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汞离子及其胁迫下内源性活性物质的荧光成像分析

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汞离子及其胁迫下内源性活性物质的荧光成像分析

作者：房淑静烟台大学

学位级别：硕士

汞（Hg）是毒性最强的重金属之一,具有生物富集性,并且在生物体内难以降解,长期暴露可导致慢性中毒,对生态环境和人类健康构成严重威胁。汞通常通过食物链进入人体并蓄积,即使是低浓度的汞离子(Hg)也会对心脏、肾脏、胃和肠道造成破坏... 详细信息

汞（Hg）是毒性最强的重金属之一,具有生物富集性,并且在生物体内难以降解,长期暴露可导致慢性中毒,对生态环境和人类健康构成严重威胁。汞通常通过食物链进入人体并蓄积,即使是低浓度的汞离子(Hg)也会对心脏、肾脏、胃和肠道造成破坏性影响,导致生理机能失调,引起代谢紊乱、运动和认知以及感觉功能障碍,对身体造成不可逆转的损害。Hg诱导的氧化应激在汞中毒的病理机制中也起着至关重要的作用,然而汞中毒是如何扰乱人体正常的生理过程以及汞胁迫下内源性活性物质的浓度波动的具体机制,目前科学研究尚未完全明晰,仍需要深入探索。荧光成像分析技术因其高灵敏度,高选择性,以及原位监测的优点,可以对待测物实现无损、实时的监测,有效用于生理和医学诊断。本论文利用荧光探针监测汞离子,并对汞离子胁迫下生物内源性活性物质过氧亚硝基阴离子（ONOO）和锌离子(Zn)的浓度、分布及波动情况进行原位监测和成像。探究汞离子的作用规律,揭示汞离子污染对人类健康产生的影响。本文的研究内容如下:（1）荧光探针用于环境和生物系统中Hg的荧光成像低浓度Hg的检测及其作用机制研究是当前的研究热点。本论文设计合成了两个荧光探针（NP-1和NP-2）用于Hg检测。两种探针对Hg的荧光响应是由Hg与杂原子N、S的配位引起的。其中,NP-1基于激基缔合机理对Hg有较高选择性和优异的灵敏度,且检测限超低（LOD=1.98 n M）。该探针不仅适用于环境水样中低浓度的Hg监测,而且还能用于细胞内及豌豆芽中Hg检测。（2）近红外荧光探针用于环境样品和生物体系中的Hg成像分析在前期研究中,两种荧光探针的检测波长较短,且由于Hg的高亲电性,与蛋白质（含氧、硫和硒）结合力强,在细胞内易与生物硫醇络合,导致探针检测细胞内的Hg灵敏度低。为了探究汞中毒在细胞内的复杂机制,基于Hg与杂原子N、S、O的配位作用,本论文设计了一种以硫代吗啉为识别基团的半花菁近红外荧光探针HCYS,基于Hg的螯合效应和重原子效应,通过抑制探针分子内电荷转移过程,从而使HCYS的荧光强度发生显著变化,实现了对Hg的监测。探针HCYS对Hg显示出选择性好,高灵敏度且响应速度快（1 min）,良好的水溶性,低毒性和生物实用性。研究结果表明探针HCYS可在不同水样、细胞、斑马鱼和豌豆芽中实现Hg荧光成像分析,进一步证实了探针对Hg污染的监测能力。（3）汞离子胁迫下过氧亚硝基的检测与成像分析汞离子胁迫能够引起机体损伤和复杂的生理及病理过程,导致氧化应激和线粒体功能障碍,诱导活性氧物种（ROS）爆发。ONOO作为典型的ROS物种之一,在生物体内发挥着重要作用。ONOO的失调和过度表达与炎症、神经退行性疾病和器官损伤过程高度相关。因此,迫切需要开发具有高选择性和高灵敏度的分子工具来监测细胞内ONOO含量。本论文在丙二腈衍生物中引入ONOO的识别位点苯硼酸,设计合成了荧光探针DICY。探针DICY具有快速开启荧光信号、高灵敏度和对ONOO高选择性的特点,成功用于检测Hg胁迫下细胞内源性ONOO的浓度和分布。探针DICY进一步揭示脂多糖（LPS）、佛波醇-12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸酯（PMA）和Hg诱导的氧化应激与ONOO的关系,并构建了不同浓度的汞离子胁迫模型,探索不同汞离子剂量诱导的ONOO的变化情况。实验结果表明,汞离子胁迫会诱导ONOO增加,而细胞内ONOO浓度的增加在一定程度上造成了细胞氧化应激损伤,为阐明汞离子中毒相关的病理机制提供有利证明。（4）汞离子胁迫下锌离子的检测与成像分析Zn是人体内必需的金属离子,在调节金属酶的功能以及参与信号传导、基因转录方面都发挥着非常重要的作用。细胞内汞离子暴露会导致ROS的爆发,引起氧化应激。在氧化应激条件下使细胞内的锌流失,导致癌症、心血管疾病和神经性疾病的发生。本论文中设计合成荧光探针HBT-Zn-Red,对Zn有较好的选择性和高灵敏度,能快速、原位、可视化检测细胞和斑马鱼中的内源性Zn。通过荧光成像分析,探针HBT-Zn-Red成功监测了汞离子胁迫下细胞内Zn的波动。结果表明探针HBT-Zn-Red有望成为一种有效的荧光工具,用于阐明汞中毒胁迫下Zn的流失水平,通过深入了解汞中毒相关的生理或病理过程,为相关疾病的诊断提供帮助。

关键词：汞离子生物活性物质荧光探针成像分析氧化应激

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单体建筑无筋砌体加固体系的抗震韧性研究

地震工程学报 2024年第3期46卷 566-574页

作者：魏淑静杨中宣郑州工业应用技术学院建筑工程学院河南郑州451191 中原工学院经济管理学院河南郑州450007

单体建筑无筋砌体结构的抗震韧性较差,在地震中容易发生严重破坏和倒塌。为此,以抗震韧性为参数指标,对单体无筋砌体结构进行加固并分析,研究其在地震作用下的抗震能力。以某实际工程作为研究对象,运用ANSYS软件建立单体建筑无筋砌体加... 详细信息

单体建筑无筋砌体结构的抗震韧性较差,在地震中容易发生严重破坏和倒塌。为此,以抗震韧性为参数指标,对单体无筋砌体结构进行加固并分析,研究其在地震作用下的抗震能力。以某实际工程作为研究对象,运用ANSYS软件建立单体建筑无筋砌体加固有限元模型,选取中国汶川地震波、日本阪神大地震波、美国克恩县地震波、中国台湾集集地震波及人工地震波作为地震动输入,利用韧性指数法和韧性等级法,从无筋砌体加固体系在震后的修复费用、修复时间及人员伤亡等方面进行分析,得到抗震韧性评估结果。研究表明:(1)在罕遇地震、设防地震和多遇地震的情况下,单体建筑无筋砌体结构的层间位移、层间剪应力、破坏程度均大于单体建筑无筋砌体加固体系;(2)在受到地震强弱因素影响下,无筋砌体结构的抗震韧性指数最高为0.877,而其加固体系的抗震韧性指数最低为0.908;(3)在经历不同地震波后,无筋砌体结构受到较大损害等级占比较高,人员伤亡较重,需要花费较长的时间和较多的费用完成灾后重建;而经过加固后的无筋砌体结构,加固体系受到较小损害等级占比较高,人员伤亡较轻,且能够用较短的时间和较少的费用完成灾后重建。

关键词：无筋砌体加固体系抗震韧性单体建筑韧性指数法韧性等级法

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改良双腔气囊尿管滴注法对肝性脑病患者保留灌肠操作肠液溢出、肛管滑脱及治疗效果的作用

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国际护理学杂志 2022年第16期41卷 2962-2965页

作者：刘娅罗丹董梦醒许淑静徐遥遥孟莹徐州市中心医院 221000 南京中医药大学护理学院南京医科大学徐州临床医学院221000

目的探讨改良双腔气囊尿管滴注法对肝性脑病患者保留灌肠操作肠液溢出、肛管滑脱及治疗效果的作用。方法选取2018年2月至2019年10月徐州市中心医院收治的肝性脑病患者60例,随机分为实验组和对照组,各30例。对照组接受常规保留灌肠,实验... 详细信息

目的探讨改良双腔气囊尿管滴注法对肝性脑病患者保留灌肠操作肠液溢出、肛管滑脱及治疗效果的作用。方法选取2018年2月至2019年10月徐州市中心医院收治的肝性脑病患者60例,随机分为实验组和对照组,各30例。对照组接受常规保留灌肠,实验组在此基础上应用改良双腔气囊尿管滴注法,比较两组患者肠液溢出率、肛管滑脱率及治疗有效率。结果肠液溢出率与肛管滑脱率实验组分别为13.33%、3.33%,对照组分别为53.33%、36.67%,差异有统计学意义(P<0.05);实验组治疗总有效率为90%,对照组有效率66.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝性脑病患者保留灌肠中改良双腔气囊尿管滴注法的应用能有效降低肠液溢出率及肛管滑脱率,使灌肠药物充分达到整个结肠并保留足够时间,促进肠黏膜的吸收,从而提升治疗效果。

关键词：改良双腔气囊尿管滴注法肝性脑病保留灌肠肠液溢出肛管滑脱

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急诊胃镜治疗上消化道出血患者的临床效果

医疗装备 2019年第6期32卷 96-97页

作者：许淑静兴城市人民医院辽宁兴城125100

目的探讨急诊胃镜治疗上消化道出血(UGH)患者的临床效果。方法选取医院2017年5月至2018年10月收治的UGH患者102例,根据随机数字表法分为对照组与试验组,各51例。对照组行保守治疗,试验组行急诊胃镜治疗,对比两组的疗效及再出血率。结果... 详细信息

目的探讨急诊胃镜治疗上消化道出血(UGH)患者的临床效果。方法选取医院2017年5月至2018年10月收治的UGH患者102例,根据随机数字表法分为对照组与试验组,各51例。对照组行保守治疗,试验组行急诊胃镜治疗,对比两组的疗效及再出血率。结果试验组止血有效率高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组手术治疗率低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组再出血率低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组住院期间输血量少于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论急诊胃镜治疗UGH患者可显著提升其止血效果,并能防止出血再发生,临床效果显著。

关键词：急诊胃镜上消化道出血保守治疗

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儿童血管迷走性晕厥的病因学分析及诊治进展

中国实用医药 2014年第34期9卷 89-90页

作者：许淑静郑州市儿童医院 450053

目的探讨血管迷走性晕厥(VVS)的病因分布及诊治方法。方法选择临床诊治的82例血管迷走神经性晕厥患儿资料,进行回顾性分析。结果最常见晕厥诱因主要为持久站立(31.2%),剧烈疼痛(26.7%)、情绪激动(15.3%)、体位改变(12.1%)、过度疲劳(10.... 详细信息

目的探讨血管迷走性晕厥(VVS)的病因分布及诊治方法。方法选择临床诊治的82例血管迷走神经性晕厥患儿资料,进行回顾性分析。结果最常见晕厥诱因主要为持久站立(31.2%),剧烈疼痛(26.7%)、情绪激动(15.3%)、体位改变(12.1%)、过度疲劳(10.5%)、运动(4.2%)。结论心脏充盈减少或体内儿茶酚胺增加是诱发VVS的主要因素,直立倾斜试验对VVS的诊断和评估起决定性作用,健康宣教及物理疗法治疗血管迷走性晕厥有非常满意的效果。

关键词：血管迷走性晕厥病因诊治

莫沙必利联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗功能性消化不良合并抑郁症的效果

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中国民康医学 2019年第5期31卷 42-43页

作者：许淑静兴城市人民医院辽宁兴城125100

目的:探究应用莫沙必利联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗功能性消化不良合并抑郁症的效果。方法:选取80例功能性消化不良合并抑郁症患者,按随机数字表法将其分为对照组和观察组各40例。对照组采用莫沙必利治疗,观察组采用莫沙必利联合氟哌噻... 详细信息

目的:探究应用莫沙必利联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗功能性消化不良合并抑郁症的效果。方法:选取80例功能性消化不良合并抑郁症患者,按随机数字表法将其分为对照组和观察组各40例。对照组采用莫沙必利治疗,观察组采用莫沙必利联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗;对比两组治疗前后的症状积分、治疗有效率及抑郁评分。结果:治疗前两组患者症状积分基本相近,治疗后两组症状积分明显下降,且观察组下降程度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗有效率为92.50%,高于对照组的70.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:莫沙必利联合氟哌噻吨美利曲辛片治疗功能性消化不良合并抑郁症,可改善患者的抑郁情况、提高治疗效果。

关键词：功能性消化不良抑郁症莫沙必利氟哌噻吨美利曲辛片

间歇无氧运动联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗小儿支气管哮喘的效果

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河南医学研究 2018年第24期27卷 4549-4550页

作者：许淑静余增渊郑州大学附属儿童医院/河南省儿童医院/郑州儿童医院河南郑州450018

目的探讨间歇无氧运动联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗小儿支气管哮喘的效果。方法选取2017年1月至2018年1月郑州大学附属儿童医院收治的支气管哮喘患儿158例,根据随机数表法分为对照组(79例)和观察组(79例)。对照组患儿接受沙美特罗替卡... 详细信息

目的探讨间歇无氧运动联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗小儿支气管哮喘的效果。方法选取2017年1月至2018年1月郑州大学附属儿童医院收治的支气管哮喘患儿158例,根据随机数表法分为对照组(79例)和观察组(79例)。对照组患儿接受沙美特罗替卡松气雾剂治疗,观察组患儿接受间歇无氧运动联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗,两组患儿均被治疗8周。比较治疗前后Ⅰ型原胶原氨基端延长肽(PⅠNP)、Ⅲ型原胶原氨基端延长肽(PⅢNP)、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-4(IL-4)、白介素-9(IL-9)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果治疗后,两组患儿PⅠNP、PⅢNP、CTGF、TGF-β1、IL-9、hs-CRP、IL-4和TNF-α水平均低于治疗前,观察组患儿PⅠNP、PⅢNP、CTGF、TGF-β1、IL-9、hs-CRP、IL-4和TNF-α水平均低于对照组,差异有统计学意义(均P <0. 05)。结论间歇无氧运动联合沙美特罗替卡松气雾剂治疗小儿支气管哮喘的效果确切,可改善患儿的气道重塑情况,减轻炎症反应。

关键词：支气管哮喘沙美特罗替卡松气雾剂间歇无氧运动炎症反应气道重塑

茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

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食品工业科技 2024年

作者：陈永芳李艳珂张淑静漯河医学高等专科学校

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰... 详细信息

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2 μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30 μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11 组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11+30 μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率，Western blot检测Beclin-1、LC3 I和LC3 II水平，实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR，qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系，裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果：4-128 μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖，7.5、15、30 μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3II的水平，下调HCG11水平，增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01)；与对照组比较，HCG11 siRNA 组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC50(顺铂)、Beclin-1、LC3 II/ LC3 I比值显著降低，miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I比值显著增加(P<0.01)；在不同浓度的顺铂处理下，与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1+ HCG11 组抑制率显著降低(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+ HCG11 shRNA 组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I水平显著下调(P<0.05)。结论：PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬，并影响肝癌细胞的增殖。

关键词：茯苓多糖 LncRNA HCG11 miR-539-3p 化疗耐药性自噬

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不同药物治疗小儿原发性癫痫的临床疗效比较

临床研究 2019年第3期27卷 102-103页

作者：许淑静陈国洪郑州大学附属儿童医院河南省儿童医院郑州儿童医院神经内科河南郑州450018

目的评估不同药物治疗小儿原发性癫痫的临床疗效。方法选取2017年2月～2018年1月本院收治的90例癫痫患儿作为本次研究对象,按照随机数表法分为观察组和对照组,其中45例对照组患儿应用丙戊酸钠和托吡酯联合治疗;45例观察组患儿联合应用... 详细信息

目的评估不同药物治疗小儿原发性癫痫的临床疗效。方法选取2017年2月～2018年1月本院收治的90例癫痫患儿作为本次研究对象,按照随机数表法分为观察组和对照组,其中45例对照组患儿应用丙戊酸钠和托吡酯联合治疗;45例观察组患儿联合应用丙戊酸钠与左乙拉西坦治疗,比较两组患儿临床疗效、血钙和血磷指标以及3个月后的癫痫发作频率。结果观察组患儿的治疗总有效率高于对照组;观察组患儿血钙、血磷水平低于对照组,组间比较差异均明显(P <0.05)。观察组患儿简单部分发作、肌阵挛发作、强直阵挛发作、复杂部分发作的频率均低于对照组(P <0.05)。结论在小儿癫痫中联合应用丙戊酸钠、左乙拉西坦治疗,疗效确切,建议采用。

关键词：小儿癫痫丙戊酸钠左乙拉西坦临床疗效