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雷公藤红素抑制血管生成的实验研究

中华肿瘤杂志 2003年第5期25卷 429-432页

作者：黄煜伦周幽心周岱许期年叶明孙成法杜子威苏州大学附属第一医院神经外科 215006

目的　探讨雷公藤红素对血管生成的抑制作用。方法　采用MTT法测定雷公藤红素对血管内皮细胞株 (ECV)增殖的影响 ,观察雷公藤红素对ECV迁移实验和小管形成实验的作用 ,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。体内实验采用Matrigelplug方法。... 详细信息

目的　探讨雷公藤红素对血管生成的抑制作用。方法　采用MTT法测定雷公藤红素对血管内皮细胞株 (ECV)增殖的影响 ,观察雷公藤红素对ECV迁移实验和小管形成实验的作用 ,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。体内实验采用Matrigelplug方法。结果　雷公藤红素可明显抑制ECV的体外增殖 ,IC50 为 1.33μg/ml;可抑制ECV的迁移和小管形成 ,并且呈明显的剂量依赖性 ;同时具有抑制鸡胚尿囊膜血管生成和Matrigelplug中的血管新生的作用。结论　雷公藤红素具有明显抑制血管生成的作用 ,有可能成为有效的血管生成抑制剂。

关键词：雷公藤红素抑制血管生成实验研究内皮细胞抗肿瘤治疗

^3H—TdR参入裸鼠移植瘤作为抗癌药物筛选方法的初步研究

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核技术 1991年第5期14卷 282-284页

作者：黄强王强许期年杜子威苏州医学院附属二院

将~3H-TdR参入裸鼠移植瘤内,用液体闪烁计数技术测量其中氚的含量。结果表明:不同的市售抗癌药无论对可移植性人脑胶质瘤还是对患者手术标本移植在裸小鼠皮下的肿瘤都有不同的抑制~3H-TdR参入作用。初步提示,此法可用于筛选抗癌药物。

关键词： ^3H-TdR 抗癌药筛选肿瘤移植

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在荷瘤裸小鼠体内研究抗癌药物筛选流程

肿瘤 1991年第6期11卷 272-274页

作者：许期年杜子威黄强王强苏州医学院附二院脑肿瘤研究室苏州医学院附一院脑神经研究室

为了寻找抗癌新药,全世界已筛选了约60万种有关物质,被推荐到临床使用的亦有数百种之多,但对人体癌瘤治疗确实有效的尚不足50种。筛选成功率小于万分之一,说明筛选工作有“大海捞针”之难度,故要求我们从速改进现有的筛选体系与方法。

关键词：抗癌药药物筛选荷瘤裸小鼠

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裸小鼠同位素参入法测定人体肿瘤细胞增殖能

中华实验外科杂志 1992年第3期9卷 128-129页

作者：黄强许期年苏州医学院附属第二医院脑肿瘤研究室 215004

我们在动态观察可移植性人脑胶质瘤摄入 3H-TdR的基础上，取人脑瘤组织接种于裸小鼠皮下，然后将 3H-TdR参入裸小鼠体内，测肿瘤组织内的参入量，作为观察移植瘤的增殖指标，并与肿瘤的重量增加过程相比较。结果提示，同位素... 详细信息

我们在动态观察可移植性人脑胶质瘤摄入 3H-TdR的基础上，取人脑瘤组织接种于裸小鼠皮下，然后将 3H-TdR参入裸小鼠体内，测肿瘤组织内的参入量，作为观察移植瘤的增殖指标，并与肿瘤的重量增加过程相比较。结果提示，同位素参入法研究肿瘤细胞增殖能比称肿瘤的重量更正确。

关键词：同位素参入脑瘤移植裸小鼠

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抗恶性胶质瘤药物筛选的方法学研究

中华神经外科杂志 1990年第4期6卷 276-279页

作者：黄强谈琪云许期年王强杜子威苏州医学院附一院神经外科脑神经研究室

利用本室建立的 NHG-1第55～60代荷人脑胶质瘤裸小鼠共190只进行一种新的抗恶性胶质瘤药物筛选的方法学研究,采用荷瘤鼠腹腔一次注射~3H-TdR30μCi,18小时后取肿瘤、小肠和股骨制成液闪均相液,测氚的量。此法可客观反映被测组织中细胞 D... 详细信息

利用本室建立的 NHG-1第55～60代荷人脑胶质瘤裸小鼠共190只进行一种新的抗恶性胶质瘤药物筛选的方法学研究,采用荷瘤鼠腹腔一次注射~3H-TdR30μCi,18小时后取肿瘤、小肠和股骨制成液闪均相液,测氚的量。此法可客观反映被测组织中细胞 DNA 的合成能,在抗癌药作用下,既能观察肿瘤细胞增殖受抑的程度,又能反映荷瘤鼠肠上皮和骨髓细胞的受损情况。实验周期,从治疗开始仅需4天。

关键词：胶质瘤抗癌药药物筛选方法学

29例冬泳爱好者血浆TXB_2、6－K－PGF_（1α）含量观察

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中国运动医学杂志 1995年第1期14卷 43-44页

作者：周锦华郭志荣许期年苏州化工农药集团公司卫生所苏州医学院流行病学教研室苏州医学院附属第一医院脑神经研究室

为了探索冬泳对人体血管内血小板聚集及抗聚集系统的影响，我们对苏州市冬泳队中老年冬泳人员进行了血栓素Ｂ_２及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）血浆含量的放射免疫法测定。结果血栓素Ｂ_２为１０７．６±６３．３ｐｇ／ｍｌ，与正常健... 详细信息

为了探索冬泳对人体血管内血小板聚集及抗聚集系统的影响，我们对苏州市冬泳队中老年冬泳人员进行了血栓素Ｂ_２及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）血浆含量的放射免疫法测定。结果血栓素Ｂ_２为１０７．６±６３．３ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者有显著性差异（ｐ＜０．０５）。６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）为６３．４±２１．９ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者差异不显著（ｐ＞０．０５）。提示冬泳运动有抗血管内血小板非正常聚集而释放血小板素的作用。同时亦提示冬泳人员的血管内皮细胞合成前列环素水平与对照组的低年龄组相近，两者皆对预防老年人罹患的动脉粥样硬化所致的心、脑、肾及其他脏器的血管内血栓形成有一定意义。

关键词：冬泳血栓素前列环素放射免疫测定

3种脂质体介导法转染大鼠小胶质细胞的比较研究

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山东医药 2011年第4期51卷 35-37页

作者：许期年王秀云左剑玲王中苏州大学附属第一医院江苏苏州215006

目的以LipofectamineTM2000为对照,研究GenEscortTMⅠ和GenEscortTMⅢ在大鼠小胶质细胞中的转染效率及毒性。方法分别采用LipofectamineTM2000、GenEscortTMⅠ和GenEscortTMⅢ为载体,转染绿色荧光蛋白(GFP)标记的siRNA进入大鼠小胶质细胞。计算转染效率。采用磺基罗丹明B法(SRB)分析转染试剂对细胞的毒性,并研究细胞传代次数、接种密度、脂质体与siRNA的比例及脂质体-siRNA复合物形成时间等对脂质体转染效率的影响。结果 2～3次细胞传代,接种密度为1×105(24孔板)、脂质体与siRNA比例为1∶2.5、脂质体-siRNA复合物形成时间分别为30 min或15 min,转染效率最高。3种不同脂质体介导的GFP-siRNA转染的大鼠小胶质细胞内均有GFP表达,其最佳转染比例下转染效率比较为LipofectamineTM2000组>GenEscortTMⅠ组>GenEscortTMⅢ组(PGenEscortTMⅠ组>GenEscortTMⅢ组(P<0.01)。结论阳离子脂质体GenEscortTMⅠ比LipofectamineTM2000细胞毒性低,转染效率可,是一种更为理想的小胶质细胞基因转染载体。

关键词：脂质体细胞转染转染效率小胶质细胞磺基罗丹明B法大鼠

Dickkopf1在两株人脑胶质瘤细胞株中的表达

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肿瘤防治研究 2010年第6期37卷 611-613页

作者：周幽心许期年王秀云刘芳苏州大学附属第一医院神经外科江苏苏州215006

目的检测Dickkopf1(DKK1)在人胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中的表达情况。方法采用酶联免疫吸附实验,逆转录多聚酶链反应等方法对DKK1在人胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中表达水平进行检测。结果酶联免疫吸附实验提示DKK1在MGR3和UWR7中均呈高浓度... 详细信息

目的检测Dickkopf1(DKK1)在人胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中的表达情况。方法采用酶联免疫吸附实验,逆转录多聚酶链反应等方法对DKK1在人胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中表达水平进行检测。结果酶联免疫吸附实验提示DKK1在MGR3和UWR7中均呈高浓度;逆转录多聚酶链反应提示DKK1基因在胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中高表达,但在正常脑组织中表达不明显。结论 DKK1在人胶质瘤细胞株MGR3和UWR7中高表达,提示DKK1可能在胶质瘤中的发生发展中起重要作用。

关键词：胶质瘤基因 DKK1

人源Dickkopf-1真核表达质粒的构建

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苏州大学学报（医学版） 2009年第1期29卷 116-118页

作者：李文帅周幽心许期年苏州大学附属第一人民医院神经外科江苏苏州215006

目的构建人源Dickkopf-1(DKK-1)基因的真核表达质粒,为进一步探讨DKK-1的生物学功能奠定基础。方法Trizol法从人新鲜胎盘组织中抽提总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增人源DKK-1的基因序列,将真核表达载体pcDNA3.1和DKK-1的PC... 详细信息

目的构建人源Dickkopf-1(DKK-1)基因的真核表达质粒,为进一步探讨DKK-1的生物学功能奠定基础。方法Trizol法从人新鲜胎盘组织中抽提总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增人源DKK-1的基因序列,将真核表达载体pcDNA3.1和DKK-1的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pcDNA3.1-DKK-l,转化至大肠杆菌后经菌落PCR、NHeⅠ和EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。结果RT-PCR法从人胎盘中扩增出816bp大小的目的片段,重组质粒转化至大肠杆菌后菌落PCR同样扩增出816bp大小的目的片段,NHeⅠ和EcoRⅠ双酶切重组质粒能切出两条目的条带,测序后与Genbank中DKK-1的cDNA对比,证明DKK-1的基因序列完全正确。结论成功构建了pcDNA3.1-DKK-1重组质粒,为研究人源DKK-1的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础。

关键词： Dickkopf-1 重组质粒测序