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人乳头瘤病毒(HPV)58型中和单克隆抗体的制备及初步应用

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第1期28卷 93-98页

作者：刘艳春张婷谢喜秀包琦锋许雪梅中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、生物物理与结构生物学系北京100005

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型是宫颈癌的主要诱因之一.HPV58在亚洲地区宫颈癌组织中的检出率仅次于HPV16/***58中和单克隆抗体可用于HPV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的研究,并为病毒感染入侵机制的研究提供... 详细信息

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型是宫颈癌的主要诱因之一.HPV58在亚洲地区宫颈癌组织中的检出率仅次于HPV16/***58中和单克隆抗体可用于HPV病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的研究,并为病毒感染入侵机制的研究提供实验材料.本研究采用HPV58 L1 VLP免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞进行杂交瘤细胞的制备,通过VLP-ELISA和假病毒中和实验筛选杂交瘤细胞株;经rProtein A纯化阳性杂交瘤细胞培养上清获得单抗;采用ELISA测定型别特异性中和单抗的亲和力,采用相加实验及变性VLP-ELISA分析单抗识别表位的性质;选取高亲和力单抗建立定量分析HPV58 L1 VLP的ELISA方法.获得了2株HPV58特异性中和单抗XM-22和XM-23,亲和常数分别为2.7×107mol-1.L和1.9×106mol-1.L,二者识别表位可能不同.同时获得2株具有交叉中和活性的单抗XM-21和XM-24,除可较高水平中和HPV58外,还可分别交叉中和亲缘关系较远的HPV18和HPV6.以XM-22建立的ELISA方法定量分析HPV58 L1 VLP的检测范围为0.05μg/mL～0.40μg/mL.本研究建立的ELISA方法可用于HPV58 L1 VLP疫苗生产的质量控制研究,获得的4株具有不同特点的中和单抗可用于HPV58感染入侵机制的研究.

关键词：人乳头瘤病毒58型中和单克隆抗体 ELISA

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天然Aβ寡聚体抗体的制备研究

四川大学学报（自然科学版） 2016年第3期53卷 652-656页

作者：王腾季梅谢喜秀汪维云安徽农业大学生命科学学院合肥230036 中国科学院过程工程研究所生化国家重点实验室北京100190

在本研究中,制备了Aβ寡聚体和交联该寡聚体的亲和层析填料,然后应用亲和层析技术从IVIG中纯化获得了结合Aβ寡聚体的多克隆抗体(antibodies against Aβoligomer,Ab-Aβo),并应用ELISA和Western blot对其进行了鉴定,以MTT实验分析了该... 详细信息

在本研究中,制备了Aβ寡聚体和交联该寡聚体的亲和层析填料,然后应用亲和层析技术从IVIG中纯化获得了结合Aβ寡聚体的多克隆抗体(antibodies against Aβoligomer,Ab-Aβo),并应用ELISA和Western blot对其进行了鉴定,以MTT实验分析了该抗体对Aβ42诱导的细胞毒性作用的影响.结果表明,纯化获得的Ab-Aβo能特异性地结合体外合成或细胞形成的Aβ寡聚体,并且与Aβ寡聚体的结合活性比IVIG高1000倍,同时该寡聚体抗体能够显著抑制Aβ42诱导的细胞毒性.

关键词：阿尔茨海默症淀粉样蛋白寡聚体多克隆抗体

HPV 18 L1病毒样颗粒的表达纯化及其豚鼠抗血清制备

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基础医学与临床 2009年第10期29卷 1039-1043页

作者：彭清林张婷范东升郑伟谢喜秀许于飞许雪梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物物理与结构生物学系北京100005

目的优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV18L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV18L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体... 详细信息

目的优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV18L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV18L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体,构建重组病毒,感染sf9昆虫细胞72h后进行Western blot表达鉴定,密度梯度离心法纯化后进行纯度鉴定及形态学鉴定,获得HPV18L1VLP,联合弗氏佐剂免疫豚鼠制备抗血清。结果HPV18L1优化基因在昆虫细胞中可有效表达,纯化的HPV18L1蛋白纯度达90%以上,电镜观察可见直径约为50nm的VLP,豚鼠免疫血清中HPV18L1VLP特异性抗体滴度达5.12×105。结论HPV18L1优化基因可在昆虫细胞中高效表达并组装成VLP,制备的高滴度抗血清为HPV18L1VLP疫苗的进一步研究打下基础。

关键词：人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒杆状病毒表达系统抗血清

融合表达白细胞介素10与卵清蛋白重组腺病毒口服变应原疫苗的构建及鉴定

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中华临床免疫和变态反应杂志 2018年第3期12卷 263-269页

作者：马仕坤关剑王丹甄宏楠谢喜秀中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院变态(过敏)反应科过敏性疾病精准诊疗研究北京市重点实验室北京100730 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科北京100021 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院放疗科北京100730 中国科学院过程工程研究所北京100190

目的构建免疫调节因子白细胞介素(IL)-10与模式变应原卵清蛋白(OVA)融合表达的重组腺病毒载体口服疫苗。方法直接合成鸡IL-10及OVA的DNA序列后,采用重叠PCR法进行连接。连接序列插入穿梭质粒p HBAd-MCMV的多克隆区,获得重组穿梭质粒p Ad... 详细信息

目的构建免疫调节因子白细胞介素(IL)-10与模式变应原卵清蛋白(OVA)融合表达的重组腺病毒载体口服疫苗。方法直接合成鸡IL-10及OVA的DNA序列后,采用重叠PCR法进行连接。连接序列插入穿梭质粒p HBAd-MCMV的多克隆区,获得重组穿梭质粒p Ad IL-10-OVA。经测序鉴定后,p Ad IL-10-OVA与腺病毒骨架质粒p HBAd-BHG共转染293细胞,包装获得重组腺病毒Ad IL-10-OVA原代病毒,将原代病毒在293细胞中扩增到合适滴度。采用ELISA法检测细胞上清液中融合蛋白的表达水平。结果重组穿梭质粒插入目标序列经测序鉴定正确,重组腺病毒载体疫苗r Ad IL-10-OVA在293细胞中成功表达。结论成功构建了融合表达IL-10与OVA的重组腺病毒载体疫苗Ad IL-10-OVA,为后续动物实验验证其对变态反应性疾病的防治效应奠定了基础。

关键词：白细胞介素10 变应原重组腺病毒口服疫苗

基于固体介质的高次谐波和阿秒脉冲产生及应用

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中国科学:物理学力学天文学 2025年第1期 20-33页

作者：夏宇峰黄沛付玉喜中国科学院大学中国科学院西安光学精密机械研究所阿秒科学与技术研究中心

超短脉冲激光与物质的强场非微扰相互作用可以实现高次谐波产生(High-order Harmonic Generation,HHG),目前是阿秒脉冲产生的最有效途径,其研究范围已从气体扩展到固体材料. 2011年, Ghimire等人首次在Zn O固体中观察到非微扰区的透射... 详细信息

超短脉冲激光与物质的强场非微扰相互作用可以实现高次谐波产生(High-order Harmonic Generation,HHG),目前是阿秒脉冲产生的最有效途径,其研究范围已从气体扩展到固体材料. 2011年, Ghimire等人首次在Zn O固体中观察到非微扰区的透射高次谐波,为开发下一代集成化的极紫外阿秒光源提供了新的路径,也为探索凝聚态体系内部的超快动力学过程提供了新的研究手段.与气体介质相比,固体材料具有高密度、空间结构复杂等特点,其高次谐波的产生机制更为复杂.本文首先概述了固体高次谐波的独特性质,并展示了固体高次谐波与气体高次谐波的差异性.然后列举了固体高次谐波的应用场景,重点介绍了基于固体高次谐波产生阿秒脉冲的相关工作.最后分析了固体高次谐波现存的问题和未来的发展方向.

关键词：超快过程高次谐波超快光谱学阿秒科学

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盾构隧道开挖诱发邻近桩周土体变形试验研究

人民长江 2025年

作者：范伟亮张孟喜中铁二十局集团有限公司上海大学力学与工程科学学院

针对超大直径隧道开挖时邻近桩基变形观测困难的问题，提出了超大直径隧道侧穿桩基的透明土试验方案，采用熔融石英砂、搭配正十二烷和白油混合溶液作为孔隙溶液配置透明土，并结合光学观测系统及PIV处理系统，对盾构隧道开挖引起的邻... 详细信息

针对超大直径隧道开挖时邻近桩基变形观测困难的问题，提出了超大直径隧道侧穿桩基的透明土试验方案，采用熔融石英砂、搭配正十二烷和白油混合溶液作为孔隙溶液配置透明土，并结合光学观测系统及PIV处理系统，对盾构隧道开挖引起的邻近桩周土体位移变化规律进行分析，获得不同情况下桩周土体位移场。试验结果表明：随着桩隧间距的增大，隧道的开挖对桩基附近的土体扰动会越来越小，当桩隧距离到达1.5倍隧道直径时，桩基所受的影响到达临界值；随着桩长的增大，桩侧土体的竖向位移呈现抛物线形式，先增大后减小；而桩侧土体的水平位移会随着桩长的增大由桩基上部向隧道方向倾斜变为桩基上部和隧道范围内的土体向隧道方向倾斜；开挖面距离桩基越近，开挖对桩周土体位移影响越剧烈。

关键词：透明土超大直径盾构开挖土体位移场侧穿桩基

知识产权保护与企业数据资产水平——来自国家知识产权示范城市的经验证据

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会计之友 2025年第1期 11-20页

作者：苑泽明谢枚玲黄灿天津财经大学会计学院天津财经大学无形资产评价协同创新中心

文章基于2007—2022年沪深A股上市公司数据,采用逐年PSM-DID方法检验国家知识产权示范城市政策对企业数据资产水平的影响。研究发现,知识产权保护能显著提高企业数据资产水平。机制检验发现,知识产权保护政策能够发挥信息纾困效应和财... 详细信息

文章基于2007—2022年沪深A股上市公司数据,采用逐年PSM-DID方法检验国家知识产权示范城市政策对企业数据资产水平的影响。研究发现,知识产权保护能显著提高企业数据资产水平。机制检验发现,知识产权保护政策能够发挥信息纾困效应和财务预期效应,即提高企业信息披露质量、稳定企业财务预期,进而提升数据资产水平。拓展性研究表明,在地方政府引导力度强、行业自律水平高的企业中,国家知识产权示范城市政策对数据资产的积极影响更加明显;进一步的,知识产权保护在提升企业数据资产水平基础上,能有效激励企业增加研发投入、提升创新质量。研究结论为国家知识产权保护体系完善、企业数据资产发展水平提升提供借鉴意义。

关键词：知识产权保护数据资产水平研发创新国家知识产权示范城市准自然实验

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全基因组鉴定普通菜豆WOX基因及出愈率相关分析

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植物遗传资源学报 2025年

作者：叶宗茂谢迅侯思宇武晶山西农业大学农学院中国农业科学院作物科学研究所/作物基因资源与育种全国重点实验室

出愈率是影响遗传转化效率的关键因素，WOX基因能促进细胞增值和芽分化。本研究对普通菜豆WOX基因家族进行了全基因组鉴定，鉴定到18个普通菜豆WOX基因，编码177-847个氨基酸，其蛋白序列均包含保守的HD结构域，亚细胞定位于细胞核中，... 详细信息

出愈率是影响遗传转化效率的关键因素，WOX基因能促进细胞增值和芽分化。本研究对普通菜豆WOX基因家族进行了全基因组鉴定，鉴定到18个普通菜豆WOX基因，编码177-847个氨基酸，其蛋白序列均包含保守的HD结构域，亚细胞定位于细胞核中，启动子主要含有“分生组织形成相关”及“生长素反应相关”的顺式作用元件。并与绿豆、大豆和拟南芥WOX基因家族成员，进行了共线性和系统进化树分析，124个WOX基因可分为三大类群，四个物种间的WOX同源基因受纯化选择作用。通过筛选了不同浓度6-BA和2，4-D激素配比的培养基，成功建立了两个普通菜豆品种的愈伤组织诱导体系。通过转录组结合qRT-PCR分析，鉴定到8个WOX差异表达基因，其中PvWOX1/15/16基因与出愈率显著相关。qRT-PCR验证了这3个基因表达模式与转录组结果一致。以上结果表明PvWOX1/15/16基因可作为潜在的靶基因用于普通菜豆遗传转化的研究。

关键词：普通菜豆 WOX基因愈伤组织转录组

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文明叙事:习近平文化思想的方法论审视

新疆师范大学学报（哲学社会科学版） 2025年第1期46卷 34-42页

作者：张明谷生秀南京大学马克思主义学院江苏南京210023

文明是中国共产党百余年推进马克思主义中国化时代化的核心线索,文明叙事是中国共产党历史叙事的重要维度,也是习近平文化思想的重要方法论。习近平文化思想的深厚文明意蕴体现在四个方面:一是从历史纵深出发把握“走自己的路”的文明基... 详细信息

文明是中国共产党百余年推进马克思主义中国化时代化的核心线索,文明叙事是中国共产党历史叙事的重要维度,也是习近平文化思想的重要方法论。习近平文化思想的深厚文明意蕴体现在四个方面:一是从历史纵深出发把握“走自己的路”的文明基因,即从中华5000多年文明的历史传承中把握中国道路的来龙去脉及其内在逻辑必然;二是以“第二个结合”为根本方法,重塑发展中华文明的使命担当,不断推动建设中华民族现代文明实现传统文明的现代新生;三是坚守文明超越理念,将新文明的建构与中国式现代化的现实实践相互关联,以中国式现代化创造人类文明新形态,打破西方以资本逻辑为核心的形而上学抽象文明观的历史困境;四是坚持文明交流互鉴,推动落实全球文明倡议,构建人类文明交往新范式。

关键词：习近平文化思想文明叙事 “走自己的路” “第二个结合” 文明交流互鉴