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LASS1基因克隆及其在大鼠脑皮层的表达与神经元衰老的相关性初步研究(英文)

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生物化学与生物物理进展 2006年第8期33卷 760-768页

作者：王宝恒傅玉才史桂芝许铭炎耿义群徐小虎许锦阶汕头大学医学院细胞衰老实验室汕头515041 汕头大学医学院法医学教研室汕头515041

长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 3... 详细信息

长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 350 个氨基酸组成,内含 Lag1 蛋白家族保守的 Lag1p motif 和 TLC 结构域. 从新生、1 月龄、6 月龄、12 月龄和 24月龄大鼠脑顶叶皮质提取总 RNA,用半定量 RT-PCR 及 RNA 印迹方法对 LASS1 在大鼠脑皮质中的表达随年龄变化情况进行分析. 结果表明,出生后 LASS1 表达量随年龄增加而增高,至 6 月龄达高峰,然后随年龄增加而逐渐下降,至 24 月老龄鼠达最低. 衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)对鼠脑皮层染色发现,神经元阳性染色随年龄增长明显增加. 大鼠 LASS1 基因表达在正常衰老过程中发生变化,为进一步研究该基因的作用奠定了基础.

关键词： LASS1基因克隆大鼠基因表达神经元衰老

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应用型本科口腔种植学教学模式的探讨

高教学刊 2021年第32期7卷 133-137页

作者：苏艳君聂晶许铭炎厦门医学院附属口腔医院口腔种植教研室福建厦门361008

在口腔种植深入人心的今天,作为口腔医学本科专业的学生应掌握口腔种植学临床诊疗操作技术。基于这门学科的特殊性,在本科教学过程中存在诸多的问题,而且教学多偏重于理论知识,往往忽视了实践技能在临床应用的重要性。文章探讨了应用型... 详细信息

在口腔种植深入人心的今天,作为口腔医学本科专业的学生应掌握口腔种植学临床诊疗操作技术。基于这门学科的特殊性,在本科教学过程中存在诸多的问题,而且教学多偏重于理论知识,往往忽视了实践技能在临床应用的重要性。文章探讨了应用型本科医学院校五年制的口腔医学本科人才培养中存在的一些难题,并寻找解决方案,从而建设口腔种植学教学体系,以期提高口腔医学生的岗位胜任力,培养具有职业素养、熟练掌握技能和扎实的理论基础,并适应社会需求的专业人才。

关键词：应用型本科口腔种植学教学模式本科教学教学改革

白藜芦醇对缺血再灌注心肌细胞凋亡及沉寂信息调节因子2表达的影响

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中国临床康复 2006年第19期10卷 69-71页

作者：陈丽函王伟傅玉才李吉林许铭炎汕头大学医学院第一附属医院心血管内科广东省汕头市515041 汕头大学医学院细胞衰老实验室广东省汕头市515041

目的:观察沉寂信息调节因子2激活剂-白藜芦醇干预对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及沉寂信息调节因子2表达的影响。方法:实验于2005-03/10在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。选用雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,即假手术组、缺... 详细信息

目的:观察沉寂信息调节因子2激活剂-白藜芦醇干预对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及沉寂信息调节因子2表达的影响。方法:实验于2005-03/10在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。选用雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,即假手术组、缺血再灌注组和白藜芦醇组,每组10只。白藜芦醇组和缺血再灌注组大鼠结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血再灌注模型,30min后松开扎线,再灌注2h。假手术组只穿线不结扎。假手术组及缺血再灌注组给予二甲基亚砜-质量浓度为0.009的生理盐水1mL/kg,白藜芦醇组给予白藜芦醇10mg/kg,分别于缺血前15min及再灌注前1min以1mL/kg舌下静脉给药。实验结束取出心脏,应用免疫组织化学方法检测沉寂信息调节因子2同源物SIRT1及半胱氨酸蛋白酶3蛋白的表达。以背景灰度值进行标准校正,计算半胱氨酸蛋白酶3表达的相对量,其灰度值愈大则阳性强度愈大。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡情况,凋亡指数=穴视野内凋亡细胞个数/视野内所有心肌细胞个数雪×100%。结果:30只大鼠全部进入结果分析,每组10只,无脱失。①白藜芦醇组大鼠心肌细胞的SIRT1阳性细胞率显著高于缺血再灌注组(P=0.008),但低于假手术组(P=0.040)。②白藜芦醇组大鼠心肌细胞的凋亡指数显著低于缺血再灌注组(P=0.000),而缺血再灌注组则显著高于假手术组(P=0.000)。③白藜芦醇组灰度值为27.40±1.87;而缺血再灌注组灰度值为34.69±1.71,着色强度显著高于白藜芦醇组(t=9.098,P=0.000)。结论:白藜芦醇可抑制缺血再灌注后心肌细胞凋亡,可能是通过增加沉寂信息调节因子2表达,抑制半胱氨酸蛋白酶3活性而发挥作用。

关键词：藜芦生物碱类心肌再灌注损伤细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

EGFR参与溶血磷脂酸诱导口腔鳞癌细胞整合素β6的表达

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口腔医学研究 2015年第8期31卷 767-770页

作者：殷豪邓小玲李国阳石松林李祺福许铭炎厦门市口腔医院福建厦门361003 汕头大学医学院细胞衰老研究室厦门大学医学院基础部辽宁医学院口腔系

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞整合素β6(ITGB6)表达中的作用。方法:将口腔鳞癌细胞SAS接种到6孔板中,经LPA诱导后,收集细胞,用定量RT-PCR和Western Blot检测ITGB6的mRNA和蛋白表达量;利用EGFR抑制... 详细信息

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞整合素β6(ITGB6)表达中的作用。方法:将口腔鳞癌细胞SAS接种到6孔板中,经LPA诱导后,收集细胞,用定量RT-PCR和Western Blot检测ITGB6的mRNA和蛋白表达量;利用EGFR抑制剂AG1478检测EGFR对LPA诱导ITGB6mRNA和蛋白表达的影响。结果:1)经10μmol/L LPA诱导2h后,SAS细胞ITGB6的mRNA表达水平显著性增加;而ITGB6的蛋白水平则在诱导4h后有显著性升高。2)LPA诱导促进SAS细胞EGFR磷酸化水平增加。3)EGFR抑制剂AG1478抑制LPA诱导SAS细胞ITGB6mRNA和蛋白表达。结论:LPA能诱导SAS口腔鳞癌细胞ITGB6mRNA和蛋白表达,EGFR参与LPA诱导的ITGB6表达。

关键词：溶血磷脂酸表皮生长因子受体整合素β6 口腔鳞癌

蛋白激酶C介导转化生长因子β诱导人口腔鳞癌细胞整合素β6的表达

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口腔医学研究 2015年第7期31卷 684-687页

作者：谷胤征邓小玲李祺福石松林陈锡和许铭炎福建省厦门大学医学院福建厦门361102 广东省汕头大学医学院福建省厦门市口腔医院

目的:研究蛋白激酶C(PKC)是否参与转化生长因子β(TGF-β)诱导的人口腔鳞癌细胞(SAS)整合素β6表达。方法:人口腔鳞癌细胞SAS培养于含10%胎牛血清DMEM培养基中,经TGF-β诱导后,裂解细胞提取总RNA和蛋白质,采用实时荧光定量RT-PCR及蛋白... 详细信息

目的:研究蛋白激酶C(PKC)是否参与转化生长因子β(TGF-β)诱导的人口腔鳞癌细胞(SAS)整合素β6表达。方法:人口腔鳞癌细胞SAS培养于含10%胎牛血清DMEM培养基中,经TGF-β诱导后,裂解细胞提取总RNA和蛋白质,采用实时荧光定量RT-PCR及蛋白印迹方法分别检测整合素β6mRNA和蛋白表达情况;利用PKC阻断剂研究PKC对整合素β6表达的影响。结果:TGF-β诱导人口腔鳞癌SAS细胞整合素β6mRNA及蛋白表达呈时间依赖性;广谱型PKC抑制剂RO-31-8220呈剂量依赖性阻断TGF-β诱导的SAS细胞整合素β6mRNA和蛋白表达,而Ca2+依赖型PKC抑制剂G6976则没有阻断作用。结论:非Ca2+依赖途径的PKC介导TGF-β诱导人口腔鳞癌细胞SAS细胞整合素β6表达。

关键词：转化生长因子β 蛋白激酶 C抑制剂整合素β6 人口腔鳞癌细胞

四川彝族人群HIV-1辅助受体CCR5△32和CCR2-64I基因多态性分析

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中华流行病学杂志 2004年第12期25卷 1050-1053页

作者：邓小玲洪坤学陈健平阮玉华许铭炎秦光明李克邢辉邵一鸣汕头大学医学院预防医学教研室 515041 北京中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心100050 汕头大学医学院流行病学教研室四川省疾病预防控制中心

目的了解中国四川彝族人群艾滋病病毒-1(HIV-1)辅助受体CCR5△32和CCR2-64I基因多态性特点。方法提取119份彝族正常人和88份HIV-1感染人群外周血基因组DNA。用聚合酶链反应(PCR)方法检测CCR5△32突变,阳性产物经克隆、测序进一步证实;... 详细信息

目的了解中国四川彝族人群艾滋病病毒-1(HIV-1)辅助受体CCR5△32和CCR2-64I基因多态性特点。方法提取119份彝族正常人和88份HIV-1感染人群外周血基因组DNA。用聚合酶链反应(PCR)方法检测CCR5△32突变,阳性产物经克隆、测序进一步证实;用PCR-限制性片段长度多态性技术检测CCR2-64I突变,并测序验证。结果 119份正常人样本中,CCR5 wt／△32等位基因突变杂合子2例(1 68％),未检测到CCR5△32／△32突变纯合子,CCR5△32等位基因频率为0.0084;CCR2-64I突变杂合子26例(21.85％),突变纯合子2例(1.68％),等位基因频率为0.1261。88份HIV-1感染者样本中,未检测到CCR5△32突变;CCR2-64I突变杂合子12例(13.64％),突变纯合子7例(7.95％),等位基因频率为0 1327。统计分析表明,上述等位基因多态性在该群体中均呈Hardy-Weinberg平衡分布;两种等位基因的突变频率在正常人和感染人群中的差异均无统计学意义。结论研究获得了中国四川彝族人群CCR5△32、CCR2-64I等位基因多态性资料,结果有助于综合评估中国人群对HIV-1感染的遗传易感性,同时为深入研究HIV-1抗性基因在中国不同民族的HIV感染及发病机制中的作用奠定基础。

关键词： CCR5 CCR2 突变 HIV-1感染正常人辅助受体基因多态性彝族人群中国四川等位基因频率

105例潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错头影测量分析

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广东牙病防治 2013年第2期21卷 99-102页

作者：林耿真许克樱许铭炎汕头市潮阳区人民医院口腔科广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院口腔科汕头大学医学院第二附属医院唇腭裂治疗中心

目的分析潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错畸形的颅颌特征。方法收集105例潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者X线头颅侧位定位片,采用Downs分析法进行分析,所得数据进行性别比较分析,并进一步与广东地区正常及佛山地区安氏Ⅱ类错人群Do... 详细信息

目的分析潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错畸形的颅颌特征。方法收集105例潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者X线头颅侧位定位片,采用Downs分析法进行分析,所得数据进行性别比较分析,并进一步与广东地区正常及佛山地区安氏Ⅱ类错人群Downs分析法测量值进行比较。结果获取潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者Downs分析法测量值,男女Downs分析法测量值差异没有统计学意义(P>0.05);与广东地区分析正常Downs分析法测量值比较,潮汕籍女性组上下中切牙角(t=1.19,P=0.240)及上中切牙凸距(t=1.86,P=0.070)差异无统计学意义,其它项目测量值均明显偏离正常值,差异有统计学意义(P<0.05);潮汕籍男性患者的面角(t=7.21,P=0.000)、Y轴角(t=7.37,P=0.000)、下颌平面角(t=2.15,P=0.030)及下中切牙-下颌平面角(t=3.78,P=0.000)与佛山地区男性患者相比差异具有统计学意义,潮汕籍女性患者的面角(t=5.57,P=0.000)、下颌平面角(t=2.50,P=0.015)及Y轴角(t=6.39,P=0.000)与佛山地区女性患者相比差异具有统计学意义。结论潮汕籍汉族恒牙期安氏Ⅱ类错患者具备广东人前突的侧貌特征,同时下颌后缩及向后下生长的趋势更明显。

关键词：安氏Ⅱ类1分类错[牙合] 头影测量 Downs分析法

蛋白酶活化受体1介导人胚肺成纤维细胞释放单核细胞趋化蛋白-1

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汕头大学医学院学报 2010年第2期23卷 89-91页

作者：邓小玲许铭炎汕头大学医学院细胞与遗传学教研室汕头大学医学院第二附属医院口腔科广东汕头515041

目的:研究蛋白酶活化受体1(PAR1)对凝血酶诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-1)释放单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的调节作用。方法:HFL-1用PAR1激动剂凝血酶、PAR1活性肽SFLLR和反活性肽RLLFS进行诱导,并用PAR1阻断剂SCH79797进行阻断后用凝血酶和... 详细信息

目的:研究蛋白酶活化受体1(PAR1)对凝血酶诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-1)释放单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的调节作用。方法:HFL-1用PAR1激动剂凝血酶、PAR1活性肽SFLLR和反活性肽RLLFS进行诱导,并用PAR1阻断剂SCH79797进行阻断后用凝血酶和SFLLR刺激;用ELISA检测MCP-1浓度。结果:凝血酶及SFLLR可引起HFL-1释放MCP-1,而RLLFS不能引起MCP-1的释放增加;SCH79797可阻断凝血酶及SFLLR诱导HFL-1释放MCP-1。结论:PAR1介导凝血酶诱导的HFL-1细胞释放MCP-1。

关键词：凝血酶蛋白酶活化受体1 单核细胞趋化蛋白-1 人胚肺成纤维细胞系

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蛋白质组学时代的噬菌体抗体库技术

汕头大学医学院学报 2004年第3期17卷 179-181页

作者：许铭炎邓小玲于晓军汕头大学医学院法医学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院卫生学教研室

抗体是蛋白质组学研究的核心工具 ,噬菌体抗体库技术是一种高效的抗体生产技术 ,蛋白质组学研究对该技术提出了新的要求。

关键词：噬菌体抗体库技术蛋白质组学抗体生产综述研究要求核心时代工具