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家兔缺血再灌注肾组织胰岛素受体的分析

中国病理生理杂志 2004年第5期20卷 866-869页

作者：何涛谢华福段承刚李蓉晖冯志强泸州医学院基础部生物化学教研室四川泸州646000 泸州医学院分子生物学实验室四川泸州646000 四川大学华西医学中心基础医学及法医学院生物化学教研室四川成都610041 泸州医学院肾保护研究室四川泸州646000

目的 :观察家兔急性缺血再灌注 (IR)后不同时相 ,肾组织胰岛素受体及血清胰岛素水平的变化。方法 :采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。实验动物分为对照组、缺血再灌注 (IR)组 ,测定两组动物的肾组织胰岛素受体、血糖... 详细信息

目的 :观察家兔急性缺血再灌注 (IR)后不同时相 ,肾组织胰岛素受体及血清胰岛素水平的变化。方法 :采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。实验动物分为对照组、缺血再灌注 (IR)组 ,测定两组动物的肾组织胰岛素受体、血糖和血清胰岛素水平。结果 :IR 2h时 ,对照组、IR组血清胰岛素水平均较术前显著升高 (P <0 0 5 ) ,但IR组胰岛素升高更为显著 (P <0 0 5vscontrol) ,4 8h时对照组胰岛素水平接近正常水平 ,IR组也明显低于 2h时 (P <0 0 5 ) ,但仍高于对照组 (P <0 0 5 )。IR 2h时 ,两组动物血糖均较术前增高 ,但以IR组增高更为显著 (P <0 0 5vscontrol)。放射性配基结合分析法中 ,Scatchard作图得到一下凹曲线。IR 2h ,IR组胰岛素高、低亲和力受体最大受体结合容量Bmax1和Bmax2 ,高、低亲和力常数Kd1和Kd2 均显著低于对照组 (P <0 0 5 )。 4 8h时 ,二组动物Kd1、Bmax1和Bmax2 无明显差异 ,但IR组Kd2 高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :实验结果显示 ,在肾IR过程中 ,内源性胰岛素的作用减弱 ,胰岛素受体数目的减少或与配体亲和力减弱。

关键词：受体胰岛素再灌注兔肾

ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第5期23卷 413-415页

作者：张姿刘佳佳姚富丽何浩羊建谢华福何涛泸州医学院分子生物学实验室四川泸州646000

目的研究前列腺素E受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248诱导的中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化,探讨PMN死亡形式的多样性和复杂性。方法运用透射电镜、荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察PMN在自发性凋亡与ONO-AE-24... 详细信息

目的研究前列腺素E受体亚型3(EP3)激动剂ONO-AE-248诱导的中性粒细胞(PMN)非凋亡性程序化细胞死亡的形态学变化,探讨PMN死亡形式的多样性和复杂性。方法运用透射电镜、荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察PMN在自发性凋亡与ONO-AE-248刺激下亚细胞微结构的变化。结果以5mmol/L的ONO-AE-248刺激PMN12h后,电镜观察绝大多数PMN的多叶核融合为单叶核,核质疏松,核膜分层、起泡甚至破裂,核质溢出,但细胞膜较完整,细胞器无明显改变。以荧光染料DAPI标染活细胞核,ONO-AE-248刺激后,PMN表现为多叶核融合成大而模糊的球形,核染色密度较低;ONO-AE-248刺激的PMN死亡仍有细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻。ONO-AE-248刺激组与自发性凋亡组PMN在线粒体的形态结构、分布和细胞质内的染色性均有明显差异。结论ONO-AE-248在体外能刺激人PMN发生非凋亡性程序化细胞死亡,这一刺激过程不影响自发性凋亡的PMN细胞膜PS的外翻,并且细胞核和线粒体的改变是其早期最为显著的形态学改变,提示二者可能是ONO-AE-248刺激的靶标和早期的药物反应中心。

关键词： ONO-AE-248 中性粒细胞线粒体凋亡非凋亡性程序化细胞死亡

胰岛素-葡萄糖-门冬氨酸钾镁液抗急性缺血再灌注肾损伤的作用研究

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中国病理生理杂志 2003年第7期19卷 973-974页

作者：何涛谢华福邬丽莎杨烨刘友平阳建莹泸州医学院生物化学教研室四川泸州646000 泸州医学院分子生物学实验室四川泸州646000 泸州医学院生理学教研室四川泸州646000

目的与方法 :采用钳夹肾动脉的方法造成急性肾缺血再灌注 (IR)肾损伤模型 ,观察胰岛素 -葡萄糖-门冬氨酸钾镁溶液对家兔急性IR肾损伤的影响。结果 :肾IR 4 8h后 ,IR组血清尿素氮显著高于假手术对照组 (P0 0 5 ) ;IR组血清及肾组织中MD... 详细信息

目的与方法 :采用钳夹肾动脉的方法造成急性肾缺血再灌注 (IR)肾损伤模型 ,观察胰岛素 -葡萄糖-门冬氨酸钾镁溶液对家兔急性IR肾损伤的影响。结果 :肾IR 4 8h后 ,IR组血清尿素氮显著高于假手术对照组 (P0 0 5 ) ;IR组血清及肾组织中MDA含量显著高于假手术对照组 (P <0 0 5 ) ,胰岛素处理组MDA含量明显低于IR组 (P <0 0 5 ) ;IR 2h后 ,肾组织中NO含量即明显低于假手术对照组 (P <0 0 1) ,胰岛素处理组 ,NO水平与假手术对照组无明显差异。IR 2h后 ,3组动物血糖均较术前增高 ,但以IR组增高更为显著 ,与假手术对照组比较P <0 0 5 ,Ins -IR组与假手术对照组无显著差异。电镜结果显示 ,假手术对照组超微结构正常 ,IR组肾组织呈变性和坏死改变 ,Ins-IR组肾组织轻度变性。结论 :胰岛素 -葡萄糖 -门冬氨酸钾镁具有抗家兔急性IR肾损伤的作用 ,其作用机理可能和其改善能量代谢 ,降低血糖 ,抗自由基损伤 ,促进NO生成。

关键词：肾损伤再灌注损伤胰岛素

槲皮素对LPS延迟中性粒细胞自发性凋亡效应的抑制作用

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中国免疫学杂志 2005年第1期21卷 13-16页

作者：宋传旺刘佳佳段承刚谢华福甘淋刘晓燕何涛何延政泸州医学院中心实验室泸州646000

目的 :研究槲皮素对接受细菌脂多糖 (LPS)刺激的中性粒细胞 (PMN)自发性凋亡的影响 ,探讨槲皮素的抗炎作用机制。方法 :以人外周血PMN为研究对象 ,选择光镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况 ,对裂解的片段化DNA进行定量 (二苯胺测定法 )和... 详细信息

目的 :研究槲皮素对接受细菌脂多糖 (LPS)刺激的中性粒细胞 (PMN)自发性凋亡的影响 ,探讨槲皮素的抗炎作用机制。方法 :以人外周血PMN为研究对象 ,选择光镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况 ,对裂解的片段化DNA进行定量 (二苯胺测定法 )和定性 (琼脂糖凝胶电泳 )分析。结果 :槲皮素 (1～ 10 0 μmol/L)对PMN的自发性凋亡率并无影响 ,但却能部分恢复由LPS所延迟的PMN自发性凋亡进程。当槲皮素的浓度为 4 0 μmol/L时 ,其恢复作用达到最大。结论 :槲皮素对LPS延迟PMN自发性凋亡的效应产生了抑制作用 ,减轻了因预激因子活化PMN而加重的炎症反应 ,部分揭示了槲皮素的抗炎作用机制。

关键词：中性粒细胞凋亡槲皮素细菌脂多糖炎症

八肽胆囊收缩素刺激神经元所致信号转导中磷蛋白的动力学变化研究

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中国现代医学杂志 2006年第19期16卷 2917-2921页

作者：王丽何涛李娟谢华福宋杰甘淋泸州医学院基础医学院分子生物学实验室四川泸州646000

目的研究八肽胆囊收缩素(Octa-cholecystokinin,CCK8)刺激小鼠神经元所致信号转导中磷酸化蛋白的时间动力学特征。方法培养乳小鼠神经元,随机分为CCK8刺激组和对照组,32P-NaH2PO4标记后分别给予CCK8(10-7mol/L)和等量无磷培养基,作用不... 详细信息

目的研究八肽胆囊收缩素(Octa-cholecystokinin,CCK8)刺激小鼠神经元所致信号转导中磷酸化蛋白的时间动力学特征。方法培养乳小鼠神经元,随机分为CCK8刺激组和对照组,32P-NaH2PO4标记后分别给予CCK8(10-7mol/L)和等量无磷培养基,作用不同时间后液氮终止反应,经双向电泳、放射自显影,获得磷酸化蛋白质的电泳图谱。利用PDQuest2D分析软件并结合Swiss-Prot蛋白质数据库对磷酸化蛋白质斑点进行分析并绘制出一些重要的磷酸化蛋白质磷酸化改变的时间动力学曲线。结果CCK8作用不同时间后,神经元蛋白质磷酸化水平出现明显改变,通过对双向电泳图谱中100多个蛋白质斑点的定性分析,初步确定了小鼠神经元CCK8信号转导相关磷酸化蛋白包括多种蛋白激酶、磷蛋白磷酸酶、胞内信号分子、多种受体、转录因子及核蛋白等。对其中11种重要的信号分子动力学分析结果显示:曲线多数呈峰型,且蛋白质分子磷酸化达到峰值时间和高磷酸化状态持续时间各不相同,而PKAα表现为较持续的激活状态,MK07、GBOα则呈现双峰型。结论CCK8在神经元的信号转导具有整合与复杂自适应控制的特征。

关键词：八肽胆囊收缩素神经元磷酸化修饰信号转导时间动力学曲线

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过锰酸钾——苏木精染心肌闰盘整块染色法

四川解剖学杂志 1984年第3期 81-82页

作者：谢华福吴绍华泸州医学院胚教研室

参照“实用组织学技术中,碘酸钠——苏木精块染心肌闰盘法”,我们用过锰酸钾代替碘酸钠。经过应用,取得了闰盘及横纹清楚,色泽鲜艳的满意效果。现将此法介绍如下。一、取材:取人、猴、狗、兔的心肌,尤以心尖部经纵行肌较佳。切成1～2

关键词：心肌苏木精复染闰盘组织块过锰酸钾高锰酸钾

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不同剂量胰岛素对缺血再灌注肾组织的影响

泸州医学院学报 2003年第5期26卷 397-399页

作者：谢华福何涛甘淋段承刚泸州医学院基础医学院分子生物学实验室四川泸州646000

目的 :观察家兔肾缺血再灌注 (ischemicreperfusion ,IR)过程中 ,外源性胰岛素对肾组织功能和超微结构的影响。方法 :日本大耳白兔分为 :对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins +IR组 ) 3组 ,Ins +IR组再灌注的同时给予... 详细信息

目的 :观察家兔肾缺血再灌注 (ischemicreperfusion ,IR)过程中 ,外源性胰岛素对肾组织功能和超微结构的影响。方法 :日本大耳白兔分为 :对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins +IR组 ) 3组 ,Ins +IR组再灌注的同时给予胰岛素溶液 (Ins 3IU ,6IU ,12IU/kg.wt) ,对照组和IR组则给予等量生理盐水。分别观察 3组动物缺血再灌注 2h、4 8h时 ,血清尿素氮 (BUN)含量变化 ,以及肾组织结构改变。结果 :肾缺血再灌注 4 8h ,IR组血清BUN较对照组显著升高 (P 0 .0 5 ) ;中剂量胰岛素组血清BUN仍显著高于对照组 (P <0 .0 0 1) ,大剂量胰岛素组BUN比IR更高 (P <0 .0 5 )。光镜及电镜结果显示 ,对照组结构未见异常 ,IR组肾组织呈变性和坏死改变 ,小剂量胰岛素组肾组织轻度变性 ,中、大剂量胰岛素组与对照组结构改变类似。结论 :外源性小剂量胰岛素具有抗家兔急性缺血再灌注性肾损伤的作用。

关键词：肾组织缺血再灌注胰岛素家兔

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主动脉弓横部缺如

四川解剖学杂志 1983年第2期 55-57页

作者：吴绍华熊以群谢华福沪州医学院

主动脉弓横部缺如是一种相当罕见较为严重的大血管畸变,常常伴有心脏和其它大血管畸形,患儿往往因淤血性心力衰竭死亡。1958年,Kleinerman 对6例主动脉弓横部缺如的病理解剖资料作了详细报导;1964年,我国吴晋宝也报导了1例这种畸变。在... 详细信息

主动脉弓横部缺如是一种相当罕见较为严重的大血管畸变,常常伴有心脏和其它大血管畸形,患儿往往因淤血性心力衰竭死亡。1958年,Kleinerman 对6例主动脉弓横部缺如的病理解剖资料作了详细报导;1964年,我国吴晋宝也报导了1例这种畸变。在朱畅宁等人对70例小儿先天性心脏病的统计资料中,主动脉弓缺如共3例,

关键词：缺如横部室间隔膜部主动脉大动脉锁骨下动脉动脉导管

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线粒体显示法

泸州医学院学报 1992年第3期15卷 221-222页

作者：谢华福吴绍华郭勇泸州医学院组胚教研室

作者对Regaud氏线粒体染色法进行改良,满意地显示了培养心肌细胞、平滑肌细胞的线粒体。该法简便,不需要特殊染料,可用于细胞线粒体的形态学研究和批量教学切片的生产。

关键词：细胞培养线粒体苏木素