检索结果-南通市图书馆

人类胚胎干细胞体外诱导分化为神经上皮细胞及多巴胺能神经元的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人类胚胎干细胞体外诱导分化为神经上皮细胞及多巴胺能神经元的初...

作者：谢平原中南大学

学位级别：硕士

第一部分人类胚胎干细胞向神经上皮细胞分化的两种诱导体系的比较研究目的：1．比较两种诱导体系下，hESCs向神经上皮细胞诱导分化的效率，以建立高效的诱导培养体系;2．探讨在两种诱导体系下，hESCs向神经分化过程是否都符合体内早期... 详细信息

第一部分人类胚胎干细胞向神经上皮细胞分化的两种诱导体系的比较研究目的：1．比较两种诱导体系下，hESCs向神经上皮细胞诱导分化的效率，以建立高效的诱导培养体系;2．探讨在两种诱导体系下，hESCs向神经分化过程是否都符合体内早期神经发育的规律。方法：hESCs在人源性饲养层培养体系下传代培养。A组在饲养层细胞上直接诱导，B组经类似EB的悬浮阶段。16天后对两个诱导体系在d0、d6、d10、d16的细胞行RT-PCR检测多能性基因，早期神经发育相关基因，内、中胚层基因，区域化基因的表达情况，及免疫细胞化学检测hESCs多能性标记和神经相关标记的表达情况。结果：1．两种诱导体系下，d10和d16均能够产生大量Nestin和Musashi染色阳性的神经上皮细胞;***6和Sox1阳性细胞计数结果显示A组的神经诱导效率高于B组;3．两组细胞d10均为典型Pax6+Sox1-的Rosette结构，d16均为Pax6+Sox1+的神经管样结构;4．两组细胞基因表达趋势相似，全能性基因的表达下调，神经相关基因表达上调;5．A组细胞表达较高的前脑标记，B组细胞表达较高的中后脑标记。第二部分神经上皮细胞诱导为多巴胺能神经元的研究目的：1．建立神经上皮细胞分化为DA能神经元的诱导体系，为帕金森病的替代治疗提供细胞来源;2．比较不同阶段的上皮细胞诱导分化为DA能神经元的差异。方法：早期处理组和晚期处理组分别以d10天和d16的神经上皮细胞为材料，用含100ng／ml FGF8和200 ng／ml SHH的诱导培养基，培养至第22天，对照组采用不含SHH和FGF8的培养基，RT-PCR检测中脑多巴胺能神经元相关基因En1和Nkx6.1的表达，免疫细胞化学检测中脑多巴胺能神经元特异性标记TH的表达。结果：1．d22时早期处理组细胞En1和Nkx6.1的表达明显强于晚期处理组和空白对照组;2．早期处理组有大量TH+克隆，晚期处理组仅有少数TH+克隆。第三部分帕金森大鼠模型的构建目的：构建稳定、可靠的帕金森大鼠模型，为进行细胞移植治疗提供动物模型。方法：在大鼠脑立体定位仪上用4ug／ul 6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射至成年SD大鼠右侧内侧前脑束和黑质致密部各2ul，然后应用阿朴吗啡(APO)诱发旋转，进行行为学观察，并灌注、切片行酪氨酸经化酶(TH)的免疫组织化学检测。结果：***模型鼠出现典型的旋转行为，10只中有5只旋转速度超过210圈／30分钟，在检测的连续4周中，旋转速度未见下降。***免疫组化染色见损毁侧黑质致密部的TH阳性细胞大部分丢失。结论：1．建立了人源性的hESCs向神经上皮细胞诱导分化体系，经比较发现，直接诱导法比经EB诱导法具有更高的诱导效率;2．体外进行神经诱导的过程都符合体内的早期神经发育过程;3．诱导第10天的神经上皮细胞命运还未限定，是进一步诱导分化的起始作用时间点;4．在第10天的神经上皮细胞中加入FGF8和SHH能够诱导获得中脑DA能神经元;5．采用单侧双位点注射6-OHDA能获得稳定、可靠的偏侧PD大鼠模型。

关键词：人类胚胎干细胞神经上皮细胞 DA能神经元帕金森病

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抽背式汽轮机组轴封漏汽大的分析与处理

设备管理与维修 2022年第10期 87-88页

作者：刘妙斌吴恩柏张云鹏谢平原中国石油四川石化有限责任公司四川成都611930

某抽背机组由于轴封系统设计不当、排汽不畅,在运行过程中存在轴封漏汽大的现象,造成磷酸酯抗燃油酸值高、调速系统阀门波动、轴封加热器液位无法维持等隐患。经改造处理后,轴封系统运行良好,轴封漏汽、抗燃油酸值得到明显控制,为机组... 详细信息

某抽背机组由于轴封系统设计不当、排汽不畅,在运行过程中存在轴封漏汽大的现象,造成磷酸酯抗燃油酸值高、调速系统阀门波动、轴封加热器液位无法维持等隐患。经改造处理后,轴封系统运行良好,轴封漏汽、抗燃油酸值得到明显控制,为机组的安全、平稳运行提供了保障。

关键词：抽背机组轴封漏汽抗燃油酸值调速系统

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

二代测序技术在植入前遗传学诊断中的应用

中国实用妇科与产科杂志 2016年第3期32卷 247-251页

作者：谢平原胡亮林戈中信湘雅生殖与遗传专科医院中南大学基础医学院生殖与干细胞工程研究所卫计委生殖与干细胞工程重点实验室湖南长沙410078

二代测序技术在植入前遗传学诊断、筛查中的应用正在迅速发展,其不仅能进行胚胎染色体的全面筛查和诊断,还能检测单基因病。文章就二代测序技术在染色体病、单基因病的植入前遗传学诊断以及植入前遗传学筛查中的应用情况进行阐述。

关键词：二代测序技术植入前遗传学诊断植入前遗传学筛查染色体病单基因病

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

300MW汽轮机现场分缸装配技术浅析

汽轮机技术 2005年第4期47卷 296-297页

作者：庄乾兴谢平原哈尔滨汽轮机厂有限责任公司哈尔滨150046 吉林石化公司动力厂吉林132021

为缩短加工装配周期,采取高中低压分缸装配及无转子盘车等装配工艺方法。这种装配方法可以大大缩短机组的总体安装进度,但在现场安装时要注意一些与制造厂家相衔接的接口问题。以哈尔滨汽轮机厂有限责任公司生产的300MW机组为例,对现场... 详细信息

为缩短加工装配周期,采取高中低压分缸装配及无转子盘车等装配工艺方法。这种装配方法可以大大缩短机组的总体安装进度,但在现场安装时要注意一些与制造厂家相衔接的接口问题。以哈尔滨汽轮机厂有限责任公司生产的300MW机组为例,对现场安装过程中要注意的问题加以讨论分析。

关键词：汽轮机分缸装配无转子盘车工艺方法

无饲养细胞无外源因子条件下高克隆密度维持人类胚胎干细胞自身未分化状态(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2010年第11期35卷 1123-1128页

作者：罗树伟林戈孙真谢平原刘天成卢光琇中南大学生殖与干细胞研究所国家干细胞工程技术研究中心长沙410078

目的:建立人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养体系。方法:比较hESCs克隆种植密度对其无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养的影响,以及克隆种植密度对hESCs培养体系骨形蛋白(bone morp... 详细信息

目的:建立人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养体系。方法:比较hESCs克隆种植密度对其无饲养细胞无外源性细胞因子体外培养的影响,以及克隆种植密度对hESCs培养体系骨形蛋白(bone morphology protein,BMP)样诱导活性的影响。结果:在没有外源性细胞因子条件下,高克隆密度(34克隆/cm2)可以维持hESCs处于未分化状态,而低克隆密度不能维持hESCs处于未分化状态。同时,NB体系BMP样诱导活性可以被hESCs克隆种植密度所改变,高hESCs克隆密度时,培养基具有高的BMP样诱导活性。结论:高hESCs克隆种植密度可以改变自身生长的微环境,可以维持自身未分化状态,这为阐明hESCs自身未分化状态机制和简化hESCs无饲养培养体系提供了新的思路。

关键词：人类胚胎干细胞饲养细胞自分泌

不同剂量碱性成纤维细胞因子对人类胚胎干细胞生长、凋亡和DNA完整性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第三军医大学学报 2010年第19期32卷 2137-2139页

作者：罗树伟林戈孙争谢平原刘天成卢光琇中南大学生殖与干细胞研究所国家干细胞工程技术研究中心长沙410078

目的探讨碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)浓度对人类胚胎干细胞(human embry-onicstem cells,hESCs)特性的影响。方法建立化学限定性hESCs培养体系,以有饲养细胞培养体系作为参照,比较4、40ng/ml和100ng/mlbFGF对hESCs多能性标记、细胞周期、细胞凋亡和DNA完整性的影响。结果①低浓度bFGF(4ng/ml)足以维持hESCs在化学限定性培养基(基础培养基DMEM/F12,N2,B27,简称NB体系)中培养;②bFGF可以抑制hESCs细胞凋亡,且具有剂量依赖性,而对hESCs细胞周期没有影响;③bFGF有助于hESCsDNA完整性维持,在NB体系加入4ng/mlbFGF时,hESCs在DNA水平上存在75个异常区域,而在加入40ng/mlbFGF时,只存在1个异常区域。结论高剂量bFGF有助于hESCs体外快速扩增和hESCsDNA完整性维持。提高bFGF浓度为hESCs体外培养所必需。

关键词：人类胚胎干细胞饲养细胞碱性成纤维细胞生长因子比较基因组杂交

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

600MW空冷汽轮机低压部分的装配研究

汽轮机技术 2005年第3期47卷 233-234页

作者：吴泽谦谢平原张俊芬哈尔滨汽轮机厂有限责任公司哈尔滨150046 吉林石化公司动力厂吉林132021

新一代600MW空冷机组在结构上做了很大改进,其装配在国内尚无先例。借鉴600MW湿冷汽轮机组的装配经验,对600MW空冷汽轮机组的装配进行探讨。

关键词：汽轮机空冷低压部分装配

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

语文课程的核心词“阅读理解”

课程．教材．教法 2024年第6期44卷 84-92页

作者：王荣生谢平上海师范大学教育学院上海200234

自21世纪初到现在的语文课程标准文本,都刻意遮蔽了语文课程的核心词“阅读理解”以及与它紧密相连的“阅读能力”“学习阅读”,这种遮蔽有较大弊端。“阅读理解”是阅读的核心。“阅读理解能力”有三重含义:一是统括解码能力、所必需... 详细信息

自21世纪初到现在的语文课程标准文本,都刻意遮蔽了语文课程的核心词“阅读理解”以及与它紧密相连的“阅读能力”“学习阅读”,这种遮蔽有较大弊端。“阅读理解”是阅读的核心。“阅读理解能力”有三重含义:一是统括解码能力、所必需的背景知识、阅读理解过程的心智活动这三个方面,二是专指解码能力,三是特指阅读理解过程的心智活动。“阅读理解过程的心智活动”的实质就是运用阅读方法和阅读策略。在解码能力和背景知识基本具备的前提下,阅读理解能力即阅读方法与阅读策略的运用能力。中小学生“学习阅读”的核心内容,一是在认字基础上的识词,达到流利阅读水平。二是阅读理解,学习并运用阅读理解的方法和策略,抓住关键词、关键语句,在上下文的联系中理解作者所表达的意思。

关键词：语文课程阅读理解阅读能力学习阅读课程内容

不同培养体系可逆改变人类胚胎干细胞的分化倾向

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2010年第40期14卷 7513-7518页

作者：罗树伟林戈孙争谢平原卢光琇中南大学生殖与干细胞研究所湖南省长沙市410007

背景:人类胚胎干细胞可以在饲养细胞依赖性培养体系和化学限定性培养体系下维持未分化状态,能够在体内外诱导分化成三胚层来源的细胞类型。目的:比较饲养细胞和化学限定性培养体系对人类胚胎干细胞特性的影响。方法:将在饲养细胞培养体... 详细信息

背景:人类胚胎干细胞可以在饲养细胞依赖性培养体系和化学限定性培养体系下维持未分化状态,能够在体内外诱导分化成三胚层来源的细胞类型。目的:比较饲养细胞和化学限定性培养体系对人类胚胎干细胞特性的影响。方法:将在饲养细胞培养体系下培养27代的人类胚胎干细胞转入到化学限定性培养基体系中培养56代,然后再将其转回到饲养细胞培养体系中,将3种培养条件下的人类胚胎干细胞(饲养细胞培养体系培养70代、化学限定性培养体系培养56代、化学限定性培养体系下培养70代后转回饲养细胞培养体系下培养13代和20代)进行多能性分子标记SSEA4流式分析等检测分析,同时对3种培养条件下人类胚胎干细胞经拟胚体诱导分化后分别检测多能性基因和三胚层分化基因的表达。结果与结论:人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定性培养体系下表现出不同的诱导分化倾向,在化学限定性培养体系下表现出向神经诱导分化抑制,这种不同的诱导分化倾向可发生可逆性转换,当人类胚胎干细胞由化学限定性培养体系转回到饲养细胞培养体系时,诱导分化倾向表现出与其在饲养细胞下诱导分化一致的模式。在拟胚体分化中,多能性基因Nanog高可能对诱导分化倾向起着重要作用。与此同时,人类胚胎干细胞SSEA4细胞亚群发生相应的变化,人类胚胎干细胞在饲养细胞和化学限定下培养体系下表现的分化倾向与人类胚胎干细胞亚群所占的比例存在关联。

关键词：人类胚胎干细胞培养体系饲养细胞诱导分化