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吞噬凋亡细胞的机制

生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 855-859页

作者：许铭炎徐小虎汕头大学医学院病理系汕头515031

被吞噬细胞吞噬是多数凋亡细胞的命运 .凋亡细胞表面膜磷脂酰丝氨酸的暴露、膜碳水化合物的改变及表面糖蛋白的重新分布和聚集导致被吞噬细胞识别与摄取 .吞噬细胞的多种受体参与吞噬过程 ,有些受体参与栓系凋亡细胞 ,有些激发巨吞饮的... 详细信息

被吞噬细胞吞噬是多数凋亡细胞的命运 .凋亡细胞表面膜磷脂酰丝氨酸的暴露、膜碳水化合物的改变及表面糖蛋白的重新分布和聚集导致被吞噬细胞识别与摄取 .吞噬细胞的多种受体参与吞噬过程 ,有些受体参与栓系凋亡细胞 ,有些激发巨吞饮的摄取机制 .吞噬的摄取过程因吞噬细胞和凋亡细胞的类型差异而不同 .至少有 7种线虫吞噬基因及其哺乳动物同源物组成两条部分重叠而又平行的摄取信息传导通路 .吞噬基因的突变可以改变凋亡细胞的进程 .

关键词：吞噬细胞吞噬作用吞噬基因凋亡细胞信息传导机制

白细胞介素-13对巨核细胞系-HEL细胞原癌基因c-mpl表达的影响

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中国病理生理杂志 2001年第12期17卷 1193-1195页

作者：许铭炎石小玉李文林江西医学院形态学中心实验室江西医学院病理生理学教研室江西南昌330006

目的 :研究重组人白细胞介素 - 13 (rhIL - 13 )刺激巨核细胞系 -HEL细胞的增殖是否与原癌基因c -mpl表达有关。方法 :用MTT比色法和RT -PCR法 ,分别观察了rhIL - 13对HEL细胞增殖的影响和对c -mplmRNA表达的影响。结果 :rhIL - 13促进... 详细信息

目的 :研究重组人白细胞介素 - 13 (rhIL - 13 )刺激巨核细胞系 -HEL细胞的增殖是否与原癌基因c -mpl表达有关。方法 :用MTT比色法和RT -PCR法 ,分别观察了rhIL - 13对HEL细胞增殖的影响和对c -mplmRNA表达的影响。结果 :rhIL - 13促进了HEL细胞的增殖 ,上调了HEL细胞c-mplmRNA的表达。结论 :rhIL - 13促进巨核细胞系 -HEL细胞增殖 ,其部分机制可能是通过上调c -mpl的表达来实现。

关键词：白细胞介素-13 巨核细胞原癌基础基因表达细胞增殖

肌腱膜纤维肉瘤癌基因B型同系物基因的单核苷酸多态性与非综合征型唇腭裂关联研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第7期26卷 845-848页

作者：程红球黄恩民唐世杰许铭炎舒申友汕头大学医学院第二附属医院感染科广东汕头515041 湖北中医药大学研究生部汕头大学医学院第二附属医院唇腭裂治疗中心广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院口腔科广东汕头515041

目的揭示位于染色体20q12的肌腱膜纤维肉瘤癌基因B型同系物基因(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B,MAFB)上游单核苷酸多态性位点rs17820943与中国南方汉族人群非综合征型唇腭裂(non-syndromic cleft lip with or without cleft palate,NSCL/P)发病的相关性。方法采用引物单碱基延伸、基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱分析法检测了300例NSCL/P患者(病例组)和354例健康志愿者(对照组)以及168个完整患儿-健康父母3人核心家系的rs17820943基因型。并以测定的基因型为基础分别进行病例-对照研究以及患儿-健康父母3人家系研究。结果 rs17820943的等位基因和基因型频率在病例组与对照组间差异均有统计学意义(P等位基因=0.001和P基因型=0.002)。其中等位基因T(频率病例∶对照=0.358∶0.448)和基因型TT(频率病例∶对照=0.110∶0.195)的比值比(oddsratio,OR)和95%可信区间(95%confidence interval,95%CI)值分别为ORT=0.69(95%CI:0.55～0.86)和ORTT=0.43(95%CI:0.26～0.70)。患儿-健康父母3人家系研究也表明该位点与NSCL/P存在强阳性关联(ORT vs.C=0.55,95%CI:0.41～0.75,传递不平衡检验P=0.000)。结论 MAFB基因的rs17820943位点的单核苷酸多态性与中国南方汉族人群的NSCL/P易感性相关,表明MAFB基因可能是NSCL/P的易感基因。

关键词：肌腱膜纤维肉瘤癌基因B型同系物基因非综合征型唇腭裂关联研究候选基因研究单核苷酸多态性位点

酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定

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中国老年学杂志 2008年第24期28卷 2406-2409页

作者：刘居理傅玉才许铭炎许锦阶汕头大学医学院细胞衰老实验室广东汕头515041

目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检... 详细信息

目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性。利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况。结果LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111bp)、Slag(109bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用。结论重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。

关键词： LASS1 酵母双杂交诱饵蛋白

以壳聚糖金纳米粒子为载体构建Ch- GNPs/β6复合物的相关研究

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实用口腔医学杂志 2019年第3期35卷 461-463页

作者：潘夏薇赖颖真许铭炎厦门医学院口腔医学系 361000 厦门医学院附属口腔医院

通过凝聚过程形成Ch-GNPs,以其为载体,搭载整合素β6质粒,形成Ch-GNPs/β6复合物。利用紫外可见分光光度计,透射电子显微镜(TEM)检测复合物的性状。进一步通过电泳、WB和X-gal实验检测复合物的结合力及对MC3T3-E1细胞的转染能力。结果表... 详细信息

通过凝聚过程形成Ch-GNPs,以其为载体,搭载整合素β6质粒,形成Ch-GNPs/β6复合物。利用紫外可见分光光度计,透射电子显微镜(TEM)检测复合物的性状。进一步通过电泳、WB和X-gal实验检测复合物的结合力及对MC3T3-E1细胞的转染能力。结果表明Ch-GNPs/β6复合物性状稳定并能有效在MC3T3-E1细胞中进行转染。

关键词：壳聚糖金纳米粒子整合素αvβ6

重组腺病毒ADV-TK基因的构建及其对肝癌细胞的杀伤作用

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南方医科大学学报 2010年第8期30卷 1887-1889页

作者：陈耿臻韩慧许铭炎邓小玲汕头大学医学院第二附属医院外三科广东汕头515041

目的探讨含胸苷激酶(TK)自杀基因的重组腺病毒(ADV-TK)对肝癌细胞的杀伤作用。方法采用细胞内同源重组法构建出携带TK基因的ADV-TK,经PCR鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定,将ADV-TK感染人肝癌细胞株SMMC-7721,MTT法检测受感染的SMMC-... 详细信息

目的探讨含胸苷激酶(TK)自杀基因的重组腺病毒(ADV-TK)对肝癌细胞的杀伤作用。方法采用细胞内同源重组法构建出携带TK基因的ADV-TK,经PCR鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定,将ADV-TK感染人肝癌细胞株SMMC-7721,MTT法检测受感染的SMMC-7721细胞被不同浓度GCV作用后的细胞存活率情况。结果构建的重组腺病毒中带有TK基因,用相同滴度的重组腺病毒和不同浓度的GCV作用于肝癌细胞株SMMC-7721后,MTT法检测到细胞的存活率随着GCV浓度的增加而不断降低。结论本实验构建的携带TK基因的复制缺陷型腺病毒对肝癌细胞具有明显的杀伤作用。

关键词：肝癌基因治疗胸苷激酶基因腺病毒载体

阴道毛滴虫RRas同源基因的克隆和序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 215-218页

作者：许铭炎傅玉才刘居理张仁利汕头大学医学院寄生虫学教研室汕头515041 深圳市疾病预防控制中心深圳518020

目的克隆和分析阴道毛滴虫RRas同源基因,以探讨其在细胞内信号传导通路中的功能。方法从已构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离得到一个与人类RRas同源的cDNA克隆,用PCR扩增该cDNA克隆TvRRas相对应的基因组DNA,并对cDNA克隆及其对应的... 详细信息

目的克隆和分析阴道毛滴虫RRas同源基因,以探讨其在细胞内信号传导通路中的功能。方法从已构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离得到一个与人类RRas同源的cDNA克隆,用PCR扩增该cDNA克隆TvRRas相对应的基因组DNA,并对cDNA克隆及其对应的基因组DNA进行测序。利用BLASTP,RPS-BLAST和ClustalW等工具进行序列分析。结果TvRRascDNA序列全长705对碱基,读码框含615对碱基,推测蛋白质序列具205个氨基酸。序列分析显示该基因的基因组DNA序列含有5′端ATG起始密码子和3′端的终止密码子,与cDNA序列完全一致,提示该基因无内含子;进一步分析表明该基因系RRas亚家族的同源基因,其氨基酸序列与人类和小鼠的RRas同源性最高(两者的一致性均为51%,相似性均为70%),同时拥有人类RRas基因高度保守的结合GTP的结构域和完全一致的效应结构域。进化树分析表明该基因与人类的RAS原癌蛋白基因分支及RRas分支聚类。结论获得了阴道毛滴虫RRas同源基因。

关键词：阴道毛滴虫 RRas同源基因基因克隆

克隆并应用计算机软件分析小鼠LASS1基因启动子区的特征

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第10期11卷 1865-1868页

作者：刘居理傅玉才许铭炎许锦阶汕头大学医学院细胞衰老实验室广东省汕头市515041

目的:克隆并应用计算机分析小鼠LASS1基因启动子,为进一步研究在细胞衰老过程中LAG1基因的转录调控奠定基础。方法:实验于2006-03/07在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。培养EC109细胞株,预测小鼠LASS1基因启动子所在区域,用PCR技术... 详细信息

目的:克隆并应用计算机分析小鼠LASS1基因启动子,为进一步研究在细胞衰老过程中LAG1基因的转录调控奠定基础。方法:实验于2006-03/07在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。培养EC109细胞株,预测小鼠LASS1基因启动子所在区域,用PCR技术扩增启动子区序列,构建重组质粒pGEM-T-501、pGEM-T-181、pGEM-T-26,并转化JM109感受态菌,并分别克隆入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic及增强型绿色荧光蛋白报告基因载体pEGFP-1,酶切pGEM-T-501、181、26重组质粒及pGL3-Basic、pEGFP-1载体,制备插入片段和载体,构建重组表达质粒pGL3-501、pGL3-181和pGL3-26及pEGFP-501、pEGFP-181和pEGFP-26,转化JM109感受态菌。用脂质体介导的方法瞬时转染EC109细胞,测定荧光素酶表达活性及观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果:①在预测启动子区构建了3种荧光素酶报告基因表达体系及3种增强型绿色荧光蛋白报告基因表达体系,分别为pGL3-501(-501bp～+106bp)、pGL3-181(-181bp～+106bp)、pGL3-26(+26～+106)、pEGFP-501、pEGFP-181和pEGFP-26。②pGL3-501表达载体与pGL3-181表达载体荧光素酶表达活性相近,pGL3-26表达载体荧光素酶表达活性极低,与阴性对照活性相近,+26bp～+106bp无启动子活性。绿色荧光蛋白的表达情况也类似,pEGFP-501和pEGFP-181有明显的绿色荧光蛋白表达,pEGFP-26和空载体pEGFP-1无表达活性。结论:-181bp～+26bp区域含有小鼠LASS1基因转录所必需的基本启动子序列。其中2个SP1保守序列是小鼠LASS1基因启动子所必需的。

关键词：基因启动子小鼠

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吞噬凋亡细胞研究新进展

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2002年第5期22卷 439-442页

作者：许铭炎汕头大学医学院病理系法医教研室广东汕头515031

从线虫到哺乳动物 ,吞噬细胞对凋亡细胞的识别与吞噬具有进化保守性 ,目前发现 ,有 7种吞噬基因编码吞噬蛋白参与这一过程的主动调控。吞噬基因的突变可以改变细胞凋亡的进程 ,甚至可以逃避吞噬而存活。

关键词：凋亡细胞吞噬细胞吞噬基因吞噬蛋白吞噬作用