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白细胞介素17修饰小鼠骨髓间充质干细胞对异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响及机制

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中华烧伤杂志 2020年第3期36卷 234-243页

作者：马腾霄许颖溦姜笃银河南省人民医院整形外科郑州450000 山东大学第二医院急诊科济南250000

目的探讨白细胞介素17(IL-17)修饰的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对异体小鼠皮肤移植的影响及机制。方法(1)取5只BALB/c小鼠(均为雌性,4~8周龄,性别、鼠龄下同),处死后取股骨、胫骨和肱骨,采用全骨髓密度梯度离心联合贴壁分离法分离纯化... 详细信息

目的探讨白细胞介素17(IL-17)修饰的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对异体小鼠皮肤移植的影响及机制。方法(1)取5只BALB/c小鼠(均为雌性,4~8周龄,性别、鼠龄下同),处死后取股骨、胫骨和肱骨,采用全骨髓密度梯度离心联合贴壁分离法分离纯化培养BMSC,取第3代细胞行形态学观察,该代细胞经成骨、成脂诱导分化鉴定。第4代细胞经干细胞表面标志物鉴定。取第3~6代BMSC,经终质量浓度50 ng/mL小鼠重组IL-17预处理5 d后,行形态学观察。取IL-17预处理的BMSC和未经IL-17预处理BMSC标记碳花青荧光染料(CM-Dil),行形态学观察并计算标记率。(2)取45只C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组13只、单纯BMSC组16只、BMSC+IL-17组16只。在小鼠皮肤移植术前1 d,单纯BMSC组13只小鼠经尾静脉注射5×10^6个/mL未经CM-Dil标记的BMSC 0.1 mL,另3只小鼠经尾静脉注射5×10^6个/mL CM-Dil标记的BMSC 0.1 mL;BMSC+IL-17组13只小鼠经尾静脉注射5×10^6个/mL未经CM-Dil标记的IL-17预处理的BMSC 0.1 mL,另3只小鼠经尾静脉注射5×10^6个/mL CM-Dil标记的IL-17预处理的BMSC 0.1 mL;PBS对照组13只小鼠经尾静脉注射0.1 mL PBS。取45只BALB/c小鼠作供体,将前述3组处理后的45只C57BL/6J小鼠作为受体,建立背-背全厚皮移植模型。于移植术后第2天,再次对3组小鼠注射与移植术前1 d一样的等量相应细胞或PBS。于移植术后第7天,分别取单纯BMSC组和BMSC+IL-17组中注射CM-Dil标记的BMSC和CM-Dil标记的IL-17预处理BMSC的3只小鼠,脱颈处死后采用荧光显微镜观察BMSC的CM-Dil示踪并计数。于移植术后第6天拆除敷料后,从单纯BMSC组注射未经CM-Dil标记的BMSC的13只小鼠和BMSC+IL-17组注射未经CM-Dil标记的IL-17预处理BMSC的13只小鼠及PBS对照组13只小鼠中选取7只小鼠,记录移植皮片的存活时间。于移植术后第8天,从3组剩余的6只小鼠中分别取3只小鼠进行移植皮片的大体观察,酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中γ干扰素、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的水平,流式细胞仪检测脾脏CD4^+CD25^+叉头翼状螺旋转录因子p3(Foxp3)^+调节性T细胞(Treg)比例,行苏木精-伊红染色观察移植皮片的组织形态。于移植术后第14天,取3组剩余3只小鼠同前行组织形态观察。对数据行独立样本t检验、单因素方差分析、LSD检验。结果(1)培养5 d,经IL-17预处理的BMSC与未处理的BMSC形态和大小并无明显差别。(2)CM-Dil标记后,经IL-17预处理的BMSC与未处理的BMSC生长状态均较良好,标记率几乎可达100%。(3)移植术后第7天,单纯BMSC组小鼠皮片及邻近皮下组织CM-Dil标记阳性的BMSC数量为每100倍视野下(6.2±2.6)个,明显少于BMSC+IL-17组CM-Dil标记阳性的IL-17预处理BMSC的每100倍视野下(15.0±5.3)个(t=-2.962,P<0.05)。(4)单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠移植皮片的存活时间分别为(13.3±1.2)、(17.0±1.5)d,明显长于PBS对照组的(8.7±0.8)d(P<0.01),而BMSC+IL-17组小鼠移植皮片的存活时间明显长于单纯BMSC组(P<0.01)。(5)移植术后第8天,PBS对照组小鼠移植皮片大部分发黑变硬且结痂坏死,单纯BMSC组小鼠移植皮片大部分存活良好,BMSC+IL-17组小鼠移植皮片均存活良好。(6)移植术后第8天,与PBS对照组相比,单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠的血清中IL-10和TGF-β含量明显升高(P<0.01),γ干扰素含量明显降低(P<0.01);与单纯BMSC组相比,BMSC+IL-17组小鼠的血清中IL-10和TGF-β含量明显升高(P<0.01),γ干扰素含量明显降低(P<0.01)。(7)移植术后第8天,单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠脾脏CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg比例明显高于PBS对照组(P<0.01),BMSC+IL-17组小鼠脾脏CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg比例明显高于单纯BMSC组(P<0.01)。(8)移植术后第8天,PBS对照组小鼠移植皮片可见大量炎性细胞浸润,表皮、真皮坏死;单纯BMSC组小鼠移植皮片可见局灶性的炎性细胞浸润,仅有轻微的表皮变性;BMSC+IL-17组小鼠移植皮片

关键词：白细胞介素17 间质干细胞免疫耐受皮肤移植

脂肪干细胞复合Ⅰ型胶原对裸鼠移植组织生长的影响

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郑州大学学报（医学版） 2014年第2期49卷 255-257页

作者：许颖溦刘林嶓徐永飞郑州大学第一附属院整形外科郑州450052

目的:探讨脂肪干细胞(ADSCs)复合Ⅰ型胶原在裸鼠背部组织工程化软组织存活与生长的变化。方法:根据所选移植物不同,将实验分为ADSCs复合Ⅰ型胶原(A)、单纯脂肪颗粒(B)和单纯ADSCs(C)组。分别将3组移植物定量注射到每只裸鼠背部皮下,1只... 详细信息

目的:探讨脂肪干细胞(ADSCs)复合Ⅰ型胶原在裸鼠背部组织工程化软组织存活与生长的变化。方法:根据所选移植物不同,将实验分为ADSCs复合Ⅰ型胶原(A)、单纯脂肪颗粒(B)和单纯ADSCs(C)组。分别将3组移植物定量注射到每只裸鼠背部皮下,1只裸鼠每种组织复合物各注射一点,并做相应的分组标记,12只裸鼠均做同样处理。观察各移植组织的生长情况,3个月后获取移植组织标本,测量体积、湿重和微血管密度(MVD)。结果:①A组移植组织被吸收较少,体积最大;B组移植组织被吸收较多,体积较小;C组移植组织被吸收最多,体积最小;差异有统计学意义(F=47.619,P<0.001)。②A组移植组织湿重高于B、C组,差异有统计学意义(F=68.425,P<0.001)。③A组移植组织中MVD高于B、C组,差异有统计学意义(F=46.730,P<0.001)。结论:Ⅰ型胶原作为生物支架可促进移植的ADSCs成活与生长,并可加速移植组织血管化。

关键词： Ⅰ型胶原脂肪干细胞支架整形外科组织工程裸鼠

全耳廓再造二期立耳术中自体组织注射移植治疗半侧颜面短小畸形的疗效研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2021年第6期56卷 643-647页

作者：张栋益张璐璐王志朋许颖溦刘清亮赵尚华康深松河南省人民医院河南大学人民医院郑州大学人民医院整形外科郑州450003

目的观察全耳廓再造二期立耳术中利用废弃的自体真皮、脂肪组织注射移植治疗半侧颜面短小畸形的效果。方法研究对象为2013年3月至2018年3月河南省人民医院57例单侧小耳畸形合并同侧轻、中度颜面短小畸形患者,根据手术方法不同分为同期... 详细信息

目的观察全耳廓再造二期立耳术中利用废弃的自体真皮、脂肪组织注射移植治疗半侧颜面短小畸形的效果。方法研究对象为2013年3月至2018年3月河南省人民医院57例单侧小耳畸形合并同侧轻、中度颜面短小畸形患者,根据手术方法不同分为同期治疗组(32例,女13例,男19例,年龄6~33岁,平均12.5岁)与传统治疗组(25例,女10例,男15例,年龄6~21岁,平均11.3岁)。同期治疗组在行改良Nagata法耳廓再造术二期立耳术(颅耳角成形术)的同期以自体真皮、脂肪组织注射填充治疗患侧颜面短小畸形;传统治疗组仅行改良Nagata法耳廓再造术二期立耳术。术后统计分析两组患者平均手术时间、平均住院天数、手术常见并发症发生率及术后效果满意率。应用SPSS 21.0软件进行统计学分析。结果同期治疗组平均手术时间[(282.0±3.4)min]较传统治疗组平均手术时间[(243.0±3.1)min]长,差异有统计学意义(t=9.884,P0.05);同期治疗组手术常见并发症发生率(12.5%,4/32)与传统治疗组(12.0%,3/25)接近,差异无统计学意义(χ^(²)=0,P>0.05);同期治疗组术后效果满意率(90.6%,29/32)高于传统治疗组(56.0%,14/25),差异有统计学意义(χ^(²)=9.081,P<0.05)。结论耳廓再造术同期利用废弃自体组织移植注射治疗半侧颜面短小畸形在提高患者满意度的同时并没有显著增加平均住院天数及常见并发症发生率;平均手术时间虽略有延长,但减少了患者总体手术次数,节约了医疗资源。

关键词：耳畸形,先天性小耳畸形半侧颜面短小外科,整形

脂肪来源干细胞复合不同生物支架在裸鼠皮下的促血管化作用

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郑州大学学报（医学版） 2013年第6期48卷 773-776页

作者：徐永飞张建文暴志国李静怡王耀聪许颖溦郑州大学第一附属医院整形外科郑州450052

目的:探讨脂肪来源干细胞复合不同生物支架在裸鼠皮下的促血管化作用。方法:根据所选支架的不同,将实验分为4组,A组为脂肪颗粒,B组为透明质酸钠,C组为Ⅰ型胶原支架,分别按体积比1∶1与25×106mL-1的脂肪来源干细胞混合,D组为单纯脂肪来... 详细信息

目的:探讨脂肪来源干细胞复合不同生物支架在裸鼠皮下的促血管化作用。方法:根据所选支架的不同,将实验分为4组,A组为脂肪颗粒,B组为透明质酸钠,C组为Ⅰ型胶原支架,分别按体积比1∶1与25×106mL-1的脂肪来源干细胞混合,D组为单纯脂肪来源干细胞,将4组试剂注射到12只裸鼠皮下构建软组织,每只裸鼠各注射4个点,3个月后获取相应标本,测定湿质量、存活率、微血管密度。结果:4组间湿质量、存活率、微血管密度比较,差异均有统计学意义(F=47.523、48.425和47.619,P均<0.05),且A、B、C组湿质量、存活率、微血管密度均高于D组(P均<0.05)。结论:脂肪来源干细胞复合生物支架可加速软组织血管化,且效果优于单纯脂肪来源干细胞。

关键词：脂肪来源干细胞生物支架血管化裸鼠

真皮内充分肿胀麻醉对FUE毛发移植术供区创面恢复的影响

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中国美容整形外科杂志 2024年第1期35卷 5-8,61页

作者：王璐许颖溦赵尚华张栋益河南大学人民医院整形美容外科河南郑州450003 河南省人民医院整形美容外科河南郑州450003 郑州大学人民医院整形美容外科河南郑州450052

目的探究毛囊单位提取技术(follicular unit extraction,FUE)毛发移植术中真皮内充分肿胀麻醉后“即肿即取”对供区创面恢复的影响。方法回顾性分析自2021年1月至2022年10月,就诊于河南省人民医院整形美容外科行FUE毛发移植术的96例雄... 详细信息

目的探究毛囊单位提取技术(follicular unit extraction,FUE)毛发移植术中真皮内充分肿胀麻醉后“即肿即取”对供区创面恢复的影响。方法回顾性分析自2021年1月至2022年10月,就诊于河南省人民医院整形美容外科行FUE毛发移植术的96例雄激素性脱发或发际线调整患者,均于枕部优势供区钻取毛囊用于受区移植。根据其供区肿胀麻醉方式分为两组,其中供区真皮内行小范围“即肿即取”充分注射肿胀液的48例患者为观察组,行供区常规肿胀麻醉的48例患者为对照组,定期随访30~60 d,对比观察两组供区创面渗液类型、渗液量、周围皮肤颜色、创面组织类型以及创面完全愈合时间等创面愈合情况。结果术后3 d,观察组的渗液量、创面周围皮肤颜色和创面组织类型评分均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);术后4、5 d,两组创面渗液量、渗液类型和创面组织类型评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组创面周围皮肤颜色评分在术后4 d评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而在术后5 d,所有患者供区创面均呈现正常或粉色。观察组愈合时间[(4.08±0.28)d]较对照组[(4.44±0.77)d]明显缩短(t=-2.998,P<0.05)。术后14 d,观察组[(8.69±1.28)%]供区点状淡红色瘢痕面积占比明显小于对照组[(9.69±2.19)%],差异有统计学意义(t=-2.73,P<0.05)。结论FUE毛发移植术中采用真皮内充分肿胀麻醉后“即肿即取”患者的供区创面愈合情况及速度均明显优于常规肿胀技术患者。

关键词：毛发移植术毛囊单位提取技术即肿即取肿胀麻醉创面愈合

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3D打印耳模在儿童个体化耳廓再造中的应用

医药论坛杂志 2024年第7期45卷 735-738,742页

作者：赵尚华康深松张栋益许颖溦河南省人民医院整形外科郑州450000

目的探讨在3D打印技术辅助下应用自体肋软骨在儿童个体化耳廓再造中的优势。方法河南省人民医院整形外科2019年8月-2021年9月收治的70例小耳畸形患者,随机分为研究组和对照组,每组35人,分别用3D打印技术制作的3D打印耳模和传统的胶片耳... 详细信息

目的探讨在3D打印技术辅助下应用自体肋软骨在儿童个体化耳廓再造中的优势。方法河南省人民医院整形外科2019年8月-2021年9月收治的70例小耳畸形患者,随机分为研究组和对照组,每组35人,分别用3D打印技术制作的3D打印耳模和传统的胶片耳模作为模版术中雕刻。结果术后6个月复诊照相,由术者,第三方整形医生及家属对研究组再造耳廓外形的总体评价的优良率为94.3%,对照组的优良率为77.1%,P=0.003<0.050,差异有统计学意义。结论在3D打印技术辅助下的运用自体肋软骨对儿童小耳畸形患者进行全耳再造,形态更加逼真,立体感更强,患者家属及医生的满意度认可度更高,值得在临床上推广和应用。

关键词：先天性小耳畸形耳廓支架 3D打印耳模

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长江经济带财政科技支出对数字经济的影响

合作经济与科技 2025年第2期 17-19页

作者：莫溦重庆工商大学重庆

长江经济带是我国重要战略经济带,探究其财政科技支出对数字经济的影响对长江经济带数字经济发展具有重要意义。本文以长江经济带110个城市为研究样本,实证检验财政科技支出对数字经济的影响。研究结果表明:财政科技支出能够促进数字经... 详细信息

长江经济带是我国重要战略经济带,探究其财政科技支出对数字经济的影响对长江经济带数字经济发展具有重要意义。本文以长江经济带110个城市为研究样本,实证检验财政科技支出对数字经济的影响。研究结果表明:财政科技支出能够促进数字经济发展。研究结论对于优化财政支出结构、完善科技政策和促进数字经济发展具有一定借鉴意义。

关键词：长江经济带财政科技支出数字经济

骨关节炎中枢纽基因及在免疫浸润中作用的生物信息学分析与鉴定

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中国组织工程研究 2025年第18期29卷 3747-3757页

作者：蔡溦朱御坤许建中郑州大学第一附属医院骨科河南省郑州市450052 四川大学华西医院重症医学科四川省成都市610041

背景:低度慢性炎症被认为在骨关节炎的发病机制中起着核心作用,但是具体的分子机制目前仍不清楚。目的:筛选和探讨骨关节炎中的潜在枢纽基因及免疫细胞的浸润情况。方法:将来自GPL570平台的GSE206848数据集与来自GPL96平台的GSE55235和G... 详细信息

背景:低度慢性炎症被认为在骨关节炎的发病机制中起着核心作用,但是具体的分子机制目前仍不清楚。目的:筛选和探讨骨关节炎中的潜在枢纽基因及免疫细胞的浸润情况。方法:将来自GPL570平台的GSE206848数据集与来自GPL96平台的GSE55235和GSE55457数据集合形成原始数据集。使用加权基因共表达网络分析去除离群样本,随后鉴定差异表达基因,并对差异表达基因进行功能富集分析。此外,构建差异表达基因的蛋白质-蛋白质相互作用网络,并使用Cytoscape软件中的两种不同算法筛选枢纽基因。利用CIBERSORT算法评估骨关节炎样本与正常对照之间免疫细胞浸润比例的差异。通过对收集到的骨关节炎患者滑膜组织样本进行定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)实验,并结合来自GPL96测序平台的GSE12021数据集作为独立数据集,验证枢纽基因对骨关节炎的诊断能效。结果与结论:①在去除5个离群样本后,共鉴定出340个差异表达基因,其中包括159个上调基因和181个下调基因。通过加权基因共表达网络分析和Cytoscape共获得了6个枢纽基因。②CIBERSORT分析显示,骨关节炎组织中多种类型免疫细胞浸润比例与正常组织相比存在差异,6个枢纽基因的表达水平与骨关节炎中多种免疫细胞的相对比例密切相关。③RT-qPCR结果表明,6个基因的相对表达水平相对于正常组织呈下调趋势,但是NFKBIA和PTGS2的表达差异不显著(P>0.05);原始和外部数据集中的ROC曲线表明,6个枢纽基因对骨关节炎具有较强的诊断能力(AUC>0.8)。④结论:最终确定了4个枢纽基因,分别为CDKN1A、MYC、CXC趋化因子配体2和血管内皮生长因子A,可能通过介导免疫应答和炎症反应成为未来治疗骨关节炎的分子靶点。

关键词：骨关节炎滑膜组织枢纽基因免疫浸润生物信息学加权基因共表达网络分析

无轴承永磁同步电机系统及其关键技术发展综述

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中国电机工程学报 2019年第10期39卷 2994-3006页

作者：许颖朱熀秋江苏大学电气信息工程学院江苏省镇江市212013

无轴承永磁同步电机集成永磁电机和磁轴承的特性,具有无摩擦、无需润滑和密封、高速高精、寿命长等优点,在高速精密电主轴、飞轮储能、血液泵、化工泵等特殊电气传动领域具有潜在应用价值。该文首先阐述无轴承永磁同步电机转矩和径向悬... 详细信息

无轴承永磁同步电机集成永磁电机和磁轴承的特性,具有无摩擦、无需润滑和密封、高速高精、寿命长等优点,在高速精密电主轴、飞轮储能、血液泵、化工泵等特殊电气传动领域具有潜在应用价值。该文首先阐述无轴承永磁同步电机转矩和径向悬浮力产生机理,再对其结构优化设计和数学建模进行详细总结和分析,并从磁场定向控制、悬浮力绕组独立控制、直接控制、非线性解耦控制等方面综述其控制策略,最后从电机优化设计、控制策略、无传感器技术、容错控制及应用领域等方面展望发展趋势。

关键词：无轴承永磁同步电机径向悬浮力数学建模控制策略发展趋势