检索结果-南通市图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 447-449页

作者：许晓群陈雪梅张彩游力赵昌盛王郡甫张建华山东省医学科学院基础医学研究所山东济南250062 山东大学第二医院山东济南250033

目的:构建重组人NKG2D真核表达载体并在CHO细胞表达重组人NKG2D。方法:用RT-PCR方法从NK-92细胞中调取NKG2D基因片段,克隆到pGEM-TEasy载体并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制内切酶EcoRI和BamHI消化pGEM-TEasy/NKG2D重组质粒,分离N... 详细信息

目的:构建重组人NKG2D真核表达载体并在CHO细胞表达重组人NKG2D。方法:用RT-PCR方法从NK-92细胞中调取NKG2D基因片段,克隆到pGEM-TEasy载体并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制内切酶EcoRI和BamHI消化pGEM-TEasy/NKG2D重组质粒,分离NKG2D片段,并插入真核表达质粒pEGFP-N1的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pEGFP-N1/NKG2D。然后经脂质体介导转染CHO细胞。应用荧光显微镜观测、Westernblot方法和免疫组化染色对转染细胞内pEGFP-N1/NKG2D的表达进行鉴定。结果:RT-PCR扩增获得650bp基因片段,经DNA序列分析证明所获得的DNA序列与文献报道的NKG2D序列一致。转染的CHO细胞在荧光显微镜下发出强绿色荧光,Westernblot分析显示重组蛋白能特异地与抗人NKG2D单克隆抗体结合;免疫组化检测显示,转染的CHO中有棕色颗粒,证明所构建的NKG2D真核表达载体可以在细胞中表达。结论:构建了人NKG2D的哺乳动物细胞表达载体,并成功地在CHO细胞中获得重组人NKG2D的表达。

关键词： NKG2D受体基因转染基因表达 CHO细胞

人喉癌下咽癌组织中转化生长因子β_1基因的检测

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临床耳鼻咽喉科杂志 2002年第9期16卷 457-459页

作者：陈雪梅张大良赵建东王睿冯进波许晓群魏海明山东大学第二医院耳鼻咽喉科济南250033

目的 :检测喉癌下咽癌组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA的表达 ,探讨其在喉癌、下咽癌发生发展中的可能作用。方法 :取 2 0例喉癌、下咽癌患者术后新鲜组织标本 ,用半定量的逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测TGF β1的mRNA表达... 详细信息

目的 :检测喉癌下咽癌组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA的表达 ,探讨其在喉癌、下咽癌发生发展中的可能作用。方法 :取 2 0例喉癌、下咽癌患者术后新鲜组织标本 ,用半定量的逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测TGF β1的mRNA表达。结果 :检测 2 0例标本 ,其中 17例TGF β1表达阳性 ,且Ⅲ～Ⅳ期表达较Ⅰ～Ⅱ期强。结论 :TGF β1在喉癌、下咽癌中的表达可能是导致喉癌、下咽癌患者免疫功能低下。

关键词：喉癌下咽癌喉肿瘤下咽肿瘤转化生长因子β1 基因表达

IFN-α对宫颈癌细胞MHC-I类链相关蛋白A表达的上调作用

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 557-559,563页

作者：牛家峰张彩张建华许晓群张维东王郡甫高春义山东省医学科学院基础医学研究所

目的:观察IFNα对宫颈癌细胞MHCI类链相关蛋白A(MICA)表达及功能的影响。方法:以IFNα诱导宫颈癌细胞系HeLa和Caski后,用半定量RTPCR和免疫组化染色法观察诱导前后MICAmRNA和其蛋白表达的变化,用MTT比色法检测诱导前后宫颈癌细胞对外周... 详细信息

目的:观察IFNα对宫颈癌细胞MHCI类链相关蛋白A(MICA)表达及功能的影响。方法:以IFNα诱导宫颈癌细胞系HeLa和Caski后,用半定量RTPCR和免疫组化染色法观察诱导前后MICAmRNA和其蛋白表达的变化,用MTT比色法检测诱导前后宫颈癌细胞对外周血NK细胞杀伤敏感性的变化。结果:经IFNα诱导后,HeLa和Caski细胞中MICAmRNA和其表面MICA蛋白的表达水平均明显上调,并呈一定的时间和剂量依赖关系。NK细胞对MICA表达较高的HeLa细胞的杀伤活性,明显高于对MICA弱表达的Caski细胞。经1×106U/LIFNα诱导3d后,两种细胞对NK细胞杀伤的敏感性均明显增强(P<0.01)。结论:IFNα可上调MICA在肿瘤细胞表面的表达,并可增强肿瘤细胞对NK细胞杀伤的敏感性。

关键词：宫颈癌 IFN-α MICA NK细胞 NKG2D

重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化

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中国生物工程杂志 2007年第2期27卷 9-13页

作者：余德荣游力王郡甫许晓群赵跃然高春义山东省医学科学院基础医学研究所山东省肿瘤免疫与基因工程重点实验室山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 山东大学山东省立医院生殖医学研究中心济南250021

角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞... 详细信息

角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。

关键词：重组hKGF2 克隆原核表达镍亲和层析

化疗对乳腺癌患者外周血Th1和Th2类细胞因子基因表达的影响

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中国肿瘤 2008年第12期17卷 1061-1063页

作者：刘海荣李岩赵跃然许晓群山东省千佛山医院山东济南250014

[目的]探讨化疗对乳腺癌患者Th1和Th2类细胞因子的基因表达的影响。[方法]采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测乳腺癌患者化疗前后外周血单个核细胞(PBMC)Th1和Th2类细胞因子mRNA表达水平的变化。[结果]乳腺癌组IL-2mRNA(4)、IL-12... 详细信息

[目的]探讨化疗对乳腺癌患者Th1和Th2类细胞因子的基因表达的影响。[方法]采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测乳腺癌患者化疗前后外周血单个核细胞(PBMC)Th1和Th2类细胞因子mRNA表达水平的变化。[结果]乳腺癌组IL-2mRNA(4)、IL-12mRNA(5)阳性表达均较正常对照组(10,14)及良性乳腺肿瘤组(11,16)明显减少(P0.05)。乳腺癌化疗3个周期后,IL-6mRNA(8/36)和IL-10mRNA(6/38)阳性表达均较化疗前(19/25,16/28)显著降低(P<0.05);IL-2mRNA(14/30)和IL-12mRNA(15/29)阳性表达均较化疗前(4/40,5/39)显著升高(P<0.05)。[结论]化疗可使早期乳腺癌患者Th2类细胞因子的强势表达向Th1类逆转,改善患者的免疫状况。

关键词：乳腺肿瘤聚合酶链反应细胞因子 Th1 Th2 药物疗法

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CO_2施肥对大棚黄瓜生长发育的影响

山西农业大学学报 1990年第4期10卷 314-317,373页

作者：尚庆茂李平兰王敏许晓群山西农业大学食品系

本试验利用中国科学院山西煤化所研制的NC—A型农用CO_2发生器产生CO_2气肥,进行了CO_2施肥对大棚黄瓜生长发育影响的试验。结果表明,CO_2施肥可以改善大棚内的小气候;促进大棚黄瓜植株的生长发育,株高、茎粗、叶数、叶面积、根重、须... 详细信息

本试验利用中国科学院山西煤化所研制的NC—A型农用CO_2发生器产生CO_2气肥,进行了CO_2施肥对大棚黄瓜生长发育影响的试验。结果表明,CO_2施肥可以改善大棚内的小气候;促进大棚黄瓜植株的生长发育,株高、茎粗、叶数、叶面积、根重、须根数、根长等植物学性状都优于对照;增加了大棚黄瓜的前期产量和经济效益;提高了果实中的维生素C、可溶性糖、可滴定酸的含量以及糖酸比,改善了大棚黄瓜的品质。这些充分说明,CO_2施肥是大棚黄瓜早熟、丰产、优质的很好措施。

关键词： CO2施肥大棚黄瓜

二月桂酸二丁基锡对大鼠睾酮及合成关键酶的影响

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中国环境科学 2007年第2期27卷 264-268页

作者：司纪亮李杰许晓群曹延河潘寻山东大学环境科学与工程学院山东济南250061 山东大学公共卫生学院山东济南250012 山东省医学科学院基础医学研究所山东济南250062 山东省淄博市第七人民医院病理科山东淄博255000

用玉米油或二月桂酸二丁基锡[DBTD0.01,0.1,1mg/(kg·d)体重]对新生雄性Wistar大鼠连续5d注射染毒.至大鼠出生后第49d,检测其血清睾酮,细胞色素胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和细胞色素P450 17-α脱羟基酶(... 详细信息

用玉米油或二月桂酸二丁基锡[DBTD0.01,0.1,1mg/(kg·d)体重]对新生雄性Wistar大鼠连续5d注射染毒.至大鼠出生后第49d,检测其血清睾酮,细胞色素胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和细胞色素P450 17-α脱羟基酶(Cyp17)这3种睾酮合成关键酶mRNA表达及脏器系数.结果表明,大鼠血清睾酮随DBTD剂量升高呈上升趋势,1mg/(kg·d)组与对照组比较有显著性差异;P450scc和3β-HSD mRNA相对表达无显著性变化,Cyp17在0.1mg/(kg·d)组的相对表达有显著性升高;1mg/(kg·d)组大鼠睾丸脏器系数有显著性升高,而各DBTD处理组附睾和肝脏脏器系数与对照组比较无显著性变化.

关键词：二月桂酸二丁基锡(DBTD) 大鼠睾酮关键酶 mRNA表达

通心络对动脉硬化兔胸主动脉LOX-1表达干预的实验研究

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陕西医学杂志 2008年第8期37卷 951-953,974页

作者：刘忠志刘同宝李凤芝田静许晓群山东聊城市人民医院聊城252000 山东省立医院山东省医学科学院

目的:探讨通心络对动脉硬化兔胸主动脉植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及机制。方法:将24只雄性新西兰大白兔随机分为正常饮食组、高脂饮食组及高脂饮食加通心络干预组,应用免疫组化测定兔胸主动脉中LOX-1的蛋白... 详细信息

目的:探讨通心络对动脉硬化兔胸主动脉植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及机制。方法:将24只雄性新西兰大白兔随机分为正常饮食组、高脂饮食组及高脂饮食加通心络干预组,应用免疫组化测定兔胸主动脉中LOX-1的蛋白表达水平,用RT-PCR测定兔胸主动脉中LOX-1基因表达的水平。结果:高脂组及高脂饮食加通心络干预组胸主动脉中LOX-1蛋白及基因表达水平明显高于正常饮食组(P<0.05),通心络干预组胸主动脉中LOX-1蛋白及基因表达水平明显低于高脂饮食组(P<0.05)。结论:动脉硬化兔LOX-1蛋白及基因表达水平明显升高,通心络能够明显抑制动脉硬化兔LOX-1蛋白及基因表达。

关键词：动脉硬化/免疫学受体 LDL @通心络动物实验兔

UGT1A基因亚族在结肠粘膜及肝组织中的表达

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山东大学学报（医学版） 2006年第2期44卷 154-160页

作者：王敏孙德峰李延青陈建汪治敏许晓群袁孟彪山东大学齐鲁医院老年病科山东济南250012 烟台市护士学校遗传学教研室山东烟台264000 山东大学齐鲁医院消化内科山东济南250012 山东省医学科学院肿瘤免疫与基因工程重点实验室山东济南250062

目的:从mRNA水平及蛋白质水平分析葡萄糖醛酸转移酶UGT1A基因位点在结肠粘膜及肝组织中的表达。方法:结肠癌病例组25例,正常人肠道粘膜20例、正常肝组织12例。用逆转录聚合酶链反应分析结肠癌组、正常人肠道粘膜、肝组织中UGT1AmRNA的表... 详细信息

目的:从mRNA水平及蛋白质水平分析葡萄糖醛酸转移酶UGT1A基因位点在结肠粘膜及肝组织中的表达。方法:结肠癌病例组25例,正常人肠道粘膜20例、正常肝组织12例。用逆转录聚合酶链反应分析结肠癌组、正常人肠道粘膜、肝组织中UGT1AmRNA的表达;用免疫印迹检测各组UGT1A蛋白的表达;用间接免疫荧光技术分析UGT1A蛋白的荧光定位及表达强度。结果:结肠癌组织中UGT1AmRNA表达低于其周围正常粘膜,而后者低于正常人肠粘膜的表达量,正常人群结肠粘膜中,UGT1AmRNA表达总体低于肝组织,P群肠粘膜,而肝脏呈均质性表达;结肠粘膜上皮UGT1A基因位点在转录水平及蛋白水平均存在着差异性,不同个体对致癌物的易感性不同可能是这种差异表达的结果。

关键词：结肠肿瘤肝葡糖醛酸基转移酶基因,UGT 基因表达