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保元活络方改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制预测及验证

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中国现代应用药学 2022年第3期39卷 300-311页

作者：许禄华周旭蒋峰李亮宋银枝曾志聪吴子君林丰夏广州中医药大学附属深圳市宝安中医院(集团) 广东深圳518133 广州中医药大学研究生院广州510405

目的探讨保元活络方改善心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的可能作用和机制。方法从TCMSP数据库获取保元活络方(丹参、三七、山楂、黄芪和西洋参)的成分和作用靶点,从GeenCard、OMIM数据库获取MIRI靶点... 详细信息

目的探讨保元活络方改善心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的可能作用和机制。方法从TCMSP数据库获取保元活络方(丹参、三七、山楂、黄芪和西洋参)的成分和作用靶点,从GeenCard、OMIM数据库获取MIRI靶点,交集获得保元活络方改善MIRI的可能靶点;使用Cytoscape软件构建保元活络方作用MIRI的"成分-靶点"网络,拓扑分析得出关键化合物;使用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein protein interaction,PPI)网络,并导入Cytoscape软件进行优化,聚类分析得出关键靶标;使用ClueGo插件对核心靶标进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。缺氧复氧(hypoxia and reoxygenation,H/R)处理大鼠心肌细胞(H9C2)建立MIRI模型,初步验证保元活络方含药血清调控NF-κB通路从线粒体途径抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。结果共筛选得到槲皮素、山柰酚、异鼠李素等11个关键化合物,作用靶标51个;PPI网络聚类分析得到2个子网络,涉及CASP3、NOS3、IL-6、ICAM1等16个靶标;GO分析得到体外凋亡信号通路、对活性氧的反应、血管内皮细胞迁移等239个生物学功能;KEGG富集得到TNF信号通路、NF-κB信号通路、VEGF信号通路、PPAR信号通路等63条通路。细胞试验显示,H/R处理后,各组H9C2心肌细胞的细胞活力降低,细胞凋亡增加,caspase-3、caspase-9活性增强,NF-κB p65、caspase-3和caspase-9蛋白表达水平增加,IκBα、Bcl-2蛋白表达水平降低;而保元活络方含药血清干预可逆转H/R诱导的上述损伤。结论保元活络方可以通过多成分-靶点-通路的途径,发挥抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡和改善冠脉血管内皮功能等作用从而改善MIRI,其中调控NF-κB通路,从线粒体途径抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡可能是其关键机制。

关键词：保元活络方心肌缺血再灌注损伤缺氧复氧网络药理学细胞凋亡

保元活络法改善心肌缺血再灌注损伤的作用和机制研究

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保元活络法改善心肌缺血再灌注损伤的作用和机制研究

作者：许禄华广州中医药大学

学位级别：硕士

目的探讨保元活络法(BYHL)改善心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法本研究首先通过在临床招募符合条件的急性心肌梗死患者开展临床随机对照实验,以观察BYHL对血运重建后MIRI的保护作用;接着使用网络药理学方法对BYHL改善MIRI的可... 详细信息

目的探讨保元活络法(BYHL)改善心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法本研究首先通过在临床招募符合条件的急性心肌梗死患者开展临床随机对照实验,以观察BYHL对血运重建后MIRI的保护作用;接着使用网络药理学方法对BYHL改善MIRI的可能作用机制进行初步预测;最后设计体外实验对预测得到的BYHL改善MIRI的相关性最强的可能作用途径进行验证。1.临床研究:招募接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的急性心肌梗死患者,随机分为实验组和对照组,对照组给予常规治疗,实验组在常规治疗基础上加予BYHL治疗,治疗周期为2个月。观察两组患者术前和术后24小时的肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的峰值,以及术后24小时和治疗2个月后的左室射血分数(LVEF),以观察BYHL对MIRI后心肌损伤程度和心功能的影响。2.网络药理学研究:从TCMSP数据库获取BYHL的成分和作用靶点,从GeenCard、OMIM数据库获取MIRI靶点,交集获得BYHL改善MIRI的可能靶点。使用Cytoscape软件构建BYHL作用MIRI的“成分-靶点”网络,拓扑分析得出关键化合物。使用STRING数据库构建蛋白互作网络,并导入Cytoscape软件进行优化,聚类分析得出关键靶点。使用ClueGo插件对核心靶点进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。最后结合网络分析结果和目前MIRI基础研究现状,预测BYHL作用MIRI的相关性最强的作用途径和机制。3.实验研究:缺氧复氧(H/R)处理大鼠心肌细胞(H9C2)建立MIRI模型,分为正常组(control组)、模型组(H/R组)和不同浓度BYHL含药血清组(H/R+LBYHL组、H/R+MBYHL 组、H/R+HBYHL 组)。用 CCK-8 法检测细胞活性,Annexin V/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,比色法测定caspase-3和caspase-9活性,Western Blot 法检测 NF-κB p65、IκBα、Bcl-2、caspase-3 和 caspase-9 的蛋白表达水平。结果1.临床研究:(1)共招募满足纳入-排除条件者76人,10例中途脱落,最终实际入组66人,其中实验组34人,对照组32人。两组患者性别、年龄、吸烟史、合并基础疾病(高血压、糖尿病、血脂异常等)、病变血管及其TIMI分级等基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术前血清cTnI、CK、CK-MB水平以及术后24小时LVEF 比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)与术前比较,两组患者术后24小时的血清cTnI、CK、CK-MB峰值水平均明显降低(P0.05),而中、高浓度BYHL含药血清处理后细胞活力均明显增加(P<0.01);(3)与H/R组比较,经不同浓度BYHL含药血清处理后各组H9C2心肌细胞的凋亡率均有下降(P<0.01),且中、高浓度BYHL含药血清处理组的凋亡率明显低于低浓度组(P<0.01)。(4)与H/R组比较,经不同浓度BYHL含药血清处理后的各组H9C2心肌细胞的caspase-3活性均有所下降(P<0.01),

关键词：保元活络方心肌缺血再灌注损伤网络药理学细胞凋亡 NF-κB信号通路

医药院校学生熬夜行为与其危害认知的相关性调查研究

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中国民族民间医药 2015年第20期24卷 135-138页

作者：黄小靖许禄华李婷祝海毅广州中医药大学广东广州510405

目的:了解医药院校学生熬夜行为与其危害认知的相关性。方法:自行设计调查问卷进行调查,采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。结果:大学生熬夜现象普遍,非医学类专业学生熬夜情况更为严重;娱乐活动是大学生熬夜的主要因素(39.0%);大... 详细信息

目的:了解医药院校学生熬夜行为与其危害认知的相关性。方法:自行设计调查问卷进行调查,采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。结果:大学生熬夜现象普遍,非医学类专业学生熬夜情况更为严重;娱乐活动是大学生熬夜的主要因素(39.0%);大学生熬夜行为与其熬夜危害认知程度呈极弱相关。结论:医药院校学生对熬夜危害认知程度对学生的熬夜行为有一定影响,但影响不大;除增强学生对熬夜危害认知程度的知识教育外,还需要通过其他手段加以辅助,例如学生要提高自身抵制诱惑的能力、学校校园网断网、宿舍定时关灯等。

关键词：医药院校大学生熬夜行为危害认知相关性

探讨新型冠状病毒肺炎不同阶段的处方用药规律

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中国实验方剂学杂志 2020年第13期26卷 8-16页

作者：许禄华李彦荣郑丹如邵宗钫闻思齐林丰夏曾志聪宋银枝广州中医药大学附属宝安中医院深圳市宝安中医院(集团)广东深圳518133

目的:基于"因时制宜",探讨新型冠状病毒肺炎不同阶段的中医药防治规律,尤其是其中的处方用药规律。方法:检索并整理2020年2月17日前(含)国家及各省市政府以及各专家制定和发表的新型冠状病毒肺炎指南及建议,按照预防期、临床观察期、临... 详细信息

目的:基于"因时制宜",探讨新型冠状病毒肺炎不同阶段的中医药防治规律,尤其是其中的处方用药规律。方法:检索并整理2020年2月17日前(含)国家及各省市政府以及各专家制定和发表的新型冠状病毒肺炎指南及建议,按照预防期、临床观察期、临床前期、临床中期、临床后期和恢复期分期录入,对处方中药及其功效、成方和中成药进行频数分析,再对处方中药进行因子分析和聚类分析以获取合理药物组合。结果:共纳入来自24个官方和24个专家的172条中药处方建议,50个成方建议和31个中成药建议,涉及147个中药,44个方剂和16个中成药;中药处方方面,无论是药物类别选择还是具体药物选择,不同阶段的用药规律均不相同;成方和成药方面,观察期可予藿香正气胶囊、疏风解毒胶囊、连花清瘟胶囊、金花清感胶囊,中期可予宣白承气汤加减,后期可辨证予安宫牛黄丸、苏合香丸或紫雪丹;另外,清肺排毒汤在各时期均可使用。结论:新型冠状病毒肺炎各阶段用药规律各有特色,临床需随疾病进展,及时变更处方。

关键词：新型冠状病毒肺炎不同时期用药规律文献研究

基于"温病在下其郁热"探究大黄在新型冠状病毒肺炎的作用及潜在机制

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中药药理与临床 2020年第2期36卷 85-90页

作者：许禄华黄小靖李彦荣宋银枝曾志聪刘卓超周旭林丰夏广州中医药大学附属宝安中医院深圳市宝安中医院(集团)深圳518133 广州中医药大学研究生院广州510405

目的:基于"温病在下其郁热",探讨大黄在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)治疗中的作用及潜在作用机制。方法:使用网络药理学方法,在TCMSP数据库获取大黄的活性成分和作用靶点,并通过Uniprot数据库将获得的靶蛋白名称转换成Gene Symbol;使用Cy... 详细信息

目的:基于"温病在下其郁热",探讨大黄在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)治疗中的作用及潜在作用机制。方法:使用网络药理学方法,在TCMSP数据库获取大黄的活性成分和作用靶点,并通过Uniprot数据库将获得的靶蛋白名称转换成Gene Symbol;使用Cytoscape3.7.1软件,构建大黄的"化学成分-作用靶点"网络;使用STRING数据库构建作用靶标的蛋白互作网络,并导入Cytoscape中进行网络优化,再通过"MCODE"插件进行聚类分析;使用"ClueGo"插件对大黄的核心靶标进行GO功能分析和KEGG通路富集分析,结果使用R软件进行可视化。结果:共筛选得到β-谷甾醇、芦荟大黄素等7个有效化合物,对应靶标49个;靶标PPI网络聚类分析得到2个子网络,涉及JUN、CASP3、IL-1β、CASP8、CASP9等18个靶标;GO分析得到G蛋白偶联胺受体活性、核受体的活动、配体激活的转录因子活性、组蛋白磷酸化和类固醇激素受体活性等296个生物学功能(P<0.01);KEGG富集得到p53信号通路、IL-17信号通路、VEGF信号通路、c型凝集素受体信号通路和TNF通路等31条通路(P<0.01)。结论:大黄可以通过多成分-靶点-通路的途径,发挥抗病毒、抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡和调节机体免疫等功能,从而起到治疗COVID-19的作用。

关键词：大黄新型冠状病毒肺炎温病下法网络药理学机制

八珍汤促宫颈成熟分子机制和生物通路的网络药理学研究

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西部中医药 2021年第11期34卷 56-64页

作者：郑丹如卢海霞许禄华任利容广州中医药大学附属深圳市宝安中医院广东深圳518101 南京中医药大学附属医院

目的:基于网络药理学方法探讨八珍汤促宫颈成熟的分子作用机制和生物通路。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)获取八珍汤药物的有效... 详细信息

目的:基于网络药理学方法探讨八珍汤促宫颈成熟的分子作用机制和生物通路。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)获取八珍汤药物的有效化学成分并预测有效化学成分对应的靶点和基因,通过人类基因数据库(GeneCards)、孟德尔人类遗传数据库(online Mendelian inheritance in man,OMIM)、DiGSeE数据库、Drug Bank数据库和治疗靶标数据库(therapeutic target database,TTD)搜索得到宫颈成熟相关的疾病靶点基因,将药物靶点和疾病靶点进行比对,获得八珍汤促宫颈成熟的作用靶点并绘制韦恩(Venn)图。通过STRING官网(https://***/)构建蛋白互作(protein protein interac-tion,PPI)网络,并运用软件Cytoscape 3.7.2构建“促宫颈成熟-基因-靶点-八珍汤有效成分”的调控网络,筛选出核心基因。最后进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(ryo-to encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析其生物过程、细胞成分、分子功能和生物作用通路。结果:共筛选出160个化学成分,175个与促宫颈成熟相关的作用靶点,β-谷固醇、芒柄花黄素、谷甾醇、山柰酚、原阿片碱等为关键药物化学成分,前列腺素过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide syn-thase 2,PTGS2)、雌激素受体(estrogen receptor,ESR1)、雄激素受体(androgen receptor,AR)、肾上腺素能受体2(adrenrgic receptor 2,ADRB2)、核受体辅激活蛋白2(nuclear receptor coactivator 2,NCOA2)等为关键靶标。经过GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,发现八珍汤通过参与了雌激素、催产素、松弛素信号通路等内分泌激素信号通路和白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)信号通路、白细胞跨内皮转移等炎症反应信号通路促宫颈成熟。结论:八珍汤促宫颈成熟的有效成分、靶标和生物通路体现了中药多成分-多靶点-多途径的特点,与中医的“整体观念”一致,可为阐释八珍汤促宫颈成熟的基础研究和药物研究提供依据和参考;其关键化学成分和靶标揭示八珍汤中关键药物促宫颈成熟的作用可为八珍汤促宫颈成熟的用药用量规律基础研究和临床研究提供参考。

关键词：促宫颈成熟分子机制生物通路网络药理学八珍汤

基于数据挖掘探讨疫病学说对儿童新型冠状病毒性肺炎的用药启发

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世界中医药 2020年第4期15卷 489-493页

作者：黄小靖刘卓超宋银枝林丰夏许禄华广州中医药大学附属深圳市宝安中医院(集团) 深圳518000

本研究通过中医传承辅助平台(V2.5)探讨疫病学说对儿童新型冠状病毒性肺炎的用药启发。收集《温病大成(第一部)》中关于治疗小儿时疫的处方,筛选出适用于现在治疗小儿时疫的完整处方58个,将处方录入中医传承辅助平台(V2.5),运用其集成... 详细信息

本研究通过中医传承辅助平台(V2.5)探讨疫病学说对儿童新型冠状病毒性肺炎的用药启发。收集《温病大成(第一部)》中关于治疗小儿时疫的处方,筛选出适用于现在治疗小儿时疫的完整处方58个,将处方录入中医传承辅助平台(V2.5),运用其集成规则分析、改进的互信息法、复杂系统熵聚类、无监督的熵层次聚类分析等功能总结明清医家治疗小儿时疫的理论依据和用药规律。根据统计分析结果得出明清医家治疗小儿时疫的药物频次和药物间关联规则,最终获得核心药物组合16个,提取新方8个。结果表明,儿童新型冠状病毒性肺炎,内因其体稚阳,正气娇弱;外因疫气秽浊,袭人尤甚,触而发之。治疗上,应以固护脾土为前提,攻补兼施;若疫气在表、胃气未败治宜清肺热兼芳香化浊,若疫病已传、损伤阳明则应清热养阴、因势利导。

关键词：儿童新型冠状病毒性肺炎中医传承辅助系统用药规律

基于网络药理学探究黄连生物碱干预原发性高血压的作用机制

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中医药导报 2020年第11期26卷 112-117页

作者：黄小靖刘卓超许禄华宋银枝曾志聪广州中医药大学附属宝安中医院广东深圳518000

目的:基于网络药理学探讨黄连生物碱对原发性高血压的作用机制。方法:采用TCMSP、PubChem、BATMAN数据库等,以口服生物利用度和类药性为限制条件筛选黄连化学成分;通过PubChem数据库筛选符合异喹啉型的生物碱化合物,通过Uniprot数据库... 详细信息

目的:基于网络药理学探讨黄连生物碱对原发性高血压的作用机制。方法:采用TCMSP、PubChem、BATMAN数据库等,以口服生物利用度和类药性为限制条件筛选黄连化学成分;通过PubChem数据库筛选符合异喹啉型的生物碱化合物,通过Uniprot数据库获取黄连生物碱的作用靶点,构建黄连生物碱作用靶点的蛋白相互作用网络;基于GeneCards数据库筛选原发性高血压的相关靶点,利用Venny2.1工具绘制黄连生物碱作用靶点和高血压疾病靶点的韦恩图,通过生物信息学手段对黄连生物碱对高血压的作用靶点进行GO分析及KEGG分析。结果:富集通路分析KEGG通路有神经活性配体受体相互作用、cAMP信号通路、钙信号通路、间隙连接、HIF-1信号通路、cGMP-PKG信号通路、多巴胺能突触信号通路等。结论:黄连生物碱通过调节神经机制、离子浓度、抗氧化应激、抗炎等相关机制干预高血压。

关键词：黄连生物碱高血压网络药理学机制

当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经的疗效观察

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广州中医药大学学报 2021年第9期38卷 1868-1873页

作者：李彦荣许铮许禄华欧俊钊张舒婷吴凡伟广州中医药大学附属宝安中医院深圳市宝安中医院(集团)广东深圳518133 广州中医药大学研究生院广东广州510405

【目的】观察当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经的临床疗效。【方法】将60例经前-经期痛经患者随机分为试验组和对照组,每组各30例。对照组给予布洛芬缓释胶囊口服治疗,试验组给予中药汤剂当归芍药散加减联合三元气血针... 详细信息

【目的】观察当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经的临床疗效。【方法】将60例经前-经期痛经患者随机分为试验组和对照组,每组各30例。对照组给予布洛芬缓释胶囊口服治疗,试验组给予中药汤剂当归芍药散加减联合三元气血针法治疗,连续治疗3个月经周期。观察2组患者治疗前和治疗3个月经周期后视觉模拟量表(VAS)评分、COX痛经症状评价量表(CMSS)评分和健康状况调查量表(SF-36)评分的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗3个月经周期后,试验组的总有效率为93.3%(28/30),对照组为70.0%(21/30),组间比较,试验组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的VAS评分均较治疗前明显降低(P<0.01),且试验组对VAS评分的降低作用明显优于对照组(P<0.01)。(3)治疗后,2组患者CMSS的严重程度和持续时间评分均较治疗前明显降低,且试验组对CMSS的严重程度和持续时间评分的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。(4)治疗后,2组患者SF-36的一般健康、精神健康、躯体疼痛、生理机能、生理职能、情感职能、社会功能和精力等8个维度评分均较治疗前明显改善(P<0.01),且试验组对SF-36各维度评分的改善作用均明显优于对照组(P<0.05)。【结论】与单纯西药治疗相比,中药汤剂当归芍药散加减联合三元气血针法治疗经前-经期痛经临床效果更显著,能更大程度地降低疼痛评分、改善痛经相关症状和提高患者生活质量。

关键词：当归芍药散三元气血针法经前-经期痛经痛经相关症状生活质量临床疗效