略和技术基本同于男性。但随着腹腔镜后入路疝修补术的不断完善和腹股沟区解剖认知的不断深入,尤其是对肌耻骨孔的认知。

关键词：子宫圆韧带腹腔镜腹股沟疝疝修补术女性